本发明涉及黄精提取技术领域，具体尤其涉及一种黄精多糖的提取方法。
背景技术：
黄精(学名：polygonatumsibiricum)，又名：鸡头黄精、黄鸡菜、笔管菜、爪子参、老虎姜、鸡爪参。为被子植物门、单子叶植物纲、百合目、百合科、黄精属植物。根茎横走，圆柱状，结节膨大。叶轮生，无柄。药用植物，具有补脾，润肺生津的作用。主要有效部位为干燥根茎，性味甘、平，归脾、肺、肾经，具有补气养阴、健脾、润肺、益肾之功效，除此之外黄精还具有调节血糖、血脂，增强人体免疫力，抗疲劳和抗衰老的作用。主要产自黑龙江、吉林、辽宁、河北、山西、陕西、内蒙古、宁夏、甘肃(东部)、河南、山东、安徽(东部)、浙江(西北部)。生林下、灌丛或山坡阴处，海拔800-2800米。朝鲜、蒙古和苏联西伯利亚东部地区也有。现代药理学研究表明其活性成分主要为黄精多糖(polygonatumsibiticumpolysaccharides。psp)，黄精多糖与其他多糖一样具有抗肿瘤、抗衰老、免疫调节以及抗氧化损伤等作用，并且黄精中的多糖含量普遍在10％以上，因此黄精多糖的提取工艺研究对黄精的开发利用具有重要意义。
黄精是中国传统的中药，属于药食同源性中草药。黄精作为一种传统名贵中药，具有宽中益气、益肾填精、滋阴润肺、生津补脾之功效嘲，植物多糖的提取方法有很多种，包括溶剂酸提法、提取法、碱提法、超滤法、酶解法、超滤法等，黄精多糖也是植物多糖中的一种，根据其溶解性等其它特性，目前用于提取黄精多糖的提取方法主要包括热水提取、醇析分离，辅助提取方法有微波辅助提取、超声波提取等，但是提取率不高，而且提取步骤复杂，提取的多糖纯度不高，而且多次高温分离，造成多糖的有效性大大降低。
现有禽类散剂存在制剂粗放，投药量大，成本高的问题，新型制剂虽给药方便，但也存在提取效率较低、生产成本较高、质量控制难度较大的问题，所以禽类制剂急需一种方便使用、成本低、药效高的新型禽类制剂。
技术实现要素：
为此，本发明提出一种黄精多糖提取物及其提取方法和用途，提高多糖的提取率，提高多糖的有效性，降低现有方法对多糖的破坏，简化操作步骤，能显著增强禽类的内稳态平衡，增强机体的解毒能力，消除毒素影响，提高机体的抗氧化防衰老能力。
本发明通过如下手段实现：
一种黄精多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)将生黄精清洗干净并晒干，晒干后切片粉碎，粉碎粒径为6-15微米，然后加入黄精：纯水质量比为1:28-32的纯水中，并加入纤维素酶、蛋白酶，并加热至48-52℃，经功率为60-80w的超声波酶解10-15min；
(2)经上述处理的黄精溶液冷却后经振筛装置过滤，过滤孔径为1-3微米，然后将经过上述过滤的滤液经陶瓷膜、反渗透膜进行超滤，得到黄精粗提物浓缩液；
(3)将所得到的黄精粗提物浓缩液加入3-6倍于其重量的80-90％的乙醇进行脱脂，回收乙醇，进一步得到黄精浓缩液；
(4)向上述黄精浓缩液加入其2-4倍体积的去离子水，并加入0.6％的活性炭进行脱色，活性炭吸附时温度控制在52-54℃，控制时间8-10min，脱色次数2-4次；
(5)将脱色后的黄精浓缩液经高压浓缩泵输送到真空干燥箱内，真空度为100-200pa，并经微波发生器辐射待干燥黄精浓缩液，干燥得初步黄精干燥粉；
(6)将上述黄精干燥粉加入去离子水与其重量比为30:1的去离子水中，加热至70-80℃，加热时间2-2.5h，然后将经上述处理后的提取液经生物膜过滤，得到黄精纯净液，然后采用常规方法对黄精纯净液提纯并干燥，得到黄精多糖粉末。
本发明申请方法获得的黄精多糖粉末为白色粉末状，其多糖含量为96.5-99.3％。
本发明申请方法获得的初步黄精干燥粉为白色粉末状，其多糖含量为92.9-95.7％，其中采用步骤(6)最大多糖含量提升3.8％，平均提升率3.6％.
所述纤维素酶、蛋白酶的比例为1:1，纤维素酶、蛋白酶的总添加量为0.9％。
下述重量配比的物料在制备提高禽类免疫力和解毒能力的药物中的用途：多糖含量为96.5-99.3％黄精多糖12份，甘草10份，黄莲9份，白术9份。
所述药物为多糖含量为96.5-99.3％黄精多糖与采用水或有机溶剂提取物提取甘草、黄莲、白术活性成分，并配以符合国家中药药食同源标准的辅料或辅助成分制备而成药剂。
所述药剂是膏状、颗粒剂、散剂。
本发明的有益效果是：本发明所述方法对多糖提取效率高，提取的纯度高，可以得到多糖含量为92.9-95.7％的黄精干燥粉，可以得到多糖含量为96.5-99.3％的白色粉末状黄精多糖粉末，提取过程中对多糖进行低温提取，并经酶及超声进行提取，黄精能够得到充分有效利用并提取，且经真空干燥，干燥均匀，消毒、杀菌，并进一步经去离子水提纯，使得黄精多糖内有效物质进一步释放出，提高有效成分含量，并有效提高了黄精的纯化，提高了多糖含量及质量，本发明黄精多糖药物组合物能显著增强禽类的内稳态平衡，增强机体的解毒能力，消除毒素影响，提高机体的抗氧化防衰老能力。
具体实施方式：
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明作进一步说明：
一种黄精多糖的提取方法，包括以下步骤：将生黄精清洗干净并晒干，晒干后切片粉碎，粉碎粒径为6-15微米，然后加入黄精：纯水质量比为1:28-32的纯水中，并加入纤维素酶、蛋白酶，并加热至48-52℃，经功率为60-80w的超声波酶解10-15min；经上述处理的黄精溶液冷却后经振筛装置过滤，过滤孔径为1-3微米，然后将经过上述过滤的滤液经陶瓷膜、反渗透膜进行超滤，得到黄精粗提物浓缩液；将所得到的黄精粗提物浓缩液加入3-6倍于其重量的80-90％的乙醇进行脱脂，回收乙醇，进一步得到黄精浓缩液；向上述黄精浓缩液加入其2-4倍体积的去离子水，并加入0.6％的活性炭进行脱色，活性炭吸附时温度控制在52-54℃，控制时间8-10min，脱色次数2-4次；将脱色后的黄精浓缩液经高压浓缩泵输送到真空干燥箱内，真空度为100-200pa，并经微波发生器辐射待干燥黄精浓缩液，干燥得初步黄精干燥粉；将上述黄精干燥粉加入去离子水与其重量比为30:1的去离子水中，加热至70-80℃，加热时间2-2.5h，然后将经上述处理后的提取液经生物膜过滤，得到黄精纯净液，然后采用常规方法对黄精纯净液提纯并干燥，得到黄精多糖粉末。
实施例1
将100kg生黄精清洗干净并晒干，晒干后切片粉碎，粉碎粒径为6-15微米，然后加入黄精：纯水质量比为1:30的纯水中，并加入纤维素酶、蛋白酶，并加热至50℃，经功率为65w的超声波酶解12min；经上述处理的黄精溶液冷却后经振筛装置过滤，过滤孔径为1-3微米，然后将经过上述过滤的滤液经陶瓷膜、反渗透膜进行超滤，得到黄精粗提物浓缩液400kg；将所得到的黄精粗提物浓缩液加入4倍于其重量的90％的乙醇进行脱脂，回收乙醇，进一步得到黄精浓缩液；向上述黄精浓缩液加入其3倍体积的去离子水，并加入0.6％的活性炭进行脱色，活性炭吸附时温度控制在53℃，控制时间9min，脱色次数2次；将脱色后的黄精浓缩液经高压浓缩泵输送到真空干燥箱内，真空度为100-200pa，并经微波发生器辐射待干燥黄精浓缩液，干燥得初步黄精干燥粉19.1kg，黄精干燥粉含糖94.62％；将上述黄精干燥粉加入去离子水与其重量比为30:1的去离子水中，加热至70℃，加热时间2h，然后将经上述处理后的提取液经生物膜过滤，得到黄精纯净液，然后采用常规方法对黄精纯净液提纯并干燥，得到黄精多糖粉末18.8kg，含糖98.24％。
蒽酮硫酸法测定多糖含量，并精密称取于50℃干燥至恒重的葡萄糖标准品0.1g于1000ml容量瓶中，得到浓度为0.1mg/ml的标准溶液，取一定体积标准溶液分别配制浓度为0.02、0.04、0.06、0.08、0.1mg/ml标准溶液，采用蒽酮硫酸法测定上述浓度标准溶液在584n波长下的吸光度，取最大吸光度，以标准葡萄糖浓度(mg/ml)为横坐标，以吸光度为纵坐标，得到标准曲线，得回归方程为y＝8.9148x+0.0691，相关系数为0.994，表明测定吸光度与标准葡萄糖浓度呈良好的线性关系，取1ml黄精多糖溶液粗品按照实际情况稀释一定倍数以后，采用硫酸蒽酮法测定黄精多糖含量，由回归方程计算稀释后多糖的浓度，并改变黄精干燥粉与去离子水的固液比、加热时间、提取次数，来研究步骤(5)(6)对黄精多糖纯度提升功效；具体数据可参见下表：
从上表可知：本发明申请中固液比为l︰30、提取温度为70℃、提取时间为2h、提取次数为1次；固液比l︰30、提取温度80℃、提取时间2.5h，对黄精干燥粉的提纯效率最高平均提取率为3.8％，一般提高平均率3.6％，提取黄精多糖含量，显著提升。
实施例2
选取临床发病的禽类，在相同饲养条件下随机分成对照组(d)、试验组(s)和阴性对照组(y)，并选取正常的禽类作为正常组(z)，每组40只；对照组按10g/只剂量拌料饲喂市售黄莲解毒散，每天2次，连用4天；试验组用实施例1制备的本发明药物颗粒按10g/只剂量拌料饲喂市售，每天2次，连用4天；阴性对照组按日常饲养方式饲养，不给药。疗效判定方法：用药4天后，观察病禽精神食欲情况并采集前腔静脉血，分离血清，测定谷丙转氨酶(gpt)、谷草转氨酶(got)、过氧化物歧化酶(sod)、谷胱甘肽过氧化酶(gsh-px)。
从上述实验数据来看，本发明药物组合组的禽类精神食欲明显好于黄莲扶正散组，从转氨酶和抗氧化指标看，本发明药物组合明显低于阴性组，说明本发明药物组合能显著增强禽类的内稳态平衡，增强机体的解毒能力，消除毒素影响，提高机体的抗氧化防衰老能力。
以上只通过说明的方式描述了本发明的某些示范性实施例，毋庸置疑，对于本领域的普通技术人员，在不偏离本发明范围的情况下，可以用各种不同的方式对所描述的实施例进行修正。因此，上述描述在本质上是说明性的，不应理解为对本发明权利要求保护范围的限制。
除非另有定义，本文所使用的所有学术和科学术语具有本发明所属技术领域普通技术人员所理解的相同含义。
在相抵触的情况下，以本说明书中的定义为准。
除非另有说明，所有的百分数、份数、比例等都是以重量计。
当给出数值或数值范围、优选范围或一系列下限优选值和上限优选值时，应当理解其具体公开了由任何较小的范围限值或优选值和任何较大的范围限值或优选值的任何一对数值所形成的任何范围，而无论范围是否分别被公开。除非另有说明，在本说明书描述数值范围之处，所述的范围意图包括范围端值和范围内的所有整数和分数。
当术语“约”或“左右”用于描述数值或范围的端值时，所公开的内容应当是包括该具体数值或所涉及的端值。
采用“一”和“一个/种”的用法描述本发明的要素和组分，这只是出于便利和为了给出本发明一般情况。除非另有明显表述，应将该说明理解为包括一个/种或至少一个/种。