用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及贝母总生物碱的提取，具体涉及用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法。
【背景技术】
[0002]贝母是百合科(ZiWaceae)贝母属{Fritillarii)植物，传统药用部位为其鳞莖，贝母主治伤寒烦热、咳嗽止气、安五脏、利骨髓、消痰润心肺，兼有消炎退肿、治疗痛疖肿毒等功效。1982年版《中药志》述:有“清热润肺、化痰止咳、散结功能等功效”，临床用于痰热咳嗽、脸色闷痰，治瘰疠和疮疡肿毒。贝母主要药用成份为贝母生物碱，包括贝母甲素、贝母乙素等，贝母生物碱具有自由基清除活性。目前从贝母中提取总生物碱的方法为传统的有机溶剂萃取，如公告号为CN1146425的发明专利，就公开了先将贝母用95%乙醇回流，加2%盐水溶解后，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取多次，再用氯仿萃取，得到贝母总生物碱。但传统方法萃取复杂，需反复萃取，萃取时间长，萃取效率低，且是以贝母鳞茎作为原料，而贝母花大多腐烂在田野中，得不到利用。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种提取简单、时间短、效率高的用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法。
[0004]本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法，其步骤如下:
a、将当日摘取的鲜贝母花风干后粉碎，过45?60目筛，得到贝母花粉末，装入超临界萃取爸中；
b、在超临界萃取釜中，萃取温度为30?50°C，C(V流体压力为20?40MPa，夹带剂乙醇流速0.2?0.5ml/min,萃取时间I?3h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中10g贝母花粉末萃取后要用20?30ml甲醇吸收；
C、吸收液用DlOl型大孔树脂层析柱层析，层析速度为每小时两个柱床体积流速，层析后先用蒸馏水洗层析柱，洗至流出液无色，然后用2个柱床体积的质量百分浓度50%乙醇洗层析柱，再用8个柱床体积的质量百分浓度95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱的洗脱液得到贝母花洗脱液，贝母花洗脱液在450?500Pa条件下减压浓缩至近干，再在105°C条件下干燥24h，得到主要成份为贝母总生物碱的浅黄色贝母花提取物。
[0005]与现有技术相比，本发明的优点在于用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法，贝母花粉末在超临界萃取釜中，萃取温度为30?50°C，C(V流体压力为20?40MPa，夹带剂乙醇流速0.2?0.5ml/min，萃取时间I?3h，再用甲醇吸收，然后用大孔树脂层析柱层析，乙醇洗脱，95%乙醇洗脱的贝母花洗脱液减压浓缩，再105°C条件下干燥24h，得到主要成份为贝母总生物碱的浅黄色贝母花提取物。该方法步骤简单，提取时间缩短，提取效率较高，每公斤贝母花可以提取贝母总生物碱17g左右，纯度也较高，贝母总生物碱重量占60%以上，且将贝母花充分利用，提高种植贝母的价值。
【具体实施方式】
[0006]以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
[0007]实施例1
将当日摘取的鲜贝母花(可以是浙贝母、川贝母等)风干后粉碎，过45?60目筛，得到贝母花粉末，称重50g，装入超临界萃取釜中，萃取温度为38°C，C(V流体压力为33MPa，夹带剂乙醇流速0.25ml/min，萃取时间2h，萃取物用10?15ml甲醇吸收后得吸收液，吸收液DlOl型大孔树脂层析柱层析，以每小时两个柱床体积流速用蒸馏水洗涤至流出液无色，然后用2个柱床体积的质量百分浓度50%乙醇洗涤，再用8个柱床体积的质量百分浓度95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱的贝母花洗脱液，贝母花在450?500Pa条件下减压浓缩至近干，105°C条件下干燥24h，得到浅黄色的贝母花提取物0.85g，采用溴甲酚绿显色的紫外可见分光光度法测定每克提取物中贝母总生物碱含量为613mg。
[0008]实施例2
与实施例1基本相同，所不同的只是萃取温度为30°C，C(V流体压力为20MPa，夹带剂乙醇流速0.20ml/min，萃取时间3h，萃取物用30ml甲醇吸收后得吸收液，贝母花提取物
0.84g，每克提取物中贝母总生物碱含量为608mg。
[0009]实施例3
与实施例1基本相同，所不同的只是萃取温度为50°C，C(V流体压力为40MPa，夹带剂乙醇流速0.50ml/min,萃取时间lh，萃取物用20ml甲醇吸收后得吸收液，贝母花提取物
0.82g，每克提取物中贝母总生物碱含量为601mg。
【主权项】
1.用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法，其特征在于步骤如下: a、将当日摘取的鲜贝母花风干后粉碎，过45?60目筛，得到贝母花粉末，装入超临界萃取爸中； b、在超临界萃取釜中，萃取温度为30?50°C，C(V流体压力为20?40MPa，夹带剂乙醇流速0.2?0.5ml/min,萃取时间I?3h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中10g贝母花粉末萃取后需用20?30ml甲醇吸收； C、吸收液用DlOl型大孔树脂层析柱层析，层析速度为每小时两个柱床体积流速，层析后先用蒸馏水洗层析柱，洗至流出液无色，然后用2个柱床体积的质量百分浓度50%乙醇洗层析柱，再用8个柱床体积的质量百分浓度95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱的洗脱液得到贝母花洗脱液，贝母花洗脱液在450?500Pa条件下减压浓缩至近干，再在105°C条件下干燥24h，得到主要成份为贝母总生物碱的浅黄色贝母花提取物。2.如权利要求1所述的用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法，其特征在于步骤b中，萃取温度为38°C，C(V流体压力为33MPa，夹带剂乙醇流速0.25ml/min，萃取时间2ho3.如权利要求1所述的用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法，其特征在于步骤b中，萃取温度为30°C，C(V流体压力为20MPa，夹带剂乙醇流速0.20ml/min，萃取时间3ho
【专利摘要】本发明公开了用超临界流体从贝母花中提取贝母总生物碱的方法，贝母花粉末在超临界萃取釜中，萃取温度为30～50℃，CO2流体压力为20～40MPa，夹带剂乙醇流速0.2～0.5ml/min，萃取时间1～3h，再用甲醇吸收，然后用大孔树脂层析柱层析，乙醇洗脱，95%乙醇洗脱的贝母花洗脱液减压浓缩，再105℃条件下干燥24h，得到主要成份为贝母总生物碱的浅黄色贝母花提取物。该方法步骤简单，提取时间缩短，提取效率较高，每公斤贝母花可以提取贝母总生物碱17g左右，纯度也较高，贝母总生物碱重量占60%以上，且将贝母花充分利用，提高种植贝母的价值。
【IPC分类】A61K36/8966
【公开号】CN105213755
【申请号】CN201510676691
【发明人】王强, 戴永峰
【申请人】浙江大学宁波理工学院
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月20日