醛捕获化合物和其用途的制作方法

本申请主张2016年8月22日提交的第62/378,065号美国临时申请的权益，所述申请的全文通过引用并入本文中。

背景技术：

细胞中的代谢和发炎过程产生毒性醛，如丙二醛(mda)和4-羟基-2-壬烯醛(hne或4-hne)。这些醛对蛋白质、碳水化合物、脂质和dna具有高度反应性，从而产生经化学修饰的生物分子，激活如nf-κb的发炎介质，并且损伤多个器官。举例来说，视黄醛可以与磷脂酰乙醇胺(pe)反应以形成称为a2e的高毒性化合物，其是被认为涉及年龄相关性黄斑变性(amd)的罹患和进展的脂褐质组分。许多身体防御机制的功能是消除或降低毒性醛的含量。新颖小分子治疗剂可以用于清除视网膜中的“逃逸”视黄醛，因此减少a2e形成并且降低amd风险(乔丹(jordan)等人(2006))。

醛与多种多样的病理学病况有关，如干眼、白内障、圆锥形角膜、富克氏角膜内皮营养不良(fuch'sendothelialdystrophyinthecornea)、葡萄膜炎、过敏性结膜炎、琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症(ssadhd)、吡哆醇依赖性癫痫症(aldh7a1突变)、眼瘢痕性类天疱疮、屈光性角膜切除术(prk)愈合或其它角膜愈合相关病况、泪脂质降解或泪腺功能障碍相关病况、发炎性眼部病况如眼部红斑痤疮(具有或不具有睑板腺功能障碍)，和非眼部病症或病况如皮肤癌、牛皮癣、接触性皮炎、异位性皮炎、寻常痤疮、舍格伦-拉松综合征(-larssonsyndrome)、缺血性-再灌注损伤、炎症、糖尿病、神经变性(例如帕金森氏病(parkinson'sdisease))、硬皮病、肌萎缩性侧索硬化、自身免疫病症(例如狼疮)、心血管病症(例如动脉粥样硬化)和糜烂性毒剂有害作用相关病况(内格雷-萨尔瓦格雷(negre-salvagre)等人(2008),中村(nakamura)等人(2007),巴蒂斯塔(batista)等人(2012),肯尼(kenney)等人(2003),国际皮肤病学杂志(intjdermatol)43:494(2004),眼科研究与视力学(investophthalmolvissci)48:1552(2007),格拉芙临床与实验眼科学文献(graefe'sclinexpophthalmol)233:694(1994),分子视觉(molecularvision)18:194(2012))。因此，减少或消除醛应该改善这些病理学病况的症状并且减缓其进展。

mda、hne以及其它毒性醛是由涉及以下的大量代谢机制产生：脂肪醇、鞘脂、糖脂、植醇、脂肪酸、花生四烯酸代谢(里索(rizzo)(2007))；多元胺代谢(伍德(wood)等人(2006))；脂质过氧化、氧化代谢(布迪(buddi)等人(2002)、周(zhou)等人(2005))以及葡萄糖代谢(波齐(pozzi)等人(2009))。醛可以与蛋白质、磷脂、碳水化合物以及dna上的伯氨基和其它化学部分交联，这在许多情况下导致毒性后果，如诱变和致癌(马内特(marnett)(2002))。mda与患病角膜、圆锥形角膜、大疱和其它角膜病以及富克氏角膜内皮营养不良相关(布迪等人(2002))。此外，例如舍格伦-拉松综合症相关鱼鳞癣的皮肤病可能与如十八醛和十六醛的脂肪醛的积聚有关(里索(rizzo)等人(2010))。此外，增加的脂质过氧化和所得醛产生与糜烂性毒剂的毒性作用相关(舒托(sciuto)等人(2004)和帕耳(pal)等人(2009))。

所属领域尚无对于通过施用充当醛如mda和/或hne清除剂的小分子治疗剂来治疗与毒性醛相关的各种病况的建议。因此，需要治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的疾病或病症和/或降低其风险。本发明解决了此类需要。

因此，仍需要治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的疾病、病症或病况和/或降低其风险。

技术实现要素：

现已发现，本发明的化合物和其组合物适用于治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的疾病、病症或病况和/或降低其风险。在本发明的一个方面中，所述化合物具有通式i：

或其医药学上可接受的盐，其中r¹、r²、r³、r⁴、r⁵、r⁶和r⁷中的每个都如本文所定义。

本发明的化合物和其医药学上可接受的组合物适用于治疗与毒性醛相关的各种疾病、病症或病况。所述疾病、病症或病况包含本文所描述的疾病、病症或病况。

本发明所提供的化合物还适用于研究生物学和病理学现象中的某些醛。

附图说明

图1显示对于ns2和本发明的示例性化合物在23小时时间周期内的醛加成物的形成速率。

图2显示对于ns2和本发明的示例性化合物随时间推移(23小时形成时间段)的4-hne的消耗。

图3显示对于ns2和本发明的示例性化合物在1周时间周期内的醛加成物的形成速率以测量化合物是否达到平衡。在此时间周期期间，5个样品中有3个达到了平衡。

图4显示对于ns2和本发明的示例性化合物在1周时间周期内的4-hne的消耗以测量化合物在此时间周期期间是否达到平衡。

图5显示ns2对来自b6.129-aldh5a1^tm1kmg/j(ssadh缺陷型)小鼠的脑部切片和相关培育流体中的所测量gaba和ghb含量的作用。

图6显示化合物i-1对来自b6.129-aldh5a1^tm1kmg/j(ssadh缺陷型)小鼠的脑部切片和相关培育流体中的gaba和ghb含量的作用。

图7显示测量利用ns2进行的4-hne加成物形成的检验的结果。检验执行两次，并且在不同日子进行测量。ns2形成对应的具有4-hne的加成物。两个结果彼此类似并且足够接近在针对hplc仪器的测量误差内。

图8显示测量利用i-1进行的4-hne加成物形成的检验的结果。检验执行两次，并且在不同日子进行测量。i-1形成对应的具有4-hne的加成物。两个结果彼此类似并且足够接近在针对hplc仪器的测量误差内。

具体实施方式

1.本发明某些方面的一般描述

在某些实施例中，本发明提供用于治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的疾病、病症或病况和/或降低其风险的化合物、组合物和方法。在一些实施例中，所述化合物包含本文所描述的式化合物或其医药学上可接受的盐，其中每个变量都如本文中所定义并且描述于实施例中。在一些实施例中，所揭示的化合物含有被认为能够通过形成加成物来清除或捕获醛的氨基官能基和甲醇官能基(如丙-2-醇基团)。所述化合物具有式i结构：

或其医药学上可接受的盐，其中：

r¹是h、d或卤素；

r²是h、d或卤素；

r³是h、d、br或i；

r⁴是h、d或卤素；

r⁵是h、d或卤素；

r⁶是任选地经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族；并且

r⁷是任选地经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族。

2.定义

本发明的化合物包含上文一般所描述的化合物，并且通过本文所揭示的类、子类和物种进一步说明。除非另外指明，否则如本文所使用的以下定义应适用。出于本发明的目的，化学元素是根据元素周期表，cas版，化学与物理手册(handbookofchemistryandphysics)，第75版来鉴别。另外，有机化学的一般原理描述于“有机化学(organicchemistry)”,托马斯索雷尔(thomassorrell),大学科学书籍(universitysciencebooks),索萨利托(sausalito):1999和“马奇高等有机化学(march'sadvancedorganicchemistry)”,第5版,编辑：史密斯m.b.(smith,m.b.)和马奇j.(march,j.),约翰·威利父子公司(johnwiley&sons),纽约(newyork):2001中，这些文献的全部内容通过引用并入本文中。

如本文所使用的术语“脂肪族”或“脂肪族基”意思是直链(即非分支链)或分支链、取代的或未取代的、完全饱和的或含有一或多个不饱和单元的烃链；或完全饱和的、或含有一或多个不饱和单元、但非芳香族(在本文中也称为“碳环”、“环脂肪族”或“环烷基”)、具有单一分子其余部分连接点的单环烃或双环烃。除非另外说明，否则脂肪族基含有1-6个脂肪族碳原子。在一些实施例中，脂肪族基含有1-5个脂肪族碳原子。在其它实施例中，脂肪族基含有1-4个脂肪族碳原子。在再其它实施例中，脂肪族基含有1-3个脂肪族碳原子，并且在又其它实施例中，脂肪族基含有1-2个脂肪族碳原子。在一些实施例中，“环脂肪族”(或“碳环”或“环烷基”)是指完全饱和的、或含有一或多个不饱和单元、但非芳香族、具有单一分子其余部分连接点的单环c3-c6烃。合适的脂肪族基包含但不限于直链或分支链、取代的或未取代的烷基、烯基、炔基和其杂合物如(环烷基)烷基、(环烯基)烷基或(环烷基)烯基。

如本文所使用的术语“医药学上可接受的盐”是指在合理医学判断的范围内适用于与人类和低等动物的组织接触而无不当毒性、刺激、过敏反应等并且与合理益处/风险比相称的那些盐。医药学上可接受的盐在所属领域中众所周知。举例来说，s.m.贝尔奇(s.m.berge)等人在医药科学杂志(j.pharmaceuticalsciences)，1977，66，1-19中详细描述了医药学上可接受的盐，所述文献通过引用并入本文中。本发明的化合物的医药学上可接受的盐包含衍生自合适的无机酸和有机酸以及无机碱和有机碱的盐。医药学上可接受的无毒酸加成盐的实例是用无机酸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和过氯酸、或用有机酸如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸、或通过使用所属领域中所用的其它方法如离子交换形成的盐。其它医药学上可接受的盐包含己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐(benzenesulfonate)、苯磺酸盐(besylate)、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳糖醛酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。

衍生自适当的碱的盐包含碱金属盐、碱土金属盐、铵盐和n⁺(c1-4烷基)4盐。代表性碱金属盐或碱土金属盐包含钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。另外的医药学上可接受的盐适当时包含使用抗衡离子如卤素离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的无毒铵、季铵和胺阳离子。

除非另外说明，否则本文所描绘的结构也意图包含结构的所有异构(例如对映异构、非对映异构和几何(或构象))形式；例如，r和s构型用于每个不对称中心，z和e用于双键异构体，并且z和e用于构象异构体。因此，本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构、非对映异构和几何(或构象)混合物都在本发明的范围内。除非另外说明，否则本发明的化合物的所有互变异构形式都在本发明的范围内。

“视网膜”是具有约1.5亿个神经元的中枢神经系统的区域。其位于眼后部，其中其搁置在称为视网膜色素上皮(rpe)的专门上皮组织上。视网膜通过转导称为“感光体”的专门神经元中的视觉刺激来启动视觉处理的第一阶段。它们的突触输出(synapticoutput)是通过视网膜中的精密神经网络处理的并且随后传输到脑部。视网膜已进化成两类专门的感光体以在多种多样的光条件下操作。“视杆”感光体在低光条件下转导视觉图像并且调解无色差视觉。“锥体”感光体在暗光到亮光条件下转导视觉图像且调解色觉和高视敏度。

每种感光体分隔为两个区域，称为“外部”和“内部”区。内部区是含有细胞核的神经元细胞体。内部区在视网膜疾病不存在的情况下终身存活。外部区是其中光敏感性视觉色素分子以堆叠的膜结构的密集阵列进行聚集的区域。外部区的一部分常规地按照昼夜过程脱落和再生长，称为外部区更新。脱落的外部区由rpe细胞摄入并且代谢。

“黄斑”是视网膜中心区域，其含有其中视觉图像经细长视锥以高空间清晰度(“视敏度”)处理的凹窝。“黄斑变性”是攻击黄斑并且破坏视野中心的高敏锐度视觉的视网膜神经变性形式。年龄相关性黄斑变性(amd)开始呈现“干燥形式”，其特征在于称为脂褐质的rpe细胞中的残余溶酶体颗粒，和称为“玻璃膜疣”的细胞外沉积物。玻璃膜疣含有rpe细胞排出的细胞废弃产物。“脂褐质”和玻璃膜疣在临床上可以由眼科医师检测并且使用荧光技术量化。其可以是黄斑变性的第一临床征象。

脂褐质含有a2e聚集体。脂褐质在rpe细胞中积聚并且通过多种已知机制使其中毒。当rpe细胞中毒时，它们的生物化学活性下降并且感光体开始变性。细胞外玻璃膜疣可以通过干扰其血管营养物供应来进一步损害rpe细胞。玻璃膜疣还触发了发炎过程，这使十位患者中的一位患者中的黄斑受到脉络膜新生血管性入侵，从而进展为湿式amd。干式和湿式都进展为失明。

“erg”是视网膜电图的首字母缩写，其测量视网膜神经元在其对实验上所定义的光刺激物作出反应期间所发出的场势。erg是无创测量，其可以针对活的受试者(人类或动物)或从活动物中手术移出的溶液中的半切眼进行。

如本文所使用的术语“ral”是指视黄醛。术语“ral捕获剂”意思是治疗化合物，其结合自由ral且从而防止ral与膜磷脂酰乙醇胺(pe)发生希夫碱(schiffbase)缩合。“自由ral”定义为未结合到视觉循环蛋白质的ral。术语“反式-ral”和“全-反式-ral”可以互换使用并且意思是全-反式-视黄醛。

a2e是在rpe细胞和感光体外部区中协同运作的称为“视觉循环”的复杂生物化学路径的反应副产物。视觉循环使衍生自维生素a且对视觉至关重要的称为“视黄醛”的光反应性醛发色团再循环。简单地说，视觉循环具有四个主要步骤：1)其使rpe中的维生素a转化成具有一个光反应性应变双键的醛发色团(11-顺式-ral)；2)其将11-顺式-ral输送到视网膜中，在视网膜中其结合到称为视蛋白的专门感光体蛋白；3)光使所结合的11-顺式-ral发生光异构化而形成反式-ral，启动了所结合的ral从视蛋白结合位点中释放；和4)其使反式-ral(醛)转化成维生素a(醇)并且将维生素a输送回到rpe中，在rpe中循环再次开始。

ral的醛基有助于分子通过与视蛋白结合位点中的氨基酸侧链形成可逆化学键来结合到视蛋白。虽然ral上的醛基是将分子锚定于视蛋白结合位点所必需的，但是由于其倾向于与其它生物胺形成希夫碱，因此其另外带来了危险。前三个反应发生于感光体外部区中并且产生了称为a2pe的中间产物。a2pe一旦形成就分溶到脂质相中并且在感光体外部区膜中积聚。

如上文所描述，黄斑变性和其病因涉及a2e和/或脂褐质积聚的其它形式的视网膜疾病可以通过降低所形成的a2e的量来治疗或预防。适用于此举的化合物包含ral捕获剂。ral捕获剂降低了所形成的a2e的量，例如通过与已逃避螯合的ral形成共价键来进行。由此已经与捕获ral的化合物反应的ral不可供与磷脂酰乙醇胺反应使用。

本发明还涉及本文所描述的化合物在制造用于治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的疾病、病症或病况和/或降低其风险的药剂中的用途。更确切地说，本发明的此方面涉及本文所描述的化合物在制造用于治疗、预防以下各项和/或降低其风险的药剂中的用途：(1)眼部疾病、病症或病况，包含但不限于角膜疾病(例如干眼综合症、白内障、圆锥形角膜、大疱和其它角膜病变以及富克氏内皮营养不良(fuch'sendothelialdystrophy))、其它眼部病症或病况(例如过敏性结膜炎、眼部瘢痕性类天疱疮、prk愈合和其它角膜愈合相关病况以及泪脂质降解或泪腺功能障碍相关病况)以及炎症所致的高醛含量相关其它眼部病况(例如葡萄膜炎、巩膜炎、眼部史蒂文斯-约翰逊综合征(ocularstevens-johnsonsyndrome)以及眼部红斑痤疮(具有或不具有睑板腺功能障碍))；(2)皮肤病症或病况或外观适应症。举例来说，疾病、病症或病况包含但不限于牛皮癣、局部(盘状)狼疮、接触性皮炎、异位性皮炎、过敏性皮炎、辐射性皮炎、寻常痤疮、舍格伦-拉松综合征和/或相关鱼鳞癣、日光性弹性组织变性/皱纹、肤色紧致、浮肿、湿疹、烟尘或刺激物诱发的皮肤变化、真皮切口和烧伤或创伤相关皮肤病况；(3)糜烂性毒剂毒性作用或碱金属剂烧伤相关病况；或(4)自身免疫疾病、免疫介导疾病、发炎性疾病、心脏血管疾病或神经疾病，如狼疮、硬皮病、哮喘、慢性阻塞性肺病(copd)、类风湿性关节炎、发炎性肠病、败血症、动脉粥样硬化、缺血性-再灌注损伤、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病(alzheimer'sdisease)、多发性硬化症、肌萎缩性侧索硬化、糖尿病、代谢综合征、纤维化疾病、神经官能症和/或sls运动神经影响、ssadhd和吡哆醇依赖性癫痫症。

本发明还涉及本文所描述的化合物在治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的疾病、病症或病况和/或降低其风险中的用途。更具体地说，本发明的此方面涉及本文所描述的化合物在治疗、预防以下各项和/或降低其风险中的用途：(1)眼部疾病、病症或病况，包含但不限于角膜疾病(例如干眼综合征、白内障、圆锥形角膜、大疱和其它角膜病变以及富克氏内皮营养不良)、其它眼部病症或病况(例如过敏性结膜炎、眼部瘢痕性类天疱疮、prk愈合和其它角膜愈合相关病况以及泪脂质降解或泪腺功能障碍相关病况)以及炎症所致的高醛含量相关其它眼部病况(例如葡萄膜炎、巩膜炎、眼部史蒂文斯-约翰逊综合征以及眼部红斑痤疮(具有或不具有睑板腺功能障碍))；(2)皮肤病症或病况或外观适应症，举例来说，牛皮癣、局部(盘状)狼疮、接触性皮炎、异位性皮炎、过敏性皮炎、辐射性皮炎、寻常痤疮、舍格伦-拉松综合征和/或相关鱼鳞癣、日光性弹性组织变性/皱纹、肤色紧致、浮肿、湿疹、烟尘或刺激物诱发的皮肤变化、真皮切口和烧伤或创伤相关皮肤病况；(3)糜烂性毒剂毒性作用或碱金属剂烧伤相关病况；或(4)自身免疫疾病、免疫介导疾病、发炎性疾病、心脏血管疾病或神经疾病，如狼疮、硬皮病、哮喘、慢性阻塞性肺病(copd)、类风湿性关节炎、发炎性肠病、败血症、动脉粥样硬化、缺血性-再灌注损伤、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、多发性硬化症、肌萎缩性侧索硬化、糖尿病、代谢综合征、纤维化疾病、神经官能症和/或sls运动神经影响、ssadhd和吡哆醇依赖性癫痫症。

本文所描述的化合物也可以局部施用，如例如以滴眼剂或眼用软膏形式直接施用到眼睛。滴眼剂通常包括有效量的至少一种本文所描述的化合物和能够安全地施加到眼睛的载剂。举例来说，滴眼剂呈等渗溶液的形式，并且溶液的ph经调节以使得眼睛不受刺激。在许多情况下，上皮屏障干扰分子渗透到眼睛中。因此，大多数目前所用的眼用药物都补充有某种形式的渗透增强剂。这些渗透增强剂通过使最上面的上皮细胞的紧密连接松开而起作用(伯斯坦(burstein)，英国眼科学会会刊(transophthalmolsocuk)104:402(1985)；艾什顿(ashton)等人，药理学与实验治疗学杂志(jpharmacolexpther)259:719(1991)；格林(green)等人，美国眼科学杂志(amjophthalmol.)72:897(1971))。最常用的渗透增强剂是苯扎氯铵(唐(tang)等人,药物科学杂志(jpharmsci)83:85(1994)；伯斯坦等人,眼科研究与视力学19:308(1980))，其也用作抵抗微生物污染的防腐剂。

局部施用可以呈以下形式：乳膏、悬浮液、乳液、软膏、滴剂、油剂、洗剂、贴片、胶带、吸入剂、喷雾剂或受控释放局部配制物包含凝胶、膜、贴片和粘合剂。眼内施用可以采取结膜下、眼筋膜囊下、眼球后或玻璃体内注射、贮库型制剂或植入剂的形式。通过这些途径施用的化合物可以呈溶液或悬浮液的形式。通过贮库型制剂注射进行的化合物施用可以含有医药学上可接受的载剂或赋形剂；这些医药学上可接受的载剂或赋形剂可以是天然或合成的，并且可以是可生物降解或不可生物降解的并且促进以受控方式进行的药物释放。用于化合物的受控释放的植入剂可以由天然或合成的、可生物降解或不可生物降解的材料构成。载剂是可接受的，因为其与组合物的其它组分相容并且对患者无害。载剂的一些实例包含(1)糖，如乳糖葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素和(4)环糊精。有用的局部配制物在pct公开wo2011/072141中描述，所述公开的内容通过引用并入本文中。

用于局部施用到皮肤的配制物可以包含例如包括医药学上可接受的载剂中的伯胺化合物的软膏、乳膏、凝胶和糊剂。如所属领域的普通技术人员所众所周知，用于局部使用的伯胺化合物的配制物包含油性或水溶性软膏基质的制剂。举例来说，这些配制物可以包含植物油、动物脂肪和例如从石油中获得的半固体烃。所用的特定组分可以包含白软膏、黄软膏、鲸蜡酯蜡、油酸、橄榄油、石蜡、矿脂、白矿脂、鲸蜡、淀粉甘油、白蜡、黄蜡、羊毛脂、无水羊毛脂以及单硬脂酸甘油酯。还可以使用各种水溶性软膏基质，包含乙二醇醚和衍生物、聚乙二醇、聚氧乙烯40硬脂酸酯和聚山梨醇酯。

用于局部施用的配制物可以含有浓度在0.001％-10％、0.05％-10％、0.1％-10％、0.2％-10％、0.5％-10％、1％-10％、2％-10％、3％-10％、4％-10％、5％-10％或7％-10％(重量/体积)范围内、或在0.001％-2.0％、0.001％-1.5％或0.001％-1.0％(重量/体积)范围内、或在0.05％-2.0％、0.05％-1.5％或0.05％-1.0％(重量/体积)范围内、或在0.1％-5.0％、0.1％-2.0％、0.1％-1.5％或0.1％-1.0％(重量/体积)范围内、或在0.5％-5.0％、0.5％-2.0％、0.5％-1.5％或0.5％-1.0％(重量/体积)范围内、或在1％-5.0％、1％-2.0％或1％-1.5％(重量/体积)范围内的用于本申请的化合物。用于局部施用的配制物还可以含有浓度在0.001％-2.5％、0.01％-2.5％、0.05％-2.0％、0.1％-2.0％、0.2％-2.0％、0.5％-2.0％或1％-2.0％(重量/重量)范围内或在0.001％-2.0％、0.001％-1.5％、0.001％-1.0％或0.001％-5％(重量/重量)范围内的用于本申请的化合物。

在滴眼剂配制物中，组合物可以含有浓度为0.01％-20％、0.02％-15％、0.04％-10％、0.06％-5％、0.08％-1％或0.09％-0.5％(重量/体积)的活性化合物(伴以或不伴以针对溶液的ph和/或渗透性调节)。更确切地说，滴眼剂配制物可以含有浓度为0.09％-0.5％(重量/体积)如0.1％(重量/体积)的本文所描述的化合物。

在一个例证中，医药组合物涵盖通过将治疗有效量的本文所描述的化合物与寡聚物或聚合物载剂混合而制成的组合物，所述寡聚物或聚合物载剂如环糊精或经化学改性的环糊精，包含三甲基-β-环糊精、2-羟乙基-β-环糊精、2-羟丙基-β-环糊精、3-羟丙基-β-环糊精和β-环糊精磺基丁醚钠盐(或钾盐)。例证寡聚物或聚合物载剂为β-环糊精磺基丁醚钠盐。组合物中的β-环糊精磺基丁醚钠盐的量可以在约0.01到30重量/体积％范围内。在一个示例中，β-环糊精磺基丁醚钠盐的浓度是5-25重量/体积％。进一步示例β-环糊精磺基丁醚钠盐浓度为6-20重量/体积％。在一个例证中，β-环糊精磺基丁醚的浓度是6-12重量/体积％。进一步例证β-环糊精磺基丁醚的浓度为9-10重量/体积％，包含9.5重量/体积％。组合物中的本文所描述的化合物的量可以在0.01％-20％、0.02％-15％、0.04％-10％、0.06％-5％、0.08％-1％或0.09％-0.5％(重量/体积)范围内。更确切地说，组合物可以含有浓度为0.09％-0.5％(重量/体积)如0.1％(重量/体积)的本文所描述的化合物。

本文所描述的化合物可以经口施用，并且含有活性成分的医药组合物可以呈适用于口服的形式，例如呈片剂、糖衣锭、口含锭、水性或油状悬浮液、可分散粉剂或颗粒剂、乳液、硬或软胶囊或糖浆或酏剂形式。预定口服的组合物可以根据所属领域中已知用于制造医药组合物的任何方法来制备，并且所述组合物可以含有一或多种选自由甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂组成的群组的试剂以便提供医药学上精致并且适口的制剂。

对于以片剂或胶囊(例如明胶胶囊)形式进行的经口施用，活性药物组分可以与口服、无毒、医药学上可接受的惰性载剂如乙醇、甘油、水等组合。此外，当需要或必要时，也可以将适合的粘结剂、润滑剂、崩解剂和着色剂并入混合物中。合适的粘结剂包含淀粉、硅酸镁铝、淀粉糊剂、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮、天然糖如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成胶如阿拉伯胶、黄蓍胶或藻酸钠、聚乙二醇、蜡等。用于这些剂型的润滑剂包含油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠、二氧化硅、滑石、硬脂酸、其镁或钙盐和/或聚乙二醇等。崩解剂包含但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶淀粉、琼脂、褐藻酸或其钠盐或泡腾混合物、交联羧甲纤维素或其钠盐等。稀释剂包含例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸。

片剂含有与适于制造片剂的无毒的医药学上可接受的赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；粒化剂和崩解剂，例如玉米淀粉或褐藻酸；粘结剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未包覆包衣的，或其可以通过已知技术包覆包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，并且由此提供在更长时间段内的持续作用。

口服配制物中的本文所描述的化合物的治疗有效剂量可以在0.01mg/kg到50mg/kg患者体重/天、更确切地说0.01mg/kg到10mg/kg范围内变化，其可以以每天单或多剂量施用。对于经口施用，药物可以以含有1mg到500mg、具体地说1mg、5mg、10mg、20mg、50mg、100mg、250mg和500mg活性成分的片剂或胶囊的形式递送，或以含有至少1％、2％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％(w/w)活性成分的片剂或胶囊的形式递送。举例来说，胶囊可以含有50mg活性成分或5-10％(w/w)活性成分。举例来说，片剂可以含有100mg活性成分或20-50％(w/w)活性成分。举例来说，除活性成分之外，片剂还可以含有崩解剂或软化剂(例如交联羧甲纤维素或其钠盐和甲基纤维素)、稀释剂(例如微晶纤维素)和润滑剂(例如硬脂酸钠和硬脂酸镁)。药物可以按天计每天施用一次、两次或更多次。

对于通过吸入进行的施用，化合物是以气溶胶喷雾剂形式从含有合适推进剂(例如气体，如二氧化碳)的加压容器或分配器或喷雾器来递送的。

对于经粘膜或经皮施用，在配制物中使用适于渗透屏障的渗透剂。所述渗透剂在所属领域中通常是已知的，并且对于经粘膜施用而言，包含例如清洁剂、胆汁盐和夫西地酸(fusidicacid)衍生物。经粘膜施用可以通过使用经鼻喷雾剂或栓剂来实现。对于经皮施用，将活性化合物配制成如所属领域中通常所已知的软膏、油膏、凝胶或乳膏。

包括本文所描述的化合物的肠胃外配制物可以以水性等渗溶液或悬浮液的形式制备，并且栓剂宜由脂肪乳液或悬浮液制备。配制物可以经灭菌且/或含有佐剂，如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶解促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。此外，其还可以含有其它治疗上有价值的物质。组合物是根据常规方法制备的，并且可以含有约0.1％到75％、优选约1％到50％本文所描述的化合物。

短语“肠胃外施用(parenteraladministration/administeredparenterally)”是所属领域公认的术语，并且包含除经肠和局部施用如注射以外的施用模式，并且包含但不限于静脉内、肌肉内、胸膜内、血管内、心包内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊椎内以及胸骨内注射和输注。

3.示例性化合物的描述

现已发现，本发明的化合物和其组合物适用于治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的疾病、病症或病况和/或降低其风险。

根据一个方面，本发明提供式i化合物：

或其医药学上可接受的盐，其中：

r¹是h、d或卤素；

r²是h、d或卤素；

r³是h、d、br或i；

r⁴是h、d或卤素；

r⁵是h、d或卤素；

r⁶是任选地经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族；并且

r⁷是任选地经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族。

如在上文中一般定义，r¹是h、d或卤素。

在一些实施例中，r1是h。在一些实施例中，r¹是d。在一些实施例中，r¹是卤素。在一些实施例中，r¹是cl。在一些实施例中，r¹是br。

如在上文中一般定义，r²是h、d或卤素。

在一些实施例中，r²是h。在一些实施例中，r²是d。在一些实施例中，r²是卤素。在一些实施例中，r²是cl。在一些实施例中，r²是br。

如在上文中一般定义，r³是h、d、br或i。

在一些实施例中，r³是h。在一些实施例中，r³是d。在一些实施例中，r³是br。在一些实施例中，r³是i。

如在上文中一般定义，r⁴是h、d或卤素。

在一些实施例中，r⁴是h。在一些实施例中，r⁴是d。在一些实施例中，r⁴是卤素。在一些实施例中，r⁴是cl。在一些实施例中，r⁴是br。

如在上文中一般定义，r⁵是h、d或卤素。

在一些实施例中，r⁵是h。在一些实施例中，r⁵是d。在一些实施例中，r⁵是卤素。在一些实施例中，r⁵是cl。在一些实施例中，r⁵是br。

如在上文中一般定义，r⁶是任选地经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族。

在一些实施例中，r⁶是经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族。在一些实施例中，r⁶是c1-4脂肪族。在一些实施例中，r⁶是c1-4烷基。在一些实施例中，r⁶是甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施例中，r⁶是甲基。

如在上文中一般定义，r⁷是任选地经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族。

在一些实施例中，r⁷是经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族。在一些实施例中，r⁷是c1-4脂肪族。在一些实施例中，r⁷是c1-4烷基。在一些实施例中，r⁷是任选地经1、2或3个氟原子取代的c1-4烷基。在一些实施例中，r⁷是甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施例中，r⁷是甲基。

在一些实施例中，r⁶和r⁷是甲基或乙基。在一些实施例中，r⁶和r⁷是甲基。

在另一个方面中，本发明提供式i-a化合物：

或其医药学上可接受的盐，其中：

r²、r³、r⁴、r⁵、r⁶和r⁷中的每个都如上文所定义定义且以单独和组合形式描述于本文实施例中。

在另一个方面中，本发明提供式i-b化合物：

或其医药学上可接受的盐，其中：

r²、r⁴、r⁵、r⁶和r⁷中的每个都如上文所定义定义且以单独和组合形式描述于本文实施例中。

在另一个方面中，本发明提供式i-c、i-d、i-e或i-f化合物：

或其医药学上可接受的盐，其中：

r²、r⁴、r⁵、r⁶和r⁷中的每个都如上文所定义定义且以单独和组合形式描述于本文实施例中。

在另一个方面中，本发明提供式i-g、i-h、i-i或i-j化合物：

或其医药学上可接受的盐，其中：

r²、r⁴、r⁵、r⁶和r⁷中的每个都如上文所定义定义且以单独和组合形式描述于本文实施例中。

在另一个方面中，本发明提供式i-k或i-l化合物：

或其医药学上可接受的盐，其中：

r⁶和r⁷中的每个都如上文所定义定义且以单独和组合形式描述于本文实施例中。

在另一个方面中，本发明提供包括以下的组合物：式ii化合物：

或其医药学上可接受的盐，和至少一种式i化合物：

或其医药学上可接受的盐，其中：

r¹是h、d或卤素；

r²是h、d或卤素；

r³是h、d、br或i；

r⁴是h、d或卤素；

r⁵是h、d或卤素；

r⁶是任选地经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族；并且

r⁷是任选地经1、2或3个氘或卤素原子取代的c1-4脂肪族。

在一些实施例中，本发明提供包括以下的组合物：式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和至少一种式i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐。

在另一个方面中，本发明提供包括以下的组合物：式ii化合物：

或其医药学上可接受的盐，和选自以下的化合物或其医药学上可接受的盐：

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和一种选自i-1、i-2、i-3、i-4或i-5或其医药学上可接受的盐的额外化合物。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和两种选自i-1、i-2、i-3、i-4或i-5或其医药学上可接受的盐的额外化合物。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和三种选自i-1、i-2、i-3、i-4或i-5或其医药学上可接受的盐的额外化合物。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和四种选自i-1、i-2、i-3、i-4或i-5或其医药学上可接受的盐的额外化合物。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和一种选自i-2、i-3或i-4或其医药学上可接受的盐的额外化合物。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和两种选自i-2、i-3或i-4或其医药学上可接受的盐的额外化合物。在一些实施例中，组合物包括i-2、i-3和i-4或其医药学上可接受的盐。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和i-1或其医药学上可接受的盐。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和i-2或其医药学上可接受的盐。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和i-3或其医药学上可接受的盐。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和i-4或其医药学上可接受的盐。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐，和i-5或其医药学上可接受的盐。

在另一个方面中，本发明提供选自下表1中描绘的化合物的式i化合物。

表1：代表性式i化合物

在一些实施例中，本发明提供上表1中描绘的化合物或其医药学上可接受的盐。

在某些实施例中，本发明提供上文和本文所描述的任何化合物或其医药学上可接受的盐。

在其它实施例中，组合物含有呈至少约97、97.5、98、98.5、99.0、99.5、99.8、99.9、99.95或99.999重量％的量的式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l中的任一个的化合物或其医药学上可接受的盐，其中百分比以所述化合物的自由碱和组合物的总重量计。在其它实施例中，相对于hplc色谱图的总面积而言，组合物占总有机杂质hplc的不超过约2.0面积％，或在其它实施例中，占总有机杂质hplc的不超过约1.5、1.25、1、0.75、0.5、0.25、0.2、0.1、0.01、0.005或0.001面积％。

在其它实施例中，提供包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐、至少一种式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐和至少一种医药学上可接受的载剂的组合物。在一些实施例中，组合物含有呈约1重量％到约99重量％的量的式ii化合物或其医药学上可接受的盐，其中百分比以所述化合物的自由碱和组合物的总重量计。在其它实施例中，相对于hplc色谱图的总面积而言，组合物占总有机杂质hplc的不超过约2.0面积％，或在其它实施例中，占总有机杂质hplc的不超过约1.5、1.25、1、0.75、0.5、0.25、0.2、0.1、0.01、0.005或0.001面积％。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物其医药学上可接受的盐和式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐，其中式ii化合物或其医药学上可接受的盐占综合化合物或其医药学上可接受的盐的总重量或综合化合物或其医药学上可接受的盐的总hplc峰面积的约98％，并且式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐占其约2％。在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐和式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐，其中式ii化合物或其医药学上可接受的盐占综合化合物或其医药学上可接受的盐的总重量或综合化合物或其医药学上可接受的盐的总hplc峰面积的约99％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％、99.95％、99.99％或99.999％，并且式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐占其约1％、0.5％、0.4％、0.3％、0.2％、0.1％、0.05％、0.01％或0.001％。在一些实施例中，式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐占综合化合物或其医药学上可接受的盐的总重量的约100ppm、50ppm、10ppm、1ppm、500ppb、100ppb或10ppb。

在一些实施例中，组合物包括式ii化合物或其医药学上可接受的盐和式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐，其中式ii化合物或其医药学上可接受的盐占综合化合物或其医药学上可接受的盐的总重量的约99％-99.9999％、99.5-99.9999％、99.6-99.9999％、99.7-99.9999％、99.8-99.9999％、99.9-99.9999％、99.95-99.9999％、99.99-99.9999％或99.999-99.9999％，并且式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐占其约10ppm到2％、100ppm到1％、0.0001-0.5％、0.0001-0.4％、0.0001-0.3％、0.0001-0.2％、0.0001-0.1％、0.0001-0.05％、0.0001-0.01％或0.0001-0.001％。

在一些实施例中，式ii化合物或其医药学上可接受的盐和式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐以约98:2、99:1、99.5:0.5、99.6:0.4、99.7:0.3、99.8:0.2、99.9:0.1、99.95:0.05、99.99:0.01或99.999:0.001的比率存在。

在一些实施例中，相对于式ii化合物或其医药学上可接受的盐而言，式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l中的任一个的化合物或其医药学上可接受的盐占hplc色谱图的约0.01-0.20面积％。在一些实施例中，相对于式ii化合物或其医药学上可接受的盐而言，式i、i-a、i-b、i-c、i-d、i-e、i-f、i-g、i-h、i-i、i-j、i-k或i-l化合物或其医药学上可接受的盐占hplc色谱图的约0.02-0.18、0.03-0.16、0.05-0.15、0.075-0.13、0.09-0.1、0.1-0.2或0.15-0.2面积％。在一些实施例中，相对于hplc色谱图的总面积测量前述hplc色谱图的面积％。

在一些实施例中，本发明提供呈隔离形式的上文和本文所描述的任何化合物。如本文所使用的术语“隔离”意思是提供呈与可能存在于所述化合物的常见环境中的其他组分分离形式的化合物。在某些实施例中，经隔离化合物呈固体形式。在一些实施例中，如通过合适的hplc方法所测定，经隔离化合物是至少约50％纯。在某些实施例中，如通过合适的hplc方法所测定，经隔离化合物是至少约60％、70％、80％、90％、95％、98％、99％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％、99.95％、99.99％或99.999％。适用于本发明的某些化合物的制备方法揭示于2013年7月25日公开的us2013/0190500中，所述案通过引用并入本文中。

4.化合物和其医药学上可接受的组合物的用途

发现本文所描述的某些化合物适用于清除毒性醛，如mda和hne。在不希望受理论束缚的情况下，相信本文所描述的化合物与mda、hne或其它毒性醛进行希夫碱缩合，并且在能量上有利的反应中与醛形成错合物，因此减少或消除可供用于与蛋白质、脂质、碳水化合物或dna进行反应的醛。重要的是，本文所描述的化合物可以与醛反应以形成具有闭环结构的含醛化合物，从而捕获醛并且防止醛被释放回到细胞环境中。

.如本文所使用的术语“治疗(treatment/treat/treating)”是指逆转、缓解、延迟如本文所描述的疾病或病症或其一或多种症状的发作或抑制其的进展。在一些实施例中，在已经发展一或多种症状之后施用治疗。在其它实施例中，在不存在症状的情况下施用治疗。举例来说，在症状发作之前向敏感个体(例如根据症状病史和/或根据遗传学或其它易感性因素)施用治疗。在症状已消退之后，还继续治疗例如以预防、延迟或减轻其复发的严重程度。

本发明涉及用于治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的疾病、病症或病况和/或降低其风险的本文所描述的化合物。

其中与醛毒性有关的疾病、病症或病况的实例包含眼部疾病、病症或病况，包含但不限于角膜疾病(例如干眼综合症、白内障、圆锥形角膜、大疱和其它角膜病变以及富克氏内皮营养不良)、其它眼部病症或病况(例如过敏性结膜炎、眼部瘢痕性类天疱疮、prk愈合和其它角膜愈合相关病况以及泪脂质降解或泪腺功能障碍相关病况)以及炎症所致的高醛含量相关其它眼部病况(例如葡萄膜炎、巩膜炎、眼部史蒂文斯-约翰逊综合征、眼部红斑痤疮(具有或不具有睑板腺功能障碍))。在一个实例中，眼部疾病、病症或病况不是黄斑变性，如年龄相关性黄斑变性(“amd”)或斯特格氏病(stargardt'sdisease)。在另一个实例中，眼部疾病、病症或病况是干眼综合症、眼部红斑痤疮或葡萄膜炎。

其中与醛毒性有关的疾病、病症、病况或适应症的实例也包含非眼部病症，包含牛皮癣、局部(盘状)狼疮、接触性皮炎、异位性皮炎、过敏性皮炎、辐射性皮炎、寻常痤疮、舍格伦-拉松综合征(sls)和/或相关鱼鳞癣、神经官能症和/或sls运动神经影响、ssadhd、吡哆醇依赖性癫痫症、日光性弹性组织变性/皱纹、肤色紧致、浮肿、湿疹、烟尘或刺激物诱发的皮肤变化、真皮切口、烧伤或创伤相关皮肤病况、狼疮、硬皮病、哮喘、慢性阻塞性肺病(copd)、类风湿性关节炎、发炎性肠病、败血症、动脉粥样硬化、缺血性-再灌注损伤、帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症、多发性硬化症、肌萎缩性侧索硬化、糖尿病、代谢综合征、年龄有关性病症和纤维化疾病。在另一个实例中，非眼部病症是选自接触性皮炎、异位性皮炎、过敏性皮炎和辐射性皮炎的皮肤疾病、病症或病况。在另一个实例中，非眼部病症是选自舍格伦-拉松综合征和/或相关鱼鳞癣或烧伤和/或创伤相关外观适应症的皮肤疾病、病症或病况。

在另一个实例中，其中与醛毒性有关的疾病、病症或病况是年龄相关性病症。年龄相关性疾病、病症或病况的实例包含皮肤的皱纹、干燥和色素沉着。

其中与醛毒性有关的疾病、病症或病况的实例进一步包含糜烂性毒剂毒性作用或碱金属剂烧伤相关病况。本文所描述的化合物减少或消除毒性醛，并且因此治疗、预防这些疾病或病症和/或降低其风险。

在一个实施例中，本发明涉及治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的眼部疾病、病症或病况和/或降低其风险，其包括向有需要的受试者施用本文所描述的化合物。眼部疾病、病症或病况包含但不限于角膜疾病(例如干眼综合征、白内障、圆锥形角膜、大疱和其它角膜病变以及富克氏角膜内皮营养不良)、其它眼部病症或病况(例如过敏性结膜炎、眼部瘢痕性类天疱疮、prk愈合和其它角膜愈合相关病况以及泪脂质降解或泪腺功能障碍相关病况)以及其中炎症导致高醛含量的其它眼部病况(例如葡萄膜炎、巩膜炎、眼部史蒂文斯-约翰逊综合征、眼部红斑痤疮(具有或不具有睑板腺功能障碍))。眼部疾病、病症或病况不包含黄斑变性如amd或斯特格氏病。在一个示例中，在眼部疾病、病症或病况中，眼部组织或细胞中的mda或hne的量或浓度增加。举例来说，与正常眼部组织或细胞中的量或浓度相比，醛(例如mda或hne)的量或浓度增加至少1.1倍、1.2倍、1.3倍、1.4倍、1.5倍、2倍、2.5倍、5倍、10倍。本文所描述的化合物以浓度依赖性方式降低醛(例如mda和hne)浓度。醛(例如mda或hne)的量或浓度可以通过所属领域中已知的方法或技术测量，如在图克赞(tukozkan)等人,非拉特尖端杂志(furattipdergisi)11:88-92(2006)中所描述的方法或技术。

在一些实施例中，眼部疾病、病症或病况是干眼综合征。在第二类别中，眼部疾病、病症或病况是prk愈合和其它角膜愈合相关病况。举例来说，本发明涉及促进prk愈合或其它角膜愈合，其包括向有需要的受试者施用本文所描述的化合物。在第三类别中，眼部疾病、病症或病况是炎症所致的高醛含量相关眼部病况(例如葡萄膜炎、巩膜炎、眼部史蒂文斯-约翰逊综合征以及眼部红斑痤疮(具有或不具有睑板腺功能障碍))。在第四类别中，眼部疾病、病症或病况是圆锥形角膜、白内障、大疱和其它角膜病变、富克氏内皮营养不良、眼部瘢痕性类天疱疮或过敏性结膜炎。如本文在以下所描述，本文所描述的化合物可以局部或全身性施用。

在一些实施例中，本发明涉及治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的皮肤病症或病况或外观适应症和/或降低其风险，其包括向有需要的受试者施用本文所描述的化合物。皮肤病症或病况包含但不限于牛皮癣、硬皮病、局部(盘状)狼疮、接触性皮炎、异位性皮炎、过敏性皮炎、辐射性皮炎、寻常痤疮和舍格伦-拉松综合征和/或相关鱼鳞癣，并且外观适应症是日光性弹力组织变性/皱纹、肤色紧致、浮肿、湿疹、烟尘或刺激物诱发的皮肤变化、真皮切口或烧伤和/或创伤相关皮肤病况。在一些实施例中，如本文所描述，疾病、病症或病况选自年龄相关性皮肤疾病、病症或病况。

如异位性皮炎、局部(盘状)狼疮、牛皮癣以及硬皮病的各种皮肤疾病或病况是通过高mda和hne含量来表征的(英国皮肤病学杂志(brjdermatol)149:248(2003)；jeadv26:833(2012)；临床风湿病学(clinrheumatol)25:320(2006))。另外，舍格伦-拉松综合征(sls)相关鱼鳞癣起源于脂肪醛的积聚，这破坏片层体(lb)的正常功能和分泌并且导致角质层(sc)中的细胞间脂质沉积物以及皮肤中的缺陷防水层(w.b.里索(w.b.rizzo)等人(2010))。在患有sls的患者中，代谢脂肪醛的编码脂肪醛脱氢酶的基因中的突变显著地降低或消融其活性。因此，减少或消除醛的化合物如本文所描述的化合物可以用于治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的皮肤病症或病况如本文所描述的皮肤病症或病况和/或降低其风险。此外，在改善防水层和预防醛介导的炎症(包含纤维化和弹性组织变性(切尔普托(chairpotto)等人(2005))的情况下，许多外观适应症如日光性弹性组织变性/皱纹、肤色、紧致(浮肿)、湿疹、烟尘或刺激物诱发的皮肤变化以及真皮切口外观)以及烧伤和/或创伤相关皮肤病况可以使用本发明的方法来治疗。

在一些实施例中，皮肤疾病、病症或病况是牛皮癣、硬皮病、局部(盘状)狼疮、接触性皮炎、异位性皮炎、过敏性皮炎、辐射性皮炎、寻常痤疮或舍格伦-拉松综合征和/或相关鱼鳞癣。在一个例证中，皮肤疾病、病症或病况是接触性皮炎、异位性皮炎、过敏性皮炎、辐射性皮炎或舍格伦-拉松综合征和/或相关鱼鳞癣。在第二类别中，外观适应症是日光性弹力组织变性/皱纹、肤色紧致、浮肿、湿疹、烟尘或刺激物诱发的皮肤变化、真皮切口或烧伤和/或创伤相关皮肤病况。

在一些实施例中，本发明涉及治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的糜烂性毒剂毒性作用或碱金属剂烧伤相关病况和/或降低其风险，其包括向有需要的受试者施用本文所描述的化合物。

糜烂性毒剂包含但不限于硫芥、氮芥和光气肟。糜烂性毒剂的毒性或有害作用包含皮肤、眼睛和/或粘液的疼痛、刺激和/或撕裂以及结膜炎和/或眼睛角膜损伤。硫芥是化合物双(2-氯乙基)硫化物。氮芥包含化合物双(2-氯乙基)乙胺、双(2-氯乙基)甲胺和三(2-氯乙基)胺。硫芥或其类似物可能导致氧化应激并且确切地说hne含量的增加，并且通过耗乏抗氧化剂防御系统并且由此增加脂质过氧化可以诱发氧化应激反应并且因此增加醛含量(贾法里(jafari)等人(2010)；帕耳等人(2009))。当局部施加时，抗氧化剂如水飞蓟宾(silibinin)减弱由暴露于硫芥或其类似物所诱发的皮肤损伤，并且增加的抗氧化酶活性可以是对由硫芥产生的活性氧物种的补偿反应(贾法里等人(2010)；特瓦芮-辛格(tewari-singh)等人(2012))。此外，减少自由基物种的干预是暴露后针对光气诱发的肺损伤的有效治疗(舒托等人(2004))。因此，减少或消除醛的化合物如本文所描述的化合物可以用于治疗、预防糜烂性毒剂如硫芥、氮芥和光气肟的毒性作用相关病况和/或降低其风险。

碱金属剂包含但不限于石灰、碱液、氨水和排水管清洗剂。减少或消除醛的化合物如本文所描述的化合物可以用于治疗、预防碱金属剂烧伤相关病况和/或降低其风险。

在一些实施例中，本发明涉及治疗、预防其中醛毒性与发病机理有关的自身免疫、免疫介导、发炎性、心脏血管或神经疾病、病症或病况或代谢综合征或糖尿病和/或降低其风险，其包括向有需要的受试者施用本文所描述的化合物。自身免疫或免疫介导疾病、病症或病况包含但不限于狼疮、硬皮病、哮喘、慢性阻塞性肺病(copd)以及类风湿性关节炎。发炎性疾病、病症或病况包含但不限于类风湿性关节炎、发炎性肠病(例如克罗恩氏病(crohn'sdisease)和溃疡性结肠炎)、败血症以及纤维化(例如肾、肝、肺和心脏纤维化)。心血管疾病、病症或病况包含但不限于动脉粥样硬化和缺血性-再灌注性损伤。神经疾病\病症或病况包含但不限于帕金森氏病、阿尔茨海默氏病、琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症(ssadhd)、多发性硬化症、肌萎缩性侧索硬化、吡哆醇依赖性癫痫症、sls的运动神经影响和sls的神经问题(认知延迟和痉挛)。在一些实施例中，所揭示的化合物治疗sls运动神经影响，如肌肉痉挛、差动作协调、虛弱、发音困难和语言延迟。

技术人员将理解，本文中所列的疾病、病症或病况可能涉及超过一种病理学机制。举例来说，本文中所列的疾病、病症或病况可能涉及免疫反应和发炎反应中的调节异常。因此，疾病、病症或病况的上述分类不是绝对的，并且疾病、病症或病况可以视为免疫、发炎性、心血管、神经和/或代谢疾病、病症或病况。

发现患有醛脱氢酶缺陷症的个体具有高醛含量和增高的帕金森氏病(pnas110:636(2013))和阿尔茨海默氏病(生物化学与生物物理研究通讯(biochembiophysrescommun.)273:192(2000))风险。在帕金森氏病中，醛专门干扰多巴胺生理机能(自由基生物学与医学(freeradicbiolmed),51:1302(2011)；医学分子方面(molaspectsmed),24:293(2003)；脑研究(brainres),1145:150(2007))。另外，α-氨基己二酸半醛(aasa)积聚于患有吡哆醇依赖性癫痫症的个体中。此外，醛含量在多发性硬化症、肌萎缩性侧索硬化、自身免疫疾病如狼疮、类风湿性关节炎、狼疮、牛皮癣、硬皮病以及纤维化疾病中升高，并且增加含量的hne和mda与动脉粥样硬化和糖尿病的进展有关(细胞与分子医学杂志(j.cell.mol.med.),15:1339(2011)；关节炎与风湿病(arthritisrheum)62:2064(2010)；临床与实验免疫学(clinexpimmunol),101:233(1995)；国际风湿病学杂志(intjrheumdis),14:325(2011)；欧洲皮肤病学和性病学研究期刊(jeadv)26:833(2012)；临床风湿病学(clinrheumatol)25:320(2006)；消化道(gut)54:987(2005)；美国肾脏病学会杂志(jamsocnephrol20:2119(2009))。mda进一步与导致动脉粥样硬化的增加的泡沫细胞形成有关(雷邦加特(leibundgut)等人,药理学研究现状(currentopinioninpharmacology)13:168(2013))。此外，醛相关毒性在许多发炎性肺疾病如哮喘和慢性阻塞性肺病(copd)的发病机理中起重要作用(巴托丽(bartoli),发炎介质(mediatorsofinflammation)2011,论文891752)。因此，减少或消除醛的化合物如本文所描述的化合物可以用于治疗、预防自体免疫、免疫介导、发炎性、心血管或神经疾病、病症或病况或代谢综合症或糖尿病和/或降低其风险。举例来说，本文所描述的化合物预防醛介导的神经元细胞死亡。此外，本文所描述的化合物下调广泛范围的促炎性细胞因子且/或上调抗炎性细胞因子，这表明本文所描述的化合物适用于治疗发炎性疾病，如多发性硬化症和肌萎缩性侧索硬化。

如上文所论述，可以将所揭示的组合物施用到受试者以便治疗或预防黄斑变性和其病因涉及a2e和/或脂褐质积聚的其它形式的视网膜疾病。以a2e积聚为特征的其它疾病、病症或病况可以以类似方式治疗。

在一个实施例中，将化合物施用到受试者，从而减少a2e形成。举例而言，化合物可以与pe竞争以与反式-ral反应，由此减少所形成的a2e的量。在另一个实施例中，将化合物施用到受试者，从而预防a2e积聚。举例来说，化合物如此成功地与pe竞争以与反式-ral反应，未形成a2e。

待治疗的个体分成三组：(1)基于如通过视觉检查和/或视网膜电图所确定的视觉缺陷(包含但不限于暗适应、对比敏感性和敏锐度)和/或如通过针对玻璃膜疣积聚、组织萎缩和/或脂褐质荧光的视网膜和rpe组织眼底检查所指示的视网膜健康状况而临床上诊断有黄斑变性或病因涉及a2e和/或脂褐质积聚的其它形式的视网膜疾病的个体；(2)具有黄斑变性疾病的前期症状、但基于相同测量中的任一个或全部的异常结果被认为处于风险下的个体；和(3)具有前期症状、但基因上基于黄斑变性疾病家族史和/或基因分型结果被认为处于风险下的个体，所述结果显示与疾病相关的一或多种等位基因或多态性。每月、每周或每天局部或全身施用组合物一或多次。可以选定剂量以避免对暗适应的视觉表现的副作用(如果存在)。治疗持续至少一个月、三个月、六个月或十二个月或更长的时间段。可以按照一个月、三个月、六个月或十二个月或更长的时间间隔来测试患者以评估安全性和功效。通过检查如上文所描述的视觉表现和视网膜健康状况来测量功效。

在一个实施例中，受试者诊断为患有黄斑变性症状，并且然后施用所揭示的化合物。在另一个实施例中，受试者可以鉴定为处于发展黄斑变性的风险下(风险因素包含吸烟史、年龄、女性性别和家族史)，并且然后施用所揭示的化合物。在另一个实施例中，受试者可能双眼患有干性amd，并且然后施用所揭示的化合物。在另一个实施例中，受试者可能一只眼患有湿性amd，而另一只眼患有干性amd，并且然后施用所揭示的化合物。在又另一个实施例中，受试者可以诊断为患有斯特格病，并且然后施用所揭示的化合物。在另一个实施例中，受试者诊断为患有其病因涉及a2e和/或脂褐质积聚的其它形式的视网膜疾病的症状，并且然后施用化合物。在另一个实施例中，受试者可以鉴定为处于发展其病因涉及a2e和/或脂褐质积聚的其它形式的视网膜疾病的风险下，并且然后施用所揭示的化合物。在一些实施例中，预防性施用化合物。在一些实施例中，受试者在视网膜明显损伤之前已经诊断为患有所述疾病。举例来说，在任何眼病征象显现之前，发现受试者携带abca4的基因突变且诊断为处于斯特格病的风险下，或在受试者意识到对视觉的任何影响之前，发现受试者具有指示黄斑变性的早期黄斑变化。在一些实施例中，人类受试者可能知道他或她需要黄斑变性治疗或预防。

在一些实施例中，可以监测受试者的黄斑变性程度。可以以多种方式监测个体，如通过眼睛检查、散瞳检查、眼底检查、视敏度测试和/或活组织检查。监测可以在多个时间进行。举例来说，可以在施用化合物之后监测受试者。举例来说，监测可以在首次施用化合物之后的一天、一周、两周、一个月、两个月、六个月、一年、两年、五年或任何其它时间段进行。可以反复地监测受试者。在一些实施例中，可以更改化合物的剂量以响应监测。

在一些实施例中，可以将所揭示的方法与用于治疗或预防黄斑变性或其病因涉及a2e和/或脂褐质积聚的其它形式的视网膜疾病的其它方法如光动力疗法组合。举例来说，可以用超过一种针对一或多种疾病或病症的疗法治疗患者。举例来说，患者可能一只眼睛罹患干式amd，其用本发明的化合物治疗，而另一只眼睛罹患湿式amd，其用例如光动力疗法治疗。

在一些实施例中，可以长期施用用于治疗或预防黄斑变性或其病因涉及a2e和/或脂褐质积聚的其它形式的视网膜疾病的化合物。化合物可以每天一次、每天超过一次、一周两次、一周三次、每周一次、每两周一次、每月一次、每两月一次、半年一次、每年一次和/或每两年一次施用。

鞘氨醇1-磷酸酯是具有多种细胞功能的生物活性信号分子，其通过内质网酶鞘氨醇-1-磷酸酯裂解酶进行不可逆地降解，产生反式-2-十六烯醛和磷酸乙醇胺。已经证明，反式-2-十六烯醛通过jnk依赖性路径促使多种细胞类型中的细胞骨架重组织、脱离和细胞凋亡。参见生物化学与生物物理研究通讯2012年7月20日；424(1):18-21。这些发现和相关α,β-不饱和醛的已知化学性质使得反式-2-十六烯醛与额外的细胞组分相互作用的可能性提高。已经表明，其容易与脱氧鸟苷和dna发生反应以产生非对映异构体环状1,n(2)-脱氧鸟苷加成物3-(2-脱氧-β-d-赤式-戊呋喃糖基)-5,6,7,8-四氢-8r-羟基-6r-十三烷基嘧啶并[1,2-a]嘌呤-10(3h)酮和3-(2-脱氧-β-d-赤式-戊呋喃糖基)-5,6,7,8-四氢-8s-羟基-6s-十三烷基嘧啶并[1,2-a]嘌呤-10(3h)酮。这些发现证明，由鞘氨醇-1-磷酸酯裂解酶内源性产生的反式-2-十六烯醛与dna直接反应，从而形成具有潜在的突变诱发性后果的醛衍生的dna加成物。

琥珀酸半醛脱氢酶缺陷症(ssadhd)也称为4-羟基丁酸尿或γ-羟基丁酸尿，其是最盛行常染色体隐性遗传gaba代谢病症(金(kim)等人，2011)。其显现儿童早期中的发育延迟和张力减退和青春期和成人期中的严重表达语言能力不足和强迫症的表型。通常当一般化强直性-阵挛性癫痫尽管有时不存在和肌阵挛癫痫发生时，但癫痫症发生于一半患者中(珀尔(pearl)2014)。大于三分之二的患者在青春期和成人期显现神经精神问题(即adhd、ocd和攻击性)，可能成为残疾。存在主要抑制性神经传递质gaba和γ-羟基丁酸酯(ghb)、神经调节性单羧酸的代谢聚积(斯奈德(snead)和吉布森(gibson)2005)。另外，患者和对应的鼠类模型中都已检测到这种病症所特有的若干其它中间体。氨己烯酸(vgb；γ-乙烯基-gaba)是gaba-转氨酶的不可逆抑制剂，其是用于治疗ssadh缺陷症的逻辑选择，因为其阻断gaba转化为ghb。后果已混合，并且在所选择的患者中，治疗已经导致恶化(古德(good)2011；佩罗克(pellock)2011；埃斯卡莱拉(escalera)等人2010；卡萨拉诺(casarano)等人2011；马特恩(matern)等人1996；奥艾萨(al-essa)等人2000)。针对ssadhd的靶向疗法仍难以实现并且迄今为止干预仅为姑息性的。

5.医药学上可接受的组合物

使用可有效治疗上文所提供的病症或减轻其严重程度的任何量和任何施用途径来根据本发明方法施用化合物和组合物。所需的确切量将因受试者而异，这取决于受试者的物种、年龄和一般病况、感染的严重程度、特定试剂、其施用模式等。优选将本发明的化合物配制成单位剂型以用于施用容易性和剂量均一性。如本文所使用的表示式“单位剂型”是指适于待治疗患者的试剂的物理离散单元。然而，应理解，本发明的化合物和组合物的每日总用量将由主治医师在合理医学判断范围内决定。针对任何特定患者或有机体的特定有效剂量水平将取决于多种因素，包含所治疗的病症和病症的严重程度；所用特定化合物的活性；所用特定组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所用特定化合物的施用时间、施用途径和排泄速率；治疗持续时间；与所用特定化合物组合或同时使用的药物；和医学领域中众所周知的类似因素。

本发明的医药学上可接受的组合物可以经口、经直肠、肠胃外、脑池内、阴道内、腹膜内、局部(如通过粉剂、软膏或滴剂)、经颊、以口腔或鼻喷雾剂形式等施用到人类及其它动物，这取决于所治疗的感染的严重程度。在某些实施例中，本发明的化合物以约0.01mg/kg到约50mg/kg且优选约1mg/kg到约25mg/kg受试者体重/天的剂量水平一天一或多次经口或肠胃外施用来达到所需治疗效果。

用于经口施用的液体剂型包含但不限于医药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了活性化合物以外，液体剂型还可以含有所属领域中常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(尤其是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯以及其混合物。除惰性稀释剂之外，口服组合物还可以包含佐剂，如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。

可以根据已知技术使用合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性悬浮液。无菌可注射制剂也可以是无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如呈1,3-丁二醇中的溶液形式。可以采用的可接受媒剂和溶剂中有水、林格氏溶液(ringer'ssolution)、u.s.p.和等渗氯化钠溶液。另外，常规地采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。出于此目的，可以采用任何温和的不挥发性油，包含合成的甘油单酯或甘油二酯。另外，在可注射剂制备中使用脂肪酸，如油酸。

可注射配制物可以例如通过经由细菌截留过滤器过滤或通过纳入灭菌剂来灭菌，所述灭菌剂呈可以在使用前溶解或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中的无菌固体组合物的形式。

为了延长本发明的化合物的作用，通常需要由皮下或肌肉注射来减慢化合物吸收。这可以通过使用水溶性不良的结晶或非结晶材料的液体悬浮液来实现。化合物的吸收速率则取决于其溶解速率，溶解速率又可以取决于晶体大小和结晶形式。或者，通过将化合物溶解或悬浮于油媒剂中来实现肠胃外施用的化合物形式的延迟吸收。通过形成化合物于生物可降解聚合物(如聚丙交酯-聚乙交酯)的微胶囊基质来制备可注射贮库型制剂形式。取决于化合物与聚合物的比率和所用特定聚合物的性质，可以控制化合物的释放速率。其它生物可降解的聚合物的实例包含聚(原酸酯)和聚(酸酐)。还通过将化合物截留于与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备贮库型制剂可注射配制物。

用于直肠或阴道施用的组合物优选是栓剂，其可以通过以下方式来制备：将本发明的化合物与合适的无刺激性赋形剂或载剂混合，如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡，所述栓剂在环境温度下是固体，但在体温下是液体并且因此在直肠或阴道腔中溶解并且释放活性化合物。

用于经口施用的固体剂型包含胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在所述固体剂型中，活性化合物与以下各者混合：至少一种惰性医药学上可接受的赋形剂或载剂，如柠檬酸钠或磷酸二钙，和/或a)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；b)粘结剂，例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，如甘油；d)崩解剂，如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶解阻滞剂，如石蜡；f)吸收加速剂，如季铵化合物；g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸收剂，如高岭土和膨润土；和i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠；以及其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包括缓冲剂。

还可以采用类似类型的固体组合物作为使用如乳糖以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂的软填充和硬填充明胶胶囊中的填充剂。固体剂型片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂及颗粒剂可以制备有包衣和外壳如肠溶包衣和医药配制领域中众所周知的其它包衣。其可以任选地含有乳浊剂，并且也可以具有其在肠道某一部分中任选地以延迟方式仅释放或优先释放一或多种活性成分的组成。可以使用的包埋组合物的实例包含聚合物质和蜡。还可以采用类似类型的固体组合物作为使用如乳糖以及高分子量聚乙二醇等的赋形剂的软填充和硬填充明胶胶囊中的填充剂。

活性化合物还可以呈具有如上文所提及的一或多种赋形剂的微胶囊化形式。片剂、糖衣药丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型可以制备有包衣和外壳如肠溶衣、释放控制包衣以及医药配制技术中众所周知的其它包衣。在所述固体剂型中，活性化合物可以与至少一种惰性稀释剂如蔗糖、乳糖或淀粉混合。正常实践时，所述剂型还可以包括除惰性稀释剂以外的附加物质，例如压片润滑剂和其它压片助剂如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包括缓冲剂。其可以任选地含有乳浊剂，并且也可以具有其在肠道某一部分中任选地以延迟方式仅释放或优先释放一或多种活性成分的组成。可以使用的包埋组合物的实例包含聚合物质和蜡。

用于局部或经皮施用本发明的化合物的剂型包含软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、粉剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴片。可以在需要时，将活性组分与医药学上可接受的载剂和任何所需防腐剂或缓冲剂在无菌条件下混合。眼科配制物、滴耳剂和滴眼剂也考虑在本发明的范围内。另外，本发明考虑了使用透皮贴片，其具有使化合物受控递送到身体的的附加优点。所述剂型可以通过将化合物溶解或分配于适当介质中制得。还可以使用吸收增强剂来增加化合物穿过皮肤的通量。可以通过提供速率控制膜或通过将化合物分散于聚合物基质或凝胶中来控制速率。

本发明的化合物也可以局部施用，如直接施用到眼睛，例如以滴眼剂或眼用软膏形式。滴眼剂通常包括有效量的至少一种本发明的化合物和能够安全地施加到眼睛的载剂。举例来说，滴眼剂呈等渗溶液的形式，并且溶液的ph经调节以使得眼睛不受刺激。在许多情况下，上皮屏障干扰分子渗透到眼睛中。因此，大多数目前所用的眼用药物都补充有某种形式的渗透增强剂。这些渗透增强剂通过使大多数优良上皮细胞的紧密连接松开而起作用(伯斯坦,1985,英国眼科学会会刊104(pt4):402-9；艾什顿等人,1991,药理学与实验治疗学杂志259(2):719-24；格林等人,1971,美国眼科学杂志72(5):897-905)。最常用的渗透增强剂是苯扎氯铵(唐等人,1994,药物科学杂志83(1):85-90；伯斯坦等人,1980,眼科研究与视力学19(3):308-13)，其也用作抵抗微生物污染的防腐剂。通常添加其到0.01-0.05％的最终浓度。

在某些实施例中，本发明涉及如本文所描述的包括式i化合物的前药的组合物。如本文所使用的术语“前药”意思是可通过代谢手段(例如通过水解)体内转化成式i化合物的化合物。各种形式的前药在所属领域中已知，如论述于例如以下各项中的前药：邦加尔德(bundgaard),(编),前药设计(designofprodrugs),埃尔塞维尔(elsevier)(1985)；韦德尔(widder)等人(编),酶学方法(methodsinenzymology),第4卷,学术出版社(academicpress)(1985)；克洛格斯加德-拉森(krogsgaard-larsen)等人(编).前药的设计和应用(designandapplicationofprodrugs),药物设计和发展教科书(textbookofdrugdesignanddevelopment),第5章,113-191(1991),邦加尔德等人,药物递送评论杂志(journalofdrugdeliveryreviews),8:1-38(1992),邦加尔德,药物科学杂志(j.ofpharmaceuticalsciences),77:285及以下(1988)；和樋口(higuchi)和斯黛拉(stella)(编)新颖药物递送系统前药(prodrugsasnoveldrugdeliverysystems),美国化学学会(americanchemicalsociety)(1975)。

如本文所使用的术语“生物样品”包含但不限于细胞培养物或其提取物；从哺乳动物获得的活组织检查材料或其提取物；和血液、唾液、尿液、粪便、精液、眼泪或其它体液或其提取物。

本发明的每个方面的所有特点加以必要的变通即适用于所有其它方面。

为了可以较全面地理解本文所描述的本发明，阐述以下实例。应理解，这些实例仅用于说明性目的并且不应解释为以任何方式限制本发明。

例证

如以下实例中所描绘，在某些示例性实施例中，根据以下通用程序制备化合物。应了解，虽然通用方法描绘了本发明的某些化合物的合成，但以下通用方法和所属领域普通技术人员已知的其它方法可以适用于如本文所描述的所有化合物和这些化合物中的每一种的子类和物种。

实例1：用于式i化合物的通用反应顺序

本发明的醛捕获剂可以如通过引用并入本文中的2013年7月23日公开的美国专利申请公开us2013/0190500中所描述任选地用存在于方案1中所指示的变量位置处的化学官能基来制备，其中变量如上文和下文所定义。示例性方法进一步描述于下文中。所述方法可以根据所属领域中已知的方法来调适以用于制备本发明的示例性和其它化合物。

方案1

实例2：a-1的合成

溴化1-(3-乙氧基-2,3-二氧代丙基)吡啶-1-鎓。将乙醇(220ml)和吡啶(31g，392mmol)装入2l圆底烧瓶中，且在氮气下以中等搅动速率搅拌所得溶液。将含溴代丙酮酸乙酯(76.6g，354mmol)的缓慢、稳定物料流添加到此溶液中。允许在65±5℃搅拌反应混合物2小时。

实例3：a-2a的合成

溴化1-(6-氯-2-(乙氧羰基)喹啉-3-基)吡啶-1-鎓。在实例2中2小时搅拌时间完成后，将反应混合物缓慢冷却到18-22℃。将烧瓶抽真空-吹扫三次，此时使用长塑料漏斗将呈固体状的2-氨基-5-氯-苯甲醛(acb)(50.0g，321mmol)直接添加到反应烧瓶中。添加吡啶(64.0g，809mmol)，随后添加etoh冲洗液(10ml)并且在氮气下在80±3℃下加热反应混合物达约16小时(隔夜)，此时hplc分析指示反应有效完成。

实例4：a-3a的合成

3-氨基-6-氯喹啉-2-羧酸乙酯。将来自实例3的反应混合物冷却到约70℃，并且使用加料漏斗将吗啉(76.0g，873mmol)添加到2l反应烧瓶中。在80±2℃下加热反应混合物达约2.5小时，此时根据hplc分析，反应被视为完成(a-3a的面积％停止增加)。将反应混合物冷却到10-15℃以用于淬灭、处理和隔离。

使用加料漏斗在30-60分钟内将水(600g)装入2l反应烧瓶中，通过调整添加速率和使用冷却浴将温度保持低于15℃。在10-15℃下将反应混合物再搅拌45分钟，然后使用布氏漏斗(buchnerfunnel)通过过滤隔离出粗a-3a。每次用水(100ml×4)洗涤饼，允许在施加真空之前水渗透饼。使饼风干，得到呈几乎干燥的褐色固体状的粗a-3a。将滤返回到2l反应烧瓶中并且添加庚烷(350ml)和etoh(170ml)，并且将混合物加热到70±3℃达30-60分钟。将浆液冷却到0-5℃并且在真空下通过过滤隔离。在真空和35±3℃下在真空干燥烘箱中将a-3a干燥隔夜(16-18小时)，得到呈墨绿色固体状的a-3a。

实例5：ns2的合成

2-(3-氨基-6-氯喹啉-2-基)丙-2-醇。将氯化甲基镁(200ml含3.0m溶液的thf，600mmol)装入2l圆底烧瓶中。使用冰浴将溶液冷却到0-5℃。

将来自实例4的22.8克a-3a和thf(365ml)装入500ml烧瓶(磁力搅拌)中，搅拌以溶解，并且然后转移到2l反应烧瓶上的加料漏斗中。在5.75小时内将a-3a溶液逐滴添加到反应烧瓶中，在整个添加中将反应烧瓶温度保持在0-5℃之间。添加结束时，在0-5℃下将烧瓶内容物再搅拌15分钟，然后移去冷却浴并且在环境温度下将反应物搅拌隔夜。

在冰浴中冷却烧瓶，并且谨慎地通过向反应混合物中逐滴添加etoh(39.5g，857mmol)来淬灭反应混合物，在添加过程期间将反应混合物温度保持低于15℃。然后谨慎地添加nh4cl水溶液(含84.7gnh4cl的415ml水)，并且在适度搅动下搅拌混合物达约30分钟，然后转移到分液漏斗中以允许各层分离。固体存在于水相中，因此添加hoac(12.5g)并且轻轻地涡旋内容物，获得几乎均质的下层水相。将下部水层转移回到2l反应烧瓶中，并且在适度搅动下与2-甲基-四氢呋喃(2-methf)(50ml)一起搅拌约15分钟。需要时，使用旋转式蒸发器在≤40℃下在真空下将原始上部有机层浓缩到约40ml体积。分离分液漏斗中的各相，并且将与产物残余物组合的上部2-methf相转移到500ml烧瓶中并且真空蒸馏到约25ml体积。将2-methf(50ml)添加到此残余物中，并且再次将混合物蒸馏到约50ml体积。用2-methf(125ml)稀释粗化合物ns2溶液，冷却到5-10℃，并且缓慢添加2mh2so4(水溶液)(250ml)并且搅拌混合物30分钟，同时允许温度恢复到环境温度。装入庚烷(40ml)并且将反应混合物再搅拌15分钟，然后转移到分液漏斗中并且允许各层分离。用额外的庚烷(35ml)提取下部水性产物层，然后将下部水相转移到装备有机械搅拌器的1l反应烧瓶中，并且将混合物冷却到5-10℃。丢弃合并的有机层。制备25％naoh溶液(水溶液)(naoh47g，水200ml)并且缓慢添加到1l反应烧瓶中以使ph达到6.5-8.5的范围。

添加etoac(250ml)并且搅拌混合物隔夜。将混合物转移到分液漏斗中并且丢弃下部相。用盐水(25ml)洗涤上部有机层，然后在旋转式蒸发器上将上部有机产物层浓缩体积，获得呈深色油状的粗化合物ns2，其在几分钟内凝固。将粗化合物ns2溶解于etoac(20ml)中并且用3/1庚烷/etoac洗脱直到所有化合物ns2洗脱(需要约420ml)、通过硅胶塞(23g)过滤以除去大部分深色化合物ns2。真空除去溶剂，得到14.7g呈褐色固体状的化合物ns2。将化合物ns2溶解于etoac(25ml)中并且使用7/1庚烷/etoac到3/1庚烷/etoac(总共1400ml)的移动相梯度通过硅胶(72g)柱来洗脱。蒸发含有化合物ns2的溶剂洗脱份。用etoac(120ml)稀释化合物ns2并且在具有darcog-60脱色碳(4.0g)的烧瓶中搅拌约1小时。使用烧结漏斗使混合物通过硅藻土过滤，用etoac(3×15ml)冲洗饼。在旋转式蒸发器上蒸发合并的滤液并且在76℃下将化合物ns2溶解于庚烷(160ml)/etoac(16ml)中。使均质溶液缓慢冷却到0-5℃，保持2小时，然后通过过滤来隔离出化合物ns2。在最佳真空度下、在35℃下在真空烘箱中干燥5小时之后，获得呈白色固体状的化合物ns2。hplc纯度：100％(auc)；hplc(使用标准条件)：a-2：7.2分钟；a-3：11.6分钟。

acb的制备

在已经建立n2气氛并且使微弱的n2物流流过容器之后，将干燥的还原硫化铂(5wt％/碳)(9.04g，3.0wt％，相对于硝基基质)添加到装备有大磁性搅拌棒和热电偶的5l厚壁压力容器中。添加meoh(1.50l)、5-氯-2-硝基苯甲醛(302.1g，1.63mol)、另外的meoh(1.50l)和na2co3(2.42g，22.8mmol，0.014当量)。密封烧瓶并且开始以450rpm进行搅拌。将溶液抽真空并且用n2(35psi)再加压2次。将烧瓶抽真空并且用h2再加压到35psi。溶液温度在20分钟内达到30℃w。然后用水浴冷却溶液。将冰添加到水浴中以维持温度低于35℃。在敞开之前每2个小时通过抽真空和用n2(5psi)再加压2次来监测反应。反应进程可以依据tlc追踪：消耗5-氯-2-硝基苯甲醛(rf＝0.60，ch2cl2，uv)和中间物(rf＝0.51，ch2cl2，uv和rf＝0.14，ch2cl2，uv)，得到acb(rf＝0.43，ch2cl2，uv)。5小时时，反应已进行到98％完成(gc)，并且被视为完成。将硅藻土(约80g)添加到3l中号烧结漏斗中。用meoh(约200ml)沉降此硅藻土并且进行真空抽吸干燥。通过导管将浓缩的溶液转移到漏斗中，同时使用轻微的真空抽吸溶液通过硅藻土塞。将其用meoh(4×150ml)冲洗。溶液转移到5l三颈圆底烧瓶中。在旋转蒸发器上在30℃下在减压下除去溶剂(约2l)。施加n2覆盖层。将溶液转移到装备有机械式搅拌棒和加料漏斗的5l四颈圆底烧瓶中。在4小时内将水(2.5l)逐滴添加到剧烈搅拌的溶液中。用最小量的真空过滤浆液。用水(2×1.5l)、2-丙醇(160ml)、随后己烷(2×450ml)洗涤所收集的固体。将所收集的固体(淡黄色，粒状固体)转移到150×75再结晶盘中。然后在真空烘箱中在减压(于hg中26-28)下在40℃下将固体干燥隔夜。将acb(依据hplc，>99％)储存于n2气氛和5℃下。

实例6：体外和体内检验

ldh细胞毒性检验

将原代大鼠皮层培养物放置于培育箱中24或48小时并且用各种浓度的所揭示化合物处理。然后移出20μl培养基以用于进行如贝格迈尔(bergmeyer)等人，酶分析方法(methodsofenzymaticanalysis)，第3版(1983)中所描述的ldh检验。

测定循环细胞因子的量的elisa检验

雄性c57bi/6小鼠在其暴露于lps(20mg/kg)之前给药有所揭示的化合物30分钟。在lps暴露之后两小时，收集小鼠血液并且进行elisa以测定循环细胞因子的量。预期利用所揭示的化合物进行的治疗引起促炎性细胞因子如il-5和il-1β、il-17和tnfα减少。此外，利用所揭示的化合物进行的治疗引起抗炎性细胞因子如il-10升高。另外，如嗜酸细胞活化趋化因子、il-12、ip-10、lif、mcp-1、mig、mip和rantes的各种其它趋化因子还可以通过用所揭示的化合物治疗来减少。

评估接触性皮炎治疗功效的体内检验

为了测定所揭示的化合物治疗接触性皮炎的功效，将乙酸佛波肉豆蔻酯(“phorbolmyristateacetate，pma”)局部施加(2.5μg/20μl)到小鼠右耳廓的前部与后部(n＝10/组)。作为对照，左耳廓的前部与后部都接收20μl乙醇(pma赋形剂)。在pma施加之后六小时，测定右耳廓和左耳廓厚度。至少确定测量两次两只耳朵的相同区域，注意不包含毛发或折叠耳廓。

评估过敏性皮炎治疗功效的体内检验

为了测量所揭示的化合物治疗过敏性皮炎的功效，向小鼠的剃毛腹部施加噁唑酮(“oxl”)(1.5％，于丙酮中100μl)。七天后，测定经oxl治疗的小鼠的耳廓的厚度。然后向小鼠腹膜内施用所揭示的化合物(100mg/kg)或媒剂(如)，随后在30分钟后向右耳廓的前部与后部都局部施加oxl(1％，20μl)。作为对照，左耳廓的前部与后部都接收20μl丙酮(oxl赋形剂)。24小时后再次测量两只耳朵的耳廓的厚度。n＝10/组。

测量醛捕获率的检验

将每种所揭示的化合物(0.064mmol)、mda盐(22.7％mda，0.064mmol)和三油酸甘油酯(600mg)添加到单独的反应瓶中。将含20wt.％的pbs水溶液(～2.5ml)、随后亚油酸(600mg)添加到混合物中。在环境温度下剧烈搅拌反应混合物并且通过lc/ms监测。预期所揭示的化合物快速与mda反应以形成mda加成物。

希夫碱确认

使用uv/vis光谱法监测ral与本发明的化合物的伯胺发生的希夫碱缩合反应。对所揭示的化合物与ral的希夫碱缩合产物进行体内分析。

在溶液相分析中，测量自由化合物和ral希夫碱缩合产物(ral-sbc)的λmax值以及ral-sbc的τ值。如本文所使用的“ral-sbc”意思是ral与ral化合物的希夫碱缩合产物。使用100:1化合物与ral的混合物使用所属领域中已知的方案进行溶液相分析。测试若干种溶剂系统，包含水溶液、乙醇、辛醇和三氯甲烷:甲醇(各种各样，例如2:1)。测量溶液动力学且发现其高度依赖于溶剂条件。

还使用1:1化合物与ral的混合物对希夫碱缩合反应进行固相分析。使用所属领域中已知的方案进行固相分析。在氮气下干燥混合物并且缩合反应进行到完成。

使用所属领域中已知的方案进行脂质相分析并且测量λmax、τ(ral-sbc对ape/a2pe)和竞争性抑制。脂质体条件更接近原位条件。

暗适应(体内)的erg分析

暗适应是曝露于光之后的视觉敏感性的恢复。暗适应具有多个部分，包含快速(神经元)过程和缓慢(光化学)过程。视觉色素的再生涉及缓慢光化学过程。夜盲归因于暗适应丧失(视觉光敏度损失)。有可能通过在施用药物之后测量暗适应的视觉光敏度来评估药物对夜视的潜在作用。

使用视网膜电图(erg)测量正常条件相对于药物条件下的暗适应。erg是视网膜神经元在其对实验上所定义的光刺激物作出反应期间所发出的场势的测量。更具体地说，erg测量了闪光(例如50ms)之后的角膜处的视网膜场势。场强是102到103微伏，其来源于视网膜细胞。

erg是无创测量，其可以针对活的受试者(人类或动物)或从活动物中手术移出的溶液中的半切眼进行。erg需要减慢暗适应的全身麻醉并且必须按照实验设计计算。

在暗适应实验的典型erg分析中，使每只大鼠暗适应数小时以达到一致的光敏状态。然后对大鼠进行“光漂白”，即短暂曝露于足以使瞬时耗乏具有自由11-顺式-ral的视网膜(例如在300lux下2分钟)的强光。然后立即使大鼠返回到黑暗中以开始暗适应，即光敏度因视觉色素再生而恢复。使用erg测量大鼠多快适应黑暗和恢复光敏度。具体地说，针对光敏度定义标准反应变量。

在事先通过动力学分析所测定的漂白后暗恢复的特定持续时间(例如30分钟)之后，进行erg测量。使用曲线拟合法计算敏感性变量值并且显示同一个大鼠在麻醉情况下的恢复，包含针对y50和σ的暗适应动力学。光敏度越弱，观察到的适应就越慢，其中y50达到-4.0并且τ＝22.6分钟。光敏度越强，观察到的适应越快，其中y50达到-5.5并且τ＝9.2分钟。

遵循如上文所描述的相同范例以用于剂量测距。在erg剂量测距方案中，腹膜内施用的化合物以剂量依赖性方式降低暗适应的大鼠的光敏度。3小时之后，对视觉的影响降低。

ral反应的nmr分析

使用nmr光谱法监测ral与本发明的化合物的伯胺发生的希夫碱缩合反应和环形成。

a2e形成的抑制

在黄斑变性的体内模型中测试ns2减少毒性眼部醛代谢物(a2e)形成的能力。abcr^-/-基因剔除小鼠不表达功能性abca4，其是将毒性全-反式-视黄醛(ral)代谢物a2e输送出盘内腔到圆盘的细胞质侧的atp结合盒蛋白质，其中ral可以通过全-反式-视黄醛脱氢酶转化成全-反式-视黄醇。此实验设计成建立概念验证，即ral捕获化合物的长期腹膜内施用降低b6:129svev-abcr(abcr-/-)小鼠中的a2e的积聚速率。

材料和方法：

对b6:129svev-abcr(abcr-/-)小鼠执行研究。治疗组包含24只小鼠(雄性和雌性)/治疗条件。每只动物利用以下条件中的一种进行治疗：

·对照组：在动物模型中体外和体内临床上已知用以调变人类视网膜功能并且实验上已知用以与自由ral形成希夫碱加成物的市售化合物。

·媒剂

·化合物

·未处理

所揭示的化合物以10mg/kg进行测试。通过腹膜内注射来每日施用利用化合物进行的治疗达8周。

abcr^-/-基因剔除小鼠每日接收ns2(10mg/kg，ip)或媒剂对照(20％sbecd)达56天。第三组动物充当未处理对照物并且在研究的第1天处死。与经媒剂治疗的对照物(资料未显示)相比，达56天的10mg/kgns2的每日ip施用使a2e形成减少71％(p＝0.011)。ns2和媒剂都具有良好的耐受性。

结果暗示ns2能够通过捕获ral来减轻a2e形成，这表明ns2有效治疗其中醛起作用的视网膜疾病。

化学：

实验使用各种化学操作。举例来说，这些实验使用具有分析说明书以表征杂质的市售化合物。也合成化合物。化合物配制物适用于腹膜内(腹膜内)注射。

生物学和生物化学：

本文所描述的实验使用各种生物学和生物化学操作。必要时，可以例如在兔子中用眼部刺激方案建立配制成用于与滴眼剂或其它形成物一起进行治疗的无毒剂量的本发明的化合物。或者，如果初始细胞内分析显示细胞毒性，则降低化合物剂量以避免曝露于细胞毒性量。光反应的特征在于erg(翁(weng)等人,细胞(cell)98:13,1999)。使用分析方法如卡兰(karan)等人,2005；那杜(radu)等人,2003；和帕里什(parish)等人,美国科学院院报(pnas)95:14609,1998所描述的分析方法测量视网膜rpe细胞提取物的细胞内a2e浓度。

用光学显微镜组织学技术评估视网膜和rpe组织的形态(卡兰等人2005，不同之处在于本文所描述的实验中不使用电子显微镜)。

实例7：针对来自解离海马体培养物中的过氧化氢毒性的保护性活性的剂量反应评估

测试试剂

测试试剂购自商业供应商或如本文所描述并且使用所属领域中已知的方法来制备。

配制物和储备溶液制备

测试试剂是以两种配制物制备的：二甲亚砜(dmso)或

设计成检测来自过氧化氢相关氧化应激的测试化合物介导神经保护的培养条件

如先前所描述制备大鼠海马体培养物(布莱曼de(brennemande)，史密斯gr(smithgr)，张y(zhangy)，杜y(duy)，康达维提sk(kondaveetisk)，杂迪拉mj(zdillamj)，雷兹ab(reitzab)(2012)，分子神经科学杂志(j.molecularneuroscience)，47:368-379)。在这些条件下，培养物是至少90％神经元。最丰富的非神经元细胞是星形胶质细胞。

在96孔板中以10,000个细胞/孔的密度铺板培养物。在e18海马体组织解离之后的第10天与第21天之间处理培养物。在用测试化合物或大麻二酚(cbd)对照化合物治疗之后约10分钟，将过氧化氢添加到培养物中。每治疗条件存在五个复制品。

在b27/神经基底中铺板培养物。处理当天，所有培养物的培养基均完全更换成不具有抗氧化剂的b27/神经基础培养基。

如此前所确定(布莱曼等人，2012)，使用10μm过氧化氢产生毒性和氧化应激。已经在钾盐镁矾诱发的癫痫持续状态模型中的大鼠海马体中观察此过氧化氢浓度[贾勒特sg(jarrett,sg),梁l-p(liang,l-p),海涅尔jl(hellier,jl),斯塔雷kj(staley,kj)和帕特尔m.(patel,m.)(2008)疾病神经生物学(neurobiol.dis)30(1):130-138]。

用于所有研究的阳性对照物是10μm大麻二酚(cbd)，已经显示其防止发生原代神经元中的氧化应激[布莱曼de,派特康纳d(petkanas,d)和金尼w.a.(kinney,w.a.)(2014)大麻素年度会议(annualsymposiumonthecannabinoids),第129页]。

阴性对照孔、过氧化氢孔、阳性对照孔都不含有任何药物媒剂。

检验

在相同孔中同时进行两项检验。

1.神经元生存力检验：cfda(二乙酸羧基荧光素)染料由所有活细胞吸收并且由质膜的内部页状结构中的酯酶裂解，将荧光素释放到细胞溶质中。活神经元无法挤压此染料，然而从非神经元细胞的染料流出可以随时间推移而发生，因此检验仅专门检测神经元。在荧光计中读取培养物并且细胞内染料强度与活神经元群体成比例。原始参考文献：派特罗斯基re(petroski,re)和杰勒hm(gellerhm)，(1994)，用二乙酸5(6)-羧基荧光素(cfda)对星形胶质细胞单层上的胚胎神经元培养物进行选择性标记(selectivelabelingofembryonicneuronsculturesonastrocytemonolayerswith5(6)-carboxyfluoresceindiacetate(cfda))，神经科学方法杂志(j.neurosci.methods)52:23.32。

2.细胞死亡检验：从活细胞中排除碘化丙锭，但可以获取死细胞并且与dna结合。所述检验检测坏死和凋亡细胞死亡；其无法区分神经元细胞死亡与非神经元细胞死亡。参见萨拉芬ta(sarafianta)，库尤简s(kouyoumjians)，塔西金d(tashkind)，罗斯md(rothmd)，(2002)，毒理学快报(tox.letters)133:171-179。

3.数据分析

a.针对这些测试化合物中的每个计算ec50值(产生50％最大有效反应的配体浓度)。

b.通过用多重比较对对照组(霍林丝达克(holm-sidak))方法进行方差分析来统计学上分析所有数据。获得p<0.05等级的统计显著性。在所有情况下，都与阴性对照(10μm过氧化氢处理)进行比较。

实例8：关于醛加成物形成、4-hne消耗和随时间推移的平衡的检验结果

检查五种化合物：

2-(3-氨基喹啉-2-基)丙-2-醇(i-1)

2-(3-氨基-5-氯喹啉-2基)丙-2-醇(i-2)

2-(3-氨基-7-氯喹啉-2-基)丙-2-醇(i-3)

2-(3-氨基-8-氯喹啉-2-基)丙-2-醇(i-4)

2-(3-氨基-6-溴喹啉-2-基)丙-2-醇(i-5)

还检查ns2以便比较。

图1显示对于ns2和示例性化合物i-1、i-2、i-3、i-4和i-5在23小时时间周期内的醛加成物的形成速率。发现所有样品都结合(产物hplc峰值随时间推移积极增加)，但是一个样品的结合不如其它样品好。无法断定这是否是不良解离(从环糊精中)或与醛发生不良相互作用的结果。此期间的最佳拟合线与数据达到极佳的拟合。产物峰值增加速率可以用作结合动力学的近似值；然而，其不能提供任何方式将解离(从环糊精中)动力学与结合动力学分开。其可以用于对所检查的每个样品包含ns2进行相对排序。首先评估7小时时间窗内的数据。由此得到以下从最有效到最小有效的排序：

当时窗延长到23小时时，获得类似的结果。然而，化合物中的两种在此情形下产生较低的r.sq.值。

一种可能的解释是，两种动力学分量(解离和结合)不再平衡并且一种是决定因素。后续实验在60-70次注射期间密切地追踪一种样品以确定斜率变化发生之处(这潜在地得到将解离动力学分量和结合动力学分量分开的切入点)。

图2显示用于ns2和其它示例性化合物的随时间推移(23小时形成时间段)的4-hne的消耗。6个样品中有五个显示4-hne的消耗。使用本发明的方法，一个样品(2-(3-氨基喹啉-2-基)丙-2-醇)与4-hnehplc峰重叠。此期间的最佳拟合线与数据的拟合比产物形成数据更差。4-hne消耗速率可以用作结合动力学的近似值。如前所述，数据不提供任何方式将解离(从环糊精中)动力学与结合动力学分开。使用数据对所检查的样品中的每个进行相对排序，所述样品包含ns2但不包含2-(3-氨基喹啉-2-基)丙-2-醇。在前7小时期间，数据产生以下从最有效到最小有效(在254nm下分析)的排序：

23小时时的分析提供以下从最有效到最小有效的排序：

注意，粗体数字之间的差异极小(梯度数字取整为所示值)。

下表概括了上述数据：

表2

排序1-4的样品之间的差异小，基本上相同

图3显示对于ns2和本发明的示例性化合物在一周时间周期内的醛加成物的形成速率以测量化合物是否达到平衡。在此时间周期期间，5个样品中有3个达到了平衡。

图4显示对于ns2和本发明的示例性化合物在一周时间周期内的4-hne的消耗以测量化合物在此时间周期期间是否达到平衡。样品似乎达到平衡，并且hne量持续减少的原因可能是存在另一种降解路径。这是因为至少对于2-(3-氨基-8-氯喹啉-2-基)丙-2-醇和2-(3-氨基-7-氯喹啉-2-基)丙-2-醇而言，hne的减少大于对应的加成物增加(图3中所示)。

实例9：离体ssadh研究

方法：

在出生之后三天半(3.5天)，将b6.129-aldh5a1^tm1kmg/j(ssadh无效)小鼠和野生型(wt)同窝出生仔畜动物处死并且收获脑部。将脑部切片成约0.5mm矢状面部分，并且在100μg/ml化合物1(ns2)、化合物2(i-1)或媒剂中培育24小时。随后通过hplc来分析脑部切片和培育培养基(sup)的ghb和gaba含量。

结果：

ns2对ssadh无效小鼠的脑部切片中的所测量gaba和ghb含量的作用显示于图5中。i-1对ssadh无效小鼠的脑部切片中的所测量gaba和ghb含量的作用显示于图6中。与对照物相比，每种化合物降低gaba和ghb。如上所述，在ssadhd患者中，存在gaba和ghb的积聚。因此，i-1和相关化合物减少此疾病模型中的gaba和ghb的能力表明治疗人类中的ssadhd的潜能。

实例10：利用示例性化合物进行的4-hne加成物的形成

测量示例性化合物与4-hne反应并且形成对应加成物的能力。通过在254nm下的hplc分析所有化合物在反应之前其的纯度。

用一当量4-hne和2当量ns2类似物进行反应。随时间推移绘制每个加成物的曲线下面积(auc)。

图7显示ns2的检验结果。检验执行两次，并且在不同日子进行测量。ns2形成对应的具有4-hne的加成物。两个结果彼此类似并且足够接近在针对hplc仪器的测量误差内。

图8显示i-1的检验结果。检验执行两次，并且在不同日子进行测量。i-1形成对应的具有4-hne的加成物。两个结果彼此类似并且足够接近在针对hplc仪器的测量误差内。