滤灭菌的人尿激肤原酶3. 5毫克，加入适量注射用水溶解，再加入1.8毫克盐酸倍 他司汀和1.05毫克己酬可可碱溶解，调节抑至中性，加注射用水至500毫升，加氯化钢调 节等渗，无菌过滤，分装1000个安肅中，即得。
[0030] 试验例一、人尿激肤原酶对高血压肾病的影响试验 1、试验对象；选取80只SPF级雄性自发性高血压大鼠（S皿)，12周龄，体重为 280-300g，由中国科学院上海实验动物中屯、提供。
[0031] 2、高血压肾病动物模型的建立： 往甜R大鼠的饮用水中加入50mg/L的硝基左旋精氨酸甲醋（L-NAME)，并且于每周一、S、五更换新配置的含有L-NAME的水瓶。在试验开始后的M、1如、28d，分别收集大鼠2化 尿液，测定尿蛋白的含量。W大鼠尿白蛋白尿"++"作为高血压大鼠（S皿）获得严重高血压 肾病的标志，W此作为造模成功的选择标准。
[0032] 3、试验分组： 选取建模成功的70只高血压肾病大鼠，随机分为7组，分别为模型组、人尿激肤原酶低 剂量组、人尿激肤原酶高剂量组、盐酸倍他司汀组、己酬可可碱组、人尿激肤原酶+盐酸倍 他司汀组、人尿激肤原酶+盐酸倍他司汀+己酬可可碱组。各组大鼠的给药方式为后尾静 脉注射，每日一次，连续4周，各组给药量如下： 模型组：注射等体积的生理盐水； 人尿激肤原酶低剂量组；注射0.Img/kg的人尿激肤原酶注射液； 人尿激肤原酶高剂量组；注射0. 5mg/kg的人尿激肤原酶注射液； 盐酸倍他司汀组；注射0. 3mg/kg的盐酸倍他司汀注射液； 己酬可可碱组：注射0. 15mg/kg的己酬可可碱注射液； 人尿激肤原酶+盐酸倍他司汀组；注射人尿激肤原酶0. 5mg/kg+盐酸倍他司汀0. 3mg/ kg； 人尿激肤原酶+盐酸倍他司汀+己酬可可碱组：注射人尿激肤原酶0. 5mg/kg+盐酸倍 他司汀0. 3mg/kg+己酬可可碱0. 15mg/kg。
[0033] 4、试验方法； 4周后收集各组大鼠2化尿液后，腹腔注射50mg/kg的2%的戊己比妥钢麻醉大鼠，注 射后将大鼠放置可控制温度的手术台W维持大鼠的自主呼吸，然后在大鼠的左侧腹股沟静 脉插管用W注射人造血浆、菊糖和对氨基马尿酸（PAH)，在大鼠的左侧腹股沟动脉插管并和 压力转换器连接用W记录平均动脉压（MAP),在大鼠的耻骨弓上和腹中线交界处作一水平 1cm左右的切口，用一个带有边缘的PE管插入膀脱收集尿液。整个手术期间，从大鼠静脉 缓慢推注约1ml人造血浆、0. 5ml含有20mg菊糖和对氨基马尿酸（PAH)的生理盐水，再W 100yl/(min.kg)持续静脉滴注同浓度剂量的菊糖和对氨基马尿酸（PAH)的生理盐水，经 过45min的平衡时间，肾脏清除率试验由两个持续20min的收集尿液的周期组成，每个周期 的中点收集一次血液样品(约150y1)，离屯、血液，收集血浆留待分析。
[0034] 将收集的大鼠尿液进行称重计算尿量并作菊糖和PAH的浓度测定。尿中和血浆中 的菊糖浓度用慈酬法测定。PAH浓度用比色法测定。该些测定计算出菊糖的清除率相当于 肾小球的滤过率（GFR)，对氨基马尿酸（PAH)清除率相当于肾脏血浆流量（RPF)。将两个周 期的结果平均后得到肾脏功能指标，W菊糖的清除率表示肾小球的滤过率，W对氨基马尿 酸（PAH)清除率表示肾脏血浆流量。
[00巧]5、试验结果 试验结果如表1和表2所示。
[0036]表1 各给药组对高血压肾病大鼠动脉压的影响
注：与模型组相比，*P< 0. 05。
[0037] 由表1可知，与模型组相比，人尿激肤原酶高剂量组可W降低高血压肾病大鼠的 动脉压，但是没有统计学意义。与模型组相比，人尿激肤原酶和盐酸倍他司汀药物组合物对 于降低高血压肾病大鼠的动脉压具有显著的效果，说明人尿激肤原酶和盐酸倍他司汀在降 低血压水平方面具有良好的协同作用；与人尿激肤原酶+盐酸倍他司汀组相比，人尿激肤 原酶、盐酸倍他司汀和己酬可可碱药物组合物比人尿激肤原酶和盐酸倍他司汀的药物组合 物的降压效果好，说明本发明人尿激肤原酶、盐酸倍他司汀和己酬可可碱的药物组合物在 降低血压水平方面具有良好的协同作用，对高血压肾病具有良好的治疗效果。
[003引表2各给药组对高血压肾病大鼠肾脏功能的影响
注：与模型组相比，Ap< 0. 05，AAp< 0. 01 ; 与人尿激肤原酶高剂量组相比，Ap<0. 05，AAp<0.01; 与人尿激肤原酶+盐酸倍他司汀组相比，Ip< 0.05,lip<0.01。
[0039] 由表2可知；（1)对高血压肾病大鼠的肾小球滤过率的影响： A) 与模型组相比，人尿激肤原酶可W显著的增加高血压肾病大鼠的肾小球滤过率，尤 其是人尿激肤原酶高剂量组对肾小球滤过率具有极显著性差异； B) 与人尿激肤原酶高剂量组相比，人尿激肤原酶和盐酸倍他司汀的药物组合物对高血 压肾病大鼠的肾小球滤过率具有极显著的影响，说明人尿激肤原酶和盐酸倍他司汀对肾小 球滤过率的影响具有显著的协同作用； C) 与人尿激肤原酶+盐酸倍他司汀组相比，人尿激肤原酶、盐酸倍他司汀和己酬可可 碱的药物组合物对高血压肾病大鼠的肾小球滤过率具有极显著的影响，说明人尿激肤原 酶、盐酸倍他司汀和己酬可可碱对肾小球滤过率的影响具有显著的协同作用。
[0040] (2 )对高血压肾病大鼠的肾脏血浆流量的影响： A)与模型组相比，人尿激肤原酶可W显著的增加高血压肾病大鼠的肾脏血浆流量，尤 其是人尿激肤原酶高剂量组对肾小球滤过率具有极显著性差异； B) 与人尿激肤原酶高剂量组相比，人尿激肤原酶和盐酸倍他司汀的药物组合物对高血 压肾病大鼠的肾脏血浆流量具有极显著的影响，说明人尿激肤原酶和盐酸倍他司汀对肾脏 血浆流量的影响具有显著的协同作用； C) 与人尿激肤原酶+盐酸倍他司汀组相比，人尿激肤原酶、盐酸倍他司汀和己酬可可 碱的药物组合物对高血压肾病大鼠的肾小球滤过率具有显著的影响，说明人尿激肤原酶、 盐酸倍他司汀和己酬可可碱对肾脏血浆流量的影响具有显著的协同作用。
【主权项】
1. 人尿激肽原酶在制备治疗高血压肾病药物中的用途。2. 如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述人尿激肽原酶为注射剂，所述注射剂还 含有甘露醇、氯化钠、葡萄糖或聚乙二醇。3. -种治疗高血压肾病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括人尿激肽原 酶和盐酸倍他司汀。4. 如权利要求3所述的治疗高血压肾病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物 中人尿激肽原酶与盐酸倍他司汀的重量比为1:0. 1-1。5. 如权利要求4所述的治疗高血压肾病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物 中人尿激肽原酶与盐酸倍他司汀的重量比为1:0. 6。6. 如权利要求3所述的治疗高血压肾病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物 还包括己酮可可碱。7. 如权利要求6所述的治疗高血压肾病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物 中人尿激肽原酶与己酮可可碱的重量比为1:0. 1-0. 5。8. 如权利要求7所述的治疗高血压肾病的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物 中人尿激肽原酶与己酮可可碱的重量比为1:0. 3。9. 如权利要求3-8任一所述的治疗高血压肾病的药物组合物，其特征在于，所述药物 组合物为注射剂，所述注射剂还含有甘露醇、氯化钠、葡萄糖或聚乙二醇。
【专利摘要】本发明属于医药领域，具体涉及人尿激肽原酶的新用途及含有人尿激肽原酶的药物组合物。本发明提供的人尿激肽原酶在制备治疗高血压肾病药物中的用途，经试验发现，人尿激肽原酶可以降低高血压肾病大鼠的动脉压，同时通过调节肾小球的微循环，可以提高血压肾病大鼠的肾小球滤过率和肾脏血浆流量，对肾脏损害具有一定的治疗效果。本发明还提供了治疗高血压肾病的药物组合物，该药物组合物包括人尿激肽原酶和盐酸倍他司汀，还包括己酮可可碱，所述药物组合物不仅具有显著的降血压功效，还对损害的肾脏具有明显的治疗作用，是一种治疗效果确切、副作用低的治疗高血压肾病的药物，更有利于高血压肾病患者的康复。
【IPC分类】A61K31/4402, A61K9/08, A61K31/4525, A61K38/48, A61K31/522, A61P13/12, A61P9/12
【公开号】CN104906564
【申请号】CN201510402687
【发明人】王旭, 郑少亮, 许文勤, 肖益热
【申请人】广东天普生化医药股份有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年7月10日