本发明涉及一种中药组合物的制备方法及其应用。
背景技术：
：：溃疡病分为胃溃疡及十二指肠溃疡，在临床上极为常见。据统计，有10％的人一生中患过此病。胃酸和胃蛋白酶是形成为溃疡的主要致病原因之一。由于胃所处的特殊强酸环境，胃溃疡本身不易修复。现代医学多用抗酸药、受体阻断剂、黏膜保护剂以及抗幽门螺旋杆菌药等来治疗，但上述疗法存在如下问题：抗酸药(如碳酸氢钠、氢氧化铝等)仅能物理消除胃酸；受体阻断剂(如西咪替丁、奥美拉唑等)能抑制胃酸的分泌，但无法对已经形成的溃疡进行有效的修复；黏膜保护剂(如硫糖铝)对胃黏膜进行保护，但已经形成溃疡的黏膜无法进行保护；利用抗幽门螺旋杆菌药，近来研究表明胃炎和胃十二指溃疡与幽门螺杆菌的感染有很大关系，现阶段多用“三联疗法”或“四联疗法”进行治疗，但随着抗生素的滥用，其耐药性逐渐产生，有效率逐渐降低。另外，脱发是指头发脱落的现象，属于正常现象，但随着社会压力的增加生活环境的改变，病理性脱发越来越严重，已经严重干扰了现代人的正常的生活和社交。脱发的的原因有很多，激素及内分泌的改变、感染、毛囊影响不良等均能引起病理性脱发。现代治疗脱发还没有完善的方法，多数以食疗及物理治疗为主。在学位论文“郝平生.复方黄柏液联合萆薢渗湿汤对脂溢性脱发(脾胃湿热证)头皮油脂分泌的影响[d].成都：成都中医药大学,2015：11-19”中介绍了一种中药缓解脂溢性脱发症状的治疗方案，但从其实验结果可以看出，其本身对脱发并没有良好的治疗效果。因此后续对此此种治疗方法鲜有报道。技术实现要素：：本发明的目的就是针对现有技术存在的上述缺点，提供了一种中药组合物的制备方法及其应用，制备过程简便，有效率高，解决了现有技术中存在的问题。本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是：一种中药组合物的制备方法，包括如下步骤：s1、将如下重量份数原料：20-60份黄柏、20-60份金银花、20-60份蒲公英、50-100份连翘、1-10份蜈蚣，加水煎煮，然后过滤取过滤液；s2、将过滤液蒸发浓缩，直至相对密度不低于1.05，得到清膏；s3、向清膏中加入乙醇，加入乙醇的质量是清膏质量的1.5-4倍，静置过滤，滤液浓缩至干，得最终产物。优选的，在s1中，还包括0-10份的黄连、0-10份的黄芩、0-10份的丹参、0-10份的地龙、0-10份的白及、0-10份的地丁、0-10份的美洲大蠊。优选的，在s2中，清膏的相对密度为1.05-1.2。优选的，在s2中，清膏的相对密度为1.1-1.15。优选的，最终产物中的盐酸小檗碱含量不低于0.1wt％，连翘苷含量不低于0.6wt％。采用本发明的生产方法,能够保证上述两种有效的组份的含量,从而使得本发明对应产品在各项应用中的有效性。优选的，在s3后还包括如下步骤：s4、制剂：甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、蔗糖、纤维素、碳酸镁中的一种或多种，将所述最终产物制成胶囊剂或片剂或颗粒剂或口服液或丸剂。最终产物加入硬脂酸镁，装入胶囊壳，可制成胶囊剂；最终产物加赋形剂淀粉及硬脂酸镁，压片，得片剂；最终产物可加入蔗糖，制粒，得颗粒剂；最终产物加乳糖及矫味剂，加水稀释，得口服液；最终产物泛丸，包衣，得丸剂。上述剂型适于食用，在胃溃疡治疗中可直接作用于病患处。优选的，在s1中，加水煎煮2-5次，然后合并煎液后过滤。优选的，加水煎煮3次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟。优选的，在s3中，静置不少于24h。中药组合物在制备治疗胃溃疡药物中的应用。中药组合物在制备治疗脱发产品中的应用。与现有技术相比，本发明的优点是：通过煎煮后乙醇处理得到较高浓度的有效组分。在胃溃疡的相关应用中：选择黄柏、金银花、蒲公英、连翘、蜈蚣作为主药的同时，加入一些能够养胃的辅药，从而促进胃溃疡的自我修复；最终产物具有一定的止痛、抑制溃疡以及根除幽门螺旋杆菌的作用。在脱发的相关应用中：最终产物能营养毛囊，增强头部的特异性免疫力，消除炎症，调节头部激素水平，从而达到治疗脱发的作用。具体实施方式：为能清楚说明本方案的技术特点，下面通过具体实施方式，对本发明进行详细阐述。一、中药组合物制备：制备实施例1：黄柏45g、金银花45g、蒲公英40g、连翘60g、蜈蚣2g、黄连5g、黄芩40g、丹参5g、地龙2g、白及5g、地丁2g、美洲大蠊5g。(1)上述中药混合加水煎煮3次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过。(2)上述滤过液浓缩至相对密度1.10(50℃)的清膏。(3)向清膏中加入乙醇，加入乙醇的质量是清膏质量的2.3倍，静置24小时，滤过，滤液浓缩至干，即得深红棕色固体，检测得到盐酸小檗碱含量为0.16wt％，连翘苷含量为0.72wt％。得到组合物1。制备实施例2：黄柏45g、金银花45g、蒲公英40g、连翘60g、蜈蚣2g。(1)上述中药混合加水煎煮3次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，合并煎液，滤过。(2)上述滤过液浓缩至相对密度1.10(50℃)的清膏。(3)向清膏中加入乙醇，加入乙醇的质量是清膏质量的2.3倍，静置24小时，滤过，滤液浓缩至干，即得深红棕色固体，检测得到盐酸小檗碱含量为0.22wt％，连翘苷含量为1.12wt％。得到组合物2。制备实施例3：黄柏20g、金银花20g、蒲公英20g、连翘50g、蜈蚣1g。(1)上述中药混合加水煎煮5次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，第四次30分钟，第五次30分钟，合并煎液，滤过。(2)上述滤过液浓缩至相对密度为1.05(50℃)的清膏。(3)向清膏中加入乙醇，加入乙醇的质量是清膏质量的4倍，静置24小时，滤过，滤液浓缩至干，即得深红棕色固体，检测得到盐酸小檗碱含量为0.20wt％，连翘苷含量为1.34wt％。得到组合物3。制备实施例4：黄柏60g、金银花60g、蒲公英60g、连翘100g、蜈蚣10g、黄连10g、黄芩50g、丹参10g、地龙10g、白及10g、地丁10g、美洲大蠊10g。(1)上述中药混合加水煎煮5次，第一次1小时，第二次45分钟，第三次30分钟，第四次30分钟，第五次30分钟，合并煎液，滤过。(2)上述滤过液浓缩至相对密度为1.2(50℃)的清膏。(3)向清膏中加入乙醇，加入乙醇的质量是清膏质量的1.5倍，静置24小时，滤过，滤液浓缩至干，即得深红棕色固体，检测得到盐酸小檗碱含量为0.10wt％，连翘苷含量为0.60wt％。得到组合物4。制备实施例5：黄柏60g、金银花60g、蒲公英60g、连翘100g、蜈蚣10g。(1)上述中药混合加水煎煮2次，第一次1小时，第二次45分钟，合并煎液，滤过。(2)上述滤过液浓缩至相对密度为1.15(50℃)的清膏。(3)向清膏中加入乙醇，加入乙醇的质量是清膏质量的1.5倍，静置24小时，滤过，滤液浓缩至干，即得深红棕色固体，检测得到盐酸小檗碱含量为0.25wt％，连翘苷含量为1.15wt％。得到组合物5。二、成分检测方法说明：1、连翘苷的测定(高效液相色谱法测定)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(25:75)为流动相；检测波长为278nm。理论板数按连翘苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备：取连翘苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含0.lmg的溶液，即得。供试品溶液的制备：精密量取本品0.5g,置100ml量瓶中，加甲醇至刻度,摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul,注入液相色谱仪,测定，即得。2、盐酸小檗碱的测定(高效液相色谱法测定)色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.033mol/磷酸二氢钾溶液(35:65)为流动相；检测波长为347nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含8ug的溶液，即得。供试品溶液的制备：精密量取本品0.3g，置100ml量瓶中，加甲醇50ml，置60℃水浴中保温15分钟，取出，超声处理(功率500w,频率40khz)30分钟，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定：分别精密取对照品溶液与供试品溶液各loul，注入液相色谱仪,测定，即得。三、胃溃疡相关的动物及临床实验：(1)体外促愈实验：吸取适量组合物1-5，分别依次将样品用含2％胎牛血清的1640培养液做10、40、160倍梯度稀释，至4℃冰箱备用。3t3细胞悬液加入离心管并滴加10倍以上培养液，混匀；离心，弃去上清液，加入10％小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养液，37℃培养；待长成单层后，用0.25％胰酶消化，1：2传代，细胞长成单层时用于实验。将细胞密度为1*105个/ml的3t3细胞悬液接种在96孔板，每孔100ul，四周加入等体积的无菌蒸馏水，37℃培养箱培养18小时后，弃去培养液用1000ul枪头在中央垂直划一均匀裂痕，pbs缓冲液洗涤划落的细胞碎片，实验分为四组，即正常细胞组、高浓度药物组、中浓度药物组、低浓度药物组，正常对照含2％胎牛血清的1640培养基进行培养，每组均加样100ul，每组设6个复孔，分别在划痕后0h、10h、20h、30h、40h在显微镜下观察并拍照。结果：组合物溶液在10、40、160倍稀释作用于成纤维细胞，观察高中低浓度细胞均发生明显的迁移，表明：组合物具有显著的促进成纤维细胞迁移的作用，能加快创面的愈合。(2)组合物镇痛实验：1.1样品组合物1，稀释至1g/100ml，得样品1。组合物2，稀释至1g/100ml，得样品2。1.2试验动物及分组昆明种小鼠，18-22g，济南朋悦实验动物繁育有限公司。小鼠随机分为3组：对照组，样品1组(采用样品1)，样品2组(采用样品2)。每组5只小鼠。1.3剂量将动物给药剂量设定为样品1剂量10ml/kg，样品2剂量10ml/kg，各组按照规定剂量灌胃给药，模型组灌胃等量的生理盐水。1.4仪器与试剂醋酸，莱阳经济技术开发区精细化工厂；生理盐水，山东齐都药业有限公司；电子台秤，德国赛多赛斯，型号：te412-l；1ml注射器，江西科伦医疗器械制造有限公司；秒表，小鼠灌胃针(9号)。1.5试验方法各组小鼠给予相应药物，每天上午9：00-10：00，下午3：00-4：00各给药2次，连续3天，末次给药30min后，腹腔注射0.8％醋酸(0.1ml/10g)，观察各组小鼠注射醋酸15min后小鼠扭动次数。2试验结果与对照组相比，样品1组和样品2组小鼠扭动次数明显减少，统计学差异显著。对小鼠扭体次数的影响(x±s)注：与对照组相比*p<0.053结论中药组合物具有镇痛作用。(3)组合物对乙酸烧灼型慢性胃溃疡的研究：用10％醋酸铵0.05ml/只刺于浆膜下0.4-0.5mm的方法制备胃溃疡模型。大鼠随机分为造模组和生理盐水组，造模组随机分为乙酸模型组、组合物1组(采用组合物1)、组合物2组(采用组合物2)、组合物3组(采用组合物3)、组合物4组(采用组合物4)、组合物5组(采用组合物5)、奥美拉唑组、铝碳酸镁组。术后2日，生理盐水组给予2ml.100g-1.d-1生理盐水，组合物1-5组分别对应给予2ml.100g-1.d-1组合物1-5的组合物液(按照镇痛试验中的方法进行制备)，奥美拉唑2ml.100g-1.d-1奥美拉唑溶液，铝碳酸镁组给予0.5g.100g-1.d-1的铝碳酸镁粉末。1次/d，连续灌胃12d。末日给药后，开始禁食1夜，给药第13天处死动物，摘取全胃，将胃展开，在相应的位置观察黏膜面溃疡形成情况，以游标卡尺测定溃疡最大长径与垂直最大长径的最大宽度，10％甲醛浸泡24h，分别计算溃疡指数及溃疡抑制率。结果表明：模型组的溃疡指数与生理盐水组比较有非常高的显著差异(p＜0.001)；各给药组的溃疡指数与模型组比较，组合物1-5组有显著差异(p＜0.05)，奥美拉唑组、铝碳酸镁组的溃疡指数均有下降的趋势，组合物1-5组明显优于奥美拉唑组和铝碳酸镁组。(4)组合物联合“三联疗法”治疗幽门螺旋杆菌引起的胃溃疡临床观察西医目前根治hp主要有三联疗法、四联疗法和贯续疗法等数种治疗方案，其中三联疗法应用最为广泛，尽管西药标准三联疗法的清除率可达到80％，但在现有抗生素滥用的背景下，根除幽门螺旋杆菌方案的耐药性、不良反应、复发率高、患者依从性差等问题逐渐突出，其中以耐药性问题最为严重。本实验采用随机对照临床实验设计，a组为对照组，给予奥美拉唑20mg、阿莫西林1.0mg、克拉霉素0.5mg，每日两次(bid)，持续10天。b、c组为实验组，分别给予同对照组西药10天+组合物2ml，2周(bid)，同对照组西药10天+组合物2ml，4周(bid)。每组样本20例，共60例。结果：辩证应用组合物口服液联合三联疗法的hp根除率明显高于单独西药组，小组间统计分析，提示无统计学差异(p＞0.05)；对治疗组治疗前后的pro量进行统计发现，组合物组积分变化较西药组变化明显(p小于0.05)，组合物组间无明显差异，说明中药组患者自评症状改善较西药组更明显；统计各组间不良反应，两者存在明显的差异(p＜0.05)，说明组合物组在改善降低药物不良反应事件方面更具优势。结论：中药组合物联合三联疗法根除幽门螺旋杆菌率明显高于单独西药标准三联疗法，并可以有效改善患者症状，明显减少药物不良反应。四、脱发相关实验：一般资料：皮肤科门诊患者，年龄16-60岁，排除早秃、放化疗及药物过敏引起的脱发患者，患者共计180人，治疗组150人，对照组30人。治疗方案：治疗组均分为5组，每组30人；治疗组1患者，洗头后，外用组合物1加20-70倍水稀释，用软毛刷或药棉沾满药液擦拭患处，用手按摩至有轻微热感，3次/d，60d为一个疗程，连续治疗3个疗程；治疗组2患者，洗头后，外用组合物2加20-70倍水稀释，用软毛刷或药棉沾满药液擦拭患处，用手按摩至有轻微热感，3次/d，60d为一个疗程，连续治疗3个疗程；治疗组3患者，洗头后，外用组合物3加20-70倍水稀释，用软毛刷或药棉沾满药液擦拭患处，用手按摩至有轻微热感，3次/d，60d为一个疗程，连续治疗3个疗程；治疗组4患者，洗头后，外用组合物4加20-70倍水稀释，用软毛刷或药棉沾满药液擦拭患处，用手按摩至有轻微热感，3次/d，60d为一个疗程，连续治疗3个疗程；治疗组5患者，洗头后，外用组合物5加20-70倍水稀释，用软毛刷或药棉沾满药液擦拭患处，用手按摩至有轻微热感，3次/d，60d为一个疗程，连续治疗3个疗程；对照组患者外用3％的米诺地尔生发水，60d为一个疗程，连续治疗3个疗程。判断标准：治愈：脱发区有终毛生长，外观恢复正常，脱发区头发不松动，不再掉落；显效：脱发区普遍有毳毛生长，终毛覆盖区超过脱发区1/2,脱发区头发不松动，不再掉落；有效：脱发区普遍有毳毛生长，无终毛或终毛不达1/2,脱发明显减少；无效：脱发区没有或仅有少量毳毛生长,毛发继续脱落。具体的临床结果如下：组别例数治愈显效有效无效治疗组13018552治疗组23020640治疗组33021432治疗组43019533治疗组53019353对照组308868结果表明：组合物1-5直接涂抹用于治疗脱发，效果优于对照组，说明本方法制备的产品可用于脱发的治疗，由于使用策略上的改进，克服了
背景技术：
中所述的学位论文带来的技术偏见。上述具体实施方式不能作为对本发明保护范围的限制，对于本
技术领域：
的技术人员来说，对本发明实施方式所做出的任何替代改进或变换均落在本发明的保护范围内。本发明未详述之处，均为本
技术领域：
技术人员的公知技术。当前第1页12