阿比朵尔在抗丝状病毒感染中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明是关于阿比朵尔在抗丝状病毒感染方面的应用，属于医药技术领域。本发 明包含阿比朵尔在抗丝状病毒预防或治疗中的单独或联合应用。
【背景技术】
[0002] 丝状病毒科（Filoviridae)又称纤丝病毒，该科病毒只有一个属，即丝状病毒 属（Filovirus)。丝状病毒是外形如丝状的包膜病毒，其基因组为单链负链RNA，该属是 包括两种病毒，即埃博拉病毒（Ebola virus, E1B0V)和马尔堡病毒（Marburg virus, MBV), 这两种病毒均为管制病毒，需要在生物安全4级（P-4)实验室操作完成[Centers for Disease Control and Prevention/National Institutes of Health. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories.4th ed. Washington, DC:U. S. Department of Health and Human Services, U. S. Government Printing Office ；1999. DHHS Publication CDC 93-8395·]。埃博拉出血热（Ebola hemorrhagic fever，EHF)由埃 博拉病毒引起，是严重危害公共安全和人类健康的重大烈性传染病，致死率高达50 % -90 % [Sanchez,A. ；Geisbert, Tff. ；Feldmann, H. Filoviridae:Marburg and Ebola viruses. In :Knipe, DM. ；Howley, PM. , editors. Fields virology.Philadelphia:Lippincott Williams&Wilkins ;2006. 1409-1448.]。马尔堡病毒也会引起出血热，死亡率达到 50-80% [Nonfatal cases were underreported due to an uncooperative community ； thus, the mortality value seems overestimated(WHO update, August 24,2005]〇 丝 状病毒是单链负链RNA病毒，有囊膜，表面有包膜糖蛋白GP，是唯一负责病毒进入宿主的 病毒蛋白，中心为螺旋状核衣壳，包括基因组RNA及其他6种病毒蛋白[Feldmann，H.; Geisbert, Tff. ；Jahr 1 ing, PB. , et al. Filoviridae. In:Fauquet, C. ；Mayo, MA.； Maniloff, J. ；Desselberger, U. ；Ball,LA., editors. Virus taxonomy:VIIIth report of the international committee ontaxonomy of viruses. 2004. 645-653. ] 〇 丝状病毒基因 进化树如图 5 所不[Sanchez A, Trappier SG,Mahy BW,et al. The virion glycoproteins of Ebola viruses are encoded in two reading frames and are expressed through transcriptional editing. Proc Natl Acad Sci USA 1996;93:3602-3607],其 中埃博拉病毒的基因目前已确定5个亚型，分别为扎伊尔型（Zaire-EBOV)、苏丹型 (Sudan-EBOV)、莱斯顿型（Reston-EBOV)、科特迪瓦型（Cote d'lvoire-EBOV)和本迪布焦 型（Bundibugyo-EBOV)，其中扎伊尔型恶性程度最强，死亡率90%以上。
[0003] 埃博拉出血热和马尔堡出血热是人畜共患病，人类和灵长类动物普遍易感，主要 爆发于非洲地区，美国、英国、瑞士和中东曾报道有输入病例。临床症状是突然高烧、头痛、 肌痛、恶心呕吐、腹泻等，最终病人死于多器官出血衰竭、组织坏死[streether LA. Ebola virus. Br J Biomed Sci. 1999. 56 (4) : 280-284. ] 〇
[0004] 目前尚无针对丝状病毒有效疫苗和治疗药物，主要是通过防范措施控制病毒扩 散，密切监控疫情，对有出血症状的可疑病人进行隔离观察。治疗方法主要是辅助性的，包 括平衡电解质、修复血小板以防止出血，由于埃博拉康复者的血清在治疗疾病中无显著作 用，常用的抗病毒方法，如干扰素、利巴韦林均无效[Heinz Feldmann，Thomas W Geisbert. Ebola haemorrhagic fever. Lancet. 2011. 377(9768) :849-862.]，目前尚无特效治疗方 法。
[0005] 在针对丝状病毒药物研发方面[Heinz Feldmann, Thomas W Geisbert. Ebola haemorrhagic fever. Lancet. 2011. 377(9768) :849-862. ] : (1)常规抗病毒治疗方法，如利 巴韦林和干扰素均无效；（2)血清疗法，应用恢复期病人的血清用于病人的被动免疫治疗， 结果没有定论；（3)反义RNA或干扰RNA疗法，在鼠类和非人灵长类中显示有疗效。但RNA 干扰疗法受限于明确EB0V亚型序列的前提，无法应对疫情爆发早期的快速诊断；（4)针对 EB0V凝血异常的症状，有报道来源于线虫的抗凝蛋白rNAPc2在治疗非人灵长类感染中有 33 %的疗效。
[0006] 现有数据表明病人的生存率与病毒量密切相关，当病毒量低于l〇45pfu/ml血液的 病人存活率大大提高[Geisbert TW, Hensley LE, Larsen T，et al. Pathogenesis of Ebola haemorrhagic fever incynomolgus macaques: evidence that dendritic cells are early and sustained targets of infection. Am J Pathol. 2003;163:2347 - 2370·]。因 此，尽量降低病毒的复制速度，让宿主的先天和后天免疫应答来克服感染是抗丝状病毒药 物研发的重要策略，阻断丝状病毒进入的抑制剂研发有重大意义。
[0007] 以宿主为靶点进行抗病毒药物筛选是当前病毒学研究领域的热点。病毒的进入 需要宿主蛋白的参与。针对丝状病毒进入宿主的过程，2005年和2011年分别发现细胞 内含体/溶酶体中的组织蛋白酶B(Cathepsin B)和NPC1蛋白（Niemann Pick C1)是宿 主应答丝状病毒侵入的关键因子。另外，2014年最新报道发现细胞膜表面的磷脂酰丝氨 酸受体AXL也是重要的EB0V进入相关的宿主因子[Kartik Chandran et al.Endosomal Proteolysis of theEbola Virus Glycoprotein IsNecessary for Infection. Science.2005. 308:1643-1645.]。
[0008] 阿比朵尔（结构式I)是1993年首先由Trofimov等合成并报道[Trofimov，F. A. et al. , Synthesis of a new antiviral agent, arbidole. Pharm. Chem. J. 1993. 27, 75 - 76.], 由前苏联Moscow-based Masterlek?药厂研发的抗流感药物。该药物在前苏联（现俄罗斯） 已应用超过20年，主要用于甲型和乙型流感病毒引起的呼吸道疾病[Boriskin，Y. S.，et al.,Arbidol:a broad-spectrum antiviral compound that blocksviral fusion. 2008. Cum Med. Chem. 15, 997 - 1005.]。在我国阿比朵尔也作为人用药和兽药用于流感的预防 和治疗[Berendsen，B. J.，et al. , Quantitative trace analysis of a broad range of antiviral drugs in poultry muscle using column-switch liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry. Anal. Bioanal. Chem. 2012. 402, 1611 - 1623. ]〇
[0009] 除抗流感病毒外，研究还发现阿比朵尔对多种RNA病毒感染都有阻断作用，如副 粘病毒科的呼吸道合胞病毒[Shi，L.，et al.，Antiviral activity of arbidol against influenza A virus, respiratory syncytial virus, rhinovirus, coxsackie virus and adenovirus in vitro and in vivo. Arch. Virol. 2007. 152, 1447 - 1455.]、小核糖 核酸病毒科的脊髓灰质炎病毒、鼻病毒和柯萨奇病毒[Brooks，M.J.，et al.，Antiviral activity of arbidol，a broad-spectrum drug for use against respiratory viruses, varies according to test conditions. J. Med. Virol. 2012. 84, 170 - 181.； Zhong, Q. , et al. , Antiviral activity of Arbido1 against Coxsackie virus B5in vitro and in vivo. Arch. Virol. 2009. 154, 601 - 607.]、本扬病毒科的汉坦病毒[Deng, H. Y. , et al. , Efficacy of arbidol on lethal hantaan virus infections in suckling mice and in vitro. Acta Pharmacol. Sin. 2009. 30, 1015 - 1024·]、披盖病毒科的基孔 肯亚病毒[Delogu, I.,et al. , In vitro antiviral activity of arb idol against Chikungunya virus and characteristics of a selected resistant mutant.2011. Antiviral Res. 90, 99 - 107.]、肝DNA病毒科的乙型肝炎病毒[Zhao, C. , et al· , Synthesis and in vitro anti-hepatitis B virus activities of some ethyl5-hydroxy-lH-indole-3-carboxylates. Bioorg. Med. Chem. 2006. 14, 2552 - 2558]、黄病毒科的丙型 月干炎病毒[Blaising, J. , et al. , Arbidol inhibits viral entry by interfering with clathrin-dependent trafficking. Antiviral Res. 2013. 100,215 - 219.]和 本 扬病毒科的克里米亚-刚果出血热病毒[Lisa Oestereich,et al., Evaluation of Antiviral Efficacy of Ribavirin, Arbidol, and T-705 (Favipiravir)in a Mouse Model for Crimean-Congo