一种冷冻超微振荡法制备麦冬总皂苷的方法
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种冷冻超微振荡法制备麦冬总皂苷的方法。
【背景技术】
[0002] 麦冬为百合科植物麦冬Ophiopogon japonicus (L. f. )Ker-Gawl.的干燥块根，为 常用中药之一。麦冬具有养阴生津，润肺清心之功效，用于肺燥干咳，虚痨咳嗽，津伤口渴， 心烦失眠，内热消渴等症。麦冬具有悠久的用药历史，始载于《神农本草经》，列为上品，历代 本草均有记载，亦为《中国药典》所收载。
[0003] 现代研究表明，留体皂苷类化合物是麦冬的主要药效成分之一。由于麦冬中含有 大量多糖类成分，提取麦冬总皂苷时多糖类成分也会溶出，导致总皂苷部位纯化难度较大。 另外，由于含有大量多糖类成分，麦冬药材质地较黏，粉碎操作也存在一定困难，通常是将 饮片直接提取，提取效率不高。目前，麦冬总皂苷提取大多是采用水或乙醇溶液在常温下或 加热条件下提取，再应用正丁醇萃取和/或过大孔树脂除去多糖类及其他成分进行纯化， 具有耗时、耗力、效率低以及容易带入污染物等缺点。
[0004] 中国专利申请CN201010117049. 7公开了一种麦冬总皂苷超声强化提取的制备方 法，将麦冬药材粉碎成一定目数的粉末，置于超声提取器中，用水或醇溶液作为溶剂，在超 声频率20~150kHz，温度20~80°C下，提取20~200min后出料，滤过，清液浓缩，经正丁 醇萃取制备后得稠膏干燥，即得麦冬总皂苷。该方法采用常规提取方法，麦冬中的化学成 分，包括大量非皂苷类成分被充分溶出；再经正丁醇萃取，不仅增加了操作步骤，消耗更多 具有污染性的试剂成本，而且麦冬总皂苷也会进一步损失。
[0005] 中国专利申请CN200910142488. 0公开了一种短葶山麦冬中总皂苷及其制备方 法，包括：以短葶山麦冬根为原料，以浓度多51wt%的乙醇提取，提取液用正丁醇萃取，得 粗总皂苷；取粗总皂苷加水溶解，过非极性大孔树脂柱，先后以水、乙醇水溶液洗脱，收集洗 脱液，得总皂苷。该方法同样操作繁琐，试剂消耗量大，且麦冬总皂苷成分损失较多。
[0006] 中国专利申请CN200610014213. 5公开了一种麦冬总皂苷的制备方法，包括：（1) 取麦冬药材，加入溶剂，将溶液调至碱性后再进行提取，得提取液；（2)提取液上大孔型碱 性阴离子交换柱，先用碱水和纯水冲洗，冲洗液弃去，再用含水乙醇洗脱，洗脱液浓缩，即得 麦冬总皂苷。该方法同样存在操作繁琐、麦冬总皂苷损失大的缺陷。
[0007] 上述提取方法均需将麦冬提取液经树脂柱纯化，耗时、耗力、效率低。因此，需要建 立一种简便、高效的麦冬总皂苷提取物制备方法。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的在于提供一种麦冬总皂苷提取物的制备方法，该方法简单、高效，麦 冬总皂苷提取率高，纯度高。
[0009] 本发明的另一目的在于提供上述制备方法制得的麦冬总皂苷提取物。
[0010] 本发明提供一种制备麦冬总皂苷提取物的方法，包括如下步骤：
[0011] (1)将麦冬冷冻至0°C~-25°c ;
[0012] (2)将冷冻后的麦冬进行超微粉碎，得到粉碎后的麦冬；
[0013] (3)将所述粉碎后的麦冬采用60vt%~85vt%的乙醇溶液超微振荡提取，得到麦 冬提取液；
[0014] (4)将所述麦冬提取液浓缩，得到麦冬总皂苷提取物。
[0015] 根据本发明所述的方法，优选地，在步骤（1)中，将麦冬冷冻至_5°C~_20°C。
[0016] 根据本发明所述的方法，优选地，在步骤（1)中，冷冻时间为2~24小时。
[0017] 根据本发明所述的方法，优选地，在步骤（2)中，所述超微粉碎是干法粉碎，粉碎 时间为2~8分钟。
[0018] 根据本发明所述的方法，优选地，在步骤（2)中，所述超微粉碎步骤为将所述冷冻 后的麦冬分散于60vt%~85vt%的乙醇溶液中进行超微振荡粉碎。
[0019] 根据本发明所述的方法，优选地，在步骤（2)中，所述乙醇溶液的浓度为65vt%~ 80vt %，所述乙醇溶液的用量为麦冬重量的0. 5~2. 5倍，超微振荡粉碎时间为3~10分 钟。
[0020] 根据本发明所述的方法，优选地，在步骤（2)中，所述粉碎后的麦冬的粒径范围为 5~20微米，所述的粒径范围采用激光衍射粒度分析仪进行测试。
[0021] 根据本发明所述的方法，优选地，在步骤（3)中，所述乙醇溶液的浓度为65vt%~ 80vt % 〇
[0022] 根据本发明所述的方法，优选地，在步骤（3)中，乙醇溶液的用量为麦冬重量的 2~5倍，提取次数为1~3次。
[0023] 根据本发明所述的方法，优选地，步骤（3)还包括固液分离操作，固液分离的方式 为离心、过滤或沉淀。
[0024] 本发明的麦冬总皂苷提取物的制备方法，通过首先将麦冬进行冷冻处理，然后对 麦冬进行超微振荡粉碎，有利于麦冬中的皂苷类成分的充分溶出；另外，通过采用特定浓度 的乙醇溶液进行超微振荡提取，使麦冬中的皂苷类成分充分溶出，同时麦冬中含有的另一 类主要成分一一多糖类成分却几乎不能溶出，从而省去了现有技术中需要对提取液进行正 丁醇萃取、大孔树脂柱除糖等常规除杂操作。本发明的制备方法皂苷类成分损失少，得率 高；所得提取物中总皂苷纯度高，杂质少；且本发明提取方法操作十分简单，耗时短，无需 加热，无需大孔树脂、正丁醇等纯化，使麦冬总皂苷的大规模提取制备的成本大幅降低，具 有重要的产业意义。
【具体实施方式】
[0025] 下面对本发明的【具体实施方式】做进一步详细说明，但本发明的保护范围并不因此 受到任何限制。
[0026] 本发明中，所述"乙醇溶液"是指含乙醇的水溶液。除非特别说明，乙醇溶液的浓 度" ％ "具有本领域公知的含义，是指体积百分数"vt % "。
[0027] 本发明中，所述"倍量"为重量比例。
[0028] 本发明中，总皂苷得率（wt% )为麦冬总皂苷提取物中的总皂苷含量与麦冬药材 中的总皂苷含量之比。
[0029] 本发明的麦冬总皂苷的制备方法包括（1)冷冻步骤；（2)超微粉碎步骤；(3)提取 步骤；（4)浓缩步骤。以下进行详细描述。
[0030] 〈冷冻步骤〉
[0031] 本发明的步骤（1)为将麦冬冷冻至0°C至_25°C。优选地，在步骤（1)中，将麦冬冷 冻至-5°C至-20°C。更优选地，在步骤（1)中，将麦冬冷冻至-10°C至-18°C。本发明中，为 了增加药材的脆性，步骤（1)优选将麦冬冷冻2~24小时。根据本发明优选的实施方式， 步骤（1)的麦冬的冷冻时间为5~20小时。根据本发明更优选的实施方式，步骤（1)的麦 冬的冷冻时间为8~18小时，更优选为12~15小时。
[0032] 本发明中，步骤（1)所述麦冬可以是麦冬饮片或麦冬饮片切片。根据本发明的一 种实施方式，所述麦冬采用麦冬饮片切片形式，从而有利于后续步骤中的粉碎和活性成分 的溶出。根据本发明另一种实施方式，所述麦冬直接采用麦冬饮片形式。由于经过冷冻后 的麦冬黏性很小，麦冬饮片也易于被粉碎，因此直接采用麦冬饮片更易于操作。本发明中， 可通过将麦冬置于冷冻设备中进行冷冻。本发明中，通过步骤（1)的冷冻操作，使麦冬黏性 变小，脆性增强，从而有利于后续的粉碎操作。
[0033] 〈超微粉碎步骤〉
[0034] 本发明的步骤（2)为将冷冻后的麦冬进行超微粉碎。本发明中，步骤（2)的超微 粉碎操作可以在超微粉碎机中进行，也可以在超微振荡磨中进行，只要能够实现麦冬的超 微粉碎即可。
[0035] 本发明中，步骤（2)的超微粉碎操作可以是将麦冬直接置于粉碎机器内进行干法 粉碎。干法粉碎的时间优选为2-8分钟，更优选为2-4分钟。
[0036] 根据本发明的另一种实施方式，步骤（2)也可以同时加入60vt%~85vt%的乙醇 溶液进行超微振荡粉碎，在粉碎的同时进行预提取，即采用湿法粉碎。优选地，所述乙醇溶 液的浓度为65vt%~80vt%，更优选为65vt%~75vt%。发明人发现，采用这样的乙醇浓 度，有利于溶出麦冬中的皂苷类成分，而作为杂质的多糖类成分溶出却很少。当加入所述乙 醇溶液粉碎时，所述乙醇溶液的用量可以为麦冬重量的〇. 5~2. 5倍，优选为0. 5~1. 5倍。 在本发明的一种优选的实施方式中，所述乙醇溶液的用量为麦冬重量的1倍量。采用这样 的用量，更有利于麦冬的粉碎，同时有利于麦冬中皂苷成分的提取。本发明中，所述乙醇溶 液的温度可以为常温，也可以为低于常温的温度。上述湿法超微粉碎的时间优选为3~10 分钟，优选为3~8分钟，更优选为3~6分钟。当步骤（2)中加入乙醇溶液进行粉碎和预 提取时，所得产物可以经过固液分离将提取液分离出来；所得产物也可以不经分离，直接再 加入乙醇溶液进行步骤（3)的提取操作。
[0037] 在本发明中，步骤（2)粉碎后的麦冬的粒径范围为5-20微米，优选为5-10微米。 上述粒径可采用Mastersizer 3000激光衍射粒度分析仪进行测试。
[0038] 〈提取步骤〉
[0039] 本发明的步骤（3)为将粉碎后的麦冬加入60vt %~85vt %的乙醇溶液提取，得 到麦冬提取液。本发明中，步骤（3)的乙醇溶液的浓度优选为65vt%~80vt%，更优选为 65vt%~75vt%。发明人发现，采用这样的乙醇浓度有利于麦冬中的阜苷类成分的充分溶 出，而多糖类成分溶出很少，从而使麦冬总皂苷的提取效率提高，同时纯度较高。
[0040] 本发明中，步骤（3)的乙醇溶液的用量为麦冬重量的2~5倍量，优选为3~5倍 量。本发明中，步骤（3)的提取次数为1~3次，优选为1~2次，更优选为1次。由于经 过步骤（2)的超微粉碎操作，麦冬的粒径被粉碎至低于