新的化合物的制作方法

专利名称：新的化合物的制作方法
技术领域：
本发明提供了新的三唑并[4，5-d]嘧啶类化合物、它们作为药物的应用、含有它们的组合物以及制备它们的方法。
血小板粘附和聚集，是动脉血栓形成中的起始过程。虽然血小板粘附于内皮下表面的过程对受损伤血管壁的修复可能具有重要的作用，但是由此引发的血小板聚集可促使活性血管床的急性血栓形成性闭塞，结果导致具有高发病率的情况如心肌梗塞和不稳定性心绞痛。常用于预防或缓解所述病症的成功措施如血栓溶解和血管成形术，也受血小板介导的阻塞或再阻塞的危害。
有多种会聚途径可以导致血小板聚集。任何一种开始的刺激，最后共同的结果都是借助于血纤维蛋白原对膜结合位点、糖蛋白IIb/IIIa(GP IIb/IIIa)的结合，从而引起血小板的交联。针对GP IIb/IIIa的抗体或拮抗剂的高度抗血小板效力，可通过它们干扰所述最后共同结果来加以解释。但是，该效力也可以解释应用该类药物时所观察到的出血问题。凝血酶可以导致血小板聚集，这很大程度上不取决于其他的途径，但是，没有其他机制对血小板的预先激活作用，就不大可能存在相当大量的凝血酶。某些凝血酶抑制剂如水蛭素是高效的抗血栓形成剂，但是，也同样可能导致过度出血，因为它们既有抗血小板的功能，也有抗凝血剂的作用(The TIMI 9a Investigators(1994)，Circulation90，pp.1624-1630；The Global Use of Strategies to OpenOccluded Coronary Arteries(GUSTO)IIa Investigators(1994)Circulation 90，pp.1631-1637；Neuhaus K.L.等(1994)Circulation90，pp.1638-1642)。
已经发现，ADP对血栓形成起关键性介体的作用。ADP的关键作用受到以下事实的支持其他一些作用剂如肾上腺素和5-羟色胺(5HT，血清素)，只有在ADP存在时才会引起聚集作用。阿斯匹林有限的抗血栓形成效力可能反映了如下事实它仅阻断一种来源的ADP，即在血小板粘附之后以与促凝血素有关的方式释放ADP(参见例如Antiplatelet Trialists′Collaboration(1994)，Br.Med.J.308，pp.81-106；Antiplatelet Trialists′Collaboration(1994)，Br.Med.J.308，pp.159-168)。阿斯匹林对由其他来源ADP(例如来源于损伤细胞的ADP或者在血液紊流条件下释放的ADP)引起的聚集作用没有效果。ADP诱发的血小板聚集作用是由专门定位于血小板膜上的P2T-受体亚型介导的。最近的研究已表明，与其他抗血栓形成剂相比，在该受体上的拮抗剂可以提供显著的改善效果。因此，有必要寻找P2T-拮抗剂作为抗血栓形成的药物。
现已发现一系列三唑并[4，5-d]嘧啶类衍生物是P2T-拮抗剂。第一方面，本发明提供了式(I)化合物或其药学上适用的盐或其溶剂合物，
其中R1为C1-6烷基、C3-8环烷基或苯基，每一个基团可以由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11或C1-6烷基(其本身可以由1个或多个卤原子任选取代)的取代基任意地取代；R2为由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11、C3-8环烷基、芳基(可以由1个或多个烷基和/或卤原子任选取代)，或C1-6烷基的取代基任意取代的C1-8烷基；或者R2为由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11、C1-6烷基或苯基的取代基任意取代的C3-8环烷基(其中所述取代基中的后2个基团可以由1个或多个选自卤素、NO2、C(O)R8、OR8、SR11、NR12R13、由1个或多个卤原子任选取代的苯基和C1-6烷基的取代基任意地取代)；R3和R4中之一为羟基，另一个为氢、羟基或NR9R10；R5为(CH2)nNR14R15，这里n为零～6，并且R14和R15独立地为氢、C1-6烷基或苯基；或者R5为CONR16R17，这里R16为氢或C1-6烷基，R17为C1-6烷基或C3-6环烷基，它们中每个可由NR18R19取代，并且它们可由苯基任选取代，或者R17为由苯基取代的C1-6烷基或C3-6环烷基，而苯基又可由NR18R19取代，这里R18和R19独立地为氢、C1-6烷基或苯基；或者R17为含有1个或多个氮原子的并且在氮原子上由氢、C1-6烷基或苯基任选取代的五～八元饱和杂环；或者R16和R17与它们所连结的氮原子一起形成由如上定义的NR18R19取代的五～八元环；或者R16与R19一起形成含有2个氮原子的六～八元环，这里R17和R18的定义同上；或者R5为(CH2)pNR20CO(CH2)qOR21或(CH2)pNR22(CH2)qNR23COR24，这里p和q独立地为1～4，R20、R21、R22、R23和R24独立地为C1-4烷基或苯基；或者R5为CH＝CHCH2NR25R26，这里R25为氢、C1-6烷基或苯基，R26为氢或(CH2)yNR27R28，这里y为2-4，R27和R28独立地为氢、C1-6烷基或苯基；R8、R9、R10和R11独立地为氢或C1-6烷基；R12和R13独立地为氢、C1-6烷基或酰基。
烷基(无论是独立的或作为其他基团的部分)可以是直链的或支链的。式(I)化合物可以立体异构体形式(包括对映异构体)存在，本发明包括每种立体异构形式以及它们的混合物(包括外消旋体)。本发明还包括任一互变异构形式以及它们的混合物。
优选的式(1)化合物具有以下立体化学结构，
合适的R1为C1-6烷基、C3-8环烷基或苯基，每一个基团可以由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11或C1-6烷基(其本身可由1个或多个卤原子任选取代)的取代基任意地取代。优选的R1为C1-8烷基。更好的是R1为丙基。
合适的R2为由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11、C3-8环烷基、芳基(可以由1个或多个烷基和/或卤原子任选取代)的取代基任意取代的C1-8烷基，或C1-6烷基；或者R2为由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11、C1-6烷基或苯基的取代基任意取代的C3-8环烷基，其中所述取代基中的后2个基团可以由1个或多个选自卤素、NO2、C(O)R8、OR8、SR11、NR12R13、苯基和C1-6烷基任选取代。优选的R2为C1-6烷基或由苯基任选取代的C3-8环烷基。更好的是R2为丁基或由苯基取代的环丙基。
合适的是R3或R4中之一为羟基，另一个为氢、羟基或NR9R10。优选R3或R4两者均为羟基。
合适的R5为(CH2)nNR14R15，这里n为零～6，R14和R15独立地为氢、C1-6烷基或苯基；或者R5为CONR16R17，这里R16为氢或C1-6烷基，R17为C1-6烷基或C3-6环烷基，它们中每个可由NR18R19取代，并且它们可由苯基任选取代，或者R17为由苯基取代的C1-6烷基或C3-6环烷基，而苯基又可由NR18R19取代，这里R18和R19独立地为氢、C1-6烷基或苯基；或者R17为含有1个或多个氮原子的并且在氮原子上可由氢、C1-6烷基或苯基任选取代的五～八元饱和的杂环；或者R16和R17与它们所连接的氮原子一起形成由以上定义的NR18R19取代的五～八元环；或者R16与R19一起形成含有2个氮原子的六～八元环，其中R17和R18定义同上；或者R5为(CH2)pNR20CO(CH2)qOR21或(CH2)pNR22(CH2)qNR23COR24，这里p和q独立地为1～4，R20、R21、R22、R23和R24独立地为C1-4烷基或苯基；或者R5为CH＝CHCH2NR25R26，这里R25为氢、C1-6烷基或苯基，R26为氢或(CH2)yNR27R28，这里y为2～4，R27和R28独立地为氢、C1-6烷基或苯基。
优选R5为(CH2)nNH2(这里n为零、1或2)、CONR16R17，这里R16为氢，R17为由NR18R19任选取代的C1-5烷基，这里R18和R19均为氢，或者一个为C1-6烷基(尤其是甲基)，另一个为苯基，或者R5为CONR16R17，这里R16为氢，R17为CH2苯基或环己基，它们中每1个均可由氨基取代，或者R5为CONR16R17，这里R16和R17形成哌嗪环，或者R5为CH＝CHCH2NR25R26，这里R25和R26均为氢，或者R25为氢，R26为(CH2)2NH2，或者R5为CH2R20CO(CH2)2OR21，这里R20和R21为C1-4烷基，优选分别为乙基和甲基，或者R5为CH2NH(CH2)2NHCOR24，这里R24为C1-4烷基，尤其为甲基。
更优选的R5基团为本文所例举的那些。
特别优选的本发明化合物包括以下化合物或其药学上适用的盐或其溶剂合物，[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-N-[[3-(N-甲基-N-苯基)氨基]丙基]-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐，[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[5-氨基戊基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐，[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-氨基丙基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐，[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[(3-氨基苯基)甲基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐，[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-N-[3-氨基丙基]-2，3-二羟基-4-[7-[2-(苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷甲酰胺三氟乙酸盐，[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-N-[4-氨基环己基]-2，3-二羟基-4-[7-[2-(苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷甲酰胺，二(三氟乙酸盐)，[1S-(1α，2α，3β，5β)]-3-氨基-5-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-(1α，2α，3β，5β)]-3-(氨甲基)-5-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-氨基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(乙氨基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1R*，2S*)]]-3-[(甲氨基)甲基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-[(乙氨基)甲基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(氨甲基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(2-氨乙基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇[1S-[1α，2α，3β(E)，5β(1S*，2R*)]]-3-(3-氨基丙-1-烯基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，N-乙基-N-[[1R-[1α，2β，3β，4α(1R*，2S*)]]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊基甲基]-3-甲氧基-丙酰胺，[1S-[1α，2α，3β(E)，5β(1S*，2R*)]]-3-[3-(2-二甲氨基乙基)氨基]-丙-1-烯基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，二-三氟乙酸盐，[1R-[1α，2β，3β，4α(1R*，2S*)]]-N-[2-[2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊基甲基氨基]乙基]-乙酰胺，[1S-[1α，2α，3α，5β(1S*，2R*)]]-3-氨基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，1-[[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]环戊基羰基]哌嗪。
本发明还提供了制备式(I)化合物的方法，该方法包括(a)对于其中R5为CONHR16R17的式(I)化合物，使式(II)化合物或其受保护的衍生物与式(III)化合物反应，
其中R1、R2、R3和R4同式(I)中的定义，HNR16R17(III)其中R16和R17同式(I)中的定义，或(b)对于其中R5为氨基的式(I)化合物，将以上定义的式(II)化合物进行Curtis重排，或在(a)或(b)之后以任何次序任选进行●将1个或多个官能团转变为其他官能团●脱去任何保护基●形成药学上适用的盐或溶剂合物。
应用偶合化学，例如在偶合剂存在下，按照肽合成的已知方法，完成式(II)化合物与式(III)化合物的反应(见M.Bodanszky和A.Bodanszky，The Practice of Peptide Synthesis，Springer-Verlag，1984)。合适的偶合剂包括1，1′-羰基二咪唑和二环己基碳二亚胺；优选的偶合剂是溴三-吡咯烷子基-六氟磷酸鏻(bromo-tris-pyrrolidino-phosphonium hexafluorophosphat)，在N，N-二异丙基乙基胺存在下应用。该反应优选在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或四氢呋喃(THF)中进行，优选的反应温度为-15～120℃，为0℃～室温更好。
式(II)化合物可以用已知试剂如重铬酸吡啶鎓或氧化铬(VI)氧化式(IV)化合物或其受保护衍生物制得，
其中R1、R2、R3和R4同式(I)中的定义。
式(IV)化合物可以由式(V)化合物与NH2R2或NH2R2的盐(这里R2的定义同上)于碱存在下反应制得，
其中R1同式(I)中的定义，P1、P2和P3为氢或为相同或不同的保护基，L1为离去基团如卤原子。NH2R2合适的盐包括盐酸盐。合适的碱包括有机碱如三乙胺或无机碱如碳酸钾。
式(V)化合物可以由式(VI)化合物与金属亚硝酸盐如碱金属亚硝酸盐，尤其是亚硝酸钠在稀含水酸如2M HCl中，或与C1-6烷基亚硝酸酯在惰性溶剂中，于-20℃～100℃进行重氮化反应制得；优选的反应条件是用亚硝酸异戊酯，于乙腈中，在80℃进行，
其中R1、L1、P1、P2和P3定义同上。
其中P1为OH的式(VI)化合物可以通过还原式(VIII)化合物制得，
其中R1、L1、P2和P3定义同上。硝基的还原反应可以按下法进行例如用过渡金属催化剂在约室温进行氢化，如用钯/炭为催化剂在氢气压下进行氢化，优选在1-5个大气压下在溶剂如乙醇中进行，或者用铁粉于酸性溶剂如乙酸中在约100℃进行。
内酰胺的还原可以用复合的金属氢化物如氢化铝锂于合适的溶剂如乙醚中进行。该还原反应优选用硼氢化钠于甲醇中进行。
式(VII)化合物可以按下法制备使式(VIII)化合物与式(IX)化合物在碱如C1-6烷基-M或MH(这里M为金属离子)例如丁基锂存在下，于惰性溶剂如四氢呋喃(THF)中，在约-10～100℃进行反应。优选应用氢化钠于THF中在室温下进行，
其中L1和R1定义同上，L2为离去基团如卤原子，这里L1和L2最好是相同的，
其中P2和P3定义同上。为了得到式(Ia)化合物，优选式(IX)化合物具有以下立体化学结构，
式(II)化合物还可以由式(VII)化合物进行以上所述的硝基还原反应，接着进行水解而制得。水解可以用无机酸如盐酸或强有机酸如三氟乙酸进行。所述还原和水解最好同时进行应用铁粉在含有碱土金属卤化物如氯化钙的醇溶剂(如乙醇)中，于约80℃进行反应。应用以上所述方法，可以将得到的中间体转变为式(II)化合物。
所有新的中间体又形成了本发明的另一方面。
应用已知的反应条件，可以添加或脱去保护基。保护基的应用详见“Protective Groups in Organic Chemistry”，由J.W.F.McOmie编辑，Plenum Press(1973)，以及“Protective Groups in OrganicSynthesis”第2版，T.W.Greene & P.G.M.Wutz，Wiley-Interscience(1991)。
通过碱性水解可以脱去酯保护基，例如通过应用金属氢氧化物，优选碱金属氢氧化物如氢氧化钠或氢氧化锂，或季铵氢氧化物，于溶剂如含水乙醇或含水四氢呋喃中，在10°～100℃(优选在大约室温)下进行碱性水解；或者用无机酸如盐酸或强有机酸如三氯乙酸于溶剂如含水1，4-二噁烷中进行酸性水解。
通过应用例如氟化物离子源如四-正丁基氟化铵或氟化氢可以脱去三烷基甲硅烷基保护基。
通过应用过渡金属催化剂如钯/炭，于氢气流下，在1-5巴压力，于溶剂如乙酸中进行氢解，可以脱去苄基。
应用已知的方法，通过转变官能团，可以将式(I)化合物转变为另一式(I)化合物。例如(a)为了制得其中R5为CH2NH2的式(I)化合物，使其中R5为CH2Hal(这里Hal为卤素)的式(I)化合物与叠氮化钠反应，然后进行还原反应，(b)为了制得其中R5为(CH2)2NH2的式(I)化合物，使其中R5为CH2Hal(这里Hal为卤素)的式(I)化合物与氰化物反应，接着进行还原反应，(c)为了制得其中R5为(CH2)NR14R15的式(I)化合物，使其中R5为(CH2)nNH2的式(I)化合物与合适的酮于还原剂存在下进行反应，(d)为了制得其中R5为CH＝CH·CH2NR22R23并且R3和R4定义同上的式(I)化合物，使其中R5为CH＝CHCH2L的式(I)化合物与式HNR22R23的化合物反应，这里L为离去基团如溴、氯或甲磺酸酯，R22和R23定义同上，(e)为了制得其中R5为CH＝CHCH2L的式(I)化合物，可以按一般方法从其中R5为CH＝CHCH2OH的式(I)化合物制备，(f)为了制得其中R5为CH＝CHCH2OH的式(I)化合物，可以由其中R5为CH＝CHCO2R30(这里R30为C1-6烷基)的式(I)化合物经还原，例如用DIBAL-H进行还原制备。
其中R5为CH＝CHCO2R30(这里R30为C1-6烷基)的式(I)化合物可以按WO 97/03084中所述方法进行制备。
使式(I)化合物游离的酸，或其盐，或游离的碱，或其盐或它们的衍生物，与1个或多个当量合适的碱(例如由C1-6烷基任选取代的氢氧化铵或碱金属或碱土金属氢氧化物)或酸(例如氢卤酸(尤其是盐酸)、硫酸、草酸或磷酸)反应，可以得到式(I)化合物的盐。该反应可以在该盐不溶的溶剂或介质或者在该盐可溶的溶剂或介质例如水、乙醇、THF或乙醚中进行，经真空或冷冻干燥除去溶剂或介质。该反应也可以为复分解的过程或可以在离子交换树脂上进行。虽然其他盐也是有用的，例如用于分离或纯化产品，但优选无毒的生理上适用的盐。
本发明化合物用作为P2T受体拮抗剂。因此，本发明化合物可用于治疗，尤其是辅助治疗，它们特别可以用作为血小板激活、聚集和脱粒的抑制剂，抗血栓剂，或用于治疗或预防不稳定性心绞痛、冠状动脉成形术(PTCA)、心肌梗塞、周围血栓溶解、动脉粥样硬化的原发性动脉血栓并发症如血栓或栓塞中风、外周血管疾病、有或无血栓溶解的心肌梗塞、动脉粥样硬化中由于干预例如血管形成术、动脉内膜切除术、斯坦特印模、冠状血管或其他血管移植手术而出现的动脉并发症，外科或机械损伤而引起的血栓并发症如偶然外伤或外科损伤后的器官组织抢救、重建外科手术包括皮肤瓣和肌瓣的重建外科手术而引起的血栓并发症，带有扩散的血栓形成/血小板消耗成分的疾病如扩散的血管内凝血，血栓形成的血小板减少性紫癜，溶血的尿毒综合症，败血病的血栓形成并发症，成人呼吸道疾病综合症，抗磷脂综合症，肝素引起的血小板减少症和子痫前期/子痫或静脉血栓形成如深静脉血栓形成，静脉闭塞疾病，血液学疾病如脊椎增生疾病，包括血小板增多；或预防体内由于用器械方法如心-肺分流术(预防微小血栓栓塞)引起的血小板激活，预防体外由于用器械方法所引起的血小板激活如血制品(如血小板浓缩物)的保存，或分流闭塞如肾透析或血浆取出法，血管损伤的继发性血栓形成/炎症如脉管炎、关节炎、肾小球性肾炎、炎症性肠病和器官移植排斥反应，病症如偏头痛、雷诺现象，动脉粥样化蚀斑形成/渐进、血管狭窄/再狭窄以及其中在疾病过程中血小板衍生的因子涉及的免疫疾病例如哮喘。
本发明还提供了应用本发明化合物制备治疗上述疾病的药物的用途。尤其是本发明化合物可用于治疗心肌梗塞、血栓中风、短暂的局部缺血、外周血管疾病和心绞痛，尤其是不稳定性心绞痛。本发明还提供了治疗上述疾病的方法，该方法包括给患有上述疾病的患者施用治疗有效剂量的本发明化合物。
本发明化合物可以经局部给药，例如以溶液剂、混悬液剂、HFA气溶胶剂和干粉剂向肺和/或气道给药；或经全身给药，例如以片剂、小丸剂、胶囊剂、糖浆剂、粉剂或颗粒剂经口服给药，或以无菌的非经胃肠道给药的溶液剂或混悬液剂经非胃肠道给药，或经皮下给药，或以栓剂经直肠给药或经透皮吸收给药。
可以给予本发明化合物本身，或者给予药物组合物，所述药物组合物含有本发明化合物以及药学上适用的稀释剂、辅助剂或载体。特别优选不含有能够引起有害反应(如过敏)的物质的组合物。
本发明化合物的干粉剂和加压的HFA气溶胶可以经口或鼻吸收给药。对于吸入给药，要求将化合物细粉碎。
本发明化合物还可以用干粉吸入器给药。该吸入器可以是单一剂量或多剂量的，并且可以是呼吸式精确的干粉吸入器。
另一方法是将细碎的化合物与载体物质如单糖或二糖或多糖、糖醇或其他的多元醇一起混合。合适的载体包括蔗糖和淀粉。另外，细碎化合物可以用另一物质进行包衣。可以将粉末状混合物装入硬明胶胶囊中，每一粒含有所需剂量的有效化合物。
又一方法是将细碎粉末制成小球，该小球在吸入过程中破碎。可以将该球化粉末装入多剂量吸入器(即称为Turbuhaler)的药物贮存器中，其中剂量单元计量患者所需吸入的剂量。应用该系统，可以将有效化合物与载体(或没有载体)一起输送给患者。
含有本发明化合物的药物组合物可以是适用于口服给药的片剂、小丸剂、胶囊剂、糖浆剂、粉剂或颗粒剂；适用于非经胃肠道给药的无菌的非经胃肠给药或皮下给药的溶液剂、混悬液剂、或适用于直肠给药的栓剂。
对于口服给药，可以将有效化合物与辅助剂或载体例如乳糖、蔗糖、小梨糖醇、甘露糖醇、淀粉(如马铃薯淀粉、玉米淀粉或淀粉精)、纤维素衍生物、粘合剂(如明胶或聚乙烯吡咯烷酮)以及润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸钙、聚乙二醇、蜡、石蜡等一起混合，然后压制成片剂。如果需要包衣片剂，那么可以将上述制得的片芯用含有例如阿拉伯树胶、明胶、滑石、二氧化钛等的浓的糖溶液进行包衣。另外，该片剂还可以用溶于易挥发性有机溶剂或含水溶液中合适的聚合物进行包衣。
为了制备软明胶胶囊剂，可以将本发明化合物与例如植物油或聚乙二醇一起混合。硬明胶胶囊剂可以含有应用上述片剂任一赋形剂例如乳糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、纤维素衍生物或明胶制成的化合物颗粒。液体或半固体药物的配方也可以装入硬明胶胶囊中。
口服给药的液体制剂可以为糖浆剂或混悬液剂，例如含有本发明化合物、糖以及乙醇、水、甘油和丙二醇的混合物。所述液体制剂可以任选含有着色剂、调味剂、糖精和作为增稠剂的羧甲基纤维素或本技术领域专业人员熟知的其他赋形剂。
以下述实施例详述本发明。在实施例中，用Varian Unity Inova300或400核磁共振仪测定NMR谱，MS谱测定如下用VG70-250S或Finnigan Mat Incos-XL光谱仪测定EI谱，用VG70-250SEQ光谱仪测定FAB谱，用Finnigan Mat SSQ 7000或Micromass Platform光谱仪测定ESI和APCI谱。制备性HPLC分离通常用装有二氧化硅的BDSC-18反相Novapak、Bandapak或Hypersil柱进行。快速色谱(实施例中以(SiO2)简要表示)用Fisher Matrix二氧化硅(30～70μm)进行。有机溶液经硫酸镁或硫酸钠干燥，然后经过滤除去干燥剂。对于存在旋转异构体的实施例，在质子NMR谱中仅提供主要旋转异构体的化学位移。实施例1[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-N-[[3-(N-甲基-N-苯基)氨基]丙基]-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐a)4，6-二羟基-2-(丙硫基)嘧啶向含有氢氧化钠(55.6g)的4，6-二羟基-2-巯基嘧啶(200g)的水(800ml)混悬液中加入丙基碘(136ml)。反应混合物搅拌2周，然后浓缩至1/2体积，加入2N盐酸，通过过滤分离出产物(167g)。MS(EI)186(M+，100％)。
b)4，6-二羟基-5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶向冰冷的发烟硝酸(323ml)中缓慢地加入步骤a)产物(70g)。将反应混合物搅拌1小时并倒入冰中，通过过滤分离出产物(65g)。MS(EI)231(M+)，41(100％)。
c)4，6-二氯-5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶向搅拌的步骤b)产物(134g)在磷酰氯(500ml)的混悬液中滴加N，N-二乙基苯胺(150ml)，然后所得的溶液加热回流1小时。将冷却的反应混合物倒入冰中，随后用乙醚(3×500ml)萃取。将合并的萃取液干燥并浓缩。经色谱(SiO2，异己烷∶乙醚，19∶1为洗脱剂)得到小标题化合物(128g)。MS(EI)271，269，267(M+)，41(100％)。
d)[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]-5-[6-氯-5-硝基-2-(丙硫基)嘧啶-4-基]-四氢-4，7-亚甲基-2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮将氢化钠(60％，4.00g)分次加到[3aS-(3aα，4β，7β，7aα)]四氢-2，2-二甲基-4，7-亚甲基-1，3-二氧杂环戊烯并[4，5-c]吡啶-6(3aH)-酮(18.3g)的THF(500ml)溶液中。搅拌1小时，将该溶液滴加到步骤c)产物(54.0g)的THF(500ml)溶液中。反应混合物于室温搅拌45分钟，然后浓缩并经色谱纯化(SiO2，二氯甲烷∶异己烷，3∶2为洗脱剂)，得到小标题化合物(79.2g)MS(APCI)417，415(M+H+)，415(100％)。
e)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[[5-氨基-6-氯-2-(丙硫基)-4-嘧啶基]氨基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-羧酸向搅拌的步骤d)产物(10.0g)和氯化钙的乙醇(140ml)溶液中加入铁粉(10.0g)。反应混合物加热回流10分钟，然后通过硅藻土过滤，用热乙醇洗涤若干次。滤液经浓缩得到所需产物(9.3g)。MS(FAB)405，403(M+H+)，405(100％)f)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-氯-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-羧酸向步骤e)产物(9.28g)的乙腈(80ml)溶液中加入亚硝酸异戊酯(6.02ml)，溶液于70℃加热1小时。将冷却的反应混合物浓缩并纯化(SiO2，乙酸乙酯∶异己烷2∶1为洗脱剂)，得到小标题化合物(7.9g)。MS(FAB)416，414(M+H+)，414(100％)。
g)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-羧酸步骤f)产物(5.52g)和正丁基胺(5ml)在1，4-二噁烷(25ml)中的混合物于室温搅拌1小时。将反应混合物浓缩，残余物经纯化(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯2∶1为洗脱剂)得到小标题化合物(2.2g)。MS(FAB)451(M+H+，100％)。
h)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-N-[3-(N-甲基-N-苯基氨基)丙基]-4H-环戊烯并-[d]-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲酰胺向步骤g)产物(0.24g)、溴-三吡咯烷子基-六氟磷酸鏻(0.32g)和N，N-二异丙基乙基胺(0.28ml)在N，N-二甲基甲酰胺(8ml)的溶液中加入N-(3-氨基丙基)-N-甲基苯胺(0.1g)。混合物于室温搅拌2小时，浓缩并纯化(SiO2，乙酸乙酯∶汽油3∶2)，得到小标题化合物(0.23g)。MS(APCI)597(M+H+，100％)i)[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-N-[3-[(N-甲基-N-苯基)氨基]丙基]-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐步骤h)产物(0.22g)在三氟乙酸(8ml)和水(1ml)中的溶液于室温搅拌2小时，然后浓缩并纯化(HPLC NovapakC18柱，0.1％乙酸铵水溶液甲醇，30∶70～0∶100，在15分钟内作梯度洗脱)，得到标题化合物(0.12g)。MS(APCI)557(M+H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)9.00(1H，t)，8.00(1H，t)，7.21(2H，m)，6.85(3H，m)，4.95(1H，m)，4.41(1H，m)，4.15(1H，m)，3.90(2H，m)，3.51(2H，q)，3.38(2H，m)，3.11(4H，m)，2.92(3H，m)，2.78(1H，m)，2.36-2.25(2H，m)，1.73-1.58(6H，m)，1.36(2H，m)，1.00(3H，t)，0.91(3H，t).实施例2[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[5-氨基戊基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐用实施例1步骤g)产物和1，5-二氨基戊烷，按实施例1步骤h)的方法，随后按实施例1步骤i)的方法制备。MS(APCI)495(M+H+，100％)NMR δH(d6-DMSO)4.91(1H，m)，4.47(1H，t)，4.31(1H，t)，3.75 and 3.37(2H，m)，3.09(2H，t)，2.95(2H，m)，2.80(3H，m)，2.45(1H，m)，1.48(8H，br m)，1.24(4H，m)，0.83(3H，t)，0.75(3H，t).实施例3[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-氨基丙基]-4-[7-(丁氨基)-5，-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐a)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-N-[[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丙基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲酰胺按实施例1步骤h)的方法，用实施例1步骤g)产物和(3-氨基丙基)氨基甲酸，1，1-二甲基乙基酯制备。MS(APCI)495(M+H+，100％)。
b)[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-氨基丙基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐按实施例1步骤i)的方法，用步骤a)产物制备。MS(APCI)465(M-H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)9.01(1H，t)，8.14(1H，t)，7.75(3H，br s)，5.21(1H，br s)，5.04(1H，br s).4.96(1H，m)，4.41(1H，m)，4.13(1H，m)，3.50(2H，q)，3.13(4H，m)，2.77(3H，m)，2.29(2H，m)，1.68(6H，m)，1.34(2H.sextet)，0.99(3H，t)，0.91(3H，t).实施例4[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[(3-氨基苯基)甲基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐a)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-N-[(3-氨基苯基)甲基]-6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲酰胺按实施例1步骤h)的方法，用实施例1步骤g)产物和3-氨基苄基胺制备。MS(APCI)555(M+H+，100％)。
b)[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[(3-氨基苯基)甲基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐按实施例1步骤i)的方法，用步骤a)产物制备。MS(APCI)515(M+H+100％)NMRδH(d6-DMSO)8.99(1H，t)，8.54(1H，t)，6.95(1H，m)，6.48-6.43(3H，m)，5.30(2H，br s)，5.13(1H，br s)，5.00-4.93(2H，m)，4.45(1H，br m)，4.16(3H，d)，3.52-3.47(2H，m)plus rotamer at 3.90，3.13-3.07(2H，m)，2.86-2.81(1H，m)，2.37-2.24(2H，m)，1.73-1.56(4H，m)，1.39-1.32(2H，m)，0.98(3H，t).实施例5[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-N-[3-氨基丙基]-2，3-二羟基-4-[7-[2-(苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐a)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα(1R*，2S*))]-四氢-2，2-二甲基-6-[7-[2-(苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-羧酸按实施例1步骤g)的方法，用实施例1步骤f)产物和(1R-反式)-2-苯基-环丙胺，[R-(R*，R*)]-2，3-二羟基丁二酸酯(1∶1)(按L.A.Mitscher等，J.Med.Chem.1986，29，2044所述方法制备)制备。MS(APCI)511(M+H+，100％)b)[3aR-[3aα，4α，6α，6aα(1R*，2S*)]]-四氢-2，2-二甲基-N-[3-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]丙基]-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲酰胺按实施例1步骤h)的方法，用步骤a)产物和(3-氨基丙基)-氨基甲酸，1，1-二甲基乙基酯制备。MS(APCI)667(M+H+)c)[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-N-[3-氨基丙基]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷甲酰胺三氟乙酸盐按实施例1步骤i)的方法，用步骤b)产物制备。MS(APCI)527(M+H+)NMRδH(d6-DMSO)9.36(1H，d)，8.12(1H，t)，7.69 (3H，br s)，7.31-7.16(5H，m)，5.20(1H，br s)，4.97(2H，m)，4.41(1H，t)，4.12(1H，t)，3.25-3.04(3H，m)，3.02-2.72(5H，m)，2.42-2.08(3H，m)，1.77-1.40(5H，m)，1.33(1H，m)，0.81(H，3t).实施例6[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-N-[反式-4-氨基环己基]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷甲酰胺，二(三氟乙酸盐)a)[3aR-[3aα，4α，6α，6aα(1R*，2S*)]]-N-[反式-4-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]环己基]-四氢-2，2-二甲基-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲酰胺按实施例1步骤h)的方法，用实施例5步骤a)产物和反式-(4-氨基环己基)氨基甲酸，1，1-二甲基乙基酯(按J.Smith等，J.Org.Chem.，1996，61，8811所述方法制备)制备。MS(APCI)707(M+H+，100％)b)[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-N-[反式-4-氨基环己基]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷甲酰胺二(三氟乙酸盐)按实施例1步骤i)的方法，用步骤a)产物制备。MS(APCI) 567(M+H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)9.36(1H，d)，7.88(1H，d)，7.83(3H，br s)，7.29(2H，m)，7.18(3H，m)，4.98(1H，q)，4.45(1H，m)，4.08(1H，t)，3.48(1H，m)，3.25-2.74(5H，m)，2.40-2.07(3H，m)，2.00-1.72(5H，m)，1.53-1.19(7H，m)，0.81(3H，t).实施例7[1S-(1α，2α，3β，5β)]-3-氨基-5-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇a)[3aR-[3aα，4α，6α，6aα]]-6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并[d]-1，3]-二唑-4-基]氨基甲酸，1，1-二甲基乙基酯向实施例1步骤g)产物(0.25g)的叔丁醇(5ml)溶液中加入二苯基磷酰叠氮(0.15g)和三乙胺(0.056g)。混合物加热回流10小时并浓缩。残余物溶于乙酸乙酯中，并用5％柠檬酸水溶液、盐水和碳酸氢钠水溶液洗涤，干燥并浓缩。经纯化(SiO2，乙酸乙酯∶异己烷1∶9～2∶8为洗脱剂)得到小标题化合物(0.13g)。MS，(APCI)522(M+H+，100％)。
b)[1S-(1α，2α，3β，5β)]-3-氨基-5-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇按实施例1步骤i)的方法，用步骤a)产物制备。MS(APCI)382(M+H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)9.08(1H，t)，8.50(3H，s)，5.00(3H，m)，4.46(1H，t)，4.14(1H，t)，3.50(3H，m)，3.08(2H，m)，2.64(1H，m)，2.14(1H，m)，1.72(2H，m)，1.61(2H，m)，1.34(2H，m)，1.00(3H，t)，0.91(3H，t).实施例8[1S-(1α，2α，3β，5β)]-3-(氨基甲基)-5-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇
a)N-丁基-3-[[3aS-(3aα，4α，6α，6aα)]-四氢-6-(碘代甲基)-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺于-60℃向[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲醇(按WO 9703084所述方法制备)(1g)的二氯甲烷(30ml)溶液中加入甲基三苯氧基碘化鏻(3.12g)的二氯甲烷(40ml)溶液。4小时后混合物用二氯甲烷稀释，并用硫代硫酸钠水溶液和碳酸氢钠水溶液洗涤。经纯化(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯4∶1为洗脱剂)得到小标题化合物(1.4g)。MS(APCI)547(M+H+，100％)。
b)3-[[3aS-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-(叠氮基甲基)-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺步骤a)产物(0.3g)和叠氮化钠(0.1g)在N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中的混合物于80℃加热2小时。加入水，产物用二氯甲烷萃取。经纯化(SiO2，二氯甲烷∶乙酸乙酯9∶1为洗脱剂)得到小标题化合物(0.2g)。MS(APCI)462(M+H+，100％)c)3-[[3aS-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-(氨基甲基)-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-丁基-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺在1大气压氢气压下，将步骤b)产物(0.3g)在含乙酸(0.5ml)的乙醇(50ml)中的溶液与10％ Pd/C催化剂一起搅拌18小时。混合物经过滤，浓缩和纯化(SiO2，乙酸乙酯-甲醇为洗脱剂)得到小标题化合物(0.1g)。MS(APCI)436(M+H+，100％)。
d)[1S-(1α，2α，3β，5β)]-3-(氨基甲基)-5-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇按实施例1步骤i)的方法，用步骤c)产物制备。MS(APCI)396(M+H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)5.06(1H，m)，4.80(1H，br s)，4.50(1H，t)，4.19(1H，t)，3.55(2H，t)，3.35-3.15(2H，m)，3.12(2H，t)，2.67(1H，m)，2.47(1H，m)，1.99(1H，m)，1.75-1.60(4H，m)，1.40-1.30(2H，m)，0.99(3H，t)，0.90(3H，t).实施例9[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-氨基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇a)[3aR-[3aα，4α，6α(1R*，2S*)，6aα]]-[6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4基]-氨基甲酸，1，1-二甲基乙基酯按实施例7步骤a)的方法，用实施例5步骤a)产物制备。MS(APCI)582(M+H+，100％)b)[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-氨基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇按实施例1步骤i)的方法，用步骤a)产物制备。MS(APCI)442(M+H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)9.42(1H，d4.2Hz)，8.21(3H，br s)，7.35-7.16(5H，m)，4.95(1H，q6.4Hz)，4.43(1H，t 6.0Hz)，4.09(1H，t 6.0Hz)，3.50(1H，br)，3.22(1H，m)，2.95(1H，m)，2.80(1H，m)，2.65(1H，m)，2.10(2H，m)，1.50(3H，m)，1.34(1H，m)，0.78(3H，t，7.6H2)实施例10[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(乙氨基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇用乙酸将实施例9步骤b)产物(0.72g)的甲醇(20ml)溶液调至pH5，向其中加入乙醛(60μl)和氰基硼氢化钠(74mg)。反应液于室温搅拌12小时，然后用氢氧化钠溶液调至pH14，并用乙酸乙酯萃取。将有机相干燥和浓缩，然后经纯化(HPLC，NovapakC18柱，0.1％乙酸铵水溶液∶乙腈60∶40作恒溶剂成分洗脱)得到标题化合物(0.21g)。MS(APCI)470(M+H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)9.66(1H，d 4.4Hz)，9.16(2H，br m)，7.50(2H，m)，7.40(3H，m，)5.17(1H，q 7.2Hz)，4.66(1H，t 6.4Hz)，4.44(1H，t 5.6Hz)，3.75(1H，m)，3.46(1H，m)，3.30(2H，m)，3.16(1H，m)，3.05(1H，m)，2.90(1H，m)，2.35(2H，m)，1.77(1H，m)，1.68(2H，m)，1.56(1H，m)，1.44(3H，t 7.2Hz)，1.00(3H，t 7.2Hz).实施例11[1S-[1α，2α，3β，5β(1R*，2S*)]]-3-[(甲氨基)甲基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇a)[3aR-[3aα，4α，6α(1S*，2R*)，6aα]]-四氢-2，2-二甲基-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲醇按实施例5步骤a)的方法，用(1S-反式)-2-苯基-环丙胺，[S-(R*，R*)]-2，3-二羟基丁二酸酯(1∶1)制备。MS(APCI)497(M+H+，100％)b)3-[[3aS-[3aα，4α(]R*，2S*)，6α，6aα]]-四氢-6-(碘代甲基)-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-(2-苯基环丙基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺按实施例8步骤a)的方法，用步骤a)产物制备。MS(APCI)606(M+H+，100％)c)[1S-[1α，2α，3β，5β(1R*，2S*)]]-3-(碘代甲基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]环戊烷-1，2-二醇步骤b)产物(0.34g)在甲醇(5ml)和四氢呋喃(5ml)混合液中的溶液用2M盐酸水溶液(2ml)处理。反应混合物于室温放置6小时。将该混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液(200ml)中，用乙酸乙酯(200ml)萃取，并将萃取液干燥和浓缩。经纯化(SiO2，甲醇∶氯仿1∶49为洗脱剂)得到小标题化合物(0.26g)。MS(APCI)567(M+H+，100％)d)[1S-[1α，2α，3β，5β(1R*，2S*)]]-3-[(甲氨基)甲基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇步骤c)产物(0.25g)的二甲亚砜(3ml)溶液用40％甲胺水溶液(1ml)处理。反应混合物于室温放置18小时，然后倒入乙酸乙酯(200ml)中，用饱和盐水水溶液(3×100ml)洗涤，干燥并浓缩。经纯化(SiO2，甲醇∶氯仿1∶4为洗脱剂)得到小标题化合物(0.27g)。MS(APCI)470(M+H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)9.32(1H，d)，7.31-7.15(5H，m)，4.96(2H，q)，4.42-4.39(1H，m)，3.84(1H，t)，3.22-3.18(1H，m)，2.95-2.85(2H，m)，2.70-2.64(1H，m)，2.34-2.27(4H，m)，2.17-2.11(2H，m)，1.85-1.75(1H，m)，1.54-1.47(3H，m)，1.36-1.31(1H，m)，0.82(3H，t).实施例12[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-[(乙氨基)甲基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环丙烷-1，2-二醇a)[3aR-[3aα，4α，6α(1R*，2S*)，6aα]]-四氢-2，2-二甲基-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲醇向[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-氯-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-甲醇(按WO 9703084所述方法制备)(55g)和(1R-反式)-2-苯基-环丙胺，[R-(R*，R*)]-2，3-二羟基丁二酸酯(1∶1)(按L.A.Mitscher等，J.Med.Chem.1986，29，2044所述方法制备)(11.3g)的二氯甲烷(500ml)溶液中加入N，N-二异丙基乙基胺(21ml)。反应混合物于室温搅拌3小时，然后用水洗涤，干燥和蒸发。残余物经纯化(SiO2，乙酸乙酯∶二氯甲烷3∶7为洗脱剂)得到小标题化合物(19g)。MS(APCI)497(M+H+，100％)b)3-[[3aS-[3aα，4α(1S*，2R*)，6α，6aα]]-四氢-6-(碘代甲基)-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-(2-苯基环丙基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺按实施例8步骤a)的方法，用步骤a)产物制备。MS(APCI)606(M+H+，100％)c)[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(碘代甲基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇按实施例11步骤c)的方法，用步骤b)产物制备。MS(APCI)567(M+H+，100％)d)[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-[(乙氨基)甲基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇按实施例11步骤c)的方法，用步骤c)产物和乙胺水溶液制备。MS(APCI)484(M+H+，100％)NMRδH(d6-DMSO)9.35(1H，d)，7.31-7.15(5H，m)，5.03-4.97(2H，m)，4.42(1H，q)，3.86(1H，t)，3.23-3.19(1H，m)，3.00-2.80(2H，m)，2.80-2.70(1H，m)，2.64-2.57(3H，m)，2.40-2.25(1H，m)，2.15-2.12(2H，m)，1.85-1.78(1H，m)，1.54-1.47(2H，m)，1.32-1.28(1H，m)，1.11-1.01(4H，m)，0.86-0.80(3H，m).实施例13[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(氨基乙基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，盐酸盐a)[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-叠氮基甲基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇实施例12步骤c)产物(0.9g)的二甲亚砜(5ml)溶液用叠氮化钠(0.125g)处理。反应混合物于室温搅拌7小时，然后倒入乙酸乙酯(200ml)中，用盐水(3×100ml)洗涤，干燥并浓缩。残余物与乙醚一起研制，得到小标题化合物(0.64g)。MS(APCI)482(M+H+，100％)b)[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(氨基甲基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，盐酸盐步骤a)产物(0.22g)的乙醇(7ml)溶液用10％钯-炭(0.03g)处理，所得的混悬液在4个大气压力氢气压下搅拌24小时。将反应混合物过滤，所得的溶液用过量乙醚氢氯酸处理以析出白色固体。分离出固体，并用乙酸乙酯洗涤得到标题化合物(0.13g)。MS(APCI)456(M+H+，100％)NMR δH(d6-DMSO)9.39(1H，d)，8.02(3H，s)，7.31-7.18(5H，m)，4.96(1H，q)，4.33(1H，t)，3.96(1H，t)，3.22-3.19(1H，m)，3.15-3.05(1H，m)，2.95-2.80(3H，m)，2.33-2.28(2H，m)，2.13-2.11(1H，m)，1.87-1.79(1H，m)，1.55-1.45(3H，m)，1.35-1.31(1H，m)，0.81(3H，t).实施例14[1S-[1α，2α，3β，5β(1 S*，2R*)]]-3-(2-氨基乙基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，盐酸盐a)[3aR-[3aα，4α，6α(1R*，2S*)，6aα]]-四氢-2，2-二甲基-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-乙腈实施例12步骤b)产物(1.25g)的二甲亚砜(10ml)溶液用氰化钠(0.22g)处理，反应混合物搅拌6小时。混合物倒入乙酸乙酯(200ml)中，用盐水(3×100ml)洗涤，干燥和浓缩。经纯化(SiO2，乙酸乙酯∶异己烷1∶2为洗脱剂)得到小标题化合物(0.88g)。MS(APCI)506(M+H+，100％)b)[3aR-[3aα，4α，6α(1R*，2S*)，6aα]-四氢-2，2-二甲基-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙基磺酰基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-乙腈步骤a)产物(0.88g)的乙醇(20ml)溶液用3-氯过苯甲酸(1.58g，含量57％)处理。反应混合物于室温搅拌18小时，然后浓缩。残余物溶于乙酸乙酯(200ml)中，用饱和焦亚硫酸钠水溶液(100ml)，随后用饱和碳酸氢钠水溶液(3×100ml)洗涤，然后干燥和浓缩。经纯化(SiO2，乙酸乙酯∶异己烷1∶1为洗脱剂)得到小标题化合物(0.89g)。MS(APCI)538(M+H+，100％)c)3-[[3aS-(3aα，4α(1S*，2R*)，6α，6aα]]-6-(2-氨基乙基)-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙基磺酰基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺，乙酸盐步骤b)产物(0.82g)的冰醋酸(7ml)溶液用氧化铂(0.15g)处理，所得的混悬液在4个大气压力氢气压下搅拌20小时。将反应混合物过滤并浓缩。残余物与乙醚一起研制，经过滤收集得到小标题化合物(0.75g)。MS(APCI)542(M+H+，100％)d)3-[[3aS-(3aα，4α(1S*，2R*)，6α，6aα)]]-6-(2-氨基乙基)-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺向丙烷硫醇钠(1.49g)的DMF(10ml)溶液中加入步骤c)产物(0.74g)的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(5ml)溶液。反应混合物于室温搅拌1小时，然后倒入饱和盐水溶液(100ml)中，接着用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。合并的有机相用盐水(3×100ml)法涤，随后干燥和浓缩。经纯化(SiO2，甲醇∶氯仿1∶4为洗脱剂)得到小标题化合物(0.58g)。MS(APCI)510(M+H+，100％)e)[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(2-氨基乙基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]环戊烷-1，2-二醇，盐酸盐步骤d)产物(0.52g)的甲醇(5ml)溶液用2M盐酸水溶液(2ml)处理，反应液放置6小时，然后浓缩。经纯化(HPLC，NovapakC18柱，在15分钟内用0.1％三氟乙酸∶乙腈70∶30～0∶100作梯度洗脱)得到标题化合物(0.13g)。MS(APCI)470(M+H+，100％)NMR δH(d6-DMSO)9.36(1H，d)，7.90(3H，s)，7.31-7.15(5H，m)，4.93(1H，q)，4.31(1H，t)，3.81(1H，t)，3.22-3.18(1H，m)，2.95-2.82(4H，m)，2.44-2.38(1H，m)，2.13-2.11(1H，m)，2.03-2.01(1H，m)，1.91-1.86(1H，m)，1.74-1.64(2H，m)，1.55-1.47(3H，m)，1.35-1.31(1H，m)，0.82(3H，t).实施例15[1S-[1α，2α，3β(E)，5β(1S*，2R*)]]-3-(3-氨基丙-1-烯基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，盐酸盐a)[3aR-[3aα，4α(E)，6α(1R*，2S*)，6aα]]-3-[四氢-2，2-二甲基-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-2-丙烯酸，乙基酯实施例12步骤a)产物(1.60g)的二甲亚砜(15ml)溶液用吡啶(0.25g)，随后用三氟乙酸(0.18g)和N，N-二环己基碳二亚胺(1.99g)处理。反应混合物于室温搅拌5小时，然后加入乙酯基亚甲基三苯基正膦(1.82g)，再继续搅拌18小时。混合物再用乙酸乙酯(300ml)稀释，并在冰浴上冷却，再加入草酸(1.59g)。30分钟后将混合物过滤，所得溶液用饱和碳酸氢钠水溶液(2×100ml)，随后用饱和盐水水溶液(2×100ml)洗涤。将乙酸乙酯溶液浓缩，经纯化(SiO2，乙酸乙酯∶异己烷1∶4为洗脱剂)得到小标题化合物(1.52g)。MS(APCI)565(M+H+，100％)b)3-[[3aR-[3aα，4α(E)，6α(1R*，2S*)，6aα]]-四氢-2，2-二甲基-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-2-丙醇于-78℃步骤a)产物(1.45g)的四氢呋喃(40ml)溶液用DIBAL-H(1.5M甲苯溶液，7.0ml)处理。混合物于0℃搅拌1小时，然后加入甲醇(1ml)，并将反应混合物倒入稀的氢氧化钠水溶液(100ml)中。该混合物用乙酸乙酯(100ml)萃取，萃取液用盐水水溶液洗涤，然后浓缩。经纯化(SiO2，乙酸乙酯∶异己烷1∶1为洗脱剂)得到小标题化合物(1.20g)。MS(APCI)523(M+H+，100％)c)3-[[3aS-[3aα，4α(E)，6α(1S*，2R*)，6aα]]-四氢-6-(3-碘-丙-1-烯基)-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-(2-苯基环丙基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺按实施例8步骤a)的方法，用步骤b)产物制备。MS(APCI)633(M+H+，100％)d)3-[[3aS-[3aα，4α(1S*，2R*)，6α(E)，6aα]]-6-(3-氨基丙-1-烯基)-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺步骤c)产物(0.60g)的甲醇(5ml)/四氢呋喃(5ml)溶液用浓氨水(2ml)处理。反应混合物于室温放置7小时，然后浓缩，经纯化(SiO2，甲醇∶氯仿1∶4为洗脱剂)得到小标题化合物(0.21g)。MS(APCI)522(M+H+，100％)e)[1S-[1α，2α，3β(E)，5β(1S*，2R*)]]-3-(3-氨基丙-1-烯基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，盐酸盐按实施例14步骤e)的方法，用步骤d)产物制备。MS(APCI)482(M+H+，100％)NMR δH(d6-DMSO)9.37(1H，d)，8.04(3H，s)，7.31-7.15(5H，m)，5.98-5.93(1H，m)，5.63-5.58(1H，m)，4.31(1H，t)，3.89(1H，t)，3.43(2H，t)，3.21-3.18(1H，m)，2.94-2.83(2H，m)，2.72-2.69(1H，m)，2.44-2.39(1H，m)，2.18-2.10(1H，m)，1.98-1.85(1H，m)，1.54-1.46(3H，m)，1.36-1.32(1H，m)，0.81(3H，t).实施例16N-乙基-N-[[1R-[1α，2β，3β，4α(1R*，2S*)]]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊基甲基]-3-甲氧基-丙酰胺按实施例1步骤h)的方法，用实施例12产物和3-甲氧基-丙酸制备。MS(APCI)570(M+H+)，100％)NMR δH(d6-DMSO)9.34(1H，d)，7.31-7.15(5H，m)，5.16-4.73(3H，m)，4.50-4.40(1H，m)，3.85-3.78(1H，m)，3.65-3.60(1H，m)，3.55(2H，t)，3.40-3.35(2H，m)，3.20(3H，s)，2.95-2.85(2H，m)，2.60-2.55(2H，m)，2.32-2.28(2H，m)，2.16-2.14(1H，m)，1.80-1.70(1H，m)，1.55-1.50(2H，m)，1.38-1.35(1H，m)，1.18-1.10(2H，m)，1.07-1.00(1H，m)，0.84-0.80(3H，m).实施例17[1S-[1α，2 α，3β(E)，5β(1S*，2R*)]]-3-[3-(2-二甲氨基乙基)氨基]-丙-1-烯基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇二-三氟乙酸盐，a)3-[[3aS-[3aα，4α(1S*，2R*)，6α(E)，6aα]]-6-[3-[(2-二甲氨基乙基)氨基]-丙-1-烯基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺将实施例15步骤c)产物(0.50g)的二氯甲烷(6ml)溶液用N，N-二甲基乙二胺(0.10g)处理，并于室温放置2小时。再将溶液浓缩，残余物与乙醚(20ml)一起研制得到小标题化合物(0.45g)。MS(APCI)593(M+H+，100％)b)[1S-[1α，2α，3β(E)，5β(1S*，2R*)]]-3-[3-[(2-二甲氨基乙基)氨基]-丙-1-烯基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇二-三氟乙酸盐按实施例14步骤e)的方法，用步骤a)产物制备。
MS(APCI)553(M+H+，100％)NMR δH(d6-DMSO)9.37(1H，d)，8.21(3H，s)，7.32-7.16(5H，m)，6.21-6.18(1H，m)，5.80-5.75(1H，m)，5.01-4.99(1H，m)，4.32(1H，t)，4.03-3.96(3H，m)，3.46-3.43(2H，m)，3.36-3.32(2H，m)，3.22-3.20(1H，m)，3.04(6H，s)，2.95-2.78(3H，m)，2.13-2.10(1H，m)，2.02-1.95(1H，m)，1.54-1.45(3H，m)，1.35-1.32(1H，m)，0.80(3H，t).实施例18[1R-[1α，2β，3β，4α(1R*，2S*)]]-N-[2-[2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]环戊基甲氨基]乙基]-乙酰胺实施例12步骤c)产物(0.70g)的二甲亚砜(3ml)溶液用N-乙酰基乙二胺(0.38g)处理，然后于65℃加热3小时。混合物再用乙酸乙酯(100ml)稀释，该溶液用饱和盐水(2×100ml)洗涤。有机相放置1小时，将生成的白色沉淀分离得到标题化合物(0.23g)。MS(APCI)541(M+H+)，100％)NMR δH(d6-DMSO)9.33(1H，d)，7.80(1H，s)，7.31-7.15(5H，m)，5.02-4.97(2H，m)，4.78(1H，s)，4.41(1H，q)，3.84(1H，t)，3.20-3.18(1H，m).3.13-3.09(2H，m)，2.95-2.83(2H，m)，2.71-2.69(1H，m)，2.60-2.53(2H，m)，2.34-2.32(1H，m)，2.14-2.09(2H，m)，1.53-1.48(3H，m)，1.33-1.31(1H，m)，0.82(3H，t).实施例19[1S-[1α，2α，3α，5β(1S*，2R*)]]-3-氨基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，盐酸盐a)(1R-顺式)-双(1，1-二甲基乙基)-4-羟基-2-环戊基亚氨基二碳酸酯向用乙醚洗涤过的氢化钠(60％油分散物；0.31g)的THF(30ml)溶液中加入亚氨基二碳酸双-(1，1-二甲基乙基)酯(1.84g)。混合物于40℃搅拌1小时。于室温向混合物中再加入(1S-顺式)-4-乙酰氧基-2-环戊烯-1-醇(0.5g)和四(三苯基膦)钯(O)(0.185g)。反应混合物搅拌24小时，并经纯化(SiO2，乙酸乙酯∶己烷1∶9为洗脱剂)得到小标题化合物，为无色固体(0.9g)。NMR δH(d6-DMSO)1.43(18H，s)，1.61(1H，ddd，J＝12.3，7.7，6.4Hz)，2.54(1H，dt，J＝12.6，7.4Hz)，4.51-4.57(1H，m)，4.86(1H，tq，J＝8.0，1.8Hz)，4.91(1H，d，J＝5.4Hz)，5.71-5.77(2H，m).
b)[1R-(1α，2β，3β，4α)]-2，3，4-三羟基环戊烯基亚氨基二碳酸双(1，1-二甲基乙基)酯按实施例1步骤f)的方法，用步骤a)产物制备小标题化合物。NMR δH(d6-DMSO)1.44(18H，s)，1.46-1.60(1H，m)，1.97-2.05(1H，m)，3.55-3.58(1H，m)，3.66-3.73(1H，m)，4.11-4.21(2H，m)，4.54(1H，d，J＝4.8Hz)，4.56(1H，d，J＝5.9Hz)，4.82(1H，d，J＝4.6Hz)c)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-氨基-2，2-二甲基-四氢-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-醇，盐酸盐步骤b)产物(17.37g)在6M HCl(100ml)和甲醇(500ml)中的溶液搅拌18小时。将混合物蒸发，然后与甲苯(4×200ml)共沸蒸馏得到无色粉末状物(8.67g)。该固体混悬于丙酮(250ml)中，加入2，2-二甲氧基丙烷(25ml)和浓HCl(0.2ml)，反应液加热回流2小时。将混合物冷却、蒸发并与甲苯(3×200ml)共沸蒸馏。残余物溶于20％乙酸水溶液中，并搅拌2小时。将混合物蒸发并与甲苯(4×200ml)共沸蒸馏，得到小标题化合物，为无色固体(10.1g)。MS(APCI)174(M+H+，100％)d)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[[6-氯-5-硝基-2-(丙硫基)-嘧啶-4-基]氨基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-醇步骤c)产物(10.0g)和N，N-二异丙基乙基胺(35ml)的THF(600ml)溶液搅拌1小时。将混合物过滤，在1小时内将该溶液加到4，6-二氯-5-硝基-2-(丙硫基)-嘧啶(按WO 9703084所述方法制备)(25.57g)的THF(1000ml)溶液中，并再搅拌1小时。在真空下减少溶剂体积，并加入乙酸乙酯(1000ml)。混合物用水洗涤，将有机层干燥(MgSO4)，蒸发，并经纯化(SiO2，异己烷-乙酸乙酯为洗脱剂)得到小标题化合物(14.22g)。MS(APCI)405(M+H+，100％)
e)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[(5-氨基-6-氯-2-丙硫基嘧啶-4-基)氨基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-醇向搅拌的步骤d)产物(2.61g)的乙酸(100ml)溶液中加入铁粉(2.30g)。反应混合物于室温搅拌2小时，浓缩至1/2体积，用乙酸乙酯稀释，并用水洗涤。将有机相干燥和浓缩得到小标题化合物(2.28g)。MS(APCI)375(M+H+，100％)f)[3aR-(3aα，4α，6α，6aα)]-6-[7-氯-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-醇按实施例1步骤f)的方法，用步骤e)产物制备。MS(APCI)386(M+H+，100％)g)(1R-反式)-N-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-2-苯基-环丙胺(1R-反式)-2-苯基环丙胺，[R-(R*，R*)]-2，3-二羟基丁二酸酯(1∶1)(按L.A.Mitscher等，J.Med.Chem.1986，29，2044所述方法制备)(1.92g)在1N NaOH水溶液(50ml)中的溶液搅拌10分钟，并用二氯甲烷萃取。将萃取液干燥，蒸发，残余物溶于甲醇(30ml)中。向该溶液中加入2，4-二甲氧基苯甲醛(1.12g)，并用乙酸调节至pH5。加入氰基硼氢化钠(0.46g)。混合物搅拌过夜，用2N NaOH碱化，并用乙酸乙酯萃取。将萃取液干燥，蒸发，并经纯化(SiO2，甲醇∶二氯甲烷∶0.880氨水2∶98∶0.1为洗脱剂)得到小标题化合物(1.10g)。NMR δH(CDCl3)7.23-6.97(6H，m)，6.49-6.41(2H，m)，3.73(3H，s)，3.69(3H，s)，3.66(2H，s)，2.21-2.16(1H，m)，1.82-1.76(1H，m)，1.01-0.87(2H，m).
h)[3aR-[3aα，4α，6α(1R*，2S*)，6aα]]-6-[7-[N-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-醇按实施例12步骤a)的方法，用步骤g)产物和步骤f)产物制备小标题化合物。MS(APCI)633(M+H+，100％)i)三氟甲磺酸，[3aR-[3aα，4α，6α(1R*，2S*)，6aα]-[四氢-2，2-二甲基-6-[7-[N-(2，4-二甲氧基苯基)甲基-(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]酯向步骤h)产物(147mg)和吡啶(0.08ml)的二氯甲烷(2ml)溶液中加入三氟甲磺酸酐(0.08ml)，并搅拌18小时。加入水，混合物用二氯甲烷萃取。将有机层干燥(MgSO4)，蒸发，并经纯化(SiO2，石油醚∶乙醚3∶2为洗脱剂)得到小标题化合物，为白色泡沫状物(166mg)。MS(APCI)765(M+H+，100％)。
j)3-[[3aS-[3aα，4α(1S*，2R*)，6β，6aα]-6-氨基-四氢-2，2-二甲基-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-基]-N-[(2，4-二甲氧基苯基)甲基]-N-(2-苯基环丙基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-7-胺步骤i)产物(957mg)和叠氮化钠(289mg)的DMSO(10ml)溶液搅拌18小时。加入水，混合物用乙醚萃取。将有机层蒸发，残余物倒入THF(15ml)/水(1ml)中。加入三苯基膦(326mg)，溶液搅拌24小时。在真空下除去溶剂，残余物经纯化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇9∶1为洗脱剂)得到小标题化合物(424mg)。MS(APCI)632(M+H+，100％)。
k)[1S-[1α，2α，3α，5β(1S*，2R*)]]-3-氨基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，盐酸盐步骤j)产物(252mg)的5M HCl(6ml)/甲醇(10ml)溶液于20℃搅拌3天，然后于50℃搅拌6小时。在真空下除去溶剂，残余物经纯化(SiO2，二氯甲烷∶甲醇∶氨水40∶7∶1为洗脱剂)得到一固体，将该固体溶于二氯甲烷(2ml)/乙酸乙酯(2ml)中，加入1M HCl乙醚溶液。收集生成的沉淀并干燥，得到标题化合物(59mg)。m.p.225-7℃.MS(APCI)442(M+H+，100％)NMR δH(d6-DMSO)9.39(1H，d)，8.18-8.13(3H，m)，7.33-7.14(5H，m)，5.26(6H，br)，5.16(1H，q)，4.57(1H，dd)，4.15-4.13(1H，m)，3.92-3.80(1H，m)，3.23-3.19(1H，m)，2.97-2.79(2H，m)，2.38 2H，t)，2.16-2.10(1H，m)，1.57-1.29(3H，m)，0.82(3H，t).实施例201-[[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]环戊基羰基]-哌嗪a)4-[[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-四氢-2，2-二甲基-6-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-4H-环戊烯并-1，3-二氧杂环戊烯-4-羰基]-哌嗪-1-羧酸，1，1′-二甲基乙基酯按实施例1步骤h)的方法，用实施例5步骤a)产物和1-哌嗪羧酸，1，1-二甲基乙基酯制备。MS(APCI)679(M+H+，100％)。
b)1-[[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]环戊基羰基]-哌嗪按实施例1步骤i)的方法，用步骤a)产物制备。MS(APCI)539(M+H+，100％)NMR δH(d6-DMSO)9.36(1H，d)，7.56-7.31(5H，m)，5.25-5.10(2H，m)，5.04-5.01(1H，m)，4.50-4.38(1H，m)，4.14(1H，br s)，3.36-3.30(7H，m)，2.97-2.92(1H，m)，2.86-2.81(1H，m)，2.37-2.32(3H，m)，2.15-2.10(2H，m)，1.53-1.45(3H，m)，1.38-1.31(1H，m)，0.86(3H，t)药理学资料按如下步骤制备用于测定本发明化合物对于洗过的人血小板中P2T-受体激动剂/拮抗剂活性的制品。
将人静脉血(100ml)等分在3支各含有3.2％柠檬酸三钠(4ml)作抗凝血剂的试管内。将各试管以240G离心15分钟，获得富含血小板的血浆(PRP)，向该血浆中加入300ng/ml前列环素，以便在洗涤过程中使血小板稳定。通过以125G离心10分钟，随后再以640G离心15分钟，获得了无红细胞的PRP。弃去上清液，将血小板小球再悬浮于经改进的无钙Tyrode液(10ml)(CFT)中，其组成成分为NaCl137mM，NaHCO311.9mM，NaH2PO40.4mM，KCl2.7mM，MgCl21.1mM，葡萄糖5.6mM，以95％ O2/5％CO2通气，并保持在37℃。再加入300ng/ml PGI2之后，将合并的混悬液以640G再次离心15分钟。弃去上清液，将血小板开始再悬浮于10ml CFT中，并进一步加入CFT，校准至最后的血小板计数为2×105/ml。将该最后的混悬液吸入排除了空气的60ml注射器中，在3℃保存，为了能够从PGI2的抑制作用下恢复其正常功能，应在最后一次重新混悬刚2小时，就将血小板用于聚集研究。
在所有的研究中，将3ml等分量血小板混悬液加入含有CaCl2溶液的试管中(50mM的溶液60μl，最后浓度为1mM)。再加入人血纤维蛋白原(Sigma，F4883)和8-磺基苯基苯碱(8-SPT，用于阻断化合物的任何P1-激动剂活性)，分别得到0.2mg/ml(在生理盐水中的10mg/ml可凝结的蛋白质溶液60μl)和300nM(在6％葡萄糖中的15nM溶液10μl)的最终浓度。按150μl的体积适当地将血小板或缓冲液加入96孔培养板的各个孔中。对来自各个献血者的血小板一式三份，进行所有的测定。
按如下方法进行激动剂/拮抗剂效力测定。
应用培养板测定仪在660nm处测定的光密度改变，测定96孔培养板中的聚集反应。Bio-Tec Ceres 900C或者Dynatech MRX均可用作这种培养板测定仪。
先在660nm处测定培养板中每个孔的光密度，以便确定基线读数。再按10μl的体积对每个孔加入生理盐水或适当的试验化合物溶液，形成0，0.01，0.1，1，10或100mM的最后浓度。然后在设定10的有轨摇床上振摇培养板5分钟，并在660nm处测定光密度。在这点的聚集作用指示试验化合物的激动剂活性。然后对每个孔加入生理盐水或ADP(30mM；450mM的10μl)，将该培养板再振摇5分钟，然后在660nm处再次测定光密度。
以对于对照ADP反应的％抑制作用来表示拮抗效力，得到IC50。举例化合物的pIC50值均大于5.0。
权利要求
1.式(1)化合物或其药学上适用的盐或其溶剂合物，
其中R1为C1-6烷基、C3-8环烷基或苯基，每一个基团可以由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11或其本身可以由1个或多个卤原子任选取代的C1-6烷基的取代基任意地取代；R2为由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11、C3-8环烷基、任选由1个或多个烷基和/或卤原子取代的芳基或C1-6烷基的取代基任意取代的C1-8烷基；或者R2为由1个或多个选自卤素、OR8、NR9R10、SR11、C1-6烷基或苯基的取代基任意取代的C3-8环烷基，其中所述取代基中的后2个基团可以由1个或多个选自卤素、NO2、C(O)R8、OR8、SR11、NR12R13、由1个或多个卤原子任选取代的苯基和C1-6烷基的取代基任意地取代；R3或R4中之一为羟基，另一个为氢、羟基或NR9R10；R5为(CH2)nNR14R15，这里n为零～6，并且R14和R15独立地为氢、C1-6烷基或苯基；或者R5为CONR16R17，这里R16为氢或C1-6烷基，R17为C1-6烷基或C3-6环烷基，它们中每个可由NR18R19取代，并且它们可由苯基任选取代，或者R17为由苯基取代的C1-6烷基或C3-6环烷基，而苯基又可由NR18R19取代，这里R18和R19独立地为氢、C1-6烷基或苯基；或者R17为含有1个或多个氮原子的并且在氮原子上由氢、C1-6烷基或苯基任选取代的五～八元饱和杂环；或者R16和R17与它们所连结的氮原子一起形成由如上定义的NR18R19取代的五～八元环；或者R16与R19一起形成含有2个氮原子的六～八元环，其中的R17和R18的定义同上；或者R5为(CH2)pNR20CO(CH2)qOR21或(CH2)pNR22(CH2)qNR23COR24，这里p和q独立地为1～4，R20、R21、R22、R23和R24独立地为C1-4烷基或苯基；或者R5为CH＝CHCH2NR25R26，这里R25为氢、C1-6烷基或苯基，R26为氢或(CH2)yNR27R28，这里y为2-4，R27和R28独立地为氢、C1-6烷基或苯基；R8、R9、R10和R11独立地为氢或C1-6烷基；R12和R13独立地为氢、C1-6烷基或酰基。
2.权利要求1的化合物，所述化合物具有以下立体化学结构
3.权利要求1或2所述的化合物，其中R1为C1-8烷基。
4.权利要求1～3中任何一项所述的化合物，其中R2为C1-6烷基或由苯基取代的C3-8环烷基。
5.权利要求1～4中任何一项所述的化合物，其中R3或R4为羟基。
6.权利要求1～5中任何一项所述的化合物，其中R5为(CH2)nNH2，其中n为零、1或2；CONR16R17，这里R16为氢，R17为由NR18R19任选取代的C1-5烷基，这里R18和R19均为氢，或者一个为C1-6烷基，尤其是甲基，另一个为苯基，或者R5为CONR16R17，这里R16为氢，R17为CH2苯基或环己基，它们各自被氨基取代，或者R5为CONR16R17，这里R16和R17形成哌嗪环，或者R5为CH＝CHCH2NR25R26，这里R25和R26均为氢，或R25为氢，R26为(CH2)2NH2，或者R5为CH2R20CO(CH2)2OR21，这里R20和R21为C1-4烷基，或者R5为CH2NH(CH2)2NHCOR24，这里R24为C1-4烷基。
7.权利要求1所述化合物或其药学上适用的盐或其溶剂合物，它们是[1S-(1α，2β，3β，4α)]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-N-[[3-(N-甲基-N-苯基)氨基]丙基]-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐，[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[5-氨基戊基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基-环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐，[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[3-氨基丙基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐，[1S-(1α，2β，3β，4α)]-N-[(3-氨基苯基)甲基]-4-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-2，3-二羟基环戊烷甲酰胺，三氟乙酸盐，[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-N-[3-氨基丙基]-2，3-二羟基-4-[7-[2-(苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷甲酰胺三氟乙酸盐，[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-N-[4-反式氨基环己基]-2，3-二羟基-4-[7-[2-(苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷甲酰胺，二(三氟乙酸盐)，[1S-(1α，2α，3β，5β)]-3-氨基-5-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-(1α，2α，3β，5β)]-3-(氨甲基)-5-[7-(丁氨基)-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-氨基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(乙氨基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1R*，2S*)]]-3-[(甲氨基)甲基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-[(乙氨基)甲基]-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(氨甲基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β，5β(1S*，2R*)]]-3-(2-氨乙基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，[1S-[1α，2α，3β(E)，5β(1S*，2R*)]]-3-(3-氨基丙-1-烯基)-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，N-乙基-N-[[1R-[1α，2β，3β，4α(1R*，2S*)]]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊基甲基]-3-甲氧基-丙酰胺，[1S-[1α，2α，3β(E)，5β(1S*，2R*)]]-3-[3-(2-二甲氨基乙基)氨基]-丙-1-烯基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，二-三氟乙酸盐，[1R-[1α，2β，3β，4α(1R*，2S*)]]-N-[2-[2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊基甲基氨基]乙基]-乙酰胺，[1S-[1α，2α，3α，5β(1S*，2R*)]]-3-氨基-5-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]-环戊烷-1，2-二醇，1-[[1S-[1α，2β，3β，4α(1S*，2R*)]]-2，3-二羟基-4-[7-[(2-苯基环丙基)氨基]-5-(丙硫基)-3H-1，2，3-三唑并[4，5-d]嘧啶-3-基]环戊基羰基]哌嗪。
8.药物组合物，该组合物含有权利要求1～7中任何一项所述的化合物以及药学上适用的稀释剂、辅助剂或载体。
9.用于治疗的权利要求1～7中任何一项所述的化合物。
10.用于治疗或预防心肌梗塞、血栓形成的中风、短暂的局部缺血发作、外周血管疾病和心绞痛的权利要求1～7中任何一项所述的化合物。
11.用于治疗或预防心绞痛的权利要求1～7中任何一项所述的化合物。
12.制备式(I)化合物的方法，该方法包括(a)制备其中R5为CONHR16R17的式(I)化合物，使式(II)化合物或其胺保护的衍生物与式(III)化合物反应，
其中R1、R2、R3和R4同式(I)中的定义，HNR16R17(III)其中R16和R17同式(I)中的定义，或(b)制备其中R5为氨基的式(I)化合物，将以上定义的式(II)化合物进行Curtis重排，或在(a)或(b)之后以任何次序任选进行●将1个或多个官能团转变为其他官能团●脱去任何保护基●形成药学上适用的盐或溶剂合物。
全文摘要
本发明提供了新的三唑并[4,5－d]嘧啶类化合物(Ⅰ)、它们作为药物的应用、含有它们的组合物以及制备它们的方法。
文档编号A61K31/519GK1271359SQ9880913
公开日2000年10月25日 申请日期1998年7月15日 优先权日1997年7月22日
发明者D·哈德恩, B·斯普林托佩 申请人:英国阿斯特拉药品有限公司