包含己糖醇酐长链烷基缩醛或己糖醇酐长链烷基醚的抗菌组合物的制作方法

本发明涉及杀菌或抑菌组合物，其包含己糖醇酐长链烷基缩醛或己糖醇酐长链烷基醚、其治疗或预防革兰氏阳性细菌感染的用途、其作为外用卫生学或皮肤病学产品的用途和用于消毒表面的方法。

背景技术：

抗菌化合物被定义为可以抑制或阻止微生物生长或杀死它们的分子。在这种情况下，它们通常用于预防或治疗人和动物感染，以及在农产品行业中防止致病菌在食物中的繁殖。抗菌化合物的广泛使用有利于抗性病原体的出现。已获得针对使用最广泛的抗菌化合物的抗性机制的细菌的传播是越来越令人担忧的主要公共卫生问题(j.s.bradley等人，lancetinfect.2007年12月；7:68-78)。

作为示例，已经分离了许多针对最致病葡萄球菌属(即金黄色葡萄球菌)的抗生素具有抗性的菌株。葡萄球菌感染占严重感染的比例很高。此外，几乎一半的医院感染据报与葡萄球菌有关。可以提及对常用抗生素具有抗性的许多粪肠球菌或屎肠球菌菌株。尽管它们的毒性较小，尤其是相比于葡萄球菌，但是越来越多的多抗性肠球菌菌株以及最近流行的对糖肽具有抗性的肠球菌已被鉴定出来，所述糖肽是针对这一细菌家族的抗生素。

已经描述了另一种抗生素抗性(antibioresistance)的现象，其可能不仅与过量使用抗生素有关，还与食物储存方法有关。因此，例如，已经显示单核细胞增多性李斯特菌在经历渗透压应激后、在低温或酸性介质中对抗生素更具抗性(anasa等人，(2015)foodmicrobiology，第46卷，四月，第154-160页)。也就是说，人的污染物来自食物。另外，虽然比较少见，但人李斯特菌病是严重感染，死亡率估计为50％。因此，可能由食品的现代储存或处理方法引起的单核增生性李斯特菌中出现抗生素耐药性对公共卫生构成严重威胁。

尽管在抗生素耐药性中通常同时涉及多种机制，但通常将其分为三类：(a)抗生素渗入细菌的缺乏；(b)通过细菌酶系统灭活或排泄抗生素；(c)细菌靶标和抗生素之间亲和力的缺乏。这三种抗性机制类别具有结构成分，即所使用的机制依赖于所涉及的分子的结构。

因此，为了生产较低机率发展出耐药性的抗生素组合物，本发明人已经设想使用包含化合物混合物的组合物，所述化合物具有抗生素活性，但是包括可以降低发展出细菌耐药性机率的微小结构差异。因此，他们设想了包含具有抗生素活性的化合物的异构体混合物的组合物。

本发明人希望开发也具有低毒性和低环境影响的抗生素组合物。可生物降解的组合物可以由可再生资源大量获得，成本低廉，非常适用于工业应用，但又与非生物来源(non-biosourced)的抗菌药物一样有效。

现有技术中没有可以生产具有低毒性和低成本的生物来源化合物的异构体混合物的方法。

然而，现有技术已经描述了生物来源化合物。因此，现有技术描述了用作抗菌剂的不同化合物，其为对革兰氏阳性细菌具有活性并具有长的脂肪链的脂肪酸及其相应的多羟基化酯。作为指示，最活跃的抗菌剂之一是月桂酸甘油酯，其为一种具有c12脂肪链的甘油单酯。其商品名为该化合物被用作食品添加剂以抑制细菌生长(e.freese,c.w.sheu,e.galliers.nature1973,241,321–325；e.g.a.verhaegh,d.l.marshall,d.-h.oh.int.j.foodmicrobiol.1996,29,403–410)。月桂酸甘油酯的酯官能团对酯酶敏感，因此该化合物降解迅速，半衰期短。

现有技术还描述了由于其可生物降解性、低毒性和低环境影响而被认为是特别有吸引力的衍生自糖的抗菌剂。

衍生自糖的抗菌剂的实例是衍生自糖的酯，其也在工业上用于抗菌应用，因为它们的原料和生产成本相对较低。可以提及例如国际专利申请wo2014/025413中所述的脱水山梨醇辛酸酯与抗菌制剂中的桧木醇(hinokitiol)混合。根据该应用，该制剂将抑制或杀死革兰氏阳性和阴性细菌、真菌和/或酵母。

现有技术还描述了在食品工业中使用二糖酯作为抗菌剂。十二烷酰基蔗糖是最常用的之一。据报道，其对单核增生性李斯特菌尤其具有活性(m.ferrer,j.soliveri,f.j.plou,n.lópez-cortés,d.reyes-duarte,m.christensen,j.l.copa-a.ballesteros,enz.microb.tech.,2005,36,391-398)。然而，对医院应用来说，其也被描述为可微量抑制金黄色葡萄球菌的生长(j.d.monk,l.r.beuchat,a.k.hathcox,j.appl.microbiol.,1996,81,7-18)。报告说，蔗糖酯具有抑菌作用(阻止细菌生长)但不杀菌(杀死细菌)的性质。

此外，糖酯的合成存在许多缺点。首先，尽管生产成本低，但是合成酯，特别是合成二糖和三糖是有问题的，这是由于糖的高官能度，导致形成了单酯、二酯和聚酯的混合物，并且通常需要存在极性溶剂如二甲基甲酰胺(dmf)和吡啶以更好地溶解高极性试剂。然而，这些溶剂被归类为致癌的、致诱变的和生殖毒性的(cmr)，并且必须避免使用它们。为了解决这个问题，使用了酶合成，但是在这些条件下需要使用非常稀的介质，这使生产受到限制。

此外，这些化合物的酯官能团容易使细胞中存在的酯酶水解。在该水解后释放的分子，即糖和脂肪酸，几乎没有或没有抗菌性质(脂肪酸稍微具有活性)。这导致使得这些化合物活性降低的不稳定性。

因此，为了生产不易产生抗性的抗生素组合物(其包含有效和稳定的抗菌剂)，本发明提出了一种脱水山梨醇长链烷基缩醛或脱水山梨醇长链烷基醚，无论是以纯的形式还是作为异构体混合物，其都具有非常好的抗菌活性，其中特别可以在成本低且对环境有利并且在局部应用或摄入时不具有危害的条件下获得这样的产品。

技术实现要素：

杀菌或抑菌组合物

本发明涉及杀菌或抑菌组合物，其包含己糖醇酐烷基缩醛或己糖醇酐烷基醚、其药学上可接受的盐、其异构体或其异构体的混合物，所述己糖醇酐优选脱水山梨糖醇、1,4-脱水-d-山梨糖醇(arlitan)或缩甘露醇，其中所述烷基基团包含11至18个碳原子。优选地，所述烷基缩醛或烷基醚基团位于2-o、3-o、5-o和/或6-o位。有利地，所述烷基缩醛基团位于2,3-o、3,5-o或5,6-o位。有利地，所述烷基醚基团位于2-o、3-o、5-o或6-o位.

术语“药学上可接受的盐”表示任何盐，通过将其给药至患者，可(直接或间接)提供本发明所描述的化合物。盐的制备可以通过本领域中已知的工艺来实现。

根据本发明，“己糖醇酐”通过使氢化的己糖(或己糖醇)(如山梨糖醇或甘露醇)脱水而获得。通常，所述己糖醇酐选自脱水山梨糖醇、arlitan或缩甘露醇。有利地，所述己糖醇酐选自1,4-脱水-d-山梨糖醇(1,4-arlitan或脱水山梨糖醇)；1,5-脱水-d-山梨糖醇(远志糖醇，polygalitol)；3,6-脱水-d-山梨糖醇(3,6-脱水山梨糖醇)；1,4(3,6)-脱水-d-甘露醇(缩甘露醇)；1,5-脱水-d-甘露醇(安息香醇)；3,6-脱水-d-半乳糖醇；1,5-脱水-d-半乳糖醇；1,5-脱水-d-塔罗糖醇和2,5-脱水-l-艾杜糖醇。

该脱水山梨糖醇缩醛可通过本领域技术人员已知的方法获得，如直接缩醛化、转缩醛化(trans-acetalization)。此外，脱水山梨糖醇烷基醚可通过本领域技术人员已知的方法获得，如威廉姆逊醚合成、环氧化物开环、醇缩合、醇调节聚合、缩醛还原、直接或间接还原烷基化。

本发明人开发了一种特别有利的方法，其以纯的形式或以己糖醇酐烷基单醚或己糖醇酐烷基单缩醛的异构体混合物的形式产生该衍生物；优选异构体是位置异构体和/或非对映异构体。

本发明还涉及杀菌或抑菌组合物，其包含己糖醇酐烷基单醚或己糖醇酐烷基单缩醛或其异构体(优选位置异构体)的混合物，其通过包括以下步骤的方法获得：

a)使己糖醇脱水以获得单脱水己糖醇；

b)通过含有11至18个碳原子的脂族醛或其缩醛使所述己糖醇或

a)中获得的单脱水己糖醇缩醛化或转缩醛化，典型地，

i.含有11至18个碳原子的脂族醛，通过缩醛化，或

ii.含有11至18个碳原子的脂族醛衍生物，通过转缩醛化；

c)任选地，使b)中获得的己糖醇酐烷基缩醛催化氢解，优选不使用酸性催化剂，

d)回收c)中获得的己糖醇酐烷基单醚异构体的混合物，其中所述烷基基团(r)含有11至18个碳原子

或者

回收b)中获得的己糖醇酐烷基单缩醛异构体的混合物，其中所述烷基基团(r)含有11至18个碳原子，且

e)任选地，纯化d)中获得的任何混合物，尤其是通过色谱方法。

优选地，本发明还涉及杀菌或抑菌组合物，其包含脱水山梨糖醇烷基单醚或脱水山梨糖醇烷基单缩醛或其异构体(优选位置异构体)的混合物，其通过包括以下步骤的方法获得：

a)使山梨糖醇脱水以获得单脱水山梨糖醇；

b)通过含有11至18个碳原子的脂族醛或其缩醛使a)中获得的山梨糖醇或单脱水山梨糖醇缩醛化或转缩醛化，典型地

i.含有11至18个碳原子的脂族醛，通过缩醛化，或

ii.含有11至18个碳原子的脂族醛衍生物，通过转缩醛化；

c)任选地，使b)中获得的脱水山梨糖醇烷基缩醛催化氢解，优选不使用酸性催化剂，

d)回收c)中获得的脱水山梨糖醇烷基单醚异构体混合物，其中所述烷基基团(r)含有11至18个碳原子，

或者

回收b)中获得的脱水山梨糖醇烷基单缩醛异构体混合物，其中所述烷基基团(r)包含11至18个碳原子，且

e)任选地，纯化d)中获得的任何混合物，尤其是通过色谱方法。

典型地，所述脂族醛衍生物可为相应醛的二-烷基缩醛。优选二-甲基缩醛和二-乙基缩醛。

“单脱水己糖醇”或“单脱水山梨糖醇”可被理解为通过从己糖醇或山梨糖醇消除一分子或多分子的水，从而通过脱水而获得。合适的实例单脱水山梨糖醇可为1,4-脱水-d-山梨糖醇(1,4-arlitan或脱水山梨糖醇)；1,5-脱水-d-山梨糖醇(远志糖醇)或3,6-脱水-d-山梨糖醇(3,6-脱水山梨糖醇)。

优选的单脱水山梨糖醇是来自山梨糖醇的脱水的衍生物，以形成例如1,4-脱水山梨糖醇、3,6-脱水山梨糖醇或2,5-脱水山梨糖醇。

“位置异构体”被理解为表示区域异构体(regioisomer)，尤其是被理解为表示己糖醇酐烷基单醚或己糖醇酐烷基单缩醛的异构体，并且尤其是脱水山梨糖醇，其中所述烷基单醚或烷基单缩醛基团位于不同的己糖醇酐的碳上。典型地，脱水山梨糖醇烷基单缩醛的位置异构体为2,3-o-；3,5-o-或5,6-o-脱水山梨糖醇烷基单缩醛。脱水山梨糖醇烷基单醚的异构体为2-o-、3-o-、5-o-或6-o-脱水山梨糖醇烷基单醚。

术语“非对映异构体”表示无法重叠也不互为镜像的光学异构体。脱水山梨糖醇烷基单缩醛非对映异构体的实例为：

根据一个实施方案，本发明的方法可包括己糖醇脱水的步骤，以获得单脱水己糖醇。典型地，在脱水步骤之前将山梨糖醇融化。该脱水步骤可使用催化剂进行，例如使用酸性催化剂。

根据本发明，该脱水步骤在氢气气氛下进行，气压优选约20至50巴。

有利地，该脱水步骤在120至170℃的温度进行，优选130至140℃。

典型地，山梨糖醇在该脱水步骤后纯化，例如通过结晶、重结晶或色谱方法。

根据本发明，所述缩醛化或转缩醛化步骤包括：

i)任选地，预加热山梨糖醇的步骤，优选在70至130℃、典型地90至110℃的温度进行，

ii)添加所述山梨糖醇的脂族醛或脂族醛衍生物的步骤，和

iii)添加催化剂、优选酸性催化剂的步骤。

步骤i)是尤其有利的，因为其可在不存在溶剂的情况下进行。

优选地，在缩醛化或转缩醛化步骤中、且如果需要则在该脱水步骤中使用的酸性催化剂可以是均质或非均质酸性催化剂。在表达“均质酸性催化剂”时所用的术语“均质”是指处于同一相(固相、液相或气相)或与试剂处于相同聚集状态的催化剂。相反，在表达“非均质酸性催化剂”时所使用的术语“非均质”是指与试剂处于不同相(固相、液相或气相)的催化剂。

在缩醛化或转缩醛化步骤中、且如果需要则在该脱水步骤中使用的所述酸性催化剂可独立地选自固体或液体、有机酸或无机酸，优选固体酸。具体地，优选的酸性催化剂选自对甲苯磺酸、甲磺酸、樟脑磺酸(csa)和磺酸型树脂。

典型地，该缩醛化或转缩醛化步骤在70至130℃、典型地70至90℃的温度进行。反应混合物的温度可以根据所用试剂和溶剂而变化。反应时间取决于达到的转化度。

根据一个实施方案，该缩醛化或转缩醛化可通过脂族醛或其缩醛、典型地直链或支链脂族醛或其缩醛进行。该缩醛化或转缩醛化步骤通常可通过具有11、12、13、14、15、16、17或18个碳原子的脂族醛或其缩醛进行，例如选自十一烷基醛、十二烷基醛、十三烷基醛、十四烷基醛、十五烷基醛、十六烷基醛、十七烷基醛、十八烷基醛和缩醛。优选地，该c11-c13脂族醛或其缩醛为c12脂族醛或其缩醛，例如十二烷基醛或其缩醛。

本文所用的表达“其缩醛”或“它们的缩醛”覆盖相应c11-c18脂族醛的二-烷基缩醛。更具体地，优选c11-c18脂族醛的二-甲基或二-乙基缩醛。

根据一个实施方案，缩醛化或转缩醛化步骤可以使用或不用溶剂进行。当反应在溶剂存在下进行时，溶剂优选为极性溶剂。

典型地，该溶剂可选自二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基亚砜(dmso)、二甲基乙酰胺(dma)、乙腈(ch3cn)、四氢呋喃(thf)、2-甲基四氢呋喃(2me-thf)、环戊基甲醚(cpme)、甲醇(meoh)、乙醇(etoh)、丙醇(proh)、异丙醇(iproh)、丁醇(buoh)、二丁基醚(dbe)、甲基叔丁基醚(mtbe)和三甲氧基丙烷(tmp)。

深入的实验工作选择了一些条件，其允许在缩醛化或转缩醛化步骤期间观察转化率和最佳产率。当[(c11-c18脂族醛或其缩醛):单糖]的摩尔比在5:1至1:5之间、优选4:1至1:4之间、并且有利地在3:1和1:3时，获得最佳结果。

本发明人更具体地显示，在缩醛化反应过程中，c11-c18脂族醛:单糖的摩尔比在1:1至1:5之间、优选1:1至1:4之间、并且在优选方式中在1:3和1:2之间时，提高了产量并提供了最佳的转化率。

本发明人另外显示，在转缩醛化反应过程中，c11-c18脂族醛:单糖的摩尔比为1:1至5:1、优选5:4至4:1、优选3:1至4:3、优选3:2至2:5时，提高了产率并提供了最佳的转化率。所用的催化剂与缩醛化反应相同。

本发明的这种方法可以在脱水步骤(如果需要的话)、缩醛化或转缩醛化步骤后另外包含至少一种中和和/或过滤和/或纯化步骤。

当提供纯化步骤时，所述纯化步骤可以是例如结晶、重结晶或色谱方法。优选地，使用非水极性溶剂进行色谱方法。通常，当在氢解步骤之前提供过滤和/或纯化步骤时，非水极性溶剂可以与在氢解步骤中使用的相同。

有利地，氢解步骤在80℃至140℃的温度进行，和/或在15至50巴、优选20至40巴之间的氢气压力下进行。

有利地，氢解步骤在极性非质子溶剂、优选非水溶剂中进行。事实上，非质子溶剂提供更好的转化率。其中非质子溶剂的实例为(但不限于)烷烃、1,2,3-三甲氧基丙烷(tmp)、甲基叔丁基醚(mtbe)、四氢呋喃(thf)、2-甲基四氢呋喃(2me-thf)、二丁基醚(dbe)和环戊基甲醚(cpme)。非质子溶剂优选为cpme。烷烃是有利的，因为它们使得氢气更好地溶解在介质中。然而，其转化率低于其他非质子溶剂如cpme。通常，在烷烃中，优选十二烷和庚烷。

在适于氢解反应的催化剂存在下，优选在极性非质子溶剂中在80℃至140℃之间的温度和/或在15至50巴之间的氢气压力下进行氢解步骤。

优选地，氢解步骤在非水极性溶剂中在100℃至130℃之间和/或25至35巴之间的压力下进行。

通常，氢解在合适的催化剂如含有贵金属或普通金属的催化剂的存在下进行。更具体地，普通金属可以是铁或非铁金属。典型地，氢解在含铁金属的催化剂存在下进行。

作为指示，属于铁金属族的金属催化剂可以是镍、钴或铁。

优选地，使用含有贵金属如钯、铑、钌、铂或铱的催化剂进行氢解。

通常，在氢解期间使用的催化剂可以固定在诸如碳、氧化铝、氧化锆或二氧化硅或这些的任何混合物的基材上。这样的基材例如是珠粒。因此，可以有利地使用固定在碳珠上的钯催化剂(pd/c)。这些催化剂可以通过添加贵金属或普通金属来掺杂。这些称为掺杂剂。典型地，掺杂剂占催化剂重量的1～10％。

典型地，组合物对革兰氏阳性菌是是杀菌或抑菌的。

有利地，杀菌或抑菌组合物被掺入食品、化妆品、药物、植物检疫(phytosanitary)、兽医或表面处理的组合物中。例如，用于清洁和/或治疗皮肤的化妆品和/或皮肤病学组合物，特别作为乳膏、凝胶、粉末、洗剂、特别是乳脂、沐浴露、肥皂、洗发剂、淋浴剂、除臭剂、止汗剂、湿巾、防晒剂或修饰性化妆品制剂的形式。

本发明还涉及根据本发明的杀菌或抑菌组合物用于外部使用的卫生学或皮肤病学产品的用途。

典型地，“卫生用品”是指用于清洁、消毒或卫生的任何产品，包括例如洗剂、摩丝、喷雾或液体，也可包括湿巾或可用本发明组合物浸渍的任何基材。术语“皮肤病学产品”是指旨在用于皮肤或粘膜上的任何产品。

在治疗或预防革兰氏阳性菌感染中的用途。

本发明还涉及根据本发明的组合物，其用于治疗或预防革兰氏阳性细菌感染。

“治疗”被理解为是指对患者的治疗性治疗(旨在至少减少、根除或阻止感染发展)的治疗方案。“预防”被理解为是指对患者的预防性治疗(旨在降低出现感染的风险)。

“患者”可以是例如受细菌感染影响或可能受细菌感染影响(特别是革兰氏阳性细菌感染)的人或非人哺乳动物(例如啮齿动物(小鼠、大鼠)、猫科动物、狗或灵长类动物)。优选地，受试者是人。

“革兰氏阳性”的表述是指被革兰氏染色剂染成深蓝色或紫色的细菌，与不能保留紫色染色的革兰氏阴性菌相反。革兰氏染色技术利用了细菌的膜和壁的特征。

典型地，革兰氏阳性细菌是来自硬壁菌门(firmicutes)的细菌，典型地为杆菌纲(bacilli)，特别选自乳杆菌目(lactobacillales)或芽孢杆菌目(bacillales)的细菌。

根据本发明的一个实施方案，来自芽胞杆菌目的细菌选自脂环酸芽孢杆菌科(alicyclobacillaceae)、芽胞杆菌科(bacillaceae)、显核菌科(caryophanaceae)、李斯特氏菌科(listeriaceae)、类芽孢杆菌科(paenibacillaceae)、巴斯德菌科(pasteuriaceae)、动球菌科(planococcaceae)、芽孢乳杆菌科(sporolactobacillaceae)、葡萄球菌科(staphylococcaceae)、高温放线菌科(thermoactinomycetacea)和turicibacteraceae的家族。

典型地，来自李斯特氏菌科家族的细菌例如来自环丝菌属(brochothrix)或李斯特菌属(listeria)，且可典型地选自l.fleischmannii、格氏李斯特菌(l.grayi)、英诺克李斯特菌(l.innocua)、伊氏李斯特菌(l.ivanovii)、默氏李斯特菌(l.marthii)、单核增生性李斯特菌(l.monocytogenes)、l.rocourtiae、西尔李斯特菌(l.seeligeri)、l.weihenstephanensis和威尔斯李斯特菌(l.welshimeri)。

当革兰氏阳性细菌为来自葡萄球菌科(staphylococcaceae)家族的细菌时，它们特别地选自葡萄球菌属(staphylococcus)、兼性双球菌属(gemella)、咸海鲜球菌属(jeotgalicoccus)、巨型球菌属(macrococcus)、盐水球菌属(salinicoccus)和nosocomiicoccus。

来自葡萄球菌属的细菌例如选自阿尔莱特葡萄球菌(s.arlettae)、s.agnetis、金黄色葡萄球菌(s.aureus)、耳葡萄球菌(s.auricularis)、头状葡萄球菌(s.capitis)、山羊葡萄球菌(s.caprae)、肉葡萄球菌(s.carnosus)、溶酪葡萄球菌(s.caseolyticus)、产色葡萄球菌(s.chromogenes)、科氏葡萄球菌(s.cohnii)、s.condimenti、海豚葡萄球菌(s.delphini)、s.devriesei、表皮葡萄球菌(s.epidermidis)、马胃葡萄球菌(s.equorum)、猫葡萄球菌(s.felis)、福氏葡萄球菌(s.fleurettii)、鸡葡萄球菌(s.gallinarum)、溶血葡萄球菌(s.haemolyticus)、人葡萄球菌(s.hominis)、猪葡萄球菌(s.hyicus)、中间葡萄球菌(s.intermedius)、克氏葡萄球菌(s.kloosii)、s.leei、缓慢葡萄球菌(s.lentus)、路邓葡萄球菌(s.lugdunensis)、s.lutrae、s.massiliensis、s.microti、蝇葡萄球菌(s.muscae)、s.nepalensis、巴氏葡萄球菌(s.pasteuri)、s.pettenkoferi、鱼发酵葡萄球菌(s.piscifermentans)、s.pseudintermedius、s.pseudolugdunensis、小牛肉葡萄球菌(s.pulvereri)、s.rostri、解糖葡萄球菌(s.saccharolyticus)、腐生葡萄球菌(s.saprophyticus)、施氏葡萄球菌(s.schleiferi)、松鼠葡萄球菌(s.sciuri)、s.simiae、模仿葡萄球菌(s.simulans)、s.stepanovicii、s.succinus、小牛葡萄球菌(s.vitulinus)、沃氏葡萄球菌(s.warneri)和木塘葡萄球菌(s.xylosus)。

根据本发明的另一实施方案，来自乳杆菌目(lactobacillales)的细菌选自气球菌科(aerococcaceae)、肉杆菌科(carnobacteriaceae)、肠球菌科(enterococcaceae)、乳杆菌科(lactobacillaceae)、明串珠菌科(leuconostocaceae)和链球菌科(streptococcaceae)的家族。

典型地，来自肠球菌科家族的细菌选自来自bavariicoccus属、catellicoccus属、肠球菌属(enterococcus)、蜜蜂球菌属(melissococcus)、镖杆菌属(pilibacter)、四联球菌属(tetragenococcus)、漫游球菌属(vagococcus)的细菌。

来自肠球菌属的细菌选自例如来自病臭肠球菌(e.malodoratus)、坚忍肠球菌(e.、粪肠球菌(e.faecalis)、屎肠球菌(e.faecium)、鹑鸡肠球菌(e.gallinarum)、希氏肠球菌(e.hirae)、孤立肠球菌(e.solitarius)，优选坚忍肠球菌、粪肠球菌和屎肠球菌。

来自葡萄球菌属的细菌，更特别是金黄葡萄球菌是许多皮肤或粘膜(如阴道或鼻膜)感染的原因。例如，诸如毛囊炎、脓肿、甲沟炎、疖、脓疱病、指头之间的感染、炭疽(葡萄球菌炭疽)、蜂窝织炎、继发性伤口感染、耳炎、鼻窦炎、汗腺炎、传染性乳腺炎、创伤后皮肤感染或烧伤皮肤的感染。

来自肠球菌属、特别是粪肠球菌的细菌尤其会造成心内膜炎以及膀胱、前列腺和附睾的感染。

本发明还涉及用于治疗或预防革兰氏阳性细菌感染的方法，优选皮肤或粘膜的感染，其通过向有此需要的个体给药、优选局部给药治疗有效量的根据本发明的组合物。

在被革兰氏阳性菌感染的人中，“治疗有效量”被理解为表示足以阻止感染恶化、或足以使感染退化的量。在没有感染的人中，“治疗有效量”是足以保护与革兰氏阳性菌接触的人、并防止发生由该革兰氏阳性细菌引起的感染的量。

典型地，通过将本发明的组合物施用于皮肤或粘膜来进行局部给药。

消毒或预防基材的细菌定植的方法

本发明还涉及消毒或预防由革兰氏阳性菌引起的基材的细菌定植的方法，包括使基材与本发明组合物接触。

典型地，基材是可被革兰氏阳性菌定植的任何基材，其可通过接触或摄取将感染传播给动物。

例如，基材可以是植物或动物来源的食物或包含这些食物或这些食物提取物(特别是谷物、水果、蔬菜、肉、鱼或内脏)的食物组合物。

基材也可以是选自金属、塑料、玻璃、混凝土或石材中的一种或多种元素。

优选地基材是食品工业中所用的器皿、工具或装置(炊具、容器、冷藏系统、冰箱、冷藏室等)；医院环境中所用的器皿、工具或装置，例如手术工具或假体；或公共交通工具(扶手、座椅等)。

本发明还涉及用于消毒、清洁、灭菌或净化表面的组合物。

虽然具有不同的含义，但是术语“包含”、“含有”、“包括”和“由...组成”在本发明的描述中可以互换使用，并且可以被彼此替代。

通过阅读仅作为实例的以下附图和实施例，将更好地理解本发明。

实施例

脱水山梨糖醇缩醛是根据专利no.13/01375“由糖制备长链烷基环缩醛的方法”中所述的方法通过缩醛化或转缩醛化制备的。然后使用还原条件还原糖缩醛，而没有使用先前在专利no.14/01346中描述的酸性催化剂。为了说明，脱水山梨糖醇缩醛和醚的合成如下所述。

实施例1：合成脱水山梨糖醇缩醛(a)的一般过程

山梨糖醇脱水：

将d-山梨糖醇(20g,110mmol)和0.1mol％的樟脑磺酸加入150-ml不锈钢高压釜中。将反应器密封，用氢气吹扫三次，然后引入氢气直到压力达到50巴。然后将系统加热至140℃，并用机械搅拌器搅拌15小时。冷却至室温后，释放氢气压力，将粗反应混合物在乙醇(200ml)中稀释，得到均匀的黄色混合物。减压蒸发溶剂，然后将残余物在冷甲醇中结晶并真空过滤。将结晶物质用冷甲醇洗涤，得到白色固体形式的1,4-脱水山梨糖醇(5.88g，理论值的35％)。通过hplc测定纯度>98％，而晶体的熔点为113-114℃。反应转化率测定为73％，其中获得山梨糖醇、1,4-脱水山梨糖醇、异山梨醇的混合物和非常少量的副产物，因此1,4-脱水山梨糖醇:异山梨醇为80:20。

脱水山梨糖醇缩醛化的一般过程

在装有冷凝器和cacl2捕集器的圆底烧瓶中，在氩气氛下，将1,4-d-脱水山梨糖醇(5.00g，30.5mmol，3当量)溶于无水乙醇(15ml)中。然后滴加醛(10.2mmol，1当量)，然后加入樟脑磺酸(csa，相对于醛质量的10％)。将反应混合物在磁力搅拌下在80℃保持15小时。将反应混合物冷却并减压蒸发溶剂。将残余物在乙酸乙酯中研磨，过滤除去过量的脱水山梨糖醇，用冷乙酸乙酯洗涤。可以重复该操作，以去除任何痕量的脱水山梨糖醇。将滤液减压浓缩。残余物通过硅胶柱色谱纯化，得到脱水山梨糖醇烷基缩醛。通过hplc测定区域异构体5,6-o-亚烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇和3,5-o-亚烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇的混合物的组成。此外，以两种非对映异构体的混合物的形式获得每种区域异构体。

脱水山梨糖醇转缩醛化的过程：

在圆底烧瓶中，将1,4-脱水山梨糖醇(0.5g，3mmol)溶于乙醇(7.5ml)中，在氩气流下加入1,1-二乙氧基戊烷(1.15ml，6mmol)，然后加入樟脑磺酸(50mg；10％w/w)。将反应混合物在磁力搅拌下加热至80℃。3小时后，将混合物中和并减压浓缩。残余物通过快速色谱(乙酸乙酯/环己烷80:20至100:0)纯化，得到无色油状物形式的脱水山梨糖醇缩醛(0.43g，66％分离产率)。hplc显示为4种异构体的混合物。

实施例1a:

5,6-o-亚戊基-1,4-d-脱水山梨糖醇1a和1a’以及3,5-o-亚戊基-1,4-d-脱水山梨糖醇1a”和1a”’：根据一般过程(a)，该化合物获自1,4-d-脱水山梨糖醇(0.49g,3mmol)和戊醛(0.107ml,1mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷80:20→100:0)，产生脱水山梨糖醇缩醛在5,6-o-和3,5-o-位的区域异构体的43:57混合物(0.189g,81％)，其为无色油状物形式。所获得的产物是5,6-o-和3,5-o-的脱水山梨糖醇缩醛区域异构体的混合物，并且每种区域异构体都是非对映异构体的混合物(26:17:47:10)，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.85(3h,t,j＝7.2),1.16–1.35(4h,m),1.35–1.60(2h,m),3.30–4.30(8h,脱水山梨糖醇质子),4.67–5.33(3h,3m,1h缩醛和2oh)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso)5,6-o-区域异构体1a和1a’的δc:13.90(ch3),22.06(ch2),25.68和25.81(ch2),33.16(ch2),66.59和66.93(ch2),72.79和73.19(ch),73.43(ch2),75.46和75.68(ch),76.55和76.61(ch),80.74和81.01(ch),103.29和103.37(ch)；3,5-o-区域异构体1a”和1a”’的δc:13.92和13.93(ch3),21.95和22.00(ch2),25.53和25.75(ch2),33.73和34.13(ch2),60.78和61.92(ch2),72.37和73.55(ch2),72.58和72.99(ch),73.19和73.96(ch),74.87和76.45(ch),78.38和79.08(ch),93.83和96.06(ch)；irνmax:3386(oh),2954,2873,1716,1412,1145,1461,1061,1029,967；hrms(esi⁺)计算值c11h20nao5:255.1208[m+na]⁺；测量值:255.1203(+1.8ppm)；hplc(等强度80:20h2o/ch3cn+0.1％h3po4):3,5-o-区域异构体的rt＝9.70min(1a”,47％)和11.25min(1a”’,10％)；5,6-o-区域异构体的rt＝12.50min(1a,26％)和14.49(1a’,17％)。

实施例1b:

5,6-o-亚己基-1,4-d-脱水山梨糖醇1b和1b’和3,5-o-亚己基-1,4-d-脱水山梨糖醇1b”和1b”’:根据一般过程(a)，该化合物获自1,4-d-脱水山梨糖醇(0.49g,3mmol)和己醛(0.124ml,1mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷80:20→100:0)，产生脱水山梨糖醇缩醛在5,6-o-和3,5-o-位的区域异构体的57:43混合物(0.144g,58％)，其为黄色油状物形式。所获得的产物是5,6-o-和3,5-o-的脱水山梨糖醇缩醛区域异构体的混合物，并且每种区域异构体都是非对映异构体的混合物(32:25:31:12)，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.85(3h,t,j＝6.5),1.12–1.40(6h,m),1.45–1.58(2h,m),3.30–4.30(8h,m,脱水山梨糖醇质子),4.72–4.90(1h,m,缩醛质子),5.07–5.28(2h,2m,oh)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso)5,6-o-区域异构体1b和1b’的δc:13.91(ch3),22.12(ch2),23.24和23.38(ch2),31.24(ch2),33.50(ch2),66.64和66.98(ch2),72.86和73.24(ch),73.48(ch2),75.50和75.73(ch),76.60和76.66(ch),80.78和81.06(ch),103.34和103.42(ch)；3,5-o-区域异构体1b”和1b”’的δc:13.93(ch3),22.12(ch2),23.09和23.31(ch2),31.17(ch2),34.06和34.48(ch2),60.85和61.97(ch2),72.42和73.61(ch2),72.64和72.86(ch),73.08和74.01(ch),74.94和76.48(ch),78.40和79.13(ch),93.90和96.13(ch)；irνmax:3386(oh),2929(ch3),2871(ch2),2360,2341,1465,1407,1143,1034；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c12h22nao5计算值269.1359,测量值269.1360(-0.4ppm)；hplc(等强度80:20h2o/ch3cn+0.1％h3po4):3,5-o-区域异构体的rt＝20.77min(1b”,31％)和24.65min(1b”’,12％)；5,6-o-区域异构体的rt＝28.28min(1b,32％)和33.90(1b’,25％)。

实施例1c:

5,6-o-亚辛基-1,4-d-脱水山梨糖醇1c和1c’和3,5-o-亚辛基-1,4-d-脱水山梨糖醇1c”和1c”’:根据一般过程(a)，化合物获自1,4-d-脱水山梨糖醇(1.00g,6mmol)和辛醛(0.317ml,2mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷60:40→100:0)，产生脱水山梨糖醇缩醛在5,6-o-和3,5-o-位的区域异构体的61:39混合物(0.102g,37％)，其为白色糊状物形式。所获得的产物是5,6-o-和3,5-o-的脱水山梨糖醇缩醛区域异构体的混合物，并且每种区域异构体都是非对映异构体的混合物(32:29:28:11)，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.86(3h,t,j＝8.7),1.10–1.42(10h,m),1.43–1.62(2h,m),3.38–4.31(8h,m,脱水山梨糖醇质子),4.70–4.90(1h,m,缩醛质子),5.02–5.28(2h,2m,oh)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso)5,6-o-区域异构体1c和1c’的δc:13.96(ch3),22.13(ch2),23.40和23.58(ch2),28.72(2ch2),31.26(ch2),33.54(ch2),66.22和66.96(ch2),72.85和73.24(ch),73.47(ch2),75.49和75.72(ch),76.59和76.64(ch),80.77和81.05(ch),103.31和103.40(ch)；3,5-o-区域异构体1c”和1c”’的δc:13.96(ch3),22.13(ch2),23.62和23.70(ch2),28.92和28.99(2ch2),31.26(ch2),34.09和34.51(ch2),60.85和61.95(ch2),72.42和73.60(ch2),72.62和72.90(ch),73.10和73.99(ch),74.93和76.46(ch),78.36和79.10(ch),93.88和96.09(ch)；irνmax:3425(oh),2953(ch3),2920(ch2),2855,1467,1414,1257,1047；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c14h26nao5计算值297.1672,测量值297.1670(+1.0ppm)；hplc(等强度60:40h2o/ch3cn+0.1％h3po4):3,5-o-区域异构体的rt＝11.50min(1c”,28％)和12.93min(1c”’,11％)；5,6-o-区域异构体的rt＝14.83min(1c,32％)和16.56(1c’,29％)。

实施例1d:

5,6-o-亚癸基-1,4-d-脱水山梨糖醇1d和1d’和3,5-o-亚癸基-1,4-d-脱水山梨糖醇1d”和1d”’:根据一般过程(a)，该化合物获自1,4-d-脱水山梨糖醇(1.00g,6mmol)和癸醛(0.382ml,2mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷50:50→80:20)，产生脱水山梨糖醇缩醛在5,6-o-和3,5-o-位的区域异构体的64:36混合物(0.098g,32％)，其为白色固体形式(熔点＝72℃)。所获得的产物是5,6-o-和3,5-o-的脱水山梨糖醇缩醛区域异构体的混合物，并且每种区域异构体都是非对映异构体的混合物(35:29:25:11)，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,cdcl3)所有异构体的δh:0.85(3h,t,j＝6.9),1.10–1.45(14h,m),1.47–1.70(2h,m),3.45(2h,brs,oh质子),3.60–4.39(8h,m,脱水山梨糖醇质子),4.75(t,29％h缩醛,j＝5.1),4.83(t,11％h缩醛,j＝4.8),4.85(t,35％h缩醛,j＝5.3),4.97(t,26％h缩醛,j＝4.8)；nmr¹³c(75mhz,cdcl3)5,6-o-区域异构体1d和1d’的δc:14.19(ch3),22.76(ch2),24.12和24.17(ch2),29.40(ch2),29.63(3ch2),31.97(ch2),33.98和34.12(ch2),68.17和68.57(ch2),73.57和73.66(ch),73.77和74.13(ch2),75.51和75.91(ch),77.30和77.56(ch),79.64和81.15(ch),104.99和105.14(ch)；3,5-o-区域异构体1d”和1d”’的δc:14.19(ch3),22.76(ch2),23.84和24.12(ch2),29.40(ch2),29.63(3ch2),31.97(ch2),34.19和34.83(ch2),61.76和63.41(ch2),72.80和73.14(ch),73.81(ch2),75.15和75.34(ch),77.25和77.90(ch),81.37(ch),95.73和97.92(ch)；irνmax:3433(oh),2918(ch3),2851(ch2),1739,1123,1080,1048；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c16h30nao5计算值325.1985,测量值325.1991(-1.7ppm)；hplc(等强度50:50h2o/ch3cn+0.1％h3po4):3,5-o-异构体的rt＝11.97min(1d”,25％)和13.27min(1d”’,11％)；5,6-o-区域异构体的rt＝15.21min(1d,35％)和16.60(1d’,29％)。

实施例1e:

5,6-o-亚十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇1e和1e’和3,5-o-亚十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇1e”和1e”’:根据一般过程(a)，该化合物获自1,4-d-脱水山梨糖醇(1.00g,6mmol)和十二烷基醛(0.450ml,2mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷50:50→70:30)，产生脱水山梨糖醇缩醛在5,6-o-和3,5-o-位的区域异构体的48:52混合物(0.095g,29％)，其为白色固体形式(熔点＝82℃)。所获得的产物是5,6-o-和3,5-o-的脱水山梨糖醇缩醛区域异构体的混合物，并且每种区域异构体都是非对映异构体的混合物(25:23:40:12)，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.85(3h,t,j＝6.9),1.12–1.42(18h,m),1.43–1.59(2h,m),3.41–4.30(8h,m,脱水山梨糖醇质子),4.72–4.89(1h,m,缩醛质子),5.00–5.12和5.17–5.33(2h,2m,oh质子)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso)δc5,6-o-区域异构体的1e和1e’:13.95(ch3),22.15(ch2),23.60和23.69(ch2),28.79(ch2),28.93(ch2),29.05(ch2),29.07(ch2),29.08(ch2),29.10(ch2),31.37(ch2),33.54(ch2),66.59和66.93(ch2),72.87和73.26(ch),73.46(ch2),75.49和75.72(ch),76.58和76.63(ch),80.75和81.04(ch),103.29和103.38(ch)；3,5-o-区域异构体1e”和1e”’的δc:13.95(ch3),22.15(ch2),23.38和23.60(ch2),28.79(ch2),28.93(ch2),29.05(ch2),29.07(ch2),29.08(ch2),29.10(ch2),31.37(ch2),34.10和34.51(ch2),60.84和61.94(ch2),72.60和72.95(ch),72.43和73.59(ch2),73.17和73.98(ch),74.92和76.43(ch),78.31和79.07(ch),93.87和96.06(ch)；irνmax:3412(oh),2917(ch3),2849(ch2),1468,1418,1256,1082,1050；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c18h34nao5计算值353.2298,测量值353.2300(-0.3ppm)；hplc(等强度50:50h2o/ch3cn+0.1％h3po4):3,5-o-区域异构体的rt＝31.89min(1e”,40％)和35.77min(1e”’,12％)；5,6-o-区域异构体的rt＝41.72min(1e,25％)和46.18(1e’,23％)。

实施例2：合成脱水山梨糖醇醚的一般过程(b)

在300-ml不锈钢高压釜中，将1,4-d-脱水山梨糖醇缩醛的区域异构体和非对映异构体的混合物(20mmol)在环戊基甲基醚(cpme,200ml)中稀释，并添加5％-pd/c(1.00g,5mol％钯)。将反应器密封，用氢气吹扫三次，然后将氢气引入以产生30巴的压力。将反应混合物机械搅拌并加热至120℃，保持15小时。在回到环境温度后，释放氢气压力，将反应混合物在无水乙醇(etoh，100ml)中稀释并过滤(milliporedurapore0.01μm过滤器)。将滤液减压浓缩，得到脱水山梨糖醇醚区异构体的混合物。

实施例2a:

戊基-1,4-d-脱水山梨糖醇2a,2a’和2a”:根据一般过程(b)，该化合物获自5,6-o-亚戊基-1,4-d-脱水山梨糖醇1a和1a’和3,5-o-亚戊基-1,4-d-脱水山梨糖醇1a”和1a”’的43:57混合物(0.98g,4.22mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷,90:10→100:0，然后etoh/etoac10:90)，产生脱水山梨糖醇醚区域异构体2a、2a’和2a”的混合物(0.686g,69％)，其为白色糊状物形式。该产物为5-o-戊基-1,4-d-脱水山梨糖醇2a、3-o-戊基-1,4-d-脱水山梨糖醇2a’和6-o-戊基-1,4-d-脱水山梨糖醇2a”的26:33:41混合物，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.86(3h,t,j＝6.9),1.19–1.35(4h,m),1.39–1.56(2h,m),3.22–3.99和4.05–4.11(10h,m,脱水山梨糖醇质子+och2醚),异构体2a的δh:4.31(1h,t,j＝5.8,oh⁶),4.84(1h,d,j＝4.3,oh³),5.00(1h,d,j＝2.9,oh²),异构体2a’14b的δh:4.31(1h,t,j＝5.2,oh⁶),4.37(1h,d,j＝5.4,oh⁵),5.06(1h,d,j＝3.3,oh²),异构体2a”的δh:4.55(1h,d,j＝5.8,oh⁵),4.82(1h,d,j＝4.3,oh³),4.99(1h,d,j＝2.8,oh²)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso)次要异构体(26％)2a的δc:14.03(ch3),22.06(ch2),27.88(ch2),29.55(ch2),62.02(ch2),69.79(ch2),73.15(ch2),75.53(ch),76.46(ch),77.38(ch),79.29(ch)；中间体异构体(33％)2a’的δc:13.99(ch3),22.03(ch2),27.91(ch2),29.22(ch2),64.20(ch2),68.72(ch),69.52(ch2),73.23(ch),73.61(ch2),80.10(ch),83.96(ch)；主要异构体(41％)2a”的δc:13.99(ch3),22.02(ch2),27.87(ch2),28.99(ch2),67.50(ch),70.60(ch2),73.36(ch2),73.49(ch2),75.66(ch),76.38(ch),80.34(ch)；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c11h22nao5计算值257.1359,测量值257.1363(-1.4ppm)；hplc(c18柱，等强度80:20h2o/ch3cn+0.1％h3po4):rt7.20min(2a,26％),9.25min(2a’,33％)和10.79min(2a”,41％)。

实施例2b:

己基-1,4-d-脱水山梨糖醇2b,2b’和2b”：根据一般过程(b)，该化合物获自5,6-o-亚己基-1,4-d-脱水山梨糖醇1b和1b’和3,5-o-亚己基-1,4-d-脱水山梨糖醇1b”和1b”’的57:43混合物(4.92g,20.0mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷,80:20→100:0，然后etoh/etoac10:90)，产生脱水山梨糖醇醚区域异构体2b、2b’和2b”的混合物(3.25g,65％)，其为白色糊状物形式。该产物为5-o-己基-1,4-d-脱水山梨糖醇2b、3-o-己基-1,4-d-脱水山梨糖醇2b’和6-o-己基-1,4-d-脱水山梨糖醇2b”的33:16:51混合物，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.86(3h,t,j＝6.9),1.16–1.36(6h,m),1.38–1.56(2h,m),3.25–4.00和4.05–4.11(10h,m,脱水山梨糖醇质子+och2醚),异构体2b的δh:4.31(1h,t,j＝5.5,oh⁶),4.83(1h,d,j＝4.4,oh³),4.99(1h,d,j＝2.9,oh²),异构体2b’的δh:4.31(1h,t,j＝5.5,oh⁶),4.36(1h,d,j＝5.4,oh⁵),5.06(1h,d,j＝3.3,oh²),异构体2b”的δh:4.54(1h,d,j＝5.8,oh⁵),4.81(1h,d,j＝4.3,oh³),4.99(1h,d,j＝2.9,oh²)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso)异构体2b(33％)的δc:14.00(ch3),22.14(ch2),25.36(ch2),29.87(ch2),31.27(ch2),62.03(ch2),69.84(ch2),73.17(ch2),75.57(ch),76.49(ch),77.40(ch),79.31(ch)；异构体2b’(16％)的δc:13.97(ch3),22.17(ch2),25.34(ch2),29.52(ch2),31.19(ch2),64.21(ch2),68.74(ch),69.56(ch2),73.27(ch),73.62(ch2),80.11(ch),83.98(ch)；异构体2b”(51％)的δc:13.97(ch3),22.17(ch2),25.40(ch2),29.31(ch2),31.23(ch2),67.54(ch),70.65(ch2),73.38(ch2),73.50(ch2),75.70(ch),76.40(ch),80.35(ch)；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c12h24nao5计算值271.1516,测量值271.1521(-1.7ppm)；hplc(c18柱，等强度80:20h2o/ch3cn+0.1％h3po4):rt17.49min(2b,33％),24.45min(2b’,16％)和29.58min(2b”,51％)。

实施例2c:

辛基-1,4-d-脱水山梨糖醇2c,2c’和2c”:根据一般过程(b)，该化合物获自5,6-o-亚辛基-1,4-d-脱水山梨糖醇1c和1c’和3,5-o-亚辛基-1,4-d-脱水山梨糖醇1c”和1c”’(5.61g,20.4mmol)的61:39混合物。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷,80:20→100:0，然后etoh/etoac10:90)，产生脱水山梨糖醇醚区域异构体2c、2c’和2c”的混合物(4.79g,85％)，其为白色固体形式。该产物为5-o-辛基-1,4-d-脱水山梨糖醇2c,3-o-辛基-1,4-d-脱水山梨糖醇2c’和6-o-辛基-1,4-d-脱水山梨糖醇2c”的33:22:45混合物，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.86(3h,t,j＝6.8),1.13–1.35(10h,m),1.36–1.55(2h,m),3.27–3.99和4.05–4.11(10h,m,脱水山梨糖醇质子+och2醚),异构体2c的δh:4.31(1h,t,j＝5.8,oh⁶),4.84(1h,d,j＝4.5,oh³),5.00(1h,d,j＝2.8,oh²),异构体2c’的δh:4.31(1h,t,j＝5.2,oh⁶),4.37(1h,d,j＝5.4,oh⁵),5.06(1h,d,j＝3.3,oh²),异构体2c”的δh:4.54(1h,d,j＝5.8,oh⁵),4.81(1h,d,j＝4.3,oh³),4.99(1h,d,j＝2.8,oh²)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso):异构体2c(33％)的δc:13.98(ch3),22.13(ch2),25.66(ch2),28.78(ch2),28.99(ch2),29.89(ch2),31.32(ch2),62.01(ch2),69.83(ch2),73.15(ch2),75.53(ch),76.45(ch),77.38(ch),79.29(ch)；异构体2c’(22％)的δc:13.98(ch3),22.13(ch2),25.70(ch2),28.75(ch2),28.90(ch2),29.53(ch2),31.30(ch2),64.18(ch2),68.71(ch),69.52(ch2),73.23(ch),73.60(ch2),80.08(ch),83.95(ch)；异构体2c”(45％)的δc:13.98(ch3),22.13(ch2),25.70(ch2),28.75(ch2),28.93(ch2),29.32(ch2),31.30(ch2),67.49(ch),70.61(ch2),73.36(ch2),73.49(ch2),75.66(ch),76.37(ch),80.34(ch)；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c14h28nao5计算值299.1829,测量值299.1832(-1.2ppm)；hplc(c18柱，等强度60:40h2o/ch3cn+0.1％h3po4):rt8.79min(2c,33％),9.80min(2c’,22％)和11.77min(2c”,45％)。

实施例2d:

癸基-1,4-d-脱水山梨糖醇2d、2d’和2d”:根据一般过程(b)，该化合物获自5,6-o-亚癸基-1,4-d-脱水山梨糖醇1d和1d’和3,5-o-亚癸基-1,4-d-脱水山梨糖醇1d”和1d”’的64:36混合物(6.12g,20.2mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷,70:30→100:0，然后etoh/etoac10:90)，产生脱水山梨糖醇醚区域异构体2d、2d’和2d”的混合物(3.66g,59％)，其为白色固体形式。该产物为5-o-癸基-1,4-d-脱水山梨糖醇2d,3-o-癸基-1,4-d-脱水山梨糖醇2d’和6-o-癸基-1,4-d-脱水山梨糖醇2d”的32:16:52混合物，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.85(3h,t,j＝6.9),1.14–1.35(14h,m),1.37–1.55(2h,m),3.25–3.98和4.05–4.11(10h,m,脱水山梨糖醇质子+och2醚),异构体2d的δh:4.31(1h,t,j＝5.4,oh⁶),4.82(1h,d,j＝4.3,oh³),4.99(1h,d,j＝2.9,oh²),异构体2d’的δh:4.31(1h,t,j＝5.4,oh⁶),4.35(1h,d,j＝5.5,oh⁵),5.06(1h,d,j＝3.3,oh²),异构体2d”的δh:4.53(1h,d,j＝5.8,oh⁵),4.80(1h,d,j＝4.3,oh³),4.98(1h,d,j＝1.9,oh²)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso)异构体2d的δc(32％):13.98(ch3),22.16(ch2),25.69(ch2),28.79(ch2),29.07(ch2),29.10(ch2),29.17(ch2),29.92(ch2),31.37(ch2),62.01(ch2),69.84(ch2),73.16(ch2),75.56(ch),76.48(ch),77.41(ch),79.30(ch)；异构体2d’的δc(16％):13.98(ch3),22.16(ch2),25.72(ch2),28.79(ch2),28.98(ch2),29.07(ch2),29.12(ch2),29.57(ch2),31.37(ch2),64.18(ch2),68.72(ch),69.55(ch2),73.27(ch),73.60(ch2),80.08(ch),83.96(ch)；异构体2d”的δc(52％):13.98(ch3),22.16(ch2),25.72(ch2),28.79(ch2),29.01(ch2),29.07(ch2),29.14(ch2),29.35(ch2),31.37(ch2),67.53(ch),70.64(ch2),73.37(ch2),73.50(ch2),75.69(ch),76.40(ch),80.35(ch)；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c16h32nao5计算值327.2142,测量值327.2135(+2.1ppm)；hplc(c18柱，等强度50:50h2o/ch3cn+0.1％h3po4):rt9.03min(2d,32％),9.67min(2d’,16％)和11.61min(2d”,52％)。

实施例2e:

十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇2e、2e’和2e”:根据一般过程(b)，该化合物获自5,6-o-亚十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇1e和1e’和3,5-o-亚十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇1e”和1e”’的48:52混合物(1.29g,3.92mmol)。反应后，残余物通过硅胶柱色谱纯化(etoac/环己烷,70:30→100:0，然后etoh/etoac10:90)，产生脱水山梨糖醇醚区域异构体2e、2e’和2e”的混合物(0.72g,55％)，其为无色油状物形式。该产物为5-o-十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇2e、3-o-十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇2e’和6-o-十二烷基-1,4-d-脱水山梨糖醇2e”的27:33:40混合物，这通过hplc确定。nmr¹h(300mhz,d6-dmso)所有异构体的δh:0.85(3h,t,j＝6.9),1.16–1.34(18h,m),1.38–1.54(2h,m),3.26–3.98和4.05–4.11(10h,m,脱水山梨糖醇质子+och2醚),异构体2e的δh:4.32(1h,t,j＝5.5,oh⁶),4.84(1h,d,j＝3.7,oh³),5.00(1h,d,j＝2.8,oh²),异构体2e’的δh:4.32(1h,t,j＝5.5,oh⁶),4.37(1h,d,j＝5.4,oh⁵),5.06(1h,d,j＝3.3,oh²),异构体2e”的δh:4.55(1h,d,j＝5.8,oh⁵),4.82(1h,d,j＝4.1,oh³),4.99(1h,d,j＝2.1,oh²)；nmr¹³c(75mhz,d6-dmso)异构体2e(27％)的δc:13.97(ch3),22.11(ch2),25.64(ch2),28.74(ch2),29.05(3ch2),29.08(2ch2),29.88(ch2),31.32(ch2),62.00(ch2),69.81(ch2),73.14(ch2),75.52(ch),76.44(ch),77.38(ch),79.27(ch)；异构体2e’(33％)的δc:13.97(ch3),22.11(ch2),25.68(ch2),28.74(ch2),29.05(3ch2),29.08(2ch2),29.52(ch2),31.32(ch2),64.16(ch2),68.69(ch),69.51(ch2),73.22(ch),73.58(ch2),80.06(ch),83.93(ch)；异构体2e”(40％)的δc:13.97(ch3),22.11(ch2),25.68(ch2),28.74(ch2),28.92(ch2),28.96(ch2),29.05(2ch2),29.08(ch2),29.31(ch2),31.32(ch2),67.47(ch),70.59(ch2),73.35(ch2),73.48(ch2),75.63(ch),76.35(ch),80.34(ch)；hrms(esi⁺):[m+na]⁺c18h36nao5计算值355.2455,测量值355.2458(-0.9ppm)；hplc(c18柱，等强度50:50h2o/ch3cn+0.1％h3po4):rt22.65min(2e,27％),25.04min(2e’,33％)和30.81min(2e”,40％)。

实施例3：合成脱水山梨糖醇醚的一锅法

由1,4-脱水山梨糖醇一锅合成脱水山梨糖醇醚：

在100ml的圆底烧瓶中，在na2so4(6.5g，50mmol)的存在下，在氩气氛下将1,4-脱水山梨糖醇(10g，62mmol)溶于无水cpme(30ml)中。滴加戊醛(3.3ml，31mmol)，然后加入amberlyst15(530mg，20％m戊醛)。在磁力搅拌下将混合物加热至80℃。3小时后，将热混合物过滤，用cpme(2×25ml)洗涤，滤液减压浓缩。无需额外纯化，将混合物在cpme(300ml)中稀释，用mgso4干燥并过滤。将滤液放入500ml不锈钢高压釜中，加入5％-pd/c(3.3mg)。在加压(30巴)加入氢气之前，将反应器封闭并用氢气吹扫三次。将体系在120℃加热并搅拌15小时。在冷却至环境温度后，释放出压力下的氢气，将反应混合物溶于无水乙醇(250ml)中并过滤(0.01微米milliporedurapore过滤器)。滤液减压蒸发，残余物(5.8g)通过快速色谱纯化(etoac/环己烷90:10至100:0，然后etoh/etoac10:90)。得到戊基-(1,4)-脱水山梨糖醇醚的混合物(3.97g，56％)，其为无色油状物形式(nmr1h，纯度>98％)。

实施例4：测定脱水山梨糖醇缩醛和醚衍生物对革兰氏阳性菌的抑菌性质

通过测量其对所测细菌的最低抑制浓度(mic)来评估衍生物的抑菌性质。根据以下定义的条件，使用96孔微板微稀释法进行测定。

测量的细菌：

根据“临床实验室标准研究所”(clinical-laboratory-standards-institute，第6版，批准的标准m100-s17.clsi,wayne,pa,2007)的建议，在革兰氏阳性菌株上测量最低抑制浓度(mic)。

所研究的革兰氏阳性细菌如下：单核增生性李斯特菌(cip103575)、粪肠球菌(29212^tm)和金黄色葡萄球菌(292213^tm)。

制备接种物：

将新鲜分离的所研究的培养物(在37℃在血琼脂上孵育18小时后)在无菌水(10ml)中溶解，直到获得0.5mcfarland(mc)(即1至2×10⁸cfu(细菌)/cm³)的悬浮液。然后稀释该细菌悬浮液以获得5×10⁵cfu/cm³的最终浓度。

制备用于读取mic的多孔板：

每个孔含有相同量的mueller-hinton培养基(用于细菌培养物的丰富培养基)和最终为5×10⁵cfu/cm³的细菌。

将目标测试化合物溶解在2.5％m的乙醇中，然后将其两两稀释至不同浓度。

在多孔板上，已经计划了不包含感兴趣的测试化合物的培养基的第一系列。它对应于生长对照(对照孔)。这些对照作为与包含不同浓度的感兴趣的测试化合物的随后孔的细菌生长进行比较的参考。第二系列孔包含在孔中浓度为4mm的感兴趣的测试化合物的母液。将每一系列孔两两稀释，直到最后一个系列终浓度为0.003mm。每个浓度都在同一个平板上重复。将板在37℃孵育18小时。孵育后的读数显示对照孔中的浊度(显示细菌生长)。如果有抗菌活性，则细菌生长被抑制，这意味着不存在浊度或细菌残留物。如果测试化合物抑制这种细菌生长，它可以对应于分子中的抑菌活性(抑制细菌生长)或分子中的杀菌活性(导致细菌死亡)。

细菌计数：

为了确定所测试的试剂是否具有杀菌性，确定了最小杀菌浓度(mbc)。mbc对应于留下<4log的存活细菌数的浓度。为此，对澄清的孔或无细菌残留的孔(c≤mic)进行细菌计数。为了做到这一点，在使用螺旋技术在血琼脂接种之前，将相同浓度的两个孔稀释100倍。在37℃孵育24小时后，视觉计数可测定没有细菌生长的最小浓度。

用脱水山梨糖醇衍生物对革兰氏阳性菌进行了测试。将测试化合物的溶液在乙醇中以不造成细菌生长的溶剂浓度(2.5％m)进行稀释。灭菌后，将该溶液在水中稀释。将单核增生性李斯特菌(cip103575)、粪肠球菌(atcc29212tm)和金黄葡萄球菌(atcc292213tm)的抗菌试验得到的结果总结在表1中。

表1.脱水山梨糖醇衍生物对革兰阳性菌的抗菌效果：最低抑菌浓度(mic)，单位为mmol/l

根据对96孔微孔板的观察，脂肪链小于或等于10个碳的脱水山梨糖醇醚和缩醛不具有抗菌性质，因为所有的孔都含有浊度或细菌残留物。仅对于衍生自十二烷基的化合物观察到细菌抑制(条目5)。

事实上，浓度低于12mm时，脱水山梨糖醇c12缩醛和醚抑制了研究的细菌菌株。

实施例5：脱水山梨糖醇缩醛和醚衍生物对革兰氏阳性菌的杀菌性质

为了确定呈现抑菌性质的化合物的杀菌效果，将不再具有浊度的孔在琼脂上重新接种。孵育一晚后获得的结果列于表2。

表2.脱水山梨糖醇衍生物对革兰阳性菌的抗菌效果：最低抑制浓度(mic)单位为mmol/l，最小杀菌浓度(mbc)单位为mmol/l(斜体)

关于脱水山梨糖醇衍生物，仅分析了含有12个碳原子链并呈现细菌抑制的化合物。脱水山梨糖醇亚十二烷基缩醛已被揭示，在0.03mm时为单核增生性李斯特菌和粪肠球菌株的杀菌化合物，在0.12mm时为金黄色葡萄球菌的抑菌化合物。为了证实在缩醛上测量的性质确实是该两亲性化合物的性质，而不是其水解产物的性质，在不同的细菌菌株上测试十二烷基醛的性质，并且在浓度小于或等于4mm时没有观察到抗菌活性。因此，c12脱水山梨糖醇缩醛是有活性的，该活性不是来自相应的醛。该脱水山梨糖醇十二烷基醚混合物对所有测试的革兰氏阳性菌株的mbc为0.12mm。

因此可得出结论，脱水山梨糖醇c12缩醛和醚，即使为区域异构体和非对映异构体的混合物形式时，也呈现非常有趣的抗菌和杀菌性质。

这些结果表明，脱水山梨糖醇衍生物可呈现出非常活跃的新一代生物来源的抑菌和杀菌性质。

实施例6：评估表面活性剂和抗菌性质

已经测试了合成的最佳产物的物理、化学和抗菌性质。这些分析显示了每种化合物对革兰氏阳性菌具有不同的表面活性剂分布以及最低抑制浓度(mic)。表3中比较了最佳的表面活性剂和抗菌结果。

表3.在感兴趣产物的临界胶束浓度(cmc)和最低抑制浓度(mic)(mmol/l)之间的比较结果：最低抑制浓度(mic)单位为mmol/l

对于脱水山梨糖醇亚十二烷基(条目1)，cmc值在mic范围内。脱水山梨糖醇十二烷基醚相比于其mic(0.12mm)具有略低的cmc(0.09mm)，但这些浓度大体相同(条目2)。

实施例7：与现有技术中已知化合物的比较测试

已经将脱水山梨糖醇衍生物的活性与具有相似结构的化合物或下表中的商业化合物，例如单月桂酸甘油酯(ml)的活性进行了比较。

表4.参考产品(ml)与脱水山梨糖醇缩醛和醚的比较结果：最低抑制浓度(mic)单位为mmol/l

得到的结果表明，根据本发明的衍生物与单月桂酸甘油酯(ml)一样有效，因为缩醛(c12acsorb)或c12糖醚(c12ethsorb)的混合物获得的mic与单月桂酸甘油酯获得的mic之间差异很小。

然而，生物培养基中的醚官能团的稳定性高于酯的稳定性(对酯酶敏感)，这是因为包含醚官能团的化合物将随时间具有延长的活性，这使得该化合物的这些衍生物特别有利。

实施例8：测定c12脱水山梨糖醇醚对革兰氏阳性菌的抑菌性质

由于用具有c12烷基基团的化合物观察到了最好的结果，所以使用例如根据前述实施例获得的脱水山梨糖醇醚的混合物在更宽范围的革兰氏阳性菌株上进行了实验。

-制备接种物：

将新鲜分离的所研究的培养物(在37℃在血琼脂上孵育18小时后)在无菌水(10ml)中溶解，直到获得0.5mcfarland(mc)(即1至2×10⁸cfu(细菌)/cm³)的悬浮液。然后稀释该细菌悬浮液以获得1×10⁶cfu/cm³的最终浓度。

-制备用于读取mic的多孔板：

每个孔含有相同量的mueller-hinton培养基(用于细菌培养物的丰富培养基)和最终为0.5×10⁶cfu/cm³的细菌。

将感兴趣的测试化合物以25mg/ml溶解在乙醇或dmso中，然后两两稀释至不同浓度。在多孔板上，已经计划了不包含感兴趣的测试化合物的培养基的第一系列。它对应于生长对照(对照孔)。这些对照作为与包含不同浓度的感兴趣的测试化合物的随后孔的细菌生长进行比较的参考。第二系列孔包含浓度为在孔中256mg(7mm)的感兴趣的测试化合物的母液。将每一系列孔两两稀释，直到最后一个系列终浓度为0.25mg/l(0.0007mm)。每个浓度都在同一个平板上重复。将板在37℃孵育18小时。孵育后的读数显示出在对照孔中的浊度(显示细菌生长)。如果有抗菌活性，则细菌生长被抑制，这意味着不存在浊度或细菌残留物。

根据“临床实验室标准研究所”(clinical-laboratory-standards-institute，第6版，批准的标准m100-s17.clsi,wayne,pa,2007)的建议，测量对革兰氏阳性菌株的最低抑制浓度(mic)。临床菌株已在hospicedelyon中分离。

所研究的革兰氏阳性细菌如下：

-葡萄球菌金黄色葡萄球菌：29213^tm,atcc25923，

葡萄球菌菌株：抗甲氧西林金黄色葡萄球菌(lac-deleousa300),(mu3),(ht2004-0012),ly199-0053,(ht2002-0417),(ht2006-1004)，

葡萄球菌菌株：抗达托霉素金黄色葡萄球菌(st2015-0188),(st20141288)。

-肠球菌：粪肠球菌(29212^tm)，由尿液分离的临床肠球菌菌株粪肠球菌：菌株015206179901(此后为9901),菌株015205261801(此后为1801)，

-肠球菌：屎肠球菌(cip103510)，肠球菌临床菌株屎肠球菌：vana0151850763(此后为vana)；菌株015205731401(此后为1401)，

-李斯特菌属：单核增生性李斯特菌(cip103575)，由血培养分离的临床菌株(015189074801,lm1)，由脑脊髓液分离的菌株(015170199001,lm2)，由血培养分离的临床菌株(015181840701,lm3)。

-制备接种物：

将新鲜分离的所研究的培养物(在37℃在血琼脂上孵育18小时后)在无菌水(10ml)中溶解，直到获得0.5mcfarland(mc)(即10⁸cfu(细菌)/cm³)的悬浮液。然后稀释细菌悬浮液以获得10⁶cfu/cm³的最终浓度。

-葡萄球菌属的菌株的结果

表5.脱水山梨糖醇醚对金黄色葡萄球菌不同菌株的抗菌结果：最低抑制浓度(mic)单位为mg/l

根据对96孔微孔板的观察，脱水山梨糖醇c12醚(c12-eth-sorb)对所测试的葡萄球菌属菌株具有活性(32mg/l<mic<64mg/l)。

-肠球菌属菌株的结果

表6.脱水山梨糖醇醚对肠球菌属不同菌株的抗菌结果：最低抑制浓度(mic)单位为mg/l

脱水山梨糖醇c12醚(c12-eth-sorb)对所测试的所有肠球菌属菌株具有良好的抗菌活性8mg/l<mic<16mg/l。

-李斯特菌属菌株的结果

表7.脱水山梨糖醇醚对李斯特菌属不同菌株的抗菌结果：最低抑制浓度(mic)单位为mg/l。

脱水山梨糖醇c12醚(c12-eth-sorb)对所测试的所有李斯特菌属菌株具有良好的抗菌活性16mg/l<mic<32mg/l。