专利名称：美托咪定衍生物的左旋对映体的药物组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一些咪唑衍生物的左旋对映体在预防或治疗与肾上腺素能的α-2受体表达过剩或超致敏作用有关的疾病以及在这类疾病诊断中的用途。本发明还涉及包含这类咪唑衍生物的药物组合物。
用于本发明的咪唑衍生物是通式为I的化合物的左旋异构体或者是其生理上可接受的酯或盐，
其中R1是C1-C2的烷基，R2到R4每个取代基可以相同也可以不同，并且它们分别是氢原子、C1-C2烷基，OH，OCH3，卤素，C1-C2羟烷基，羧基、氰基、CHO、COOCH3、COOCH2CH3、CONH2、C＝NHNH2、C＝NHNHCH(C6H6)CH3，条件是R2到R4中一种以上的取代基不同时为C＝NHNHCH(C6H6)CH3。
优选的化合物是R1是甲基，R2到R4每个取代基可以相同也可以不同，并且它们分别是氢原子、C1-C2烷基、OH、C1-C2-羟烷基或CONH2的那些化合物。美托咪定的左旋对映体是特别优选的。
现已公开了通式为I的咪唑衍生物的制备如在EP 72615 B1，EP 269599B1，EP 341231 B1和EP 626372 A1。例如用在EP 300652 B1中所述的理想的活性酸可制备相应的左旋对映体。
尽管从文献中已知一些通式I的衍生物(多数作为相应旋光混合物的一种组分)，但是相信从未公开它们以把相应右旋对映体(即杂质)的存在限制在不显著量的形式作为药物或诊断剂。
现在我们惊奇地发现通式I的咪唑衍生物的左旋对映体确实是肾上腺素能的α-2受体的相反激动剂。这就意味着本发明的化合物可以用于预防或治疗与肾上腺素能的α-2受体表达过剩或超致敏作用有关的疾病的药物。
随着过敏试验体系的发展，相反激动剂的测定已成为可能，这使得对许多药物再分类变得必要(Bond，R.A.等，1995，Nature，374，272)。相反激动剂显然使受体-G蛋白的耦合变得不稳定或选择性地与非活性形式的受体结合(或者二者都存在)。在系统中有活性受体系统(活性不变的受体，即在没有激动剂下也有活性的受体)大量形成的地方，具有相反激动剂特性的化合物将改变活性和无活性受体之间的平衡，增加非活性受体的数量。另一方面，这将导致参加信号传送的活性受体数量的减少(相反激动，也称作阴性拮挤剂)。简单地说，相反激动剂是一种通过结合受体降低活性构型部分的药物(Jenkins，D.H.，等，1995，Pharmacol.Rev.，47，225)。
在疾病状态及由持续活化的受体突变导致的病理中相反激动剂是特别重要的。所以，对于这些疾病状态，相反激动剂代表了一种重要和特殊治疗方法。
以前在拮抗剂家族中已经发现了相反激动剂(Bond等，1995和Wang-Ni T.等，1994，Molecular Pharmacology，45，524)。但是，拮抗类型的相反激动剂除了否定组成性受体活性外在靶向药物治疗的不需要所有组织中也消除了正常的内激动作用。
本发明化合物的真正相反激动剂能够降低受体的激活状态，所以，上述靶向剂对于组成性活性受体有关的诊断、预防或治疗是很重要的。
肾上腺素能的α-2受体的相反激动剂可单独或与常规定义的肾上腺素能的α-2受体的激动剂或肾上腺素能的α-2受体的拮抗剂一起能够用于治疗与增加的受体数量或敏感有关的病态。肾上腺素能的α-2受体的相反激动剂能够用于治疗雷诺现象(Coffman，J.D.和Cohen，R.A.，J.Vasc.Med.，Biol.，3，100)、高血压、中风和其它与α-2受体的遗传多型性有关的病理和临床疾病〔Freeman，K.，等，1995，Am.J.Hypertens.，8，86 3；Lockette，W.，1995，Am.J.Physiol.，8，390)、肥胖症(Jhanwaruniyal，M.等，1991，Pharmacol.Biochem.Behav.，40，853)、对氯压定和其他肾上腺素能的α-2受体的激动剂的戒断症状、以交感神经机能障碍为特征的神经系统疾病(如在帕金森病中的直立性低血压)和多种系统萎缩(Azuma，T.等，1991，Acta Neurol.Scand.，84，46)、糖尿病的糖尿症(Garris，D.R.，1990，Dev.Brain Res.，51，161)、良性前列腺增生和其它由性和其他甾体引起的肾上腺素能的α-2受体的激动剂的失调的病态(morita，H.等，1992，Tohoku.J.Exp.Med.，166，403)以及由其它药物诱发的肾上腺素能的α-2受体的的致敏作用，如用米塞林治疗抑郁症或用olenzapine或氯氮平治疗精神分裂症，用地塞米松或其他甾体治疗风湿性关节炎或哮喘，或用降压平或其它抗交感神经药治疗高血压。
对本发明化合物的有效用途来说，相应右旋对映体(即激动剂)的量不能高到干扰或甚至中和相反激动剂的作用是很重要的。当然，右旋对映体的最大含量取决于在不同情况下两种对映体的特性并且人们相信本领域普通技术人员可以不经过过多试验来计算它的含量。例如，对左旋美托咪定来说，右旋美托咪定的最大含量大约是两种对映体总重量的0.3％，优选0.1％。
本发明的另一个目的是提供一种含有通式I的＝衍生物作活性组分的药物组合物，其中该活性组分的右旋对映体的含量最好低于两种对映体总重量的0.3％。特别优选的是该制剂中右旋对映体的含量低于两种对映体总重量的0.1％。值得注意的是该组合物也可以是完全没有右旋对映体。但是，为了实际和经济的因素，从它的整体中除去其它对映体是非常困难的。
本发明的组合物可以用常规技术单独或与其它活性成分和一种药学上可接受的稀释剂或载体一起配制成不同药物单位剂型如片剂、胶囊、溶液、油膏剂、乳剂、洗剂、凝胶剂、霜剂、斑贴剂和粉剂等。特别优选的是的可以经皮给药的制剂。
所用的药物组分是随着预计的给药途径来选择的。所以，固体组分可以包括如糖类和糖醇类如乳糖、葡萄糖、蔗糖、右旋糖、甘露糖醇和山梨醇、淀粉、纤维素及其衍生物、藻酸盐、合成聚合物如聚乙烯吡咯烷酮、滑石、硬脂酸盐及其衍生物，而液体组分一般包括水、多元醇类如丙三醇、丙二醇和聚乙二醇，矿物油类和植物油类。用于半固体产品的组分可以包括上述组分并还包括羊毛脂、石蜡、聚乙烯蜡类、植物蜡类、蜂蜡、黄原胶、长链醇类和脂肪酸、羧乙烯基聚合物类、月桂基硫酸钠、山梨醇酯、聚氧乙烯山梨醇酯以及聚氧乙二醇酯类。
活性组分的量根据剂型的类型不同而在0.001到75重量％之间，优选0.01到10重量％之间变化。
也可以制备本发明的经皮斑贴，例如按照PCT专利申请WO 91/02505中所述的方法制备右旋美托咪定(游离碱)，按照PCT专利申请WO 92/21338所述的方法制备美托咪定(盐)。
本发明化合物的适当剂量取决于几种因素如给予的化合物、被治疗对象的物种、年龄和性别、治疗的情况和给药的方法。所以，对成人来说，非肠道给药的剂量一般是在每天0.5μg/kg到10mg/kg之间，口服剂量是在5μg/kg到100mg/kg之间。左旋美托咪定的制备用与右旋美托咪定相同的方法(EP 30652 B1)能够拆分得到美托咪定的(一)对映体，美托咪定的左旋对映体，但是不同的是用L-(+)-酒石酸作拆分剂，D-(-)-酒石酸能够用来得到(-)-对映体的D-(-)-酒石酸加成物。例如用HPLC检查1-对映体的酒石酸盐的纯度从而重复重结晶直到右旋美托咪定的含量低于两种对映体总重量的0.3％为止。用常规技术能够制备该游离碱和相应的盐酸盐。左旋美托咪定，碱mp 149-151℃，[α]D20-75.2(c，1g/100ml甲醇)左旋美托咪定盐酸盐，盐mp 156-158℃，[α]D20-53.5(c，1g/100ml水)。附图的简述
图1.细胞内Ca2+浓度的测定UK10μM UK 14，304(primonidine)，1-mede10μM左旋美托咪定，rauw1μM萝芙素。图2.不同肾上腺素能α-受体激动剂(10μM)对Ca2+代谢和cAMP产生的最大反应。图3.左旋美托咪定对Ca2+代谢和cAMP产生作用的剂量-反应曲线。
HEL(人红白血病)细胞是从患有和杰金病和红白血病患者的血液中得到的(Martin，P.和Papayannopoulou，1982，Science 216，1233)。该细胞系已被用来研究肾上腺素能α-受体和它们的偶联时腺苷酰基环化酶的抑制(McKeman等，1987，Mol.Pharmacol.32，258)和细胞内Ca2+代谢(Michel，M.等，1989，J.Biol.Chem.264，4986和Musgrave，I.F.和Seifert，R.，1995，Biochem.Pharmacol.，49，187)的模型体系。收集数据处理表明HEL细胞含有一种肾上腺素能α-2受体亚型，它能够通过非选择性阳离子通道来激活对百日咳毒素敏感的G-蛋白，该蛋白导致Ca2+的代谢，并抑制腺苷酰基环化酶。用这种系统可以筛选用于不同目的的肾上腺素能α-2受体激动剂。
细胞内Ca2+的测定按照Kukkonen等所描述的方法(1992，J.Pharmacol.Exp.Ther.263，1487)用fura-2(Grynkiewicz，G.等，J.biol.Chem.，260，3440)测定HEL细胞中细胞内游离Ca2+浓度。用fura-2/AM(分子探针，Junction City，USA)装载该细胞。然后把该细胞悬浮液放在石英小杯中并用Hitachi F-2000荧光分光光度计在340nm(发射)和505nm(激发)的波长处进行荧光测定。在试验最后依次加入毛地黄皂苷和EGTA校准染色反应来分别得到最大的和最小的荧光值。
加入不同肾上腺素能α-2受体激动剂造成细胞内Ca2+的浓度依剂量增加。加入10μm左旋美托咪定造成Ca2+的浓度的下降(-17±2nM)(图1和图2)。该反应依剂量变化，EC50＝761±502nM(图3)。预先给予左旋美托咪定不会拮抗受体对UK(一种α-2受体的激动剂)的激活而萝芙素却能(图1)。
细胞内cAMP的测定按照Jansson等所述的(1985，Eur.J.Pharmacol.266，165)通过预先用[3H]腺嘌呤(Amersham，UK)标记细胞来测定细胞内cAMP的浓度。用Salomon等的方法(1974，Ahal.Biochem.58，541)可实现[3H]ATP和[3H]cAMP的分离。把与细胞有关的[3H]ATP转化为[3H]cAMP可表达为总放射活性的百分比并校正[14C]cAMP示踪物的回收百分比。
加入弗司扣林导致cAMP的产生有10倍的增长。加入不同肾上腺素能α-2受体激动剂造成依剂量抑制弗司扣林刺激cAMP的产生。加入10μM左旋美托咪定导致进一步刺激弗司扣林刺激的cAMP的产生(42±27％)(图2)。该反应呈剂量依赖，EC50＝150±105nM(图3)。
这些结果表明左旋美托咪定与肾上腺素能α-2受体激动剂相比在偶联信号分子Ca2+和cAMP方面具有相反的作用。这就能够降低HEL细胞中α-2受体的组成性活性。实施例1如下制备左旋美托咪定的局部用经皮制剂(霜剂)0.05-0.5w％，优选0.1-0.3w％的左旋美托咪定盐酸盐或碱作活性组分，1-40w％，优选5-20w％的润肤剂，如植物油、甘油和丙二醇，1-35w％，优选2-20w％乳化剂，如十二烷基硫酸钠、十六烷基硬脂酰基硫酸钠、聚乙二醇和硬脂酸甘油酯、甘油油酸聚乙二醇酯或甘油月桂酸聚乙二醇酯或甘油亚油酸聚乙二醇酯，0-30w％，优选2-20w％的稠度剂，如十六烷基醇(cetearylalcohol)，硬脂酸甘油酯，0-10w％，优选0.1-2w％的防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯和苯氧基乙醇，30-90w％，优选60-85w％的纯化水。
在一个适当容器内，融化乳化剂、润肤剂和稠度剂。在另一个容器内，用煮沸的纯化水溶解防腐剂。把两种液体调到相同温度(大约80℃)并合并在一个加工容器中。在真空下连续混合来匀化该混合物并使其冷却到35℃。把活性成分溶于纯化水(剩余的)中并加到加工容器中。在真空下连续混合来匀化该霜剂并将其冷却到室温。
权利要求
1.一种咪唑衍生物的用途，即其中所述的咪唑衍生物为通式I化合物的左旋异构体或其生理上可接受的酯或盐用于生产预防或治疗与肾上腺素能的α-2受体表达过剩或超致敏作用有关的症状的药物，
其中R1是C1-C2的烷基，R2到R4每个取代基可以相同也可以不同，并且它们分别是氢原子、C1-C2烷基，OH，卤素，C1-2羟烷基，羧基、氰基、CHO、COOCH3、COOCH2CH3、CONH2、C＝NHNH2、C＝NHNHCH(C6H6)CH3，条件是R2到R4中一个以上的取代基不同时为C＝NHNHCH(C6H6)CH3。
2.根据权利要求1的用途，其中通式I中R1是甲基，R2到R4每个取代基可以相同也可以不同，并且它们分别是氢原子、C1-C2烷基、OH、C1-C2-羟基烷基或CONH2。
3.根据权利要求1或2的用途，其中通式I的化合物是左旋美托咪定。
4.根据权利要求1的用途，其中所治疗的症状是肥胖症、对肾上腺素能的α-2受体的戒断症状、神经系统疾病、多种系统萎缩、糖尿病的糖尿症、良性前列腺增生和药物诱发的肾上腺素能的α-2受体致敏作用。
5.根据权利要求4的用途，其中所治疗的神经系统疾病是直立性低血压。
6.根据权利要求4的用途，其中药物是米塞林、olenzapine、氯氮平或一种甾体。
7.根据权利要求1的用途，其中通式I化合物是与一种肾上腺素能的α-2受体激动剂或肾上腺素能的α-2受体拮抗剂结合使用。
8.一种治疗肥胖症、肾上腺素能的α-2受体的戒断症状、神经系统疾病、多种系统萎缩、糖尿病的糖尿症、良性前列腺增生和药物诱发的肾上腺素能的α-2受体致敏作用的方法，它包括给需要这种治疗的患者使用有效量的权利要求1到4中任何一个所定义的衍生物。
9.肾上腺素能的α-2受体的相反激动剂在制备用于预防或治疗肥胖症、肾上腺素能的α-2受体的戒断症状、神经系统疾病、多种系统萎缩、糖尿病的糖尿症、良性前列腺增生和药物诱发的肾上腺素能的α-2受体致敏作用的药物中的用途。
10.肾上腺素能的α-2受体的相反激动剂在诊断与肾上腺素能的α-2受体表达过剩或超致敏作用有关症状方面的用途。
11.一种药物组合物，其特征在于它包括一种如权利要求1所定义的咪唑衍生物作活性成分，相应的右旋对应体的量小得足以不能干扰或中和作为肾上腺素能的α-2受体的相反激动剂的左旋异构体的作用。
12.根据权利要求11的组合物，其中它是经皮给药的。
13.根据权利要求12的组合物，其中它是霜剂。
14.根据权利要求11到12的任何一种组合物，其中活性成分是左旋美托咪定。
15.根据权利要求11到14的任何一种组合物，其中相应的右旋对映体的量小于两种对映体总量重量的0.3％。
16.根据权利要求11到15的任何一种组合物，其中相应的右旋对映体的量小于两种对映体总量重量的0.1％。
全文摘要
现已发现些咪唑衍生物特别是美托咪定的左旋异构体是肾上腺素能的α－2受体的相反激动剂并且它可用于预防或治疗与肾上腺素能的α－2受体表达过剩或超致敏作用有关的疾病如肥胖症、肾上腺素能的α－2受体的戒断症状、神经系统紊乱、多种系统萎缩、糖尿病的糖尿症、良性前列腺增生和药物诱发的肾上腺素能的α－2受体致敏作用。该药物组合物优选经皮给药。
文档编号A61P5/00GK1200035SQ96197793
公开日1998年11月25日 申请日期1996年10月23日 优先权日1995年10月23日
发明者K·E·O·阿克曼, C·詹森, J·库克恩, J－M·萨沃拉, S·沃斯特, V·科克罗夫特 申请人:欧里恩公司, K·E·O·阿克曼, C·詹森, J·库克恩