以剂量依赖地显著延长小鼠的负重游泳时间。克拉 霉素和阿奇霉素组游泳时间也明显长于对照组，说明克拉霉素和阿奇霉素也能够显著地延 长小鼠的负重游泳时间。大环内酯类抗生素，尤其是红霉素、克拉霉素和阿奇霉素能够显著 延长小鼠的负重游泳时间，提高运动耐力，具有显著的抗疲劳作用。
[0057] 实施例2对小鼠运动后生化指标的影响
[0058] 一、材料和方法
[0059] 1?试剂和实验动物
[0060] 同实施例1，将实验用小鼠120只，随机分成2批，分别进行血清尿素氮测定、血 乳酸测定、血红蛋白测定、乳酸脱氢酶测定实验和肝糖原测定实验。每批动物又分为6组， 分别为红霉素低剂量组，红霉素中剂量组，红霉素高剂量组，克拉霉素组，阿奇霉素组和对 照组，每组动物10只，分别按红霉素5mg/kg，红霉素15mg/kg，红霉素60mg/kg，克拉霉素 15mg/kg和阿奇霉素15mg/kg的剂量进行灌胃给药，对照组给予同样剂量的CMC-Na溶液。 小鼠常规光照、饮水，25°C饲养。每日灌胃1次，灌胃量为小鼠质量的1%，连续30d后测各 项指标。
[0061] 2?主要试剂与仪器
[0062] 尿素氮（BUN)测定试剂盒、糖原测定试剂盒、乳酸（LD)测定试剂盒、乳酸脱氢酶 (LDH)测定试剂盒、微量游离血红蛋白（FHb)测定试剂盒：购自南京建成生物工程有限公 司；HitachiL-8900氨基酸自动分析仪：HITACHI日立集团产品；电子分析天平：上海精密 仪器科学有限公司产品；游泳箱、高速冷冻离心机：美国热电公司产品；电热恒温水浴锅： 上海一恒科技有限公司产品；漩涡振荡器：上海精科实业有限公司产品；UV-2450紫外可见 分光光度计：日本岛津公司产品。
[0063] 3.小鼠血清尿素氮、血乳酸、血红蛋白、乳酸脱氢酶的测定
[0064] 末次给予受试物30min后，将小鼠放于游泳箱中不负重游泳90min，水温 (30± 1) °C，休息60min后摘眼球取血，血液样品以3000r/min离心5min以分离血清。用尿 素氮（BUN)测定试剂盒测定血清尿素氮，用乳酸（LD)测定试剂盒测定血乳酸，用微量游离 血红蛋白（FHb)测定试剂盒测定血红蛋白，用乳酸脱氢酶（LDH)测定试剂盒测定乳酸脱氢 酶。
[0065] 4.肝糖原测定
[0066] 末次给予受试物30min后脱颈椎处死。取肝脏，以生理盐水漂洗后用滤纸吸干，用 糖原测定试剂盒测定肝糖原。
[0067] 5.统计分析
[0068] 数据处理和统计分析采用Excel和SPSS17. 0软件，结果以平均数土标准差 (X土S)表不。
[0069] 二、结果
[0070] 1.不同试样对小鼠终末体重的影响
[0071] 连续灌喂30d后，各组小鼠体重的增长无显著性差异（P> 0. 05)，表明红霉素低剂 量，红霉素中剂量，红霉素高剂量，克拉霉素和阿奇霉素对小鼠体重无显著影响。
[0072] 2.对小鼠运动后生化指标的影响
[0073] 由表3可知，经□给药30d，与对照组比较，红霉素低剂量，红霉素中剂量，红霉素 高剂量，克拉霉素和阿奇霉素均能显著降低游泳后小鼠血清尿素氮的含量。红霉素中剂量， 红霉素高剂量和克拉霉素能显著降低游泳后小鼠血乳酸的含量，红霉素低剂量和阿奇霉素 效果不明显。红霉素中剂量，红霉素高剂量，克拉霉素和阿奇霉素均能显著增加游泳后小鼠 血红蛋白的含量，其中红霉素高剂量效果最明显。红霉素高剂量能显著增加小鼠乳酸脱氢 酶的含量。红霉素低剂量，红霉素中剂量，克拉霉素和阿奇霉素也能增加小鼠乳酸脱氢酶的 含量，但效果不明显。红霉素中剂量，红霉素高剂量，克拉霉素和阿奇霉素的肝糖原含量显 著升高，且红霉素高剂量效果更明显。
[0074] 表3不同处理组对小鼠生化指标的影响
[0075]
[0076] 血清尿素氮是蛋白质代谢的终产物，是评定机体对运动适应能力的重要指标之 一，机体血清尿素氮含量随劳动及运动负荷的增加而增加，机体对负荷适应能力越差，血清 尿素氮增加越明显。实验结果显示，红霉素能够剂量依赖的明显降低小鼠剧烈运动后血清 尿素氨水平，克拉霉素和阿奇霉素也能够明显降低小鼠剧烈运动后血清尿素氨水平，说明 保护剧烈运动中蛋白质的过量分解，提高了机体对剧烈运动的适应能力，使耐力增加。血乳 酸是评价机体疲劳的重要标志物，机体在长时间剧烈运动后，体内堆积过多乳酸是引起运 动性疲劳的一个重要原因，因为机体内乳酸积累过多会影响机体内环境的相对稳定和体内 正常代谢过程。本发明发现红霉素和克拉霉素可具有抑制血乳酸升高作用，说明红霉素和 克拉霉素能及时消除由于剧烈运动而产生的乳酸，从而减轻疲劳。血红蛋白的主要功能是 运输氧气，其含量直接影响机体的运动耐力，实验结果表明，红霉素、克拉霉素和阿奇霉素 均能维持或增加小鼠血红蛋白的含量，保证机体氧气供应充足，进而促进机体有氧代谢的 进行和乳酸的消除，提高运动耐力。通过提高乳酸脱氢酶活力以降低血乳酸水平是提高机 体抗疲劳能力的途径之一。实验测得红霉素能明显地增强乳酸脱氢酶活力，有效地降低运 动后血乳酸产生的量，增强小鼠运动耐力。肝糖原是血糖的储存库，在机体血糖降低时可迅 速分解释放入血，以维持血糖水平的稳定。实验结果表明，红霉素、克拉霉素和阿奇霉素能 够提高肝糖原储备量和减少运动时肝糖原的消耗，为机体提供更多的能量来达到抗疲劳的 目的。
[0077] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为 本发明的保护范围。
【主权项】
1. 大环内酯类抗生素在制备抗疲劳疾病药物中的应用。2. 大环内酯类抗生素在制备抗疲劳保健品中的应用。3. 根据权利要求1或2任一所述的应用，其特征在于，所述的大环内酯类抗生素是红霉 素。4. 根据权利要求1或2任一所述的应用，其特征在于，所述的抗疲劳疾病药物或抗疲劳 保健品中的抗疲劳活性成分是大环内酯类抗生素。5. 根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的抗疲劳疾病药物或抗疲劳保健品 中还包括其他辅料。6. 根据权利要求1或2任一所述的应用，其特征在于，所述的药物或保健品通过以下一 种或几种方式达到抗疲劳的效果：降低剧烈运动后血清尿素氨水平，抑制血乳酸升高，维持 或增加血红蛋白的含量，增强乳酸脱氢酶活力，提高肝糖原储备量和减少运动时肝糖原的 消耗。7. 根据权利要求1或2任一所述的应用，其特征在于，所述的大环内酯类抗生素的有效 剂量为 5-60mg/kg。
【专利摘要】本发明涉及大环内酯类抗生素尤其是红霉素在制备抗疲劳疾病药物中的应用。本发明优点在于：本发明首次发现了大环内酯类抗生素尤其是红霉素的抗疲劳作用，动物试验结果表明，大环内酯类抗生素能够显著延长负重小鼠的游泳时间，降低剧烈运动后血清尿素氨水平，抑制血乳酸升高，维持或增加血红蛋白的含量，增强乳酸脱氢酶活力，提高肝糖原储备量和减少运动时肝糖原的消耗，具有显著的减轻疲劳、增加运动耐力的作用。
【IPC分类】A61K31/7048, A61P39/00
【公开号】CN105106229
【申请号】CN201510445839
【发明人】苏定冯, 刘霞, 雷虹, 孙旸
【申请人】中国人民解放军第二军医大学
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年7月27日