本发明涉及一种柿叶总黄酮的制备方法。
背景技术：
黄酮类化合物是一类广泛存在于植物中的天然产物，由于其具有抑菌消炎、抗氧化口、预防心血管疾病和抗肿瘤H1等功效，近年来受到人们的极大关注。柿叶为柿树科(Ebenaceae)柿属(Diospyros)植物柿(Diospyros kaki L．f)的新鲜或干燥叶片，味苦：性寒、无毒，其主要有效成分是黄酮类化合物。已有研究表明柿叶总黄酮具有多种药理和I临床作用，因而成为一类极具开发前景的天然植物药用资源。
近年来，随着环境污染日趋严重，人类对各类化学药物的使用大幅增加，与肝脏有关的疾病呈不断上升趋势。各种肝脏疾病，诸如A或B型肝炎、中毒性肝炎、肝囊肿、肝血管瘤、肝纤维化和肝硬化等已严重威胁人类健康，因而肝损伤保护研究成为天然药物研究的热点之一。
技术实现要素：
本发明提出一种柿叶总黄酮的制备方法。
1、一种柿叶总黄酮的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）取柿叶，清洗阴干后粉碎，用245目粒径过筛，备用；
（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液备用；
（3）联苯双酯滴丸配制成质量浓度为10mg／mL联苯双酯水溶液备用；
（4）称取柿叶粉10g，置于平底烧瓶，加入石油醚浸泡脱脂和除去叶绿素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加热于20-105℃条件下提取50-150min，抽滤，定容；
（5）将提取液上聚酰胺型大孔树脂柱吸附，用蒸馏水淋洗至洗脱液无色后，用100 mL浓度为70％的乙醇解吸，收集流出液，浓缩蒸干，85-150℃干燥，得初步纯化的柿叶总黄酮。
如权利要求1所述一种柿叶总黄酮的制备方法，其特征在于：所述水浴温度为85℃。
如权利要求1所述一种柿叶总黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）加热时间为70分钟。
如权利要求1所述一种柿叶总黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）加热时间为90分钟。
如权利要求1所述一种柿叶总黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤（5）干燥时间为105℃。
本发明所述方法制备的柿叶总黄酮，纯化后柿叶提取物中总黄酮含量达72．5％。
具体实施方式
实施例1。
一种柿叶总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
（1）取柿叶，清洗阴干后粉碎，用245目粒径过筛，备用；
（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液备用；
（3）联苯双酯滴丸配制成质量浓度为10mg／mL联苯双酯水溶液备用；
（4）称取柿叶粉10g，置于平底烧瓶，加入石油醚浸泡脱脂和除去叶绿素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加热于20-105℃条件下提取50-150min，抽滤，定容；
（5）将提取液上聚酰胺型大孔树脂柱吸附，用蒸馏水淋洗至洗脱液无色后，用100 mL浓度为70％的乙醇解吸，收集流出液，浓缩蒸干，85-150℃干燥，得初步纯化的柿叶总黄酮。
实施例2。
一种柿叶总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
（1）取柿叶，清洗阴干后粉碎，用245目粒径过筛，备用；
（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液备用；
（3）联苯双酯滴丸配制成质量浓度为10mg／mL联苯双酯水溶液备用；
（4）称取柿叶粉10g，置于平底烧瓶，加入石油醚浸泡脱脂和除去叶绿素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加热于20-105℃条件下提取50-150min，抽滤，定容；
（5）将提取液上聚酰胺型大孔树脂柱吸附，用蒸馏水淋洗至洗脱液无色后，用100 mL浓度为70％的乙醇解吸，收集流出液，浓缩蒸干，85-150℃干燥，得初步纯化的柿叶总黄酮；
（6）所述水浴温度为85℃。
实施例3。
一种柿叶总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
（1）取柿叶，清洗阴干后粉碎，用245目粒径过筛，备用；
（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液备用；
（3）联苯双酯滴丸配制成质量浓度为10mg／mL联苯双酯水溶液备用；
（4）称取柿叶粉10g，置于平底烧瓶，加入石油醚浸泡脱脂和除去叶绿素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加热于20-105℃条件下提取50-150min，抽滤，定容；
（5）将提取液上聚酰胺型大孔树脂柱吸附，用蒸馏水淋洗至洗脱液无色后，用100 mL浓度为70％的乙醇解吸，收集流出液，浓缩蒸干，85-150℃干燥，得初步纯化的柿叶总黄酮；
（6）所述水浴温度为85℃；
（7）所述步骤（4）加热时间为70分钟。
实施例4。
一种柿叶总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
（1）取柿叶，清洗阴干后粉碎，用245目粒径过筛，备用；
（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液备用；
（3）联苯双酯滴丸配制成质量浓度为10mg／mL联苯双酯水溶液备用；
（4）称取柿叶粉10g，置于平底烧瓶，加入石油醚浸泡脱脂和除去叶绿素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加热于20-105℃条件下提取50-150min，抽滤，定容；
（5）将提取液上聚酰胺型大孔树脂柱吸附，用蒸馏水淋洗至洗脱液无色后，用100 mL浓度为70％的乙醇解吸，收集流出液，浓缩蒸干，85-150℃干燥，得初步纯化的柿叶总黄酮；
（6）所述水浴温度为85℃；
（7）所述步骤（4）加热时间为90分钟。
实施例5。
一种柿叶总黄酮的制备方法，包括以下步骤：
（1）取柿叶，清洗阴干后粉碎，用245目粒径过筛，备用；
（2）四氯化碳(AR)，用植物油配成0．2％的溶液备用；
（3）联苯双酯滴丸配制成质量浓度为10mg／mL联苯双酯水溶液备用；
（4）称取柿叶粉10g，置于平底烧瓶，加入石油醚浸泡脱脂和除去叶绿素，然后加入75％乙醇100mL，水浴加热于20-105℃条件下提取50-150min，抽滤，定容；
（5）将提取液上聚酰胺型大孔树脂柱吸附，用蒸馏水淋洗至洗脱液无色后，用100 mL浓度为70％的乙醇解吸，收集流出液，浓缩蒸干，85-150℃干燥，得初步纯化的柿叶总黄酮；
（6）所述水浴温度为85℃；
（7）所述步骤（4）加热时间为70分钟；
（8）所述步骤（5）干燥时间为105℃。