甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药在制备治疗和/或预防肺部疾病的药物中的应用的制作方法

本发明涉及甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药的一种新用途，具体涉及一种甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药在制备治疗和/或预防肺部疾病的药物中的应用。

背景技术：

生存环境中空气中的微生物居群、室内和室外空气污染、包括抽烟，均可直接导致肺病易感人群肺组织损伤，引起病变，可引起炎症、急性肺损伤、肺纤维化、肺癌等多种疾病。更令人关注的是，随着我国经济突飞猛进的发展，环境污染日益严重，特别是当前的雾霾形势严峻。如此恶劣的空气环境势必威胁广大民众的肺脏，呼吸道病人将急剧增加。据预警，五到六年后将是肺部疾病高发期，预计将持续二十年，这将带来极大的社会问题。

目前，大部分治疗肺部疾病的药物通过全身体循环给与，通过口服或者皮下注射，但这些治疗效果有限，严重副作用显著(包括免疫抑制、后续感染、急性加重期疾病和大量出血)，还存在轻微副作用(包括胃肠并发症，比如腹泻和恶心)，这些副作用严重影响了病人的生活质量。因此，有必要提供一种新的治疗肺部疾病的药物。

激素衍生物是在多种基本代谢转化中扮演重要生物角色的一类化合物。在所述化合物中，甲状腺激素例如甲状腺素((s)-2-氨基-3-[4-(4-羟基-3,5-二碘苯氧基)-3,5-二碘苯基]丙酸，经常简写为t4)，和三碘甲状腺原氨酸(简写为t3)，代表重要的关键分子，涉及在体内控制多种代谢过程的速率。甲状腺激素被广泛用于涉及甲状腺障碍的数种病变的治疗。然而，迄今为止尚未见有关甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药用于治疗和/或预防肺部疾病的报道。

技术实现要素：

为解决上述问题，本发明提供了一种甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药的新用途，即在制备治疗和/或预防肺部疾病的药物中的应用。

本发明第一方面提供了甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药在制备治疗和/或预防肺部疾病的药物中的应用。

其中，所述肺部疾病包括急性肺损伤、肺纤维化、气管炎或肺癌。

其中，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药包括甲状腺激素t3和/或t4及其药学上可接受的盐或前药。

其中，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药作为单一活性成分或与其他药学上可接受的活性成分构成组合物以制备所述药物。

其中，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药与药学上可接受的载体构成组合物以制备所述药物。

其中，所述药物与其他活性药剂联合使用，所述其他活性药剂包括吡非尼酮和尼达尼布中的至少一种。

其中，所述药物的给药方式包括局部给药、消化道给药或非消化道给药。

其中，所述药物的给药方式包括雾化吸入。

其中，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药的用量为每天0.1-1000微克/公斤体重。

本发明第一方面提供了一种甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药的新用途，甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药可以有效地保护肺泡上皮细胞，调节肺泡上皮细胞表面蛋白合成、储存和分布，促进肺泡上皮细胞成熟、分化和细胞完整性，有利于肺内积液的清除，促进肺泡上皮细胞内受损线粒体恢复，增强线粒体生物合成，从而有利于受损肺组织修复，阻止和逆转肺纤维化，调节免疫反应，改变癌化环境，达到防治肺部疾病、改善气体交换等肺功能，达到治疗效果。

本发明第二方面提供了一种试剂盒，包括说明书和如上述第一方面所述的药物。

附图说明

图1为使用microarray平台所做的基因表达分析图；

图2为经定量实时pcr分析dio2mrna表达水平图；

图3为dio2蛋白表达通过免疫印记的灰度分析图(a)和定量分析图(b)；

图4为dio2酶切活性在特发性肺纤维化病人(ipf表示)和正常以及肺肿瘤组织(ctrl表示)的比较图；

图5为代表性的正常肺部组织(c)和代表性的特发性肺纤维化病人肺部组织(d和e)免疫组化图片；

图6为dio2基因敲除对羟脯氨酸含量影响的直方图(a)和对应的梅森三色(masson)染色组化分析图(b)；

图7为抑制甲状腺素对羟脯氨酸含量影响的直方图(c)和对应的梅森三色染色(masson)组化分析图(d)；

图8为小鼠给与博来霉素后第3天腹腔注射t4的羟脯氨酸含量直方图(a)和胶原蛋白基因表达分析图(b)；

图9为小鼠给与博来霉素后第7天腹腔注射t4的羟脯氨酸含量直方图(c)和胶原蛋白基因表达分析图(d)；

图10为全身给与t4后血清中t3含量变化图(e)和t3在血清含量和羟脯氨酸在小鼠肺中含量的相对关系直方图(f)；

图11为腹腔注射t4后肺部组织的梅森三色染色组化分析图；

图12为博来霉素诱导后不同药物治疗后肺组织梅森三色染色组化分析图(a、b、c、d、e)和不同处理条件下羟脯氨酸的含量直方图(f)；

图13为不同处理条件下对小鼠成活率的影响；

图14为血清中t3含量变化图；

图15为t3处理对肺泡积液清除的影响图；

图16为肺洗液中蛋白含量变化图(c、e)和肺洗液中炎症细胞数量变化图(d、f)；

图17为雾化吸入甲状腺激素对肺功能影响图。

具体实施方式

以下所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

除非特殊声明，所有本文中的技术性和科学名词在该发明中和普遍使用的含义相同。尽管有些方法和材料的叙述可以用于本发明的描述。

本文中，“一”用于指一个或多于一个(比如至少一个)。举例说明，“一种成分”的含义是一种成分或多于一种成分。

本文中，测量值表达方法，比如数量，持续时间，而类似是指包括±20％或±10％的变量，或者更为精确的±5％或者±1％，更精确能在某些特定数值达到±0.1％，这些变量更适合文章所描述的方法。

疾病或者紊乱“减轻”指的是患者该问题症状的严重程度，发病频率有所下降，或两者都有。

“共同给与”一方面的含义是同时给与实验者试验药物或者盐水对照(参照组)跟另外一种药物一起治疗，本文中，共同给与实际操作时候是分开给药的，只是在该治疗中药物为联合使用。共同给与的药物可以是各种形态或混合物，比如固体、液体、凝胶或者溶液。

本文中，“组合”或者“药物组合”指的是本发明中所使用的一种以上药物的混合，使用药物学上可接受的载体。药物组合帮助药物更容易到达病人或实验动物病灶。条款中描述多种技术包括，并不局限于，静脉给药、口服、气雾吸入、肠胃外、眼部、鼻腔、肺部和局部给药。

本文中，“dio2”指的是二型碘甲腺氨酸脱碘酶，碘甲腺原氨酸5'-脱碘酶或碘甲腺原氨酸5'-单脱碘酶。dio2脱去甲状腺素前体激素(t4)激活甲状腺素外环上的碘而生成具有生物活性的3,3’,5-三碘甲状腺原氨酸(t3)。

本文中“疾病”指的是实验动物的健康状态不能维持稳态，所以在本文中疾病不改善，动物的健康状态持续恶化。

本文中“紊乱”指的是实验动物的健康状态能够维持稳态，但是如果实验动物的健康状态比没有“紊乱”的动物要差。如果不予以治疗，“紊乱”并不一定会导致实验动物发展成疾病状态。

本文中“有效剂量”，“药物学有效剂量”和“治疗有效剂量”指非毒理性但足够剂量能够引起所需的生物学结果。这些结果包括减少或减轻疾病的特征，症状，疾病的原因，或者其它生物学系统的良好方向发展。针对个体合适的治疗剂量可根据常规实验数据正常范围得出。

本文中，“纤维性肺部疾病”或者“肺纤维化”或者“肺疤痕”指的是特征为在肺部形成或逐渐发展成过多纤维结缔组织(纤维化)的一组疾病。肺纤维化的症状主要有：呼吸局促，特别是用力时；长期干咳；乏力和虚弱；胸腔不适；还有食欲下降和快速体重减轻。肺纤维化可能是其它疾病导致的，大多数情况被归类为间质性肺病，比如自身免疫疾病，病毒感染或者肺部的微观损伤。肺纤维化的发生可以没有已知原因(“特发性”)。特发性肺纤维化的诊断是排除一系列常规间质性肺炎的组织学/病理学特征。

能导致肺纤维化的疾病和情况包括：吸入环境和职业中等污染物(石棉肺，硅肺和气体暴露)；超敏性肺炎，大多数情况是吸入尘埃中含有细菌，真菌或者动物产品；吸烟；结缔组织疾病比如风湿性关节炎，系统性红斑狼疮(sle)；药物导致比如胺碘酮，博来霉素(平阳霉素)，白消安，甲氨蝶呤，阿扑吗啡和呋喃妥因；以及胸腔的放疗。

本文中“病人”，“实验对象”，“个体”可以相互转化使用，对于实验动物和实验细胞而言也是如此，体内和体外都一样。在没有限制的实施例中，病人，实验对象和个体指的是人。

本文中，“药物学可接受的”指的是一种材料，比如载体或者稀释剂，他们本身不影响药物的生物学活性，而且相对是无毒的，比如该材料可以注入个体体内而不会引起不好的生物学反应或和其携带的药物发生严重的反应。

本文中，“药物学可接受的载体”指的是药学上可接受的材料，组和或者载体，比如液体，固体填料，稳定剂，分散剂，悬浮剂，稀释剂，赋形剂，增稠剂，溶剂或包封材料，他们的作用是运输本发明中的有效成分，使其在患者体能发挥应有的作用。一般而言，运输是从一个器官，或者身体的某一部分到达另外一个器官或者身体的另外一个部分。每一个载体必须和各个配方成分相兼容，包括发明中的有效成分，使其对患者不产生负面影响。这些材料在药物学上可接受的载体包括：糖类，比如乳糖，葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素，以及其药学上可接受的盐或前药，比如羧甲基纤维素钠，乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；油，例如花生油，棉籽油，红花油，芝麻油，橄榄油，玉米油和大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油，山梨醇，甘露醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；表面活性剂；藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；以及其它无毒在药物学上配方相容物质。

本文中，“药物学上可接受的载体”也包括所有的表面涂料，抗菌和抗真菌制剂，吸收延迟剂，和与本发明中有用的化合物的活性相容的类似物，这些在生理学上能被病人所接受。

补充的活性化合物也可以掺入有效成分组合中。

“药物学上可接受的载体”也可以进一步包括发明中在药物学上可接受的有效盐成分。其它成分也包括制药学上的成分组成，在条例中描述和使用的该项发明，比如在remington制药学科学((genaro,ed.,mackpublishingco.,1985,easton,pa),在此引用作为参考。

本文中，词语“药物学上可接受的盐”指的是由药物学上可接受的无毒酸制备的化合物的盐，可给与病人，包括无机酸，有机酸，溶剂化物，水合物或笼形物。

本文中，“预防”含义为在给与了药物后未发病的实验者能避免或者延迟和疾病或状况相关的症状发生。

本文中，“t3”指的是(s)-三碘甲状腺原氨酸，碘甲腺氨酸，(s)-2-氨基-3-[4-(4-羟基-3-碘苯氧基)-3,5-二碘苯基]丙酸或其盐或溶剂合物。具体地，t3的化学式如下式(ⅰ)所示。

本文中，“t4”(s)-甲状腺素，(s)-2-氨基-3-[4-(4-羟基-3,5-二碘苯氧基)-3,5-二碘苯基]丙酸或其盐或溶剂合物。具体地，t4的化学式如下式(ⅱ)所示。

“治疗上的”指的是对于已经显现出了病变特征的实验个体进行的治疗，为了达到减轻或者消除症状的目的。

本文中“治疗”或者“治疗过程”定义为使用治疗上的药物，比如本发明中的化合物(单独使用或者跟其它药物联合使用)，用在病人，或者用在病人身体提取分离的组织或者细胞系(比如为了诊断和体外培养)。该病人其具有本文考虑的病症，病症的症状或能发展成本文考虑的病症的可能性，为了治愈，治疗，减轻，改变，减弱，提高或者影响本文考虑的病症和或者发展出该病症状的可能性。这些治疗可以根据不同药物基因组学的最新知识在适当情况下量体裁衣。

贯穿于本公开文件，本发明的各个方面可以以一定范围的格式呈现。值得注意的是，范围格式中的描述仅为了方便和简洁，并不是本发明应用范围不灵活的限制。相应的，范围描述应被认为已经详细公开了全部可能的子范围和范围内的单个数值。例如，诸如1至6的范围的描述应当被认为已经具体公开了子范围，例如1至3，1至4，1至5，2至4，2至6，从3到6等，以及在该范围内的单个数字，例如1,2,2.7,3,4,5,5.1,5.3,5.5和6。这适用于该范围的宽度。

本发明实施方式第一方面提供了一种甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药在制备治疗和/或预防肺疾病的药物中的应用。

本发明实施方式中，所述肺疾病包括急性肺损伤、肺纤维化、气管炎或肺癌。

本发明实施方式中，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药包括甲状腺激素t3和/或t4及其药学上可接受的盐或前药。可选地，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药包括甲状腺激素t3和/或t4的钠盐。具体地，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药包括甲状腺素钠。

本发明实施方式中，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药作为单一活性成分或与其他药学上可接受的活性成分构成组合物以制备所述药物。

本发明实施方式中，所述甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药可与药物学上可接受的载体构成组合物以制备所述药物。在一个实施例中，本发明的药物组成使用包括本发明中药物的有效治疗剂量和一个药学上的合理载体。载体可以是含有例如水，乙醇，多元醇(例如甘油，丙二醇和液体聚乙二醇等)，其合适的混合物和植物油的溶剂或分散介质。可通过使用如卵磷脂包裹，通过在分散体的情况下维持所需的粒度和通过使用表面活性剂来保持适当的流动性。防止微生物的作用可以通过各种抗菌剂和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯，氯丁醇，苯酚，抗坏血酸，硫柳汞等实现。在许多情况下，优选在组合物中包含等渗物质，例如糖，氯化钠或多元醇如甘露醇和山梨醇。

在一个实施例中，本发明的药物直接和药物学组成包装在了一起，包括一个含有治疗有效剂量药物的容器，单独使用或者和另外一个药物学物质共同使用；本发明在的说明描述了用药物治疗，预防或者减轻疾病或紊乱的症状的使用方法。

制剂可以与常规赋形剂，即适合于本领域已知的任何合适的给药方式的药物学上合适的有机或无机载体物质的混合物使用。药物学准备工作可无菌处理，如果需要可与辅助剂混合，例如润滑剂，防腐剂，稳定剂，润湿剂，乳化剂，影响渗透压缓冲剂的盐，着色剂，调味剂和/或芳香物质等。也可以根据需要与其它活性成分组合使用，例如止痛剂。

本发明实施方式中，本发明中的药物联合至少一种其它药物对于治疗和预防纤维性肺病效果更好。其它药物可能是发明中所包含的，或者比如可以买到的，已知的可以预防或减轻纤维性肺病症状的药物。所述药物与其他活性药剂联合使用，所述其他活性药剂包括吡非尼酮(5-甲基-1-苯基吡啶-2-酮或其盐或溶剂化物，pirfenidone)和尼达尼布(3z)-3-{[(4-{甲基[(4-甲基哌嗪-1-基)乙酰基]氨基}苯基)氨基](苯基)亚甲基}-2-氧代-2,3-二氢-1h-吲哚-6-羧酸甲酯，或其盐或溶剂合物，nintedanib)中的至少一种。

协调效用可以根据以下方法计算得出，sigmoid-emax公式(holford&scheiner,19981,clin.pharmacokinet.6:429-453),loewe加性公式(loewe&muischnek,1926,arch.exp.patholpharmacol.114:313-326)和中位数效应公式(chou&talalay,1984,adv.enzymeregul.22:27-55).以上公式都可根据实验数据生成相应的图表，来评估联合用药的效果。每一个和公式相关的相应图表分别为浓度效果曲线，等值线曲线和组合指数曲线。

本发明实施方式中，所述药物还可以与其他方式进行联合治疗，如本发明药物的施用可与吸氧相结合。

本发明实施方式中，所述药物的给药方式包括局部给药、消化道给药或非消化道给药。局部给药是指直接用药于要影响的身体部位，包括：表皮给药，吸入给药，灌肠给药，眼部给药，鼻腔给药。消化道给药，包括口服、肛门给药。非消化道给药包括经动脉注射、静脉注射、肌肉注射、心内注射、皮下注射、骨髓腔内注射、皮内注射、颅内植入或透皮给药。可选地，所述药物的给药方式包括口服、注射或雾化吸入。具体地，以上药物给与方式包括雾化吸入气管内、肺内和支气管内。

甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药通过吸入器直接进入肺部。这一方法有利于甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药直接进入肺部及特定损伤部位或区域，使得治疗效果最大化并让全身给药的潜在副作用最小化。

合适的组成和给与药物形式包括例如分散体，悬浮液，溶液，糖浆，颗粒，珠，粉末，丸剂，用于鼻或口服的液体喷雾剂，用于吸入的干粉或气雾化制剂等。值得注意的是应用于本发明的制药方式和组成并不局限于本文中描述某种特定的方法和组成。

本发明的药物制剂的粉末和颗粒制剂可以使用已知的方法准备。这样的制剂可以直接给与于实验对象，用于例如该材料适合某一实验对象。每一种制剂中还可以包含一种或多种分散剂或润湿剂，悬浮剂和防腐剂。制剂成分还可以包括另外的赋形剂，例如填充剂和甜味剂，调味剂或着色剂。

本发明的药物组合可以通过口腔以适于肺部给药的制剂准备，包装或销售。制剂方法可以包括干粉颗粒，其中包含有药物活性成分，直径约0.5到7纳米，最适应为约1到6纳米。为方便使用，这种组合物为干粉形式，可使用包括干粉储存器的装置进行施用，其中可以根据说明推进剂流动以分散粉末，或者使用自行推进溶剂/粉末分配容器，例如包括活性成分溶解或悬浮在密封容器中的低沸点推进剂中。理想情况下，这种粉末包括的颗粒质量中至少98％直径大于0.5纳米，数量上至少95％颗粒直径小于7纳米。更理想的是，粉末包括的颗粒质量中至少95％直径大于1纳米，数量上至少90％颗粒直径小于6纳米。干粉组成包括一种固体细粉末稀释剂，比如糖，这样方便以单位剂量形式提供。

低沸点推进剂一般包括液体推进器，沸点在大气压下低于65华氏。通常，推进剂可构成组合物的50-99.9％(质量/质量)，活性成分可占组合物的0.1-20％(质量/质量)。推进剂可以进一步包含另外的成分，例如液体非离子或固体阴离子表面活性剂或固体稀释剂(最好具有与包含活性成分的颗粒相同数量级的颗粒大小)。

本发明药物组合物的配制专门用于肺部给药，以溶液或悬浮液的液滴的形式提供活性成分。这样的制剂可以准备，包装或作为含有或含有活性成分，可选择无菌的水性或稀释醇溶液或悬浮液出售，并且可以方便地使用任何雾化或雾化装置施用。这种配置可以进一步包括一种或多种额外的成分，比如但并不局限于调味剂如糖精钠，挥发油，缓冲剂，表面活性剂，或防腐剂如羟基苯甲酸甲酯。这种给药途径提供的液滴最好平均半径在约0.1至约200纳米范围。

本文描述的可用于本发明药物组合物的肺部给药制剂方法也可用于鼻腔内给药。

另一种适于鼻腔内给药的制剂方法是包含活性成分并平均颗粒约0.2至500微米的粗粉末。

这种制剂以吸气时候施用，即通过将粉末容器靠近鼻孔通过鼻道快速吸入。适合于鼻内给药的制剂方法包含约0.1％(质量/质量)至100％(质量/质量)的活性成分，并且可以包含一种或多种额外的成分。

给药方案可以影响有效量的组成成分。本发明治疗制剂可以在发病前或者发病后给与实验对象。此外，几次分开的剂量以及交错剂量可以每日或顺序给药，或者剂量可以连续输注，或者可以是推注。还有，治疗制剂的剂量可根据治疗或预防情况的紧急情况按比例地增加或减少。可以通过调整剂量方案以提供最佳治疗效果。

向患者，优选哺乳动物，更优选人施用本发明中的药物可以使用已知的给药程序，用本发明中陈述的疾病或紊乱的剂量和治疗时间给与执行。本研究中有效治疗剂量需要根据不同因素来调整，包括病人疾病和紊乱的发展阶段，年龄，性别，体重；还有治疗药物的活性。比如，可以每天施用几个分开的剂量，或者可以按照治疗情况的紧急情况按比例减少剂量。其中一个非限制性示例为本发明的治疗药物有效剂量范围约为每天0.1-1000微克/公斤体重。

研究人员将能够研究相关因素并且在不进行过度实验的情况下确定治疗药物的有效剂量。实际应用中本发明的有效成分的含量，给与方法可能根据每一个患者而不同，因为每个患者对药物的反映，对药物毒性的阈值各不相同。

本发明中治疗的有效剂量和给与病人的剂量要根据病人的年龄，性别和体重，已经目前用药情况以及疾病的发展情况进行调整。医生，比如内科医生或者兽医，有能力做出病人所需有效成分的处方决定权。比如内科医生或者兽医可使用比推荐剂量较低的剂量开始治疗，然后逐渐增加已达到所期待的治疗效果。

本发明中合适的剂量范围可以是每天0.1μg到1000μg，或者1μg到500μg，或者5μg到250μg。这个剂量可以一次给与，或者分多次给与，可以一天给与1到4次。当多次给药时，每次的剂量可以相同也可以不同。比如，每天1μg的剂量可以分两次0.5μg间隔12小时给与。

某些实施例中，本发明的用药量为1μg到1000μg。某些实施例中，本发明的用药含量少于1000μg，或少于500μg，或少于200μg，或少于50μg。同样的，在某些实施例中，本发明中额外药物的剂量少于1000μg，或少于800μg，或少于600μg，或少于500μg，或少于400μg或少于300μg，或少于200μg，或少于100μg，或少于50μg，或少于40μg，或少于30μg，或少于25μg，或少于20μg，或少于15μg，或少于10μg，或少于5μg，或少于2μg，或少于1μg，或少于0.5μg，或者是其中任何一个中间值。

在其中一个实施例中，本研究的药物给与病人的频率为一天一次到五次以上。在另一实施例中，本研究药物给药频率可以是但并不局限于每天一次，每两天一次，每三天一次，直到每周一次，每两周一次。很明显的是，目前给药多种组合的频率不尽相同，取决于但不局限于年龄，疾病和紊乱是否进行过治疗，性别，健康状况以及其它因素。因此，本发明不应被理解为限于任何特定的剂量方案，并且给与任何患者的精确剂量和组合物，要通过考虑到患者的所有其他因素而进行物理确定后来决定。

可以理解的是每天给与的药物可以但并不局限于每天一次，每两天一次，每三天一次，每四天一次，每五天一次。比如说，针对每两天给与的频率，一天给与5μg，可以由周一开始给与第一个5μg，然后周三5μg，周五5μg，依次进行下去。

在患者状态改善的情况下，根据医生的判断，可以连续给与本发明的药物；或者，所施用的药物的剂量暂时减少或暂时中止一段时间(比如“药物假期”)。药物假期的长短可以从2天到1年，包括2天，3天，4天，5天，6天，7天，10天，12天，15天，20天，28天，35天，50天，70天，100天，120天，150天，180天，200天，250天，280天，300天，320天，350天或者365天。药物假期中剂量减少范围是10％-100％，可包括10％,15％,20％,25％,30％,35％,40％,45％,50％,55％,60％,65％,70％,75％,80％,85％,90％,95％,或者100％。

一旦病人出现症状改善，维持治疗的剂量可以给与。另外，也可以将剂量或频率，或者两者都降低，如果患者的身体功能在疾病和紊乱情况下都有所改善。在其中一个实施例中，病人需要长期间断性的智力，因为症状的反复出现和/或感染。

本发明中药物使用方法可制成每单位剂量的方式。术语“单位剂量方式”指的是适于作为接受治疗的患者的单位剂量的物理上不连续单位，其中每个单位含有提前计算好的活性物质，经计算产生所需的治疗效果的剂量，也可以联合适宜的制药载体使用。单位剂量方式可以一天一次，也可以一天多次(比如1天一次到四次)。当每天给与多次剂量时，单位剂量可以每次相同或不同。

毒性和治疗效果的测定是可选择进行的，结果来自细胞学实验和动物实验，包括但不并局限于，ld50(让实验群体50％的致死剂量)和ed50(让实验群体50％的有效剂量)。毒性和有效性的比值为治疗指数，为ld50和ed50的比值。可根据细胞学和动物学获得的数据来推断出用于人体的剂量范围。每个药物的剂量最好是体循环中接近ed50并且毒性最小。剂量根据这个范围可根据给与方式和使用途径改变。

本发明实施例提供了甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药的一种新用途，甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药可以提高肺组织thrt水平可以有效地保护肺泡上皮细胞，调节肺泡上皮细胞表面蛋白合成、储存和分布，促进肺泡上皮细胞成熟、分化和细胞完整性，有利于肺内积液的清除，促进肺泡上皮细胞内受损线粒体恢复，增强线粒体生物合成，从而有利于受损肺组织修复，阻止和逆转肺纤维化，调节免疫反应，改变癌化环境，达到防治肺部疾病、改善气体交换等肺功能，达到治疗效果。

本发明实施方式第二方面提供了一种试剂盒，包括说明书和如上述第一方面所述的药物。

本发明实施方式中，所述试剂盒中还包括雾化器。

本发明实施方式中，所述说明书描述了预防和治疗急性肺损伤和纤维性肺病的说明，给药途径，频率等。

实施例1：

甲状腺素雾化剂的制备：

取甲状腺素或其钠盐，溶于氢氧化钠等碱性溶液中，浓度可达5mg/ml，然后可用生理盐水(可加少量修饰成分)稀释250倍，作为存储液。使用时取1-5ml存储液，稀释至一定体积，选取相应的雾化器进行雾化，雾化时间为15-20分钟较宜，(如使用欧姆龙雾化器，雾化吸入10ml，大约雾化15分钟)。

下面结合附图来说明本发明具体实施情况。

图1-5表明dio2在特发性肺纤维化病人肺组织中大幅上调。其中，图1为使用microarray平台所做的基因表达分析，证明dio2是其中一个上调最为显著的基因(p＝5.4e-7)，特发性肺纤维化病人(n＝89)比对照组(n＝42)高达8.49倍。图2为经定量实时pcr分析dio2mrna表达水平在ipf病人(n＝53)和对照人群(图中用ctrl表示)(n＝17)。图3(a)为dio2蛋白表达通过免疫印记比较特发性肺纤维化病人(n＝6)和对照(n＝3)的肺部组织。图3(b)为图3(a)中免疫印记的灰度分析结果。图4为dio2酶切活性在特发性肺纤维化病人(ipf表示)和正常以及肺肿瘤组织(ctrl表示)的比较。图5为代表性的正常肺部组织(c)和代表性的特发性肺纤维化病人肺部组织(d和e)免疫组化图片；其中c代表性的正常肺组织免疫组化图片。图d和e代表性的特发性肺纤维化病人肺部组织图片。

图6-图7表明dio2缺陷(dio2ko)和甲状腺素抑制条件均加剧小鼠肺纤维化。其中，将8周大的小鼠气管内给与博来霉素(1.5u/kg)，在第14天后杀死。图6a和6b是dio2敲除老鼠的实验结果，图7c和7d是甲状腺素抑制剂ptu(丙基硫脲嘧啶)处理情况下的结果。图6a:右肺羟脯胺酸含量在野生型(wt，在图中以dio2+/+表示)和dio2ko小鼠(dio2基因敲除小鼠，在图中以dio2-/-表示)第14天的结果比较(每组n＝8)。图6b:免疫组织化学分析表明胶原蛋白在野生型(在图中以dio2+/+表示)和dio2ko小鼠肺组织(在图中以dio2-/-表示)表达区别(第14天)。图7c:右肺羟脯胺酸含量在ptu抑制甲状腺素下小鼠第14天的结果比较(每组n＝8)。图7d:免疫组织化学分析表明胶原蛋白在有或无ptu处理条件下小鼠肺组织表达区别(第14天)。

图8-11显示在博来霉素腹腔注射给与t4能减轻肺纤维化。其中，40μg/kgt4在给与博来霉素后3或7天通过腹腔给与，小鼠在第14天被杀死。图8a:羟脯胺酸测量显示博来霉素在盐水和ptu组均显著升高，而在t4处理过的组中同盐水比较没有显著性变化，t4为第三天注射t4。图8b:qrt-pcr表明t4处理有效地抑制了靶向基因col1a1,col3a1,s100a4和acta2表达，(n＝8,p<0.05)，t4为第三天注射t4。图中直柱从左到右依次为t4组、pbs组和ptu组，pbs组为盐水对照组。图9c:羟脯胺酸测量显示博来霉素在盐水和ptu组均显著升高，而在t4处理过的组中同盐水比较没有显著性变化，t4为第七天注射t4。图9d:qrt-pcr表明t4处理有效地抑制了靶向基因col1a1,col3a1,s100a4和acta2表达，(n＝8,p<0.05)，t4为第七天注射t4。图中直柱从左到右依次为t4组、pbs组和ptu组。图10e:全身给与t4显著性升高了体循环中t3的水平(n＝10,p<0.05)。图10f:t3在血清含量和羟脯氨酸在小鼠肺中含量的相对关系。图11:组织学masson三色染色针对博来霉素的纤维化和炎性反应在第三天或第七天给与t4治疗而减弱。其中，图中数字3和数字7代表第三天注射和第七天注射t4。

图12-14显示雾化吸入t3减轻了博来霉素引起的纤维化并降低其致死率。给与1.5u/kg博来霉素的第10,12,14,16天，雾化和吸入40μg/kgt3，盐水为对照。在第21天杀死小鼠取材。图12a-e:massontrichorome胶原蛋白染色分析结果。a，正常对照组老鼠肺组织，b，博来霉素诱导的纤维化肺组织，c，博来霉素诱导纤维化后t3治疗下肺组织，d，博来霉素诱导后尼达尼布(fda批准药物)治疗后的肺组织，e，博来霉素诱导后吡菲尼酮(fda批准药物)治疗后的肺组织，结果显示t3的治疗效果最好。图12f:羟脯胺酸测量显示博来霉素处理后显著升高，而40g/kgt3吸入后降低了羟脯氨酸含量。图13:kaplan-meier生存曲线分析显示博来霉素导致的致死率。4.0u/kg博来霉素在第0天通过气管给与，40μg/kgt3从第10天起每隔一天雾化吸入，盐水为对照。图14:elisa检测血清中t3水平显示吸入t3并未改变小鼠的血清t3水平(n＝10,p<0.05)，图中二甲基亚砜代表溶剂对照。

图15-16显示雾化吸入甲状腺素可有效清除肺积液，减少细胞内容物外泄和炎症。其中，图15a，b显示t3处理可增加肺内积液的清除，而反式t3则无此功能，在氧胁迫条件下(急性肺损伤)t3处理促进肺积液清除。图16c，d，t3处理在lps(脂多糖)诱导的急性肺损伤中的作用。小鼠在lps处理后3小时和24小时吸入t3，48小时候采集小鼠样品，分析表明t3处理可保护细胞完整性，减少细胞内容物流出，同时也减少炎症细胞在肺泡中的积累，减轻炎症反应。图16e，f，t3处理在盐酸暴露导致的急性肺损伤中的作用。小鼠在盐酸处理后3小时和24小时吸入t3，48小时候采集小鼠样品，分析显示盐酸暴露导致急性肺损伤模型下t3处理可保护细胞完整性，减少细胞内容物流出，同时也减少炎症细胞在肺泡中的积累，减轻炎症反应。

图17显示t3处理显著改善由博来霉素诱导的纤维化了得肺功能。小鼠给与博来霉素后第10天开始隔天雾化吸入t3(40ug/kg)，第21天进行肺功能测试。其中，横坐标为肺内压力，纵坐标为肺内体积变化。图17中各曲线从上到下依次为博来霉素+t3、博来霉素+尼达尼布、盐水对照、博来霉素+吡非尼酮、博来霉素。

本发明发现在急性肺损伤和纤维化肺组织中dio2水平上调，dio2是一个可催化t4转换为活性成分t3的活化酶。在某些情况下，给与t4可导致肺组织中甲状腺素水平上调。

本研究显示缺少甲状腺激素会加剧肺纤维化，局部雾化吸入甲状腺激素可减轻肺急性损伤和纤维化动物模型中的疾病进程。这些结果支持雾化给与甲状腺激素有可能治疗急性肺损伤和纤维化肺部疾病的病人。结果显示，靶向在受损的肺中给与甲状腺激素及其药学上可接受的盐或前药可以有效减轻或完全阻止纤维化过程。

如本文所报道的，动物学研究包括在博来霉素引起的小鼠损伤模型中，在疾病发展的不同时间点多次吸入t4至受损肺组织有利于疾病治愈。在预防实验中，t4在博来霉素诱导后第3天到第七天后给药可有效抑制肺纤维化。在治疗实验中，t4在博来霉素诱导后第10天开始给药，隔天给药，在第21天取样检测，对肺纤维化有治疗作用。

在某些情况下，dio2表达增加的特发性肺纤维化病人给与t4激素可治疗或预防纤维化进程。这一结果发现了这些病人在甲状腺素治疗后可能获益最大。本发明提供了如何选择特定的特发性肺纤维化病人群体有可能在甲状腺素治疗中获益的一种方法。

通过上述试验研究发现：(1)dio2表达在肺病病变中显著改变。该基因编码的蛋白主要是负责把原thrtt4转化为活性thrtt3。(2)dio2基因敲除和thrt抑制药物处理能够促进老鼠肺纤维化。(3)注射thrt在两种动物肺纤维化模型中均显示可阻止和逆转肺纤维化。(4)雾化吸入活性thrt(甲状腺激素)更为有效阻止和逆转肺纤维化。(5)thrt处理促进肺泡上皮细胞发育成熟和细胞膜完整性，防止细胞损伤和蛋白渗出。(6)thrt处理调节肺泡上皮细胞表面蛋白合成，储存和分泌，减少细胞胁迫。(7)t3处理实验表明thrt显著增加肺泡腔内液体清除率(80％)和肺泡上皮ii型细胞的钠泵活性(60％)。(8)t3治疗恢复原代肺泡上皮细胞损伤导致的线粒体异常。

所有结果显示，提高肺组织thrt水平可以有效地保护肺泡上皮细胞，调节肺泡上皮细胞表面蛋白合成、储存和分布，促进肺泡上皮细胞成熟、分化和细胞完整性，有利于肺内积液的清除，促进肺泡上皮细胞内受损线粒体恢复，增强线粒体生物合成，从而有利于受损肺组织修复，阻止和逆转肺纤维化，调节免疫反应，改变癌化环境，达到防治肺部疾病、改善气体交换等肺功能，达到治疗效果。总之，本发明为急性肺损伤和肺纤维化疾病治疗找到有效治疗的新方法。

以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。