时间2小时，包合溫度为 40摄氏度，无水乙醇与薰衣草精油比例为1:1。
[0048] 6、薰衣草精油包合物的标准测定
[0049] 6. 1挥发油利用率的考察
[0050] 将所得干燥包合物精密称重，置装有沸石250ml圆底烧瓶中，加蒸馈水200ml，提 取挥发油至油量不再增加时停止加热，读数，得回收挥发油体积，再按下式计算包合物产率 及挥发油利用率。
[0051] 挥发油利用率=[收集挥发油量（ml)/加入挥发油量（ml)]X100%
[0052] 包合物产率={包合物重量（g)/[P-环糊精重量（g)+投油量（g)]}X100%
[0053] 最后结果为，薰衣草油包合物的空白回收率为75. 44%，包合物产率为80. 67%。
[0054] 6. 2显微镜观察
[00巧]空白包合物为规则的半透明板状结晶，薰衣草精油-P-CD包合物为无定型的不 规则粉末，说明P-CD包合前后的物相形态发生了较大改变，P-环糊精将薰衣草油包合进 材料中，证明了包合物的形成。（见图1、图2)
[005引 6. 3包合前后薰衣草油GC-MS色谱图（见图3)
[0057] 检测方法参考文章：袁苏宁，杜卫军，刘丛等.GC-MS法测定不同来源薰衣草挥发 油中芳精醇和乙酸芳精醋的含量[J].新疆医科大学学报，2012,11(35) =1478-1482.
[005引 7成型工艺的考察
[0059] 7. 1按照有效成分薰衣草精油16. 5份、葡萄巧提取物33份、抗氧化剂维生素E2 份和辅料进行不同配比研究，选取比例为表2。
[0060]
[0061] W下通过具体药效学试验证明本发明的有益效果。
[00的]材料与试剂：
[0063] 小鼠胚胎成纤维MEF细胞；薰衣草油相对密度（20°C/20°C)0. 8875,为浅黄色澄 清流动液；葡萄巧提取物原花青素，质量分数98. 95%，为栋褐色粉末；所述的薰衣草精油 的CAS号为：8000-28-0 ;所述的葡萄巧提取物（或称葡萄巧提取物原花青素）的CAS为 84929-27-1〇
[0064] 嚷挫兰MTT试剂盒；活性氧检测试探针（DCFH-DA);DMEM(高糖）培养基；活性氧 抑制剂NAC。
[0065] 试验例1本发明组合物细胞M1T试验
[0066] 接种小鼠成纤维细胞于96孔板中化000/孔），待细胞完全贴壁后取浓度梯度为 (0、0.l、l、10、50、100mg/ml)薰衣草油和葡萄巧提取物原花青素做加药处理，48小时后加 入40yLM1T溶液巧mg/ml，即1 %MTT)解育地，待充分形成甲琐后，吸光培养基加入150ul 二甲基亚讽充分溶解甲琐，采用酶标仪检测0D值，测得薰衣草油ic50为119. 85,几乎无毒 性，葡萄巧提取物原花青素ic50为58. 53,毒性很小。试验结果见表3,图4,图5。
[0067]
[0068] 试验例2本发明组合细胞活性氧检测试验
[0069]另接种小鼠胚胎成纤维MEF细胞于6孔板中（采用每孔10000)，24小时后，于倒 置显微镜中观察观察细胞状态是否贴壁。细胞状态良好加入&〇220yM和分别加入不同浓 度的薰衣草油（LAO)与葡萄巧提取物原花青素（OPC)W及其配伍混合物，检测细胞内活性 氧（R0巧变化情况（双氧水会带来氧化损伤）。在收取细胞前20min加入DCFH-DA探针 值CFH-DA工作也浓度为10-20yM)，20min后，洗掉培养基，PBS冲洗3遍，膜酶消化后离屯、 收取细胞（离屯、转速不超过3000转），离屯、下来的细胞采用含有10%GibcoDMEM血清处 理停止消化，离屯、后采用PBS转移到流式管中，设定流式细胞仪，上机检测（上机设定时采 用SS area和fs area进行检测细胞），通过FL1通道进行分析。选用双氨-乙酷乙酸二 氯巧光黄值CFH-DA)检测细胞内R0S的，观察W薰衣草油5mg/ml和葡萄巧提取物原花青素 lOmg/ml配伍比例为1 :2时效果较佳（此处薰衣草油和葡萄巧原花素素的含量是指细胞用 量，人体用量就是相应倍数增加即可，配伍比例是重量比），上机检测细胞系内R0S清除率 高于两种单独效果。
[0070] 通过流式细胞图（图6)和结果分析图（图7)说明：
[0071] 1、双氧水在处理小鼠胚胎细胞mef细胞后有明显的活性氧升高；
[0072] 2、NAC作为活性氧抑制剂可W明显抑制双氧水带来的R0S升高现象；
[0073] 3、0PC和LA0在lOmg/ml和5mg/ml单独情况下处理对mef细胞没有影响；
[0074] 4、LA0和0PC可W部分抑制活性氧的升高，其中0PC效果具有显著性；
[0075] 5、0PC和LA0共处理可W明显降低双氧水带来的R0S，并且具有显著性。
[0076] 试验结果表明，通过将葡萄巧提取物原花青素联合薰衣草油口服使用，对细胞活 性氧清除能力有显著的增强效果，具有协同增效的作用。
【主权项】
1. 薰衣草精油与葡萄籽提取物联合使用在制备抗氧化的保健品或药品中的用途。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述的薰衣草精油与葡萄籽提取物的重 量配比为： 薰衣草精油15-20份、葡萄籽提取物30-35份。3. 根据权利要求2所述的用途，其特征在于：所述的薰衣草精油与葡萄籽提取物的重 量配比为： 薰衣草精油16. 5份、葡萄籽提取物33份。4. 一种抗氧化作用的保健或药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料组 成： 薰衣草精油15-20份、葡萄籽提取物30-35份、抗氧化剂1-3份。5. 根据权利要求4所述的组合物，其特征在于：所述的抗氧化剂量维生素E ;它是由下 述重量配比的原料组成： 薰衣草精油16. 5份、葡萄籽提取物33份、维生素E2份。6. 根据权利要求4或5所述的组合物，其特征在于：它是由薰衣草精油、葡萄籽提取 物、维生素E为主要成分制备而成的制剂。7. 根据权利要求6所述的组合物，其特征在于：所述的制剂是口服制剂。8. 根据权利要求7所述的组合物，其特征在于：所述的制剂是片剂、胶囊剂、丸剂、口服 液、颗粒剂。9. 一种制备权利要求4-8任意一项所述的组合物的方法，其特征在于：它包括如下步 骤： a、 取各重量配比的原料； b、 将原药和辅料过筛；按比例称取薰衣草精油，以P _环糊精包合制备的包合物、葡萄 籽提取物、维生素E加填充剂混合均匀，再加粘合剂制软材，过筛制粒，湿颗粒再干燥，过20 目筛整粒，加入润滑剂、外加崩解剂混匀，压片即可。10. 根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于：b步骤所述的填充剂为淀粉，粘合剂 为70%乙醇，崩解剂为硬脂酸镁。
【专利摘要】本发明提供了薰衣草精油与葡萄籽提取物联合使用在制备抗氧化的保健品或药品中的用途。本发明还提供了一种抗氧化作用的保健或药物组合物，它是由下述重量配比的原料组成：薰衣草精油15-20份、葡萄籽提取物30-35份、抗氧化剂1-3份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明保健品可以实现精油口服化，并且葡萄籽提取物联合薰衣草油后细胞活性氧清除能力有增强效果，具有协同增效的作用。
【IPC分类】A61K36/87, A23L1/29, A61P39/06, A23L1/30
【公开号】CN105147878
【申请号】CN201510117282
【发明人】曾锐, 王爽, 张英
【申请人】四川紫颐天堂香草科技开发有限公司, 曾锐
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年3月17日