专利名称：麦芽醇在制药中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及麦芽醇(酚)的用途，特别是在制药领域中的用途。
现有技术中，麦芽醇，亦称麦芽酚，其化学名称3-羟基-2-甲基-4-吡喃酮，结构式为
分子量126.11。该物质是以发酵法制取曲酸，再经化学合成而制得。其性状为白色，微黄色针状或结晶粉末，具有焦甜香气，熔点范围159～163℃。易溶于水与乙醇。麦芽醇通常做为香料使用，US3296079,JP55003753,JP-8303507,JP-74000840等专利均有所披露。经(北京市卫生防疫站)测定，该物质的急性毒性试验LD50:1420毫克/公斤。亚急性毒性试验以含麦芽醇0,50,100,300ppm的饲料喂大鼠12周，在大鼠的体重、血象，GPT、NPN、病理学检查方面均未发现有异常。因此，麦芽醇被允许使用配制各种食用香料，最大使用量可按“正常生产需要”使用。(食品添加剂，中国轻工业出版社，第2版，201-202页，1993)。
麦芽醇具有缓和其它香料的香气的性质，可作为香味改良剂和定香剂使用(食品添加剂，中国轻工业出版社，第2版，201-202页，1993)。至目前为止发明人没有发现麦芽醇对哺乳动物和人类的药理作用的报道。
本发明的目的在于提供一种麦芽醇的新用途，即在制药中的应用。本发明将结合下文的研究结果进一步详述麦芽醇对抗自由基，抗肿瘤，抑制血小板聚集，减肥、降血脂，增强体质，治疗皮肤病等方面的应用。
为了完成本发明的目的，实际上本发明涉及一种麦芽醇(酚)作为制备抑制或治疗哺乳动物和人类肿瘤的药中的应用。
另外，本发明还涉及麦芽醇作为制备哺乳动物或人类抗衰老药中的应用。
本发明还涉及麦芽醇作为治疗人类皮肤病疾患药中的应用以及作为治疗或预防哺乳动物或人类心血管疾病的药中的应用。
最后，本发明还涉及麦芽醇作为制备降低哺乳动物或人类血脂药中的应用以及抑制血小板聚集药中的应用。
本发明人对现有技术中早已存在的物质麦芽醇的用途开拓了一个新的应用领域。对麦芽醇的进一步开发利用提供一条新出路。另外，麦芽醇本身对人体无毒，很有希望发展成一系列的新药，为人类造福。
附图简要说明
图1、麦芽醇对家蝇寿命的影响。
图2、麦芽醇对肾上素腺和胶原诱导血小板聚集的抑制作用。
图3、麦芽醇对ADP、肾上腺素、胶原诱导血小板聚集的抑制作用。
图4、麦芽醇对·OH自由基的清除作用。
图6、麦芽醇对O-2·自由基的清除作用。
图6、麦芽醇抗紫外照射对皮肤损伤的作用。
为了进一步了解本发明，以下将详细描述本发明的实质。本发明提供一种麦芽醇的药用新用途，换言之，本发明涉及麦芽醇作为制备抑制或治疗哺乳动物或人类肿瘤细胞的药中的应用。其最低有效量剂量为10mg/kg。
本发明还涉及麦芽醇在抗衰老药中的应用。本发明中所述的麦芽醇对清除自由基具有明显的效果，其中所述的自由基包括超氧自由基(O-2·)和羟自由基(·OH)。其最低有效剂量10μmol/L本发明的新用途还包括作为治疗人类皮肤病疾患药中的应用。本发明同药物载体结合后，可以制成各种剂型，如水剂，膏剂或霜剂、片剂、胶囊剂等等，即可口服，又可外敷。上述的皮肤疾患包括黄褐斑，日光性皮炎，痤疮等。其最低有效剂量为0.05％。
另外，将麦芽醇同药物载体结合后制成的药品还可以用于治疗或预防人类心血管疾病的发生，麦芽醇突出地表现为对哺乳动物的血脂，包括甘油三脂和胆固醇有降低作用。对哺乳动物的体重也有减轻作用。同时，麦芽醇对哺乳动物的血小板聚集有明显的抑制作用。
麦芽醇对哺乳动物降血脂的有效剂量最低是5mg/kg，对哺乳动物血小板凝集的抑制作用的最低有效剂量为0.05％。
以下将结合附图和实施例，进一步描述本发明，本发明的实施例和实验例并非限定本发明，只是用于说明本发明。实施例1按现有技术的方法，将麦芽醇125mg，溶于1000ml的生理盐水中，制成浓度为0.125％的含麦芽醇的水溶液，加热溶解，混合均匀后，装入药瓶中密封，消毒制成产品。实施例2按实施例1中所述的方法，将250mg的麦芽醇溶于100ml水中制成0.25％浓度的麦芽醇水溶液产品。实施例3取5克麦芽醇加入基质内制成抗氧化膏制剂。其中所述的基质由如下组分组成80克硬脂酸，80克十六醇，100克白油，60克二甲基硅油，3克尼泊金乙酯，30克SE-10,40克HRS,100克甘油，3克常用助渗剂，0.6克的Cy-1，其余为蒸馏水，约为500.16克。制成2000克的含麦芽醇的膏剂。
首先将上述重量的硬脂酸，十六醇，白油，二甲基硅油和尼泊金乙酯均匀混合制得混合物A，再将上述重量的SE-10,HRS，甘油，蒸馏水，麦芽醇，助渗剂均匀混合后制得混合物B，再分别将混合物A和B加热到85°～90℃，接着将混合物A徐徐加入到混合物B中，得A加B的混合物，再用均质机以3000转/分的速度对其进行均质，搅拌80-100分钟，然后冷却到50℃时，再向得到的均质后的混合物中加入Cy-1，然后继续冷却到40℃出料，制成含有0.5％麦芽醇的膏剂。实施例4取麦芽醇0.5克，按实施例3中所述的方法，制备膏剂。其中基质由下列组分组成硬脂酯50克，十六醇50克，白油60克，二甲基硅油30克，尼泊金乙脂1克，SE-10,10克，HRS20克，甘油60克，助渗剂2克，Cy-10.2克。制成含有0.05％麦芽醇的膏剂。实施例5按本领域技术人员公知的方法制备麦芽醇片剂，其中所述的片剂中按实际需要能制成含有6～10％麦芽醇，也可再加大或减少其麦芽醇的含量。
取100克麦芽醇，560克微晶纤维素，无水乳糖380克，硬脂酸镁200克，二氧化硅30克，按公知的制片技术和装备，制成片剂，即取上述配方中除硬脂酸镁外所有成分混合25～30分钟，再筛入硬脂酸镁，继续混匀，尔后用13/32英寸(约1.03cm)标准凹冲压片。实验例1将纯种家蝇卵放入培养基中培养幼虫，成蛹后放在蛹箱内羽化成蝇，成蝇后喂等量奶粉和白糖混合喂料，饮自来水，饲室温度为28℃，相对湿度75.5％，每日光照10小时，将羽化后家蝇随机分为对照及实验组，每组300-400只，对照组喂养如前，实验组2取0.05克麦芽醇，24.95克奶粉制成细粉，实验开始后，逐日登记雌雄蝇的死亡数，直至家蝇全部死亡，统计学处理，求其半数存活期。
雌性对照20天雌性服药28天雄性对照28天雄性服药36天其效果见附图1，与蜂王浆相等花粉多5天。实验例2按李家增采用的测定血小板聚集作用的方法(见“刺参双性粘多糖对人和兔血小板的聚集作用”，李家增，2中华血液学杂志，1987，第八期，第469页)，测定麦芽醇对血小板聚集的抑制作用。其中，以ADP，肾上腺素，胶原为诱导剂，以阿魏酸钠做对照。采用人富含血小板的血浆PRP52μl，肾上腺素终浓度为1×10-5mol/l，胶原浓度0.4mg/ml，ADP浓度为2×10-5mol/l。
其结果见附图2和3。实验例3麦芽醇对·OH自由基的清除作用取50μl0.1mol/l,pH7.0的磷酸缓冲液，内含1％的过氧化氢及5mmol/lFe(NH4)2(SO4)2，加入5,5-二甲基吡咯-1-氧杂(终浓度50mmol/l)，充分混匀，立即将上述样品装入石英毛细管内，在VarianE-109ESR(自旋顺磁共振)波谱仪上进行测定，观察H2O2被Fe离子诱发的羟自由基(·OH)形成情况。另取麦芽醇(终浓度7.25mmol/l)溶液加入到上述反应体系，观察猝灭·OH的情况。测试温度25℃,λ-波段，调制幅度1G，扫宽200G，扫描速度50G/min，放大倍数8×108，时间常数0.128，从波谱的峰高计算药物的猝灭率。
上述得到的结果见附图4。
实验例4麦芽醇对O-2·自由基的清除作用。
取50μl10mmol/l,pH7.4的生理盐水磷酸缓冲液，内含0.4mmol/l黄嘌呤，0.2mmol/LEDTA,0.106单位/ml黄嘌呤氧化酶，加入5,5-二甲基吡咯-1-氧杂(终浓度0.1mmol/l)，充分混匀。O-2·的形成及麦芽醇对O-2·的猝灭测定同实验例3。
上述得到的结果见附图5。
实验例5麦芽醇对肿瘤细胞的抑制作用一、配药麦芽醇粉末24.2mg溶于2ml生理盐水中，加热溶解。
二、接种细胞将培养KB细胞(人鼻咽癌上皮细胞，中国医学科学院肿瘤研究所)用胰酶EDTA消化分散后计数。
1、配液RDMI-1640 85％小牛血清 15％2、接种取无菌96孔培养板，加入上述细胞悬液200μl/孔3、培养37℃5％CO2培养箱培养24小时。
三、加药1、将96孔中的培养基上清吸出2、加入含有麦芽醇的培养基约含量(μl/m)终浓度(mmol/l)0.250.0240.500.050
1.000.0962.000.1924.000.3848.000.76016.001.530四、加MTT1、配液MTT粉加1640液配成0.2mg/ml2、将含有麦芽醇的培养基从96孔板中吸出，加入上述MTT液200ul/孔3、继续培养4小时五、加DMSO将MTT液吸出，加入DMSO 200μl/孔，振荡10分钟六、结果在MR700酶标仪上检测OD值结果见表1，其中T为加药O.D值、C为无药对照O.D值表1
从上表可以看出麦芽醇终浓度为0.384mmo1/L时，肿瘤生长率仅10％左右，所以又将麦芽醇终浓度为0-0.48mmol/L作重复实验，即下述的实验例6。实验例6麦芽醇对肿瘤细胞的抑制作用一、配药将麦芽醇粉末24.2mg溶于2ml生理盐水中，加热溶解。
二、接种细胞培养KB细胞用胰酶EDTA消化分散后计数。
1、配液RDMI-164085％小牛血清 15％2、接种取无菌96孔培养板，加入上述细胞悬液200ul/孔3、培养37℃5％CO2培养箱培养24小时。
三、加药1、将96孔中的培养基上清吸出2、加入含麦芽醇的培养基终含量(μl/ml) 终浓度(mmol/L)0.25 0.0240.50 0.0501.00 0.0962.00 0.1923.00 0.2894.00 0.3845.00 0.480四、加MTT1、配液MTT粉加1640液配成0.2mg/ml2、将含有麦芽醇的培养基从96孔板中吸出，加入上述MTT液200μl/孔
3、继续培养4小时五、加DMSO将MTT液吸出，加入DMSO 200μl/孔，振荡10分钟六、结果在MR700酶标仪上检测OD值结果见表2表2
从上表可以看出麦芽醇终浓度为0.48mmol/L时，肿瘤生长率仅10％，从两个实验结果说明麦芽醇浓度在0.5mmol/L可抑制肿瘤生长90％。实验例7麦芽醇对小鼠艾氏腹水癌生长的抑制作用一、配药(1)将麦芽醇粉末6.25mg溶于5ml生理盐水中，终浓度为1.25mg/ml，加热溶解；得药(1)；(2)将麦芽醇粉末12.5mg溶于5ml生理盐水中，终浓度为2.5mg/ml，加热溶解；得药(2)。
二、癌细胞的分离艾氏腹水癌接种后7-8天，拉颈椎处死，取腹水0.4ml，加生理盐水稀释到2ml。
三、喂药与接种48只小鼠(雌雄各半)体重约20克左右，随机分成3组，每组16只(雌雄各半)，一组为对照组，另两组为实验组。两个实验组在接种前分别在腹腔注射上述配好的药，一组注射含麦芽醇1.25mg/ml的药(1)，按10mg/kg体重注射，另一组注射含麦芽醇2.5mg/ml的药(2)，按20mg/kg体重注射。对照组每只小鼠注射0.2ml生理盐水。然后在腹腔注射0.2ml上述癌细胞。接种算第一天，然后每隔一天再按上述方法注射药和理生盐水三次(即第三天，第五天、第七天)。
四、结果见表3
表3
从上表可以看出麦芽醇10mg/kg、20mg/kg均可抑制艾氏腹水癌的生长，存活率增高。10mg/kg尤为明显。实验例8长期服用麦芽醇对小鼠游泳时间的影响将昆明纯种小鼠按体重随机分成3组，每组14只，一组为对照组，每天喂生理盐水；另二组为实验组，喂麦芽醇，每天以25mg/kg体重和50mg/kg体重分别喂药，每周测一次体重，4周后测游泳耐力试验将小鼠放入游泳水槽，水温25～28℃，分组进行，以小鼠不能维持浮出水面(至死)所持续的时间定为每只鼠的游脉时间，以分钟为单位。结果见表4。
表4<
实验例9短期服用麦芽醇对小鼠游泳时间的影响选昆明纯种小鼠40只，随机分组，每组20只，即麦芽醇组和对照组。麦芽醇组按每公斤体重喂麦芽醇10mg计，对照组喂生理盐水，食用2小时后，在24℃水池中检测双组小鼠的游泳时间，其结果见表5。表5
实验例10麦芽醇喂养小鼠后各种指标的测定选昆明小鼠，雄性，体重25±2克，随机分组，每周6次按体重给予服不同剂量麦芽醇，对照组服生理盐水。同时设维生素E组作为对比。维生素E配在色拉油中。
表六
注*实验组与对照组相比较P＜0.05**实验组与对照组相比较P＜0.01喂药时间为四周其结果表明，麦芽醇对减轻体重和降低血脂有作用实验例11麦芽醇抗紫外照射对皮肤损伤的实验动物购于北京医学院动物饲养厂，250-300克(♂,♀)白色豚鼠。
药物按实施例3的方法制备麦芽醇膏剂，其中含麦芽醇分别为0.2％,0.4％,0.8％方法将豚鼠背部两侧剪毛以后用8％Na2S脱净，露出皮肤，用温水棉花轻轻擦干净，两侧背皮标画上实验区域(直径2cm的圆圈)，先将被试药膏均匀涂于圈内，用厚胶布剪成2cm空洞复盖在背部，露出被试区域，用1000W微型紫外照射仪，波长253nm，距皮肤1cm照射1分半，再涂上被试药膏，同一只动物设定对照及不同剂量的药物。48小时后观察结果并拍照，照片见图6。
结果麦芽醇膏剂0.2％0.4％0.8％均有保护作用，以0.4％为最佳。实验例12麦芽醇膏剂治疗黄褐斑的疗效观察我们自1991年8月至12月采用0.05％麦芽醇霜治疗黄褐斑32例，2例由于出差中断治疗，共完成30例，现总结如下临床资料30例患者，年龄25-53岁，平均36岁。性别女性29例，占绝大多数，男性仅1例，病程2周-20年，平均5.4年。病因以妊娠而患病最常见，为11例。日晒3例；肝炎2例；服避孕药5个月而产生1例；有妊娠及肝炎1例；其余13例病因不清楚。皮损为淡黄色至深黄褐色素沉着斑，分布部位最常见为两颊，其次是颧部及上唇上方，个别在前额、眉间及口周。
方法与结果一、使用方法一日两次局部涂擦患处，治疗同时一律不使用其他口服及外用药。
二、疗效标准痊愈皮损全部消退显效70％以上皮损消退有效20％-70％皮损消退无效20％以下皮损消退或皮损未消退三、结果痊愈3例(10％)，显效15例(50％)，有效9例(30％)，无效3例(10％)，总显效率60％，总有效率90％。
副作用仅有2例(6.6％)在治疗前4周及6周有轻度瘙痒，继续使用不再瘙痒，无其余副作用。
小结0.05％麦芽醇膏剂治疗黄褐斑30例，显效率60％，总有效率90％，疗效较好，基本无副作用。
权利要求
1.麦芽醇(酚)在制备治疗人类皮肤疾患药中的应用。
2.如权利要求1的应用，其特征在于，所述的皮肤疾患包括黄褐斑、日光性皮炎、痤疮。
全文摘要
本发明涉及麦芽醇的新用途。该化合物对人类或哺乳动物肿瘤细胞有抑制作用,同时还具有抗衰老,抑制血小板聚集,降低体重,降低血脂以及对某些皮肤病的治疗作用。
文档编号A61K31/045GK1231889SQ9810185
公开日1999年10月20日 申请日期1998年5月12日 优先权日1993年2月10日
发明者冯立明, 潘华珍 申请人:中国医学科学院基础医学研究所