一种微波提取玉竹中氨基酸的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物技术领域，具体涉及一种微波提取玉竹中氨基酸的方法。
【背景技术】
[0002]玉竹，别名铃铛菜、尾参、地管子、甜草根，为百合科多年生草本植物。现代药理学研宄结果表明，玉竹的根茎具有扩张冠脉、降血脂、降血糖、改善肝脏微循环、抗肿瘤、抗衰老和增强免疫力等作用，为滋养强壮剂。玉竹富含微量元素、维生素、氨基酸、留体皂苷、黄酮、生物碱、多糖等成分，而氨基酸作为蛋白质的基本组成单位，直接参与生物体内的新陈代谢和其他生理活动，在医药方面可用作营养剂、代谢改善剂、抗溃疡、防幅射、抗菌、治癌、催眠、镇痛以及为特殊病人配制人工合成膳食等，氨基酸在食品行业可用作调味剂，在农业中可用作无害农药，增强植物抗菌能力，其易被微生物分解，无毒性、不污染环境。可见，氨基酸利用价值和经济价值很高。
[0003]目前，常用提取氨基酸的方法有超声提取、加热回流提取、浸提法等等，提取溶剂一般为水、醇、醚等，这些方法提取率不高且提取物质的功能成分破坏，效果均不理想。微波提取是一种最新发展起来的新技术，不仅可以提高提取率，还可保护提取物质的功能成分，但微波功率、提取时间、提取剂的浓度、料液比等影响提取率的提取工艺条件没有达到最优值，导致氨基酸的提取率没有达到理想效果。
【发明内容】
[0004]针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种耗时短、提取率高、保护有效成分的微波提取玉竹中氨基酸的方法。
[0005]为了达到上述目的，本发明采取的技术方案是:
[0006]一种微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步骤:
[0007](I)制备粉末:用蒸馏水冲洗干净玉竹，沥干水后，烘干，然后切剪成小段，用粉碎机粉碎，过40目筛得到玉竹粉末备用；
[0008](2)微波提取:称取玉竹粉末，以料液比为l:25g/ml加入浓度为20%?30%的乙醇提取剂，置于功率为400?600w、温度为75°C的微波辐射萃取仪提取3次，每次提取时间为 23 ?28min ；
[0009](3)过滤定容:合并并过滤提取液，将滤液定容至50ml ；
[0010](4)离心:将定容后的滤液蒸发离心，取其上清液于4°C储存，备用；
[0011](5)测定:以天冬酰胺药品为对照品，采用茚三酮比色法对该游离氨基酸进行测定。
[0012]作为优选技术方案，为了使微波辐射萃取仪提取时间达到较优值，以利于提高提取率和保护提取物的功能成分，所述步骤(2)中微波辐射萃取仪每次提取时间为25min。
[0013]作为优选技术方案，为了使乙醇提取剂的浓度达到较优值，以利于提高提取率和保护提取物的功能成分，所述步骤(2)中加入浓度为25%的乙醇。
[0014]作为优选技术方案，为了使为了使微波辐射萃取仪功率达到较优值，以利于提高提取率和保护提取物的功能成分，所述步骤(2)中微波辐射萃取仪功率为500w。
[0015]本发明的有益效果:利用微波辅助提取玉竹中氨基酸的方法，耗时短；微波功率、提取时间、提取剂及其浓度、料液比等提取工艺条件均采取最优，提取率高且有效保护提取物的功能成分；且本发明的提取方法简单、易于操作，适合工业化生产。
【具体实施方式】
[0016]下面结合具体实施例对本发明作进一步地说明。
[0017]实施例1
[0018]一种微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步骤:
[0019]1、制备粉末:用蒸馏水冲洗干净玉竹，沥干水后，烘干，然后切剪成小段，用粉碎机粉碎，过40目筛得到玉竹粉末备用。
[0020]2、微波提取:(I)精确称取玉竹粉末0.1000g，加入浓度为20%的乙醇提取剂
2.5ml，置于设定功率为400w、温度为75°C的微波辐射萃取仪提取3次，每次提取时间为23min ； (2)采用抽滤的方式过滤出提取液，将滤液定至50ml ； (3)将定容后的滤液离心，控制离心转速为4500r/min，离心时间为15min，取其上清液于4°C储存，备用；以上三个处理按顺序重复二次。
[0021]3、标准溶液的制备:精密称取0.0lOOg的的天冬酰胺标准物质，定容于10ml容量瓶中，此溶液质量浓度为0.lmg/mlo
[0022]4、标准曲线的制备:精密量取0.lmg/ml的天冬酰胺标准溶液0.5ml, 1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml，3.0ml，3.5ml分别置于25ml比色管中，各加水至10ml，再分别加入pH为8.04的磷酸盐2ml和2%的茚三酮溶液2ml，摇匀，置于沸水中显色15min，取出后立即用冷水冷却至室温，静放5min，定容至25ml，摇勾，再放置15min，于566nm处测定各标准溶液的吸光度A，以试剂空白调零，以吸光度(A)为横坐标，质量浓度(C)为纵坐标进行线性回归。结果表明，天冬素在I?14yg/ml与吸光度呈良好的线性关系，可得回归方程为C =0.4953A-0.0029，R2 = 0.9992。
[0023]5、游离氨基酸的测定:精密量取上述提取上清液5ml置于25ml比色管中，并加水至10ml，再加入pH为8.04的磷酸盐2ml和2%的茚三酮溶液2ml，摇匀，置于沸水中显色15min，取出后立即用冷水冷却至室温，静放5min，定容至25ml，摇勾，再放置15min，于566nm处测定其的吸光度(A);将测定得到的吸光度值代入回归方程，该方法下测得游离氨基酸的含量为24.06%。
[0024]实施例2
[0025]—种微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步骤:
[0026]1、制备粉末与实施例1相同。
[0027]2、微波提取:(I)精确称取玉竹粉末0.1500g，加入浓度为20%的乙醇提取剂
3.75ml，置于设定功率为500w、温度为75°C的微波辐射萃取仪提取3次，每次提取时间为25min ； (2)采用抽滤的方式过滤出提取液，将滤液定至50ml ； (3)将定容后的滤液离心，控制离心转速为5000r/min，离心时间为20min，取其上清液于4°C储存，备用；以上三个处理按顺序重复三次。
[0028]3、标准溶液的制备与实施例1相同。
[0029]4、标准曲线的制备与实施例1相同。
[0030]5、游离氨基酸的测定与实施例1相同；将测定得到的吸光度值代入回归方程，该方法下测得游离氨基酸的含量为24.15%。
[0031]实施例3
[0032]—种微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步骤:
[0033]1、制备粉末与实施例1相同。
[0034]2、微波提取:(I)精确称取玉竹粉末0.2000g，加入浓度为20%的乙醇提取剂5.0ml，置于设定功率为600w、温度为75°C的微波辐射萃取仪提取3次，每次提取时间为28min ； (2)采用抽滤的方式过滤出提取液，将滤液定至50ml ； (3)将定容后的滤液离心，控制离心转速为4000r/min，离心时间为lOmin，取其上清液于4°C储存，备用；以上三个处理按顺序重复三次。
[0035]3、标准溶液的制备与实施例1相同。
[0036]4、标准曲线的制备与实施例1相同。
[0037]5、游离氨基酸的测定与实施例1相同；将测定得到的吸光度值代入回归方程，该方法下测得游离氨基酸的含量为23.98%。
[0038]应当指出，以上案例仅是本发明有代表性的例子。显然，本发明的技术方案并不限于上述实施例，还可以有许多变性。
【主权项】
1.一种微波提取玉竹中氨基酸的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)制备粉末:用蒸馏水冲洗干净玉竹，沥干水后，烘干，然后切剪成小段，用粉碎机粉碎，过40目筛得到玉竹粉末备用； (2)微波提取:称取玉竹粉末，以料液比为l:25g/ml加入浓度为20%?30%的乙醇提取剂，置于功率为400?600w、温度为75°C的微波辐射萃取仪提取3次，每次提取时间为23 ?28min ； (3)过滤定容:合并并过滤提取液，将滤液定容至50ml； (4)离心:将定容后的滤液蒸发离心，取其上清液于4°C储存，备用； (5)测定:以天冬酰胺药品为对照品，采用茚三酮比色法对该游离氨基酸进行测定。
2.根据权利要求1所述一种微波提取玉竹中氨基酸的方法，其特征在于:所述步骤(2)中微波辐射萃取仪每次提取时间为25min。
3.根据权利要求1所述一种微波提取玉竹中氨基酸的方法，其特征在于:所述步骤(2)中加入浓度为25%的乙醇。
4.根据权利要求1?3任意一项所述一种微波提取玉竹中氨基酸的方法，其特征在于:所述步骤(2)中微波辐射萃取仪功率为500w。
【专利摘要】本发明公开一种微波提取玉竹中氨基酸的方法，包括以下步骤：用蒸馏水冲洗干净玉竹，沥干水后，烘干，切剪成小段后粉碎，过40目筛，以料液比为1:25g/ml向粉末加入浓度为20％～30％的乙醇提取剂，置于功率为400～600w、温度为75℃的微波辐射萃取仪提取3次，每次提取时间为23～28min；合并并过滤提取液，定容后蒸发离心，取其上清液于4℃储存，测定氨基酸含量。利用微波辅助提取，耗时短；采取最优的提取工艺条件，提取率高且有效保护提取物的功能成分；且本发明的提取方法简单、易于操作，适合工业化生产。
【IPC分类】A01P3-00, A23L1-227, A01P1-00, A61K36-8969, A01N65-42
【公开号】CN104740296
【申请号】CN201510091130
【发明人】周可幸
【申请人】周可幸
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2015年2月28日