参果实提取 物和25 y g/mL人参根部提取物后，测量寿命。分别将100只成年雌性果蝇和100只成年 雄性果蝇放入各个笼子中，每隔一天将所述培养基更换成新鲜的培养基，同时记录死的 果蝇数量。该实验持续进行，直到笼子内的果蝇全部死亡。每种浓度用三个笼子进行实 验。如图 1 所不，通过利用 Kaplan-Meier(product-limit)估量和 log-rank (generalized Savage, Mantel-Cox)测试对其结果作了统计分析。
[0066]【测试实施例4】人参果实提取物对线虫的延长寿命效果的分析
[0067] (1)线虫生长培养基（NGM)板的准备
[0068] 混合3g NaCl、17g Difco琼脂和2. 5g细菌蛋白胨来制备955mL混合物，将其放入 高压灭菌器内。待高压灭菌器运作20分钟后，用磁力搅拌器搅拌1小时，而将所述混合物 冷却至60°C。随后，加入ImL的IM CaCl2UmL的3mg/mL乙醇中的胆固醇、ImL的IM MgSO4 和25mL的IM KPO4缓冲液，并用磁力搅拌器进行混合。在4°C下，将所得NGM溶液保存在板 上。
[0069] (2)秀丽隐杆线虫的繁殖
[0070]从秀刚隐杆线虫遗传中心（University of Minnesota, St. Paul, MN, USA)获得野 生型秀丽隐杆线虫。在20°C下，将所选取的卵在NGM板中孵化16小时，在NGM板中添加有 S基础缓冲液（IOOmM NaCl、0.0 lmM胆固醇、50mM磷酸钾（pH 6.0))。孵化的卵（LI期幼虫） 被移至添加有作为食物源的大肠杆菌菌株0P50的NGM板上，继续孵化至L4阶段。
[0071] 3?寿命的测量
[0072] 在包含lOmg/mL人参果实提取物或lOmg/mL人参根部提取物的S培养基【S基 底培养基，其中添加有 3mM CaCl2、3mM MgS04、50mM EDTA、25mM FeSO4UOmM MnCl2UOmM ZnSO4UmM CuSOjPlOmM KH2PO4 (pH 6.0)，大肠杆菌0P50】内繁殖处于L4期的幼虫。总共 繁殖出90只幼虫。每隔一天更换新鲜的培养基，同时对存活的秀丽隐杆线虫数量进行计 数。如图 2 所不，通过利用 Kaplan_Meier(product limit)分析和 log_rank(generalized Savage，Mantel-C〇X)测试对其结果作了统计分析。由此可知，所述人参果实提取物能够有 效地延长线虫的寿命。
[0073]【测试实施例5】人参果实提取物对小鼠的延长寿命效果的分析
[0074] 由于要测量包括小鼠在内的哺乳动物的实际寿命需要至少两年的长期限且成本 极高，因而已研发出能够证明寿命延长效果的各项指标。
[0075] 例如，在包括人在内的哺乳动物中，将T细胞亚群的分布，即⑶4和⑶8记忆细胞 的数目，在包括人在内的哺乳动物中用作衰老标记，进而被广泛地用作评估受试者的寿命 的指标（Mechanisms of Ageing and Development (2004) ,125 ;381_390)。具体地，CD4 记 忆细胞的数量会随着衰老而增加，而且无论有无疾病或该疾病的发病原因为如何，这种细 胞数量的增加与快速死亡有关联（FASEB J. (1997) 11,775-783)。
[0076] 因此，在本发明中，通过使用T细胞亚群的分布，研究对于哺乳动物的寿命延长效 果。
[0077] 购买8周龄C57BL/6小鼠（Central Lab. Animal, Korea)，然后进行一周的稳定化 处理。将全部受试者保存在不同的笼子内，且让其自由地食用饲料和水。所述笼子维持在 22±1°C和60±5%湿度，且12h/12h明/暗循环。
[0078]作为饲料，提供标准饲料（D12450B, Research Diets, New Brunswick, NJ, USA)，且 每周测量饲料摄取量和体重，并检查健康状态。每天向每只小鼠（每组10只）口服给药 50mg/kg或100mg/kg人参果实提取物，且持续给药6个月。对于对照组，只提供标准饲料， 并持续6个月。
[0079]待6个月后，从每只小鼠的尾静脉中抽取400L血液。其中加入1.5体积当量的 PBS后，在3000rpm下进行离心分离，只取上清液。根据由組11616七31.(工661'〇]11:〇1. Biol. Med. Sci. 1997 ; 11，775-783)报道的方法，通过利用 FITC 和 PE 抗体（PharMingen, San Diego, CA, USA)，进行T细胞亚群分析。其结果在表3中展示。
[0080]【表3】
[0081]
[0082] 如表3所示，人参果实提取物的给药导致作为小鼠寿命的估量值的CD4和CD8记 忆细胞的数量会以浓度依赖性地下降。
[0083] 下面，将描述本发明一方面的组合物的剂型实施例。然而，这些实施例仅用作说明 为目的而使用，并不限制本发明的范围。
[0084]【剂型实施例1】保健食品
[0085] 人参果实提取物 1000 mg
[0086] 维生素混合物
[0091] 所述维生素和矿物质混合物之间的组合比例是根据适于健康功能食品的具体实 施例来描述的，然而根据需要可进行变化。
[0092] 【剂型实施例2】保健饮料
[0093]
[0094]
[0095] 根据采用用于制备保健饮料的方法，将上述成分在85°C下混合并搅拌加热约1小 时。将所得溶液进行过滤并灭菌处理。
[0096]【剂型实施例3】片剂
[0097] 混合IOOmg人参果实提取物、50mg大豆提取物、IOOmg葡萄糖、50mg红参提取物、 96mg淀粉和4mg硬脂酸镁，然后其中加入40mg的30%乙醇进行制粒。在60°C下干燥后，将 所述颗粒制成片剂。
[0098]【剂型实施例4】颗粒剂
[0099] 混合IOOmg人参果实提取物、50mg大豆提取物、IOOmg葡萄糖和600mg淀粉，然后 其中加入IOOmg的30%乙醇进行制粒。在60°C下干燥后，将所述颗粒装入袋内。
[0100] 工业应用性
[0101] 本发明涉及一种用于寿命延长的组合物，具体地涉及一种包含人参果实提取物的 用于寿命延长的组合物。本发明的组合物包含作为活性成分的人参果实提取物，该组合物 可以延长受试者的寿命，因此具有很高的药用价值。尤其，由于本发明组合物中作为活性成 分的人参果实提取物被发现能够降低小鼠体内的那些称为衰老标记的特异性细胞的数量 (Mechanisms of Ageing and Development (2004) ,125 ;381_390)，因此本发明的组合物可 以延长哺乳动物的寿命，从而具有很高的药用价值。
【主权项】
1. 一种用于寿命延长的组合物，其包含作为活性成分的人参果实提取物。2. 根据权利要求1所述的用于寿命延长的组合物，其特征在于，所述组合物包含占所 述组合物总重量的0. 001-80wt%的人参果实提取物。3. 根据权利要求1所述的用于寿命延长的组合物，其特征在于，所述人参果实提取物 具有比例为0. 5-2. 5的原人参二醇（PD)类人参皂苷和原人参三醇（PT)类人参皂苷。4. 根据权利要求1或2所述的用于寿命延长的组合物，其特征在于，所述组合物为药物 组合物。5. 根据权利要求1或2所述的用于寿命延长的组合物，其特征在于，所述组合物为保健 食品组合物。
【专利摘要】本发明涉及一种用于寿命延长的组合物，具体为包含人参浆果提取物的用于寿命延长的提取物。本发明由于包含作为活性成分的人参浆果提取物，从而延长个人的生命，因此具有很好的药用价值。
【IPC分类】A61P43/00, A61K36/258
【公开号】CN105101983
【申请号】CN201480019504
【发明人】曹始永, 金周元, 朴赞雄, 徐大方, 曹恩敬, 金完起, 李尚骏, 金贤喜
【申请人】株式会社爱茉莉太平洋
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年4月3日