本发明涉及制药领域，具体涉及一种银杏萜内酯组合物在制备用于预防和/或治疗静脉血栓栓塞性疾病的药物中的用途；本发明还涉及一种含有银杏萜内酯和沙班类药物的组合物，及其在制备用于预防和/或治疗静脉血栓栓塞性疾病的药物中的用途。
背景技术
随着我国逐渐步入老龄化社会，与血栓形成相关的心脑血管、深层静脉栓塞等疾病的发病率逐年上升，成为威胁我国中老年人身体健康的主要因素。
血栓形成是特指在血管系统管腔中形成的血凝块。血栓形成的机制十分复杂，目前仍有诸多问题有待阐明。18世纪中期virchow提出的三要素假说简明扼要地概括了血栓形成的发病机制，在赋予现代科学内涵后，至今仍不失其现实意义。该学说认为血管壁(内皮)损伤、血液流动形式(血流动力学)变化和血液成分的改变(血小板、凝血因子、抗凝因子、纤溶和抗纤溶因子)是血栓形成的基本因素。在静脉和动脉血栓形成中三要素发挥的作用和占据的地位有所不同，血管内皮损伤和血小板活化与动脉血栓形成的关系更为密切，而血流淤滞和血浆凝血相关因子的变化在静脉血栓形成中的意义更为突出。血小板在动脉的初级止血阶段和血栓形成初始阶段都发挥重要作用。因此，血小板抑制剂(即抗血小板活化因子(paf)试剂)主要用于动脉血栓形成性疾病的防治。而静脉血栓形成性疾病的治疗主要通过抗凝实现。在静脉凝血级联系统中，一种名为xa因子(也称为stuart-prower因子)的丝氨酸肽链内切酶在多个阶段均起到了非常重要的作用。临床实践表明多种药物可在多个程度上抑制xa因子的活性。
目前用于治疗动脉血栓栓塞疾病的药物主要有：溶栓药(rt-pa)、保护血管内皮药(如他汀类药物)、抗血小板聚集药(如阿司匹林、氯吡格雷)、纤维蛋白解聚药(如替罗非班)和降纤药(如尿激酶)等。而治疗静脉血栓栓塞疾病的药物主要为抗凝药，例如传统药物低分子肝素、依诺肝素、华法令等，及新一代仅针对xa因子抑制途径的沙班类药物：利伐沙班、阿派沙班和依度沙班等。虽然沙班类药物已在临床上体现了较好的抗凝效果，但是其仍面临出血风险高、肝肾毒性大及使用费用贵等问题。
技术实现要素：
本发明提供以下技术方案用于解决上述问题：
一种银杏萜内酯组合物在制备预防和/或治疗静脉血栓栓塞性疾病的药物中的用途。
优选地，所述银杏萜内酯组合物包括白果内酯和银杏二萜内酯。
优选地，所述银杏二萜内酯包括银杏内酯a、银杏内酯b、银杏内酯c、银杏内酯j、银杏内酯k、银杏内酯l、银杏内酯m、银杏内酯n、银杏内酯q中的一种或者多种。
更优选地，所述银杏二萜内酯选自由银杏内酯a、银杏内酯b和银杏内酯c所组成的组。
更优选地，所述银杏二萜内酯为银杏内酯b，或者所述银杏二萜内酯为银杏内酯b和银杏内酯c，或者所述银杏二萜内酯为银杏内酯a、银杏内酯b和银杏内酯c。
优选地，所述银杏萜内酯组合物中白果内酯与银杏二萜内酯各组分间的质量比为(1:8)～(8:1)。
优选地，所述银杏萜内酯组合物是质量比为(1～4):(1～4):(4～1)的白果内酯、银杏内酯b和银杏内酯c；或者所述组合物是质量比为(1～8):(1～8):(1～4):(1～8)的白果内酯、银杏内酯a、银杏内酯b和银杏内酯c。
优选地，所述银杏萜内酯组合物中包含质量比为(1～2):1的白果内酯和银杏内酯b。
本发明还提供了一种含有银杏萜内酯和沙班类药物的组合物，其中所述银杏萜内酯包括银杏二萜内酯和白果内酯。
优选地，所述银杏二萜内酯包括银杏内酯a、银杏内酯b、银杏内酯c、银杏内酯j、银杏内酯k、银杏内酯l、银杏内酯m、银杏内酯n、银杏内酯q中的一种或者多种。
更优选地，所述银杏二萜内酯选自由银杏内酯a、银杏内酯b和银杏内酯c所组成的组。
更优选地，所述银杏二萜内酯为银杏内酯b，或者所述银杏二萜内酯为银杏内酯b和银杏内酯c，或者所述二萜银杏内酯为银杏内酯a、银杏内酯b和银杏内酯c。
优选地，所述银杏萜内酯组合物中白果内酯与银杏二萜内酯各组分间的质量比为(1:8)～(8:1)。
优选地，所述银杏萜内酯组合物是质量比为(1～4):(1～4):(4～1)的白果内酯、银杏内酯b和银杏内酯c；或者所述组合物是质量比为(1～8):(1～8):(1～4):(1～8)的白果内酯、银杏内酯a、银杏内酯b和银杏内酯c。
优选地，所述银杏萜内酯组合物中包含质量比为(1～2):1的白果内酯和银杏内酯b。
优选地，所述沙班类药物包括利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班、奥米沙班、雷扎沙班及它们药学可接受的盐、水合物和溶剂合物中的一种或多种。
优选地，所述沙班类药物选自利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班中的一种或者多种，更优选所述沙班类药物为利伐沙班或依度沙班。。
优选地，所述银杏萜内酯与沙班类药物的质量比为(5:6)～(20:1)。
本发明还提供上述含有银杏萜内酯和沙班类药物的组合物在制备预防和/或治疗静脉血栓栓塞性疾病的药物中的用途。
优选地，本发明所述静脉血栓栓塞性疾病包括深层静脉血栓栓塞、肺栓塞、充血性心力衰竭、骨折及大型外科手术所造成的静脉血栓栓塞，所述大型外科手术包括关节置换术。
本发明所称的银杏二萜内酯，其结构中含有6个富氧五元环(包括一个螺[4.4]-壬烷、一个四氢呋喃环和三个内酯环)、10-12个立体中心以及特有的叔丁基。已分离出的银杏二萜内酯在结构上的差异仅在于羟基的数目和位置。本发明所称的白果内酯含有三个内酯环、一个叔丁基和一个全碳环，属于倍半萜内酯。
本发明所称的沙班类药物是一类凝血xa因子抑制剂，其中所述xa因子是凝血级联反应中的关键调节因子，可促进静脉血栓的形成。
本发明提供的银杏萜内酯组合物以及含有银杏萜内酯和沙班类药物的组合物可有效抗静脉血栓形成(抗凝、改善血液成分)并治疗涉及静脉血栓栓塞的相关疾病，其扩展了银杏萜内酯类化合物的应用范围，并且为静脉血栓的治疗提供了具有较低出血风险、价格适宜、且疗效确切、安全可靠、使用方便的新选择。
具体实施方式
实施例1银杏萜内酯组合物对家兔创伤性肢体深静脉血栓形成模型的抗凝作用
材料与方法
1.1实验动物
i级日本大耳白家兔500只(4只备用)，试验时体重2.0～3.0kg，全雄性。
1.2实验药物
白果内酯、银杏内酯a、银杏内酯b、银杏内酯c和银杏萜内酯组合物1-24，详细组方如下：
表1.银杏萜内酯组方详细配比表
1.3试剂和仪器
仪器：
(1)家兔称重检查仪器
acs-15led电子台秤，分辨值1g，最大称量6kg，仪器编号bky-yb-002，上海鹰牌衡器有限公司出品，用于称家兔体重。
(2)病理检查仪器
德国sartoriusbs124s型电子天平(分度值：0.0001g)，仪器编号：bky-tj-002，德国sartorius股份有限公司生产。
zt-14v2生物组织自动脱水机，仪器编号：bky-bl-016，孝感市亚光医用电子技术有限公司出品。
常州中威bmj-ⅲ型包埋机，仪器编号：bky-bl-002，江苏省常州市中威电子仪器厂出品。
常州中威phy-ⅲ病理组织漂烘仪，仪器编号：bky-bl-003，江苏省常州市中威电子仪器厂出品。
徕卡rm2126轮转式切片机，仪器编号：bky-bl-004，上海徕卡仪器有限公司出品。
日本奥林巴斯bx41-32p01显微镜，仪器编号：bky-bl-013，日本奥林巴斯株式会社出品。
yr-21生物组织自动染色机，仪器编号：bky-bl-015，孝感市亚光医用电子技术有限公司出品。
北京永光明202-0型台式干燥箱，仪器编号：bky-bl-005，北京市永光明医疗仪器厂出品。
试剂：
(1)供试品配液所需试剂
羧丙甲纤维素，乳糖，甘露醇。
(3)麻醉剂
戊巴比妥钠，用于家兔麻醉。使用时用纯化水将戊巴比妥钠配制成3％浓度。配制成3％戊巴比妥钠溶液(g/v)。用于造模时家兔麻醉。
1.4造模
取检疫及适应性观察合格的日本大耳白家兔496只进行造模，体重2.0～3.0kg，全雄性，先取8只作为正常组，其余均采用击打装置，击打接触圆面直径为1.5cm，创伤能量按ep＝mgh计算，铁棒每打击一次能量为7.5j。具体方法：兔耳缘静脉注射3％戊巴比妥钠1ml/kg麻醉，右侧俯卧位，左大腿根部置打击平台上，触清兔左股骨大转子，将击打头平面紧贴股骨大转子至大转子下1.5cm范围内，使用自制击打装置，击打兔大腿近端外侧，石膏固定左下肢于屈髋屈膝位，上石膏绷带时检查右髋活动自如后，俯卧位待石膏定型，造模后动物自由饮水，颗粒饲料饲养，不用抗凝剂及抗生素。
1.5分组与给药方式
1.5.1药物配制方法
药物(mg)：羧丙甲纤维素(mg)：乳糖(mg)：甘露醇(mg)＝1:2:10:20研磨均匀后，再加水入纯化水1ml，搅拌均匀，即得。举例：50mg药物+100mg羧丙甲纤维素+500mg乳糖+1000mg甘露醇，研磨均匀，加水50ml，搅拌均匀，即得1mg/ml的药液。
1.5.2给药方案
取造模成功的动物进行分组，每组8只，按下表给药方案灌胃给药，连续给药14天，每天给药2次。
表2动物深层静脉血栓形成模型给药方案
1.6深静脉血栓形成测定
末次给药30min后放血处死动物，切取股静脉，he染色，光镜镜检检查血管内皮损伤、血栓形成和血管破裂等情况，并对以上病变程度进行分级评分，具体评分标准详见下表。
表3深静脉血栓形成病理组织学检查病变程度评分标准
1.7统计学处理
深静脉血栓形成测定数据为等级资料数据，采用软件spss13.0“非参数检验”的“多个独立样本”进行统计分析。
研究结果及结论分析
表4供试品灌胃给药对家兔创伤性肢体深静脉血栓形成模型股静脉病理组织学变化的影响
注：与模型组相比，#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001。
研究结果显示：
1)组合物24(8:8:4:8，即2:2:1:2)的抗凝作用最强，且对内皮细胞的保护、血管的完整性及血栓形成的作用最均衡，为本试验各组中最好的组方，其次为组合物15(4:0:4:1)、组合物10(2:0:2:2)及组合物19(4:8:2:8，即2:4:1:4)。
2)通过对数据及组方进行分析发现：白果内酯与银杏二萜内酯的比例为2:1及1:1时，组合物的抗凝作用较好。
3)故随后的实验以白果内酯：银杏内酯b＝2:1、1:1为代表与沙班类药物代表进行实验研究。
实施例2银杏萜内酯与沙班类药物组合物对家兔创伤性肢体深静脉血栓形成模型的抗凝作用
材料与方法
2.1实验动物及造模方法
同实施例1
2.2实验药物及给药方案
1:1的白果内酯和银杏内酯、2:1的白果内酯：银杏内酯b、利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班及其组合物。
因利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班人体临床推荐剂量不同，参考其说明书：利伐沙班每日临床推荐剂量：10mg；阿哌沙班每日临床推荐剂量：2.5mg而依度沙班最大临床推荐剂量：60mg/日，结合药物的临床推荐剂量按等效剂量进行折算。
给药剂量如下表5所示
2.3试剂和仪器
同实施例1
2.4造模
同实施例1
2.5分组与给药方式
2.5.1药物配制方法
同实施例1
2.5.2给药方案
见上表表5
2.6深静脉血栓形成测定
同实施例1
2.7统计学处理
同实施例1。
研究结果及结论分析
表6供试品灌胃给药对家兔创伤性肢体深静脉血栓形成模型股动脉、股静脉病理组织学变化的影响
注：与模型组相比，#p<0.05,##p<0.01,###p<0.001。
研究结果显示：以利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班为代表的xa因子抑制剂沙班类药物具有很强的抗凝作用，对家兔创伤性深静脉血栓形成模型具有显著的治疗效果，无法获得银杏萜内酯组合物与沙班联合应用的临床疗效。
因此直接各剂量减半进行实验，以探索各组方对家兔创伤性肢体深静脉血栓形成的影响,其他相同。
表7
研究结果如下表8所示:
研究结果显示:
1)银杏萜内酯组合物与利伐沙班、阿哌沙班、依度沙班配伍，对静脉抗凝能起到协同增效作用。
2)银杏萜内酯组合物与利伐沙班、依度沙班的配伍静脉抗凝作用更明显。这可能与阿哌沙班的临床日剂量较小，药物混合不均匀有关。
3)银杏萜内酯组合物与沙班类药物配伍的静脉抗凝作用优于银杏内酯b与沙班类药物配伍的静脉抗凝作用。