一种关节内液体固体复合润滑剂及制备方法与流程

本发明涉及生物医学工程技术领域，尤其涉及一种关节内液体固体复合润滑剂及制备方法。

背景技术：

骨关节炎又称退行性关节炎，是一种慢性疾病，主要病变是关节软骨的退行性变和继发性骨质增生，多见于中老年人，女性多于男性，好发于负重关节。

其治疗方法较多，早期一般采用非手术疗法。传统治疗主要以非甾体类抗炎药(nasids)为主，但长期服用容易导致胃肠及肾脏损害。目前在关节腔内注射玻璃酸钠已经成为治疗骨性关节炎的常用方法，然而在临床实践过程中有人还是认为单纯的玻璃酸钠注射治疗不能够完全替代天然的关节滑液，在长时间的使用中膝关节会逐渐消耗掉玻璃酸钠从而造成复发的情况。

为改进现有治疗方法，相关临床研究提出用针刺、中医手法和运动训练联合玻璃酸钠关节内注射治疗，以弥补单纯玻璃酸钠关节内注射治疗的不足，这只是治疗手段数量的叠加，但没有在注射材料上进行改进。随着自然科学技术的发展，相关临床研究提出应用臭氧或黄芪注射液加玻璃酸钠关节内注射，这在一定程度上改进了注射材料，然而液体润滑剂在关节面负载挤压时的减摩效果并不明显。因此，液体润滑剂不能有效地减少负载条件下的软骨摩擦损伤。

技术实现要素：

基于现有的技术问题，本发明提出了一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法。

本发明提出的一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法，包括如下步骤：将碗烯加入玻璃酸钠中使浓度为20μg/ml-50μg/ml，在15-60℃条件下，超声0.5-2h，使所述碗烯均匀分散，所述碗烯的外表面呈层片状，所述碗烯的纯度为99.9％-99.999％，粒径为30nm-120nm，所述玻璃酸钠的分子量为50-220万。

优选地，上述方法制备的关节内液体固体复合润滑剂。

本发明中的有益效果为：

1、本发明的润滑剂安全可靠，抗软骨损伤效果良好，在关节表面形成均匀的润滑膜，有效减少关节处摩擦损伤，增加关节活动，恢复膝关节功能。同时，碗烯在生物体内可长期稳定存在于关节腔内，且具有超强的吸附性和良好的生物相容性，对玻璃酸钠有吸附和缓释作用，减缓了玻璃酸钠的消耗，玻璃酸钠能保护关节软骨，显著减少膝关节的局部症状，明显减少了注射次数。由原来每周一次连续注射5周，改为最少一次性注射，减轻了多次注射的痛苦。

附图说明

图1为本发明提出的一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法的第一天显微镜观察图；

图2为本发明提出的一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法的第二天显微镜观察图；

图3为本发明提出的一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法的第三天显微镜观察图；

图4为本发明提出的一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法的第四天显微镜观察图；

图5为本发明提出的一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法的第五天显微镜观察图；

图6为本发明提出的一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法的第六天显微镜观察图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。

参照图1-6，一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法，包括如下步骤：将碗烯加入玻璃酸钠中使浓度为20μg/ml-50μg/ml，在15-60℃条件下，超声0.5-2h，使所述碗烯均匀分散，所述碗烯的外表面呈层片状，所述碗烯的纯度为99.9％-99.999％，粒径为30nm-120nm，所述玻璃酸钠的分子量为50-220万。

实施例一：

一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：采用改进的hummers方法制备碗烯，碗烯为层片状，粒径约为90nm，纯度为99.99％；

将碗烯加入分子量为150万的玻璃酸钠中，使浓度为30μg/ml，在60℃条件下，超声0.5h，使碗烯均匀分散，平衡复合润滑剂至25℃后待用；

采用雄性sd大鼠，体重200±10g，购自天津市山川红实验动物科技有限公司，许可证号scxk(津)2009-0001，生产批号：20120617，选健康雄性sd大鼠，按0.3g·kg体重ip10％的水合氯醛麻醉，以35％泊洛沙姆载药体加载4％木瓜蛋白酶制成温敏型原位凝胶控释剂，按照0.05ml(1.6u)/关节剂量，双侧膝关节注射，50℃环境下作用2小时，随机抽取3/10只大鼠进行病理组织学检查，复核该方法的可靠性及成功率，所得造模后关节软骨切片，

抽取1ml本实施例制备的一种关节内液体固体复合润滑剂注射入患骨性关节炎的小鼠膝关节内，治疗后30天观察到小鼠的步态仍近乎正常，取小鼠膝关节软骨作病理切片，切片显示小鼠膝关节软骨面上仍然吸附大量的碗烯。

实施例二：

一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法，包括如下步骤：采用offeman方法制备碗烯，碗烯为层片状，粒径约为110nm，纯度为99.9％；

将碗烯加入分子量为80万的玻璃酸钠中，使浓度为50μg/ml，在20℃条件下，超声1h，使碗烯均匀分散，平衡复合润滑剂至25℃后待用；

采用雄性sd大鼠，体重200±10g，购自天津市山川红实验动物科技有限公司，许可证号scxk(津)2009-0001，生产批号：20120617，选健康雄性sd大鼠，按0.3g·kg体重ip10％的水合氯醛麻醉，以35％泊洛沙姆载药体加载4％木瓜蛋白酶制成温敏型原位凝胶控释剂，按照0.05ml(1.6u)/关节剂量，双侧膝关节注射，50℃环境下作用2小时，随机抽取3/10只大鼠进行病理组织学检查，复核该方法的可靠性及成功率；

抽取1.5ml本实施例制备的一种关节内液体固体复合润滑剂注射入患骨性关节炎的小鼠膝关节内，治疗后60天观察到小鼠的步态仍近乎正常，取小鼠膝关节软骨作病理切片，切片显示小鼠膝关节软骨面上仍然吸附大量的碗烯。

实施例三：

一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法，包括如下步骤：

购买无毒害的碗烯，碗烯为层片状，粒径约为120nm，纯度为99.999％；

将碗烯加入分子量为220万的玻璃酸钠中，使浓度为20μg/ml，在15℃条件下，超声2h，使碗烯均匀分散，平衡复合润滑剂至25℃后待用；

采用雄性sd大鼠，体重200±10g，购自天津市山川红实验动物科技有限公司，许可证号scxk(津)2009-0001，生产批号：20120617，选健康雄性sd大鼠，按0.3g·kg体重ip10％的水合氯醛麻醉，以35％泊洛沙姆载药体加载4％木瓜蛋白酶制成温敏型原位凝胶控释剂，按照0.05ml(1.6u)/关节剂量，双侧膝关节注射，50℃环境下作用2小时，随机抽取3/10只大鼠进行病理组织学检查，复核该方法的可靠性及成功率；

抽取本实施例制备的1ml一种关节内液体固体复合润滑剂注射入患骨性关节炎的小鼠膝关节内，治疗后90天观察到小鼠的步态仍近乎正常，取小鼠膝关节软骨作病理切片，切片显示小鼠膝关节软骨面上仍然吸附大量的碗烯。

实施例四：

一种关节内液体固体复合润滑剂的制备方法，包括如下步骤：

购买无毒害的碗烯，碗烯为层片状，粒径约为30nm，纯度为99.99％；

将碗烯加入分子量为50万的玻璃酸钠中，使浓度为40μg/ml，在40℃条件下，超声0.5h，使碗烯均匀分散，平衡复合润滑剂至30℃后待用；

采用雄性sd大鼠，体重200±10g，购自天津市山川红实验动物科技有限公司，许可证号scxk(津)2009-0001，生产批号：20120617。选健康雄性sd大鼠，按0.3g·kg体重ip10％的水合氯醛麻醉，以35％泊洛沙姆载药体加载4％木瓜蛋白酶制成温敏型原位凝胶控释剂，按照0.05ml(1.6u)/关节剂量，双侧膝关节注射，50℃环境下作用2小时，随机抽取3/10只大鼠进行病理组织学检查，复核该方法的可靠性及成功率；

抽取本实施例制备的一种关节内液体固体复合润滑剂1.5ml注射入患骨性关节炎的小鼠膝关节内，治疗后60天观察到小鼠的步态仍近乎正常，取小鼠膝关节软骨作病理切片，切片显示小鼠膝关节软骨面上仍然吸附大量的碗烯。

实验证明，本发明的关节内液体固体复合润滑剂中的碗烯在负载条件下不会被挤出关节表面，可有效地附着在关节表面起到润滑的效果，本发明的关节内液体固体复合润滑剂，打破了关节内注射剂是仅是液体的传统，有效改善了负载条件下关节摩擦损伤。

将本发明的关节内液体固体复合润滑剂平衡至25-30℃后，在无菌条件下抽取注入关节腔内，碗烯具有超强的吸附性，关节内注射后能长期吸附于关节表面，不随液体润滑剂代谢而减少，起到对骨关节润滑。碗烯对玻璃酸钠的吸附和缓释作用，减缓了玻璃酸钠的消耗，延长了患者的注射周期，或减少了一定时间内注射次数减少。采用该复合润滑剂，注射周期为1月1次，1-3次为一个疗程。

以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。