一种荧光碳颗粒的生物酶切法制备方法与流程

文档序号:11090908阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种荧光碳颗粒的制备方法,其特征在于模拟黑冰片碳颗粒在人体内的消化过程并制备荧光碳颗粒,其包括如下步骤:①黑冰片的炮制;②生物酶切法制备荧光颗粒,具体为:

①黑冰片的炮制:称取1公斤净制的野猪成型干燥粪,置瓷碗中加盖,中间缝隙用盐水泥密封(水盐比5∶1),晾干后置于马弗炉内,于500℃煅烧2小时,取出放凉,利用研磨器研磨后过200目的筛子,称重保存干燥处备用。

②生物酶切法制备荧光颗粒:

(1)模拟人胃、肠液的配制:A、胃液的配制:0.2g NaCl,0.32g胃蛋白酶,0.7ml浓盐酸,双蒸馏水定容于100ml。pH约为1.2。B、模拟肠液的配制:将0.68g KH2PO4溶于25ml双蒸水,振荡,完全溶解后加19ml0.2mol/LNaOH和40ml的双蒸水。加胰蛋白酶1.0g,混匀,用0.2mol/L NaOH调pH到7.5±0.1,双蒸水定容于100ml。

(2)黑冰片荧光颗粒的制备:

首先,将1g黑冰片碳粉投入到在预先加入模拟人胃液的圆底烧瓶中,置于油浴锅中37℃、磁力搅拌回流12h。反应完后,离心分离除去未反应物,取上面黄色上清液,转入到透析袋在超纯水中透析2~3天(期间不断换水),直到pH值接近中性。透析处理后的黄色液体再逐级离心分离提纯,最后以16000转/秒离心30min后提取上清液4℃保存。其次,将胃液消化离心沉淀的黑冰片碳颗粒回收,并倒入适量超纯水轻轻混匀然后16000转/秒离心10min,以上方法重复两次,最后把沉淀物溶于肠液置于油浴锅中37℃、磁力搅拌回流12h,反应完后,离心分离除去未反应物,取上面黄色上清液,转入到透析袋在超纯水中透析2~3天(期间不断换水),直到pH值接近中性。最后以16000转/秒离心30min后提取上清液4℃保存。最后,两次提取的黄色上清液混合后经旋转蒸发浓缩至25mL左右,接着把浓缩的液体放入微波炉以50Hz微波5min后放入冷冻干燥机干燥,然后加入适量超纯水到干燥碳颗粒里,超声1min后回收,得到碳颗粒溶液,可通过冷冻干燥获得在荧光碳颗粒。

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