本发明涉及糖尿病用药
技术领域：
，特别涉及一种含有利拉鲁肽的复方降糖制剂及其制备方法。
背景技术：
：糖尿病是一种常见的有遗传倾向的内分泌代谢疾病，其病理生理改变是胰岛素分泌相对不足，引起糖、脂肪、蛋白质等代谢紊乱，表现为血糖尿糖高、多饮、多食、多尿、口渴症状，进而引发糖尿病并发症。而糖尿病并发症是一种常见的慢性并发症，患病后果相当严重，足病(足部坏疽、截肢)、肾病(肾功能衰竭、尿毒症)、眼病(模糊不清、失明)、脑病(脑血管病变)、心脏病、皮肤病、性病等是糖尿病最常见的并发症，是导致糖尿病患者死亡的主要因素。因此糖尿病被称为疾病的“百货公司”，近年来糖尿病的发病率呈逐渐增高的趋势，而且由于人们饮食结构不合理以及环境因素的影响，糖尿病这一过去的“富贵病”逐渐呈现发病人群平民化、年轻化的趋势。目前治疗糖尿病的目的是纠正代谢紊乱、消除症状、促进胰岛素分泌。由于市场上用于治疗糖尿病的药物成分单一，作用只是针对降低血糖的某一环节，长期应用会造成靶器官钝化，进而导致用药一段时间后疗效降低的现象。从而研发一种疗效显著，且不会随用药时间的延长而降低药效的药物极为重要。技术实现要素：本发明的技术方案为：一种含有利拉鲁肽的复方降糖制剂，按重量组份计，包括以下成分：利拉鲁肽9～17份、黄参多糖28～41份、粉防己碱22～37份、糖萜素16～23份、螺旋藻多糖12～15份、混合激酶8～11份、门冬氨酸钾镁7～9份、非诺贝特5～9份、羟苯磺酸钙3～5份、血管内皮生长因子1～4份、度洛西汀0.8～1.2份、单唾液酸四己糖神经节苷脂0.2～0.4份、雷公藤多苷0.1～0.5份、己酮可可碱0.09～0.12份、依达拉奉0.05～0.08份、丙二醇5～12份、对氨基苯甲酸钠1～2份、没食子酸丙酯0.01～0.04份。进一步的，所述的混合激酶的成分为己糖激酶、磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶按4:2:1的质量比配制而成的混合物；混合激酶主要促进糖的氧化吸收。进一步的，所述的螺旋藻多糖的制备方法为：取螺旋藻藻粉，与灭菌水以1:5的质量比例混合成悬浊液，然后将悬浊液在4℃静置4h后，放于-20～-30℃冰冻3h，在室温下融化后加入质量浓度为45％的硫酸铵溶液盐析，温度为4℃，盐析时间为12～24h；然后离心20min～40min，转速为6000rpm/min，收集上清液，然后上清液先用离子交换纤维素层析柱层析，然后用无菌水洗脱2～4次，然后将洗脱液和层析液合并，再用用葡聚糖凝胶柱G-100过滤，用无菌水洗脱2～4次，合并洗脱液和层析液，冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品；螺旋藻多糖可通过多种途径如促进胰岛素分泌、减缓糖吸收、促进物质代谢，抗氧化等调节血糖代谢。进一步的，所述的雷公藤多苷是采用加压溶剂提取法进行提取，超临界反溶剂法进行纯化所制备的；雷公藤多苷主要防止免疫性细胞对胰岛细胞的损伤。本发明的另一个技术方案为提供一种含有利拉鲁肽的复方降糖制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)取螺旋藻藻粉，与灭菌水以1:5的质量比例混合成悬浊液，然后将悬浊液在4℃静置4h后，放于-20～-30℃冰冻3h，在室温下融化后加入质量浓度为45％的硫酸铵溶液盐析，温度为4℃，盐析时间为12～24h；然后离心20～40min，转速为6000rpm/min，收集上清液，然后上清液先用离子交换纤维素层析柱层析，然后用无菌水洗脱2～4次，然后将洗脱液和层析液合并，再用用葡聚糖凝胶柱G-100过滤，用无菌水洗脱2～4次，合并洗脱液和层析液，冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品，备用；(2)按所述配比将黄参多糖、粉防己碱、糖萜素、螺旋藻多糖、门冬氨酸钾镁、非诺贝特、羟苯磺酸钙、度洛西汀、单唾液酸四己糖神经节苷脂、雷公藤多苷、己酮可可碱、依达拉奉、对氨基苯甲酸钠、没食子酸丙酯混合均匀，然后高温灭菌，得混合药粉；(3)向步骤(2)所得的混合药粉中加入相对于混合药粉240～300倍重量的注射用水，然后加入乳化剂和PH调节剂，置于超声分散仪分散处理30～40min，然后加入活性炭煮至沸腾，冷却至室温后后过滤，然后加入利拉鲁肽、混合激酶、丙二醇继续超声分散10～20min，制成所述的复方降糖制剂。进一步的，将所述的复方降糖制剂先后经0.45μm、0.22μm滤膜过滤，充氮保护下灌装封口灌装、密封、检漏、低温冷冻灭菌处理制成注射针剂。更进一步的，所述的乳化剂为泊洛沙姆和甘油单油酸酯的混合物，所述的PH调节剂为磷酸二氢钠、磷酸氢二钠中的一种；乳化剂主要促进表面活性和增溶；PH调节剂主要调节PH，防止溶液PH发生改变。用法用量：4ml/次，每日两次；静脉滴注或肌肉注射，注射前适量稀释。禁忌：孕妇和儿童遵医嘱注射。与现有技术相比，本发明的有益效果体现在：本发明通过纠正代谢紊乱，恢复肾脏代谢功能，恢复胰岛素分泌功能、促进胰岛细胞再生，修复受损胰岛细胞，从而达到降糖的效果；而且能在恢复肾脏代谢功能的同时将血液中超标的糖分进行再吸收利用，其中利拉鲁肽起主要降糖作用，混合激酶主要促进糖氧化，从而加速糖的的吸收利用；门冬氨酸钾镁、血管内皮生长因子促进细胞的分泌，对胰岛素的分泌有促进作用；粉防己碱、黄参多糖、糖萜素、螺旋藻多糖、雷公藤多苷相互结合具有明显清除自由基和抗氧化功能，对胰岛细胞具有保护和修复作用，能增强胰岛细胞的活性，能提高胰岛细胞的存活率；度洛西汀、非诺贝特、羟苯磺酸钙、单唾液酸四己糖神经节苷脂、己酮可可碱、依达拉奉结合降糖药物成分，用于消除糖尿病及糖尿病引起的眼、肾、心、神经、肢体的并发症，可改变口渴喜饮、消谷善饥、屎多便干、倦怠乏力、心悸失眠、腰膝酸软、自汗盗汗、急躁心烦等症状。且疗效显著，稳定，副作用小。具体实施方式实施例1：一种含有利拉鲁肽的复方降糖制剂，按重量组份计，包括以下成分：利拉鲁肽9份、黄参多糖28份、粉防己碱22份、糖萜素16份、螺旋藻多糖12份、混合激酶8份、门冬氨酸钾镁7份、非诺贝特5份、羟苯磺酸钙3份、血管内皮生长因子1份、度洛西汀0.8份、单唾液酸四己糖神经节苷脂0.2份、雷公藤多苷0.1份、己酮可可碱0.09份、依达拉奉0.05份、丙二醇5份、对氨基苯甲酸钠1份、没食子酸丙酯0.01份。其中，所述的混合激酶的成分为己糖激酶、磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶按4:2:1的质量比配制而成的混合物；混合激酶主要促进糖的氧化吸收。其中，所述的螺旋藻多糖的制备方法为：取螺旋藻藻粉，与灭菌水以1:5的质量比例混合成悬浊液，然后将悬浊液在4℃静置4h后，放于-20℃冰冻3h，在室温下融化后加入质量浓度为45％的硫酸铵溶液盐析，温度为4℃，盐析时间为12h；然后离心20min，转速为6000rpm/min，收集上清液，然后上清液先用离子交换纤维素层析柱层析，然后用无菌水洗脱2次，然后将洗脱液和层析液合并，再用用葡聚糖凝胶柱G-100过滤，用无菌水洗脱2次，合并洗脱液和层析液，冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品；螺旋藻多糖可通过多种途径如促进胰岛素分泌、减缓糖吸收、促进物质代谢，抗氧化等调节血糖代谢。其中，所述的雷公藤多苷是采用加压溶剂提取法进行提取，超临界反溶剂法进行纯化所制备的；雷公藤多苷主要防止免疫性细胞对胰岛细胞的损伤。制备一种含有利拉鲁肽的复方降糖注射剂的制备方法，包括以下步骤：(1)取螺旋藻藻粉，与灭菌水以1:5的质量比例混合成悬浊液，然后将悬浊液在4℃静置4h后，放于-20℃冰冻3h，在室温下融化后加入质量浓度为45％的硫酸铵溶液盐析，温度为4℃，盐析时间为12h；然后离心20min，转速为6000rpm/min，收集上清液，然后上清液先用离子交换纤维素层析柱层析，然后用无菌水洗脱2次，然后将洗脱液和层析液合并，再用用葡聚糖凝胶柱G-100过滤，用无菌水洗脱2次，合并洗脱液和层析液，冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品，备用；(2)按所述配比将黄参多糖、粉防己碱、糖萜素、螺旋藻多糖、门冬氨酸钾镁、非诺贝特、羟苯磺酸钙、度洛西汀、单唾液酸四己糖神经节苷脂、雷公藤多苷、己酮可可碱、依达拉奉、对氨基苯甲酸钠、没食子酸丙酯混合均匀，然后高温灭菌，得混合药粉；(3)向步骤(2)所得的混合药粉中加入相对于混合药粉240倍重量的注射用水，然后加入乳化剂和PH调节剂，置于超声分散仪分散处理30min，然后加入活性炭煮至沸腾，冷却至室温后后过滤，然后加入利拉鲁肽、混合激酶、丙二醇继续超声分散10min，然后先后经0.45μm、0.22μm滤膜过滤，充氮保护下灌装封口灌装、密封、检漏、低温冷冻灭菌处理制成注射针剂，每支灌装4ml。更进一步的，所述的乳化剂为泊洛沙姆和甘油单油酸酯的混合物，所述的PH调节剂为磷酸二氢钠；乳化剂主要促进表面活性和增溶；PH调节剂主要调节PH，防止溶液PH发生改变。用法用量：4ml/次，每日两次；静脉滴注或肌肉注射，注射前适量稀释。禁忌：孕妇和儿童遵医嘱注射。实施例2：一种含有利拉鲁肽的复方降糖制剂，按重量组份计，包括以下成分：利拉鲁肽13份、黄参多糖34.5份、粉防己碱29.5份、糖萜素19.5份、螺旋藻多糖13.5份、混合激酶9.5份、门冬氨酸钾镁8份、非诺贝特7份、羟苯磺酸钙4份、血管内皮生长因子2.5份、度洛西汀1份、单唾液酸四己糖神经节苷脂0.3份、雷公藤多苷0.3份、己酮可可碱0.105份、依达拉奉0.065份、丙二醇8.5份、对氨基苯甲酸钠1.5份、没食子酸丙酯0.025份。其中，所述的混合激酶的成分为己糖激酶、磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶按4:2:1的质量比配制而成的混合物；混合激酶主要促进糖的氧化吸收。其中，所述的螺旋藻多糖的制备方法为：取螺旋藻藻粉，与灭菌水以1:5的质量比例混合成悬浊液，然后将悬浊液在4℃静置4h后，放于-25℃冰冻3h，在室温下融化后加入质量浓度为45％的硫酸铵溶液盐析，温度为4℃，盐析时间为18h；然后离心30min，转速为6000rpm/min，收集上清液，然后上清液先用离子交换纤维素层析柱层析，然后用无菌水洗脱3次，然后将洗脱液和层析液合并，再用用葡聚糖凝胶柱G-100过滤，用无菌水洗脱3次，合并洗脱液和层析液，冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品；螺旋藻多糖可通过多种途径如促进胰岛素分泌、减缓糖吸收、促进物质代谢，抗氧化等调节血糖代谢。其中，所述的雷公藤多苷是采用加压溶剂提取法进行提取，超临界反溶剂法进行纯化所制备的；雷公藤多苷主要防止免疫性细胞对胰岛细胞的损伤。制备一种含有利拉鲁肽的复方降糖注射剂的制备方法，包括以下步骤：(1)取螺旋藻藻粉，与灭菌水以1:5的质量比例混合成悬浊液，然后将悬浊液在4℃静置4h后，放于-25℃冰冻3h，在室温下融化后加入质量浓度为45％的硫酸铵溶液盐析，温度为4℃，盐析时间为18h；然后离心30min，转速为6000rpm/min，收集上清液，然后上清液先用离子交换纤维素层析柱层析，然后用无菌水洗脱3次，然后将洗脱液和层析液合并，再用用葡聚糖凝胶柱G-100过滤，用无菌水洗脱3次，合并洗脱液和层析液，冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品，备用；(2)按所述配比将黄参多糖、粉防己碱、糖萜素、螺旋藻多糖、门冬氨酸钾镁、非诺贝特、羟苯磺酸钙、度洛西汀、单唾液酸四己糖神经节苷脂、雷公藤多苷、己酮可可碱、依达拉奉、对氨基苯甲酸钠、没食子酸丙酯混合均匀，然后高温灭菌，得混合药粉；(3)向步骤(2)所得的混合药粉中加入相对于混合药粉270倍重量的注射用水，然后加入乳化剂和PH调节剂，置于超声分散仪分散处理35min，然后加入活性炭煮至沸腾，冷却至室温后后过滤，然后加入利拉鲁肽、混合激酶、丙二醇继续超声分散15min，然后先后经0.45μm、0.22μm滤膜过滤，充氮保护下灌装封口灌装、密封、检漏、低温冷冻灭菌处理制成注射针剂，每支灌装4ml。更进一步的，所述的乳化剂为泊洛沙姆和甘油单油酸酯的混合物，所述的PH调节剂为磷酸二氢钠；乳化剂主要促进表面活性和增溶；PH调节剂主要调节PH，防止溶液PH发生改变。用法用量：4ml/次，每日两次；静脉滴注或肌肉注射，注射前适量稀释。禁忌：孕妇和儿童遵医嘱注射。实施例3：一种含有利拉鲁肽的复方降糖制剂，按重量组份计，包括以下成分：利拉鲁肽17份、黄参多糖41份、粉防己碱37份、糖萜素23份、螺旋藻多糖15份、混合激酶11份、门冬氨酸钾镁9份、非诺贝特9份、羟苯磺酸钙5份、血管内皮生长因子4份、度洛西汀1.2份、单唾液酸四己糖神经节苷脂0.4份、雷公藤多苷0.5份、己酮可可碱0.12份、依达拉奉0.08份、丙二醇12份、对氨基苯甲酸钠2份、没食子酸丙酯0.04份。其中，所述的混合激酶的成分为己糖激酶、磷酸果糖激酶-1、丙酮酸激酶按4:2:1的质量比配制而成的混合物；混合激酶主要促进糖的氧化吸收。其中，所述的螺旋藻多糖的制备方法为：取螺旋藻藻粉，与灭菌水以1:5的质量比例混合成悬浊液，然后将悬浊液在4℃静置4h后，放于-30℃冰冻3h，在室温下融化后加入质量浓度为45％的硫酸铵溶液盐析，温度为4℃，盐析时间为24h；然后离心40min，转速为6000rpm/min，收集上清液，然后上清液先用离子交换纤维素层析柱层析，然后用无菌水洗脱4次，然后将洗脱液和层析液合并，再用用葡聚糖凝胶柱G-100过滤，用无菌水洗脱4次，合并洗脱液和层析液，冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品；螺旋藻多糖可通过多种途径如促进胰岛素分泌、减缓糖吸收、促进物质代谢，抗氧化等调节血糖代谢。其中，所述的雷公藤多苷是采用加压溶剂提取法进行提取，超临界反溶剂法进行纯化所制备的；雷公藤多苷主要防止免疫性细胞对胰岛细胞的损伤。制备一种含有利拉鲁肽的复方降糖注射剂的制备方法，包括以下步骤：(1)取螺旋藻藻粉，与灭菌水以1:5的质量比例混合成悬浊液，然后将悬浊液在4℃静置4h后，放于-30℃冰冻3h，在室温下融化后加入质量浓度为45％的硫酸铵溶液盐析，温度为4℃，盐析时间为24h；然后离心40min，转速为6000rpm/min，收集上清液，然后上清液先用离子交换纤维素层析柱层析，然后用无菌水洗脱4次，然后将洗脱液和层析液合并，再用用葡聚糖凝胶柱G-100过滤，用无菌水洗脱4次，合并洗脱液和层析液，冷冻干燥后，制备成纯螺旋藻多糖成品，备用；(2)按所述配比将黄参多糖、粉防己碱、糖萜素、螺旋藻多糖、门冬氨酸钾镁、非诺贝特、羟苯磺酸钙、度洛西汀、单唾液酸四己糖神经节苷脂、雷公藤多苷、己酮可可碱、依达拉奉、对氨基苯甲酸钠、没食子酸丙酯混合均匀，然后高温灭菌，得混合药粉；(3)向步骤(2)所得的混合药粉中加入相对于混合药粉300倍重量的注射用水，然后加入乳化剂和PH调节剂，置于超声分散仪分散处理40min，然后加入活性炭煮至沸腾，冷却至室温后后过滤，然后加入利拉鲁肽、混合激酶、丙二醇继续超声分散20min，然后先后经0.45μm、0.22μm滤膜过滤，充氮保护下灌装封口灌装、密封、检漏、低温冷冻灭菌处理制成注射针剂，每支灌装4ml。更进一步的，所述的乳化剂为泊洛沙姆和甘油单油酸酯的混合物，所述的PH调节剂为磷酸氢二钠；乳化剂主要促进表面活性和增溶；PH调节剂主要调节PH，防止溶液PH发生改变。用法用量：4ml/次，每日两次；静脉滴注或肌肉注射，注射前适量稀释。禁忌：孕妇和儿童遵医嘱注射。本发明的复方降糖制剂在糖尿病中的应用：一、动物试验验证：1.对象选取：取ZDF大鼠，体重在200～260g，给药前监测空腹血糖，选择150只达到符合糖尿病血糖标准的大鼠随机分为5组，分别为空白组、对照组、实验组；其中实验组有三组，分别记为1组、2组、3组。试验期间记录各组大鼠的体重，饮食量、饮水量、尿量及空腹血糖。2.试验方法：给空白组大鼠每天注射等量生理盐水，对照组大鼠注射市场上治疗糖尿病的药，实验组分别注射本发明实施例1、实施例2和实施例3制备的注射剂，连续20天，观察记录大鼠的体重，饮食量、饮水量、尿量及空腹血糖情况。3.试验数据统计及结果：3.1试验结束后，各组大鼠的体重、饮食量、饮水量、尿量变化平均值如下表：组别病例数/只体重/g饮食量/g饮水量/ml尿量/ml空白组30-30+25+40+50对照组30+5-5-6-81组30+12-1-3-62组30+15-0.5-1-23组30+14-1-1-1其中：+表示比试验前增加，-表示比试验前减少。3.2各组大鼠的血糖变化如下表：组别病例数/只正常/只高血糖/只超高血糖/只空白组300255对照组3021631组3025322组3028113组302622其中判断标准为：正常指标为空腹3.5～7.0mmol/L，高血糖指标为空腹7.0～10.0mmol/L，超高血糖指标为空腹10.0mmol/L。3.3试验结束后，各组小鼠未见毒副反应。4.结论：通过以上试验可以证明，本发明制备的一种含有利拉鲁肽的复方降糖制剂有很好的降低血糖的作用，而且安全副作用小。二、临床治疗验证1.病例：收集某医院收取的糖尿病患者90例，无年龄性别区分，平均分为3组，每组30人。2.治疗方法：三组患者分别注射本发明实施例1～3的注射剂，连续注射20天，每天2次。3.治疗结果及疗效标准：组别病例数/人正常/人高血糖/人超高血糖/人有效率/％实施例130273090实施例230291096.7实施例330282093.3其中：显效：患者血糖恢复正常，控制饮食和生活习惯，未再复发；空腹血糖3.9-6.1mmol/L，餐后2小时为3.9-7.8mmol/L。有效：患者血糖恢复正常、临床症状有明显改善；无效：患者血糖并未下降，临床症状也无改善或有加重趋势。4.结论：由以上临床治疗可以看出，本发明制备的含有利拉鲁肽的复方降糖制剂具有很好的降糖效果，而且有效率达90％，安全无副作用典型病例病例1：丁女士，38岁，患者自诉倦怠乏力、口渴喜饮、夜间尿多，生活甚是痛苦，一直注射胰岛素，患者身体消瘦，而且还有逐渐减轻的趋势，而且患者经查有糖尿病足、糖尿病视网膜炎等多种并发症，后注射本发明实施例1的注射剂，血糖有明显的改善，患者仍在继续注射，患者体重不断增加，并发症也逐渐好转，电话随访患者表示以后会继续坚持注射。病例2：孙先生，59岁，患糖尿病10余年。常口服各种降糖药控制血糖，近年来血糖控制不理想，常在8～10mmol/L之间波动，感觉口渴、流虚汗、尿多、疲乏无力、夜晚睡觉不踏实，而且还患有高血压、高血脂等并发症，使用本发明实施例2制备的注射剂7天后，症状有所缓解，疲劳感减轻，夜晚睡觉踏实了，检查发现血糖稳定在7.0-8.0mmol/L，继续注射半个月后，血糖基本能稳定在6.5-7.5mmol/L，连续注射2个月后复查血糖正常，其他症状完全消失，高血压、高血脂的情况也有所好转，患者表示会坚持注射。病例3：牛女士，50岁，自从2012年10月检查患有糖尿病后采用甘精胰岛素治疗，不能忍受反复注射的痛苦，血糖反复升高，很是痛苦，后在朋友的劝导下注射本发明的实施例3的注射剂，在持续注射了1周后，血糖明显降低，在注射3周后，病情减轻，血糖恢复正常，患者精神恢复良好，一年后回访，患者称坚持注射本发明的注射剂后血糖未见升高，而且身体日渐良好。最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围。当前第1页1 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