一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂的制作方法

文档序号:11900815阅读:379来源:国知局

本发明涉及疫苗佐剂技术领域,特别是涉及一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂。



背景技术:

佐剂是非特异性免疫增强剂,当与抗原一起注射或预先注入机体时,可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。佐剂增强免疫应答的机制是通过改变抗原的物理形状,延长抗原在机体内保留时间;刺激单核吞噬细胞对抗原的递呈能力;刺激淋巴细胞分化,增加扩大免疫应答能力。

佐剂有很多种;例如氢氧化铝佐剂、短小棒状杆菌、脂多糖、细胞因子、明矾等。白油佐剂免疫原性好,但是毒副作用大;氢氧化铝胶佐剂免疫原性好,副作用小,但不能诱导细胞免疫;类脂佐剂和蜂胶佐剂免疫原性好,可诱导体液免疫和细胞免疫,免疫持续时间长,但原材料价格昂贵。现有的免疫佐剂,因为效果差或者毒力大,尤其是缺乏针对性,没有一种得到满意效果。因此本发明的目的在于提供一种用于鸡新城疫活疫苗的新型免疫佐剂。



技术实现要素:

本发明的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,本发明将明矾、维生素E、左旋咪唑、羊毛脂有机结合,互相协调,制备出用于鸡新城疫活疫苗的免疫复合佐剂,发挥佐剂的最大优势,与抗原合用免疫效果较好,毒性小,成本低。

本发明的一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂技术方案为,包括明矾、维生素E、左旋咪唑、羊毛脂。

所述的一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾20-60、维生素E10-20、左旋咪唑1-8、羊毛脂10-30。

所述的一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾30-50、维生素E12-18、左旋咪唑2-6、羊毛脂12-25。

所述的一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾40-45、维生素E12-16、左旋咪唑3-5、羊毛脂15-20。

所述的一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,优选的,包括按重量比的以下成分:明矾45、维生素E15、左旋咪唑5、羊毛脂16。

所述的一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,制备方法为:

(1)将明矾配制成10-20%的硫酸铝钾溶液;

(2)将维生素E、左旋咪唑、羊毛脂加入硫酸铝钾溶液中,混合均匀,调pH到6.5得到佐剂。

步骤(1)中,将明矾配制成12%的硫酸铝钾溶液。

将抗原按照1:1的重量比加入佐剂中,按照2500rpm,乳化30分钟。

本发明的有益效果为:本发明所述一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,包括明矾、维生素E、左旋咪唑、羊毛脂。本发明将明矾、维生素E、左旋咪唑、羊毛脂有机结合,互相协调,制备出用于鸡新城疫活疫苗的免疫复合佐剂,发挥佐剂的最大优势,与抗原合用免疫效果较好,毒性小,成本低。

本发明佐剂与鸡新城疫活疫苗抗原结合,组成最佳的配方,即形成免疫刺激复合物,更好的发挥免疫佐剂效果。应用该佐剂和单独使用明矾佐剂或者使用现有的弗氏佐剂、分别配置鸡新城疫活疫苗活疫苗免疫动物,应用本发明佐剂组其抗体滴度均明显高于单独使用明矾佐剂或者使用现有的弗氏佐剂实验组,高出5-12个抗体滴度。

具体实施方式:

为了更好地理解本发明,下面用具体实例来详细说明本发明的技术方案,但是本发明并不局限于此。

实施例1

所述的一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾45、维生素E15、左旋咪唑5、羊毛脂16。

制备方法为:

(1)将明矾配制成12%的硫酸铝钾溶液;

(2)将维生素E、左旋咪唑、羊毛脂加入硫酸铝钾溶液中,混合均匀,调pH到6.5得到佐剂。

将抗原按照1:1的重量比加入佐剂中,按照2500rpm,乳化30分钟,得疫苗。

依照国家兽药标准,验证其结果:

安全检验: 用1-2月龄的黄羽肉鸡15只,每只肌注疫苗0.5ml。观察24小时,均应无异常反应。观察10日后15只鸡均未出现异常反应。

效力检验: 免疫组用1至2个月龄的健康易感黄羽肉鸡(按92版兽用生物制品规程附录第15页做抑制红细胞凝集试验,抑制凝集价应小于1∶4)10只,每只肌注疫苗0.5ml,10至14天后,连同条件相同的未免疫对照鸡3只,各肌肉注射10 4ELD50的北京株鸡新城疫强毒1ml,观察10至14天,对照鸡全部发病死亡,免疫鸡至少保护9只。

检验结果:对照鸡全发病,免疫组全健活。

实施例2

所述的一种用于鸡新城疫活疫苗的佐剂,包括按重量比的以下成分:明矾40、维生素E12、左旋咪唑3、羊毛脂20。

制备方法为:

(1)将明矾配制成10%的硫酸铝钾溶液;

(2)将维生素E、左旋咪唑、羊毛脂加入硫酸铝钾溶液中,混合均匀,调pH到6.5得到佐剂。

将抗原按照1:1的重量比加入佐剂中,按照2500rpm,乳化30分钟,得疫苗。

依照国家兽药标准,验证其结果:

安全检验: 用1-2月龄的黄羽肉鸡15只,每只肌注疫苗0.5ml。观察24小时,均应无异常反应。观察10日后15只三黄鸡鸡均未出现异常反应。

效力检验: 免疫组用1至2个月龄的健康易感黄羽肉鸡(按92版兽用生物制品规程附录第15页做抑制红细胞凝集试验,抑制凝集价应小于1∶4)10只,每只肌注疫苗0.5ml,10至14天后,连同条件相同的未免疫对照鸡3只,各肌肉注射10 4ELD50的北京株鸡新城疫强毒1ml,观察10至14天,对照鸡全部发病死亡,免疫鸡至少保护9只。

检验结果:对照鸡全发病,免疫组全健活。

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