专利名称：一种抗癌活性蛋白及制取方法
技术领域：
本发明涉及一种药用活性蛋白及该蛋白制取方法。
蚯蚓(地龙)作为中药应用在中国已有四千多年历史，通常将蚯蚓全虫加热煮沸用于治疗风湿等症，这些都是以非蛋白部分参加作用。近年来有从蚯蚓虫中分离出胶原酶及抗栓酶的报道(生物化学杂志1991年第7卷第3期)，这都是一些活性蛋白，但至今未见有有关分离出抗癌活性物质的报道。现在国内外抗癌药物很多，但都是一些化学合成药、毒副作用甚大。一些生物抗癌药也由于其分子量过大及过敏性问题限制了它们的应用。另外也有一些基团工程制造的生物制品具有抗癌作用，如r-干扰素及白细胞介素类药物，但由于副作用问题等，都不是理想的抗癌药物。
本发明的目的在于提供一种分子量在8000-10000D之间的活性蛋白，及采用生化方法进行匀浆→离心→透析→超滤截留等工艺处理，从地龙中分离出一种具有抗癌活性的蛋白质。
本发明的目的是通过以下措施来实现的a.该制取方法为鲜地龙称重→洗涤浸泡→匀浆→高速离心→透析→超滤→测蛋白浓度→分装测活性;其具体过程是，洗涤浸泡后以18000转/分进行匀浆处理，然后以15000转/分的速度离心一小时，取出上清液用特定分子量12000透析袋透析，再进行超滤除菌除杂质处理;
b.该活性蛋白的分子量为8000-10000D。
本发明的优点与积极效果是
1.分子量在8000-10000之间活性蛋白，具有很高的抗癌活性，对多种癌细胞均有强大的杀伤作用。进一步开发将成为一种很有前途的新型抗癌药物。
2.该蛋白无热源，无过敏，无毒副作用，具有广谱抗癌作用，对正常体细胞无副作用，同时还可以提高机体的免疫功能。
3.该制取方法比较简单，易于流水线作业，无特殊要求的工艺设备，一般常规设备即可满足生产。
如下本发明的附图为制取方法流程方框图。
下面将结合附图并举出具体的实施例，对本发明做进一步详细的说明将新鲜活地龙采来，洗涤干净，用生理盐水浸泡数小时，中间换水数次。以18000转/分的速度匀浆处理，制成匀浆。将此匀浆以15000转/分的速度离心1小时，取上清液、透析，取透析外液、超滤除菌。取超滤液减压蒸发进行浓缩，测蛋白浓度。测抗癌活性即可。
取鲜地龙称重是为了计算活性蛋白的收率。反复洗涤浸泡是为了去掉泥土及地龙体内的神经毒。匀浆速度一般以15000转/分以上为好，要尽量把地龙活细胞打碎使有效成分能尽量暴露出来，以达到最大限度的提取。高速离心应以转速高些为好，因为该活性蛋白为小分子蛋白、分子量8000-10000D，高速离心能使大分子蛋白及杂质除去，为最后的透析创造条件。透析是采用特定分子量12000截留范围透析袋，使分子量大于12000的物质留在袋内。最后超滤主要是为了除菌及其他杂质。测定蛋白质浓度即可知道最后产品收率，又可知道活性情况。
例如取鲜地龙20克，用三倍的生理盐水浸泡三-五小时，然后以18000转/分进行匀浆处理，再经15000转/分的速度离心一小时，取出上清液用特定分子量12000的透析袋进行透析，截留取得活性蛋白的分子量在8000-10000D之间，蛋白浓度为300mg。
权利要求
1.一种抗癌活性蛋白及制取方法，其特征在于a.该制取方法为鲜地龙称重→洗涤浸泡→匀浆→高速离心→透析→超滤→测蛋白浓度→分装测活性；其具体过程是，洗涤浸泡后以18000转/分进行匀浆处理，然后以15000转/分的速度离心一小时，取出上清液用特定分子量12000透析袋透析，再进行超滤除菌除杂质处理；b.该活性蛋白的分子量为8000-10000D。
全文摘要
本发明涉及一种药用活性蛋白及该蛋白制取方法。该制取方法为鲜地龙称重→洗涤浸泡→匀浆→高速离心→透析→超滤→测蛋白浓度→分装测活性；该活性蛋白的分子量为8000—10000D。活性蛋白，具有很高的抗癌活性，对多种癌细胞均有强大的杀伤作用。进一步开发将成为一种很有前途的新型抗癌药物。
文档编号A61K35/56GK1083489SQ9311107
公开日1994年3月9日 申请日期1993年4月26日 优先权日1993年4月26日
发明者单凤平 申请人:单凤平