专利名称：抗纤溶酶剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种抗纤溶酶剂。更具体地说，本发明涉及一种具有改善或防止由(例如)干燥、清洁剂、以及各种类型的皮肤疾病所导致的皮肤粗糙和皲裂的功效的抗纤溶酶剂，所述的皮肤疾病诸如接触性皮炎、银屑病、寻常性天疱疮和先天性疱疹，其中在患病部位观察到了纤溶酶或纤溶酶原激活物活性的改变。
到目前为止已经公知各种类型的具有改善或治疗皮肤疾病或皮肤粗糙的作用的治疗剂、皮肤外用剂、化妆品等。这些常规的药物和化妆品等含有具有抗炎活性或高度增加水分作用的氨基酸或多糖、脂质、提取物等作为有效组分，这是由于这些组分具有预防皮肤炎症或角质层中水分缺失的优良性能。然而，无论如何，它们改善或防止皮肤粗糙的作用并不充足，所以需要开发具有更优良医疗功效的抗纤溶酶剂。
另一方面，人们已经认识到表皮细胞内的蛋白酶在皮肤角化的正常过程中起着重要作用(Ogawa H.,Yoshiike T.；Int.J.Dermatol；23,1984)，并且近年来人们已经很清楚地了解到蛋白酶、诸如纤溶酶和纤溶酶原激活物(PA)活性上的改变在各类皮肤疾病损害的形成中是非常复杂的。例如，据报导在患病皮肤的角化不全部位存在较强的PA活性(Haustein；Arch.Klin.Exp.Dermatol；234,1969)且已经使用高浓度的盐溶液从银屑病的鳞屑中提取出了PA(Fraki.Hopsu-Havu；Arch.Dermatol.Res；256,1976)。纤溶酶原激活物是一种特别在纤溶酶原、纤溶酶前体上起作用并将它们转化成活性形式纤溶酶的蛋白酶。此外，在寻常性天疱疮中，表皮细胞中大量产生的纤溶酶原激活物将存在于细胞外的纤溶酶原转化成纤溶酶。正如体外实验清楚地表明的，这种纤溶酶消化细胞内的连接物质，由此将组织液储存在细胞之间并形成表皮内小泡(Morioka S.；J.Invest.Dermatol；76,1981)。
根据上述情况，本发明者认为纤溶酶抑制剂可有效地改善各种皮肤疾病、皮肤粗糙、皮肤皲裂等并研究了各种物质的抗纤溶酶活性。结果是我们发现来自鹿蹄草科植物的提取物具有优良的抑制纤溶酶的活性。
因此，本发明的目的是解决现有技术中的上述难题并提供一种具有改善或防止皮肤粗糙和皲裂的优良功效的抗纤溶酶剂。
根据本发明，所提供的抗纤溶酶剂包括一种鹿蹄草科的植物或提取物作为一种有效成分。
就本发明者了解的情况来说，鹿蹄草科植物具有抗炎作用和防止或改善皮肤粗糙的作用(日本未审专利公开号(Kokai)3-190809)、对导致牙龈疾病的细菌的抗菌活性(日本未审专利公开号(Kokai)4-5222)、改善雀斑的作用(日本未审专利公开号(Kokai)4-279511)、睾酮5α-还原酶抑制活性(日本未审专利公开号(Kokai)5-17365)等并且可以作为外用药剂、化妆品和口服组合物使用，而到目前为止还没有对其抗纤溶酶活性的任何报导。
下面具体地解释本发明的构思。
本发明所用的来源于鹿蹄草科的植物包括、例如日本鹿蹄草(Pyrolajaponica Klenze)、红花鹿蹄草(Pyrola incarnata Fischer)、肾叶鹿蹄草(Pyrolarenifolica Maxim.)、圆叶鹿蹄草(Pyrola rotundifolia L.subsp.chinensis Andr.)。圆叶鹿蹄草主要在中国发现并且是与日本鹿蹄草不同的种，而公知日本鹿蹄草和红花鹿蹄草的中国名称是鹿蹄草(Luticao。在本发明中，从纤溶酶抑制活性强度或本国易获得的观点来看，特别优选使用的是它们中的日本鹿蹄草。
根据本发明，抗纤溶酶剂可以通过下列方法得到将日本鹿蹄草的整株植物、叶、花、或根的任意一部位进行干燥、然后粉碎成粉末；或将它们与一种提取溶液一起浸泡或将它们进行加热回流、然后过滤；而从可用性、配制方便等的观点来看，优选使用一种提取物。
作为日本鹿蹄草植物的提取溶液，可以使用任意常规的溶剂用于提取。例如醇，诸如甲醇、乙醇；以及有机溶剂，诸如丙酮、乙酸乙酯；并且可以单独使用水或任意它们的混合物。
此外，还能够使用上述溶剂、随后用(例如)分配法或色谱法将该提取物进行纯化并使用所得的产物。
一般主要将本发明的抗纤溶酶剂与一种载体一起用作外用剂。作为组合物总重中的干燥产物，在该组合物中所配制的日本鹿蹄草植物或其提取物的用量优选为0.005-20.0(重量)％，且更优选0.01-10.0(重量)％。如果该用量小于0.005(重量)％，那么本发明的优良功效就不能充分显示，而如果该用量大于20.0(重量)％，那么将会很难配制。此外，即使配制的用量超过了10.0(重量)％，也看不到所预计的优良功效的进一步增加。本发明中可以使用任何常规的载体作载体。
除主要成分以外，本发明的抗纤溶酶剂可以任意含有通常用于皮肤外用剂、诸如化妆品、药物的其它成分。这类可选择的成分的实例是增白剂、湿润剂、抗氧化剂、油类组分、紫外线吸收剂、表面活性剂、增稠剂、醇类、粉末组分、着色物质、含水组分、水、各种皮肤营养素等。
此外，能够使用例如金属螯合剂，诸如乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钠、柠檬酸钠、多磷酸钠、偏磷酸钠、葡糖酸、咖啡因、丹宁、维拉帕米、氨甲环酸、及其衍生物、光甘草定(glabridin)、各种草药提取物；其它药物，诸如乙酸生育酚酯、甘草酸、及其衍生物或盐；增白剂，诸如维生素C、抗坏血酸磷酸镁、抗坏血酸葡糖苷、熊果苷、曲酸；糖类，诸如葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖、海藻糖。
当例如作为一种外用剂使用本发明的抗纤溶酶剂时，它可以是任意的常规剂型，诸如(例如)软膏、霜剂、乳剂、洗剂、药包、浴剂等和通常用于皮肤外用剂的其它剂型。对剂型本身没有特别的限定。
实施例现在通过下面的实施例来进一步具体地解释本发明，但绝不仅限于此。实施例中配方的用量以重量百分比为准。
首先将解释本发明抗纤溶酶活性和日本鹿蹄草的皮肤改善作用的试验方法和评价标准。1．纤溶酶抑制活性试验(1)样品的制备在室温下，将50g(干重)开花期的日本鹿蹄草整株植物浸入其体积5倍的50％乙醇中1周。然后将提取物浓缩至干。将固体产物溶于二甲基亚砜(DMSO)而制备成一种3％的溶液。将该溶液用于下面的实验。(2)纤溶酶抑制活性的测定通过血纤蛋白平板法测定抑制率％。即将6ml含有1.0％血纤蛋白原(去除了纤溶酶原)的佛罗那缓冲液(25mmol/L含有0.125mol/LNaOH的巴比妥钠溶液，pH7.4)倾入9cmφ培养皿中。向其中加入0.2ml的1.0mol/LCaCl2和0.1ml的25U/ml凝血酶、缓缓搅拌并使之维持1小时。在37℃下，将以29∶1的比例混合的5U/ml纤溶酶和试验物质的混合物维持10分钟，然后将20μl的该混合物加到由血纤蛋白原转化成血纤蛋白而形成的平板上。接着进一步使之在37℃下维持18小时。使用DMSO替代试验样品进行同样的操作作为对照，然后测量血纤蛋白溶解所形成的溶解圈的面积。通过下面的数学公式(Ⅰ)来测定纤溶酶抑制比率抑制比率(％)={1-(试验样品溶解圈的面积)/(对照品溶解圈的面积)}×100 (Ⅰ)结果如表1中所示。
此外，黄柏是一种被认为是具有抗炎这种确定作用的植物并且已知它有抗粗糙皮肤的用途。如上所述对黄柏的乙醇提取物进行同样的试验来作为一个参照实施例。将结果一并列在表1中。表1(最终浓度)
正如从如表1中可以理解的，与黄柏提取物相比，日本鹿蹄草提取物具有更优良的纤溶酶抑制活性。2．实际应用试验(剃刀刮伤(须疮)的改善试验和冬季预防皮肤粗糙的试验)从改善须疮和皮肤刺激和预防冬季中的皮肤粗糙的效果、通过下面的评价方法来评价在外部皮肤上应用本发明外用剂组合物的功效。
注意如表2中所示，作为样品，将具有不同浓度的开花期中日本鹿蹄草整株植物的50％乙醇提取物的两类洗剂用作本发明的产品，而已经公知含有黄柏的50％乙醇提取物的洗剂对粗糙皮肤具有作用，且将不含日本鹿蹄草提取物或黄柏提取物的洗剂用作对比产品。将结果一并列在表2中。(1)须疮的改善将40位患须疮的男性受试参与者分成4组、每组10人，在刮脸后立即施用表2中所列的本发明产品或对比产品，并且判断对须疮的功效。判断标准和评价如下须疮改善效果的判断标准非常有效须疮消失。有效须疮减弱。有些疗效须疮有些减轻无效没有观察到须疮有改变须疮改善效果的评价极佳大于或等于80％比例的受试者表现出非常有效、有效、或有些疗效(功效)。良好50％至小于80％比例的受试者表现出非常有效、有效、有些疗效(功效)。一般30％至小于50％比例的受试者表现出非常有效、有效、有些疗效(功效)。较差小于30％比例的受试者表现出非常有效、有效、有些疗效(功效)。(2)皮肤刺激性当评价须疮的改善比率时，判断和评价本发明产品和对比产品的皮肤刺激性。评价标准如下皮肤刺激性的评价极佳在0％比例的受试者中觉察到皮肤上有烧灼感。良好在小于5％的受试者中觉察到皮肤刺激性。一般在小于10％的受试者中觉察到皮肤刺激性。较差大于或等于10％的受试者中觉察到皮肤刺激性。表2
正如从表2中清楚表明的，含有1.0(重量)％日本鹿蹄草提取物的本发明产品2的洗剂表现出与含有3.0(重量)％黄柏提取物的对比产品1的洗剂相同的功效，而含有3.0(重量)％日本鹿蹄草提取物的本发明产品1的洗剂表现出比对比产品1更优良的改善须疮作用。此外，同时没有观察到皮肤刺激性。(3)对冬季皮肤粗糙的预防在秋季(十月)取特别是患有冬季皮肤粗糙的女性受试参与者的面部皮肤的复制品并在一种显微镜(17×)下观察皮肤情况。将皮肤按照下面所列的判断标准分级。选择列为4或5等级的40位女性并将她们分成2组、每20人1组。在冬季(十二月)给20位女性每位的左右侧面部一天两次施用本发明产品1和对比产品1的洗剂或本发明产品2和对比产品2的洗剂4周，然后取皮肤的复制品并再次按照上述判断标准对皮肤情况进行分级。观察每一位参与者试验前和试验后皮肤等级的差异，并判断冬季中预防皮肤粗糙的效果。结果如表3中所示。皮肤等级和判断标准1观察到在很广泛的面积内皮沟和皮嵴以及脱屑现象消失。2不能清楚地观察到皮沟和皮嵴以及脱屑现象。3观察到皮沟和皮嵴，但较平坦。4皮沟和皮嵴较清楚。5整个范围的皮沟和皮嵴均较清楚。表3
正如从表3中所理解的，与对比产品的洗剂相比，本发明产品的洗剂表现出预防冬季中认为是由干燥等所导致的皮肤粗糙的优良功效。实施例1霜剂处方 掺合比例硬脂酸 5.0十八烷醇4.0肉豆蔻酸异丙酯 18.0单硬脂酸甘油酯 3.0丙二醇 10.0日本鹿蹄草的70％醇提取物0.05氢氧化钾0.2氨甲环酸0.5亚硫酸氢钠 0.01防腐剂 适量香料适量离子交换水 平衡制备方法将丙二醇、日本鹿蹄草乙醇提取物和氢氧化钾加入到离子交换水中，然后将其加热并保持在70℃(水相)。将其余组分混合、加热至熔化并保持在70℃(油相)。将油相逐渐加入水相。将全部用量加完后，使混合物维持在该温度下一段时间以引发反应。此后，用均匀混合器将该混合物均匀乳化、然后在充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例2；霜剂处方掺合比例硬脂酸2.0十八烷醇 7.0氢化羊毛脂2.0角鲨烷5.02-辛基十二烷醇6.0聚氧乙烯(25mol)鲸蜡醇醚 3.0单硬脂酸甘油酯2.0丙二醇5.0日本鹿蹄草的甲醇提取物0.05氨甲环酸 0.2亚硫酸氢钠0.03对羟基苯甲酸乙酯 0.3香料 适量离子交换水平衡制备方法将丙二醇加入到离子交换水中，然后将其加热并保持在70℃(水相)。将其余组分混合、加热至熔化、并保持在70℃(油相)。将油相加入水相并将该混合物预乳化。然后用均匀混合器将该混合物均匀乳化，接着在充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例3霜剂处方掺合比例固体石蜡 5.0蜂蜡 10.0凡士林 15.0液体石蜡 41.0单硬脂酸甘油酯 2.0聚氧乙烯(20mol)脱水山梨醇单月桂酸酯 2.0粉状皂 0.1N-甲基-反式-4-氨基甲基环己烷羧酰胺 1.0硼酸钠 0.2日本鹿蹄草的70％甲醇提取物 0.1亚硫酸氢钠 0.03对羟基苯甲酸乙酯 0.3香料 适量离子交换水 平衡制备方法将粉状皂和硼酸钠加入到离子交换水中，然后将其加热并保持在70℃(水相)。将其余组分混合、加热至熔化并保持在70℃(油相)。将油相逐渐加入水相，同时搅拌进行反应。接下来用均匀混合器将该混合物均匀乳化、然后在充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例4乳剂处方 掺合比例硬脂酸 2.5鲸蜡醇 1.5凡士林 5.0液体石蜡 10.0聚氧乙烯(10mol)单油酸酯 2.0聚乙二醇1500 3.0三乙醇胺 1.0羧乙烯基聚合物(商品名卡波泊尔Carbopol941,B.F.Goodrich Chemical Co)0.05日本鹿蹄草的乙酸乙酯提取物 0.03亚硫酸氢钠 0.01对羟基苯甲酸乙酯 0.3香料 适量离子交换水 平衡制备方法将羧乙烯基聚合物溶于少量的离子交换水中(A相)。将聚乙二醇1500和三乙醇胺加入到剩余的离子交换水中，加热至溶解并保持在70℃(水相)。将其它组分混合、加热至熔化并保持在70℃(油相)。将油相加入水相并将该混合物预先乳化，然后加人A相并用均匀混合器将该混合物均匀乳化，乳化后将该乳剂在充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例5乳剂处方 掺合比例微晶蜡 1.0蜂蜡 2.0羊毛脂 20.0液体石蜡 10.0角鲨烷 5.0脱水山梨醇倍半油酸酯 4.0聚氧乙烯(20mol)脱水山梨醇单油酸酯1.0丙二醇 7.0日本鹿蹄草的30％丁醇提取物 2.0氨甲环酸 1.0亚硫酸氢钠 0.01对羟基苯甲酸乙酯 0.3香料 适量离子交换水 平衡制备方法将丙二醇加入到离子交换水中且加热并保持在70℃(水相)。将其余组分混合、加热至熔化、并保持在70℃(油相)。在搅拌的同时将油相逐渐加入水相。用均匀混合器将该混合物均匀乳化、然后在充分搅拌的同时冷却至30℃。实施例6凝胶处方掺合比例95％乙醇 10.0二丙二醇 15.0聚氧乙烯(50mol)油醇醚 2.0羧乙烯基聚合物(商品名Carbopol940,B.F.Goodrich Chemical Co.)0.05氢氧化钠 0.15L-精氨酸 0.1日本鹿蹄草的30％乙醇提取物1.0亚硫酸氢钠0.01对羟基苯甲酸乙酯 0.3香料 适量离子交换水平衡制备方法将Carbopol940均匀地溶于离子交换水中。另一方面，将日本鹿蹄草提取物、聚氧乙烯(50mol)油醇醚溶于95％乙醇并加入水相。接下来加入其余的组分，然后用氢氧化钠和L-精氨酸将所得混合物中和并增稠。实施例7药包处方 掺合比例(A相)二丙二醇 5.0聚氧乙烯(60mol)氢化蓖麻油5.0(B相)橄榄油 5.0乙酸生育酚酯 0.2对羟基苯甲酸乙酯 0.2香料 0.2(C相)亚硫酸氢钠 0.03聚乙烯醇(皂化程度90，聚合度2000)13.0乙醇7.0日本鹿蹄草的50％1,3-丁二醇提取物1.0纯水平衡制备方法将A相和B相均匀地溶解，然后将B相加入A相使之增溶。接下来向其中加入分散有日本鹿蹄草提取物的C相，然后填入所得产物。实施例8基质处方 掺合比例滑石 43.1高岭土 15.0丝云母 10.0氧化锌 7.0二氧化钛 3.8黄色氧化铁 2.9黑色氧化铁 0.2日本鹿蹄草的干粉 0.05角鲨烷 8.0异硬脂酸 4.0单油酸POE脱水山梨醇3.0辛酸异鲸蜡酯 2.0防腐剂 适量香料 适量制备方法用一种粉磨机将充分干燥的日本鹿蹄草的整株植物精细地粉碎并通过#30(500μm)筛。用一种掺合机将所得粉末和从滑石到黑氧化铁的粉末组分充分混合，然后加入其它组分且将所得混合物充分捏合并将它们填入一种用于模塑的容器中。
正如上述所解释的，根据本发明，能够提供一种具有改善和防止健康人中伴有皮肤粗糙的各种皮肤疾病和皮肤粗糙、皲裂等优良功效的抗纤溶酶剂。
权利要求
1．一种抗纤溶酶剂，它含有一种属于鹿蹄草科的植物或其提取物作为一种有效成分。
2．一种如权利要求1所述的抗纤溶酶剂，其中属于鹿蹄草科植物或其提取物的配制用量为该组合物总重量的0.005-20.0重量％。
3．一种如权利要求1所述的抗纤溶酶剂，其中属于鹿蹄草科的植物是至少一种选自下列植物组成的组的植物日本鹿蹄草、红花鹿蹄草、肾叶鹿蹄草和圆叶鹿蹄草。
4．一种如权利要求1所述的抗纤溶酶剂，其中有效成分来源于至少一种属于鹿蹄草科的植物的整株植物、叶、花或根的组成部分。
5．一种如权利要求4所述的抗纤溶酶剂，其中有效成分是通过对所述植物的至少一种组成部分进行干燥且然后进行粉碎而获得的粉末形式。
6．一种如权利要求4所述的抗纤溶酶剂，其中有效成分是用一种溶剂提取所述的至少一种植物的组成部分而获得的一种提取物。
7．一种外用剂形式的如权利要求1所述的抗纤溶酶剂。
8．一种化妆品组合物或药物组合物形式的如权利要求1所述的抗纤溶酶剂。
全文摘要
一种抗纤溶酶剂,在其载体中含有属于鹿蹄草科的一种植物或其提取物,它具有改善或防止皮肤粗糙和皲裂的极佳功效。
文档编号A61K8/97GK1232692SQ9910289
公开日1999年10月27日 申请日期1999年2月24日 优先权日1998年2月24日
发明者吉田雄三, 大田正弘 申请人:株式会社资生堂