一种银杏叶提取物及其制备方法
【专利摘要】本发明属于一种银杏叶提取物的制备方法，包括以下步骤：（1）银杏叶粉的制备：将银杏叶除去杂质后烘干，将烘干后的银杏叶粉碎，过筛；（2）超临界CO2萃取：将步骤（1）得到的银杏叶粉加入到CO2 超临界萃取器中，加入夹带剂无水乙醇，进行超临界萃取，萃取完成后，收集提取物，得到银杏叶粗提物溶液；（3）银杏叶粗提物预处理：将银杏叶粗提物溶液抽滤，浓缩，乙醇溶液稀释，3~5℃下冷却10?14小时，再次抽滤后制成上柱液；（4）大孔树脂纯化：上柱液过AB?8树脂柱，先用纯水洗脱，再用乙醇溶液洗脱解析树脂柱，收集洗脱液；（5）银杏叶提取物干燥成粉：洗脱液经旋蒸浓缩，真空干燥，得到银杏叶提取物粉末产品。
【专利说明】
一种银杏叶提取物及其制备方法
技术领域
[0001]本发明属于药物制备领域，具体涉及一种银杏叶提取物及其制备方法。
【背景技术】
[0002]心脑血管疾病是一种严重威胁人类，特别是50岁以上中老年人健康的常见病，全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人，居各种死因首位。而我国每年有300万人死于心脑血管疾病，占全部死亡的51%，就是说我们国家每100个死亡就有51个是由于心血管病。银杏叶提取物因具有引起血管扩张，加强对血管的调节作用、增加脑血流量、改善脑的营养、改善缺氧时脑能量代谢、抑制血小板活化因子(PAF)，促进血液循环及脑代谢等功能，在心脑血管用药中处于比较重要的地位。
[0003]中国是世界上银杏的原产地之一，是世界上银杏生产强国，拥有一定的资源优势，并有传统的中药加工经验，在银杏的综合开发利用上，完全有条件在国际竞争中争得一席之地，据资料数据显示，全国银杏叶提取物年产量约90t，国内每年用于制药消耗20t，其余70t全部出口到国外，因此，开发银杏叶提取物有着广阔的前景。
[0004]目前，关于从银杏叶中提取银杏叶黄酮的研究较多，较传统的有水提法、有机溶剂提取法，但是现有的提取工艺大多存在使用溶剂量、料液浓缩量大，目前广泛应用于银杏叶提取的溶剂比例在10倍以上，严重制约了银杏叶提取的发展。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种溶剂使用量小、工艺简单的银杏叶提取物及其制备方法。
[0006]为实现上述目的，本发明采用的技术方案是，一种银杏叶提取物的制备方法，包括以下步骤:
(1)银杏叶粉的制备:将银杏叶除去杂质后烘干，将烘干后的银杏叶粉碎，过20-50目筛，得到银杏叶粉；
(2)超临界CO2萃取:将步骤(I)得到的银杏叶粉加入到C02超临界萃取器中，加入夹带剂无水乙醇，萃取压力10-30MPa、萃取温度30-50°C下进行超临界萃取，萃取时间为l_3h，
0)2流量20-22 L/h，萃取完成后，收集提取物，得到银杏叶粗提物溶液；
(3)银杏叶粗提物预处理:将银杏叶粗提物溶液抽滤，浓缩至稠膏状(浓缩至无醇味，近干)，15?20vol%乙醇溶液稀释，3?5°C下冷却10-14小时，再次抽滤后制成上柱液；
(4)大孔树脂纯化:上柱液过AB-8树脂柱，先用纯水洗脱，再用20-80vol%的乙醇溶液洗脱解析树脂柱，收集洗脱液；
(5)银杏叶提取物干燥成粉:洗脱液经旋蒸浓缩，真空干燥，得到银杏叶提取物粉末产品O
[0007]所述步骤(2)加入的无水乙醇的体积与银杏叶粉的质量比为5 ml: Ig _25ml:lg。
[0008]所述步骤(3)中15?20vol%乙醇溶液与浓缩至稠膏状的银杏叶粗提物体积比为10-15:lo
[0009]所述步骤(5)中真空干燥的温度为50_60°C。
[0010]本发明中的银杏叶提取物可以制成胶囊、片剂等常见剂型使用。
[0011]本发明产生的有益效果是:本发明中的超临界CO2萃取综合了溶剂萃取和蒸馏的两种功能和特点，能在接近常温下操作，对热敏物质可适用;粘度小，扩散系数大，提取速度较快，溶质和溶剂的的分离彻底。同时本发明在超临界流体萃取中加入夹带剂乙醇，可以大大提高银杏叶中有效成分的萃取收率，同时可以避免直接萃取银杏叶萃取器体积过大的弊端，大大减少了溶剂的使用量，减小料液浓缩量，简化工艺流程，降低了生产成本。本发明中制备的银杏叶提取物粉末的银杏内酯和黄酮醇苷的含量高，并且通过步骤(3)中3~5°C下冷却I O-14小时，可起到去除部分银杏叶酸的作用，因此本发明的银杏叶提取物毒副作用小，适合于心脑血管疾病需要长期治疗的特点。
【具体实施方式】
[0012]下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围不限于此。
[0013]实施例1
一种银杏叶提取物的制备方法，包括以下步骤:
(1)银杏叶粉的制备:将银杏叶除去杂质后在600C下烘干，将烘干后的银杏叶粉碎，过30目筛，得到银杏叶粉；
(2)超临界CO2萃取:取10g过筛后的银杏叶粉加入到CO2超临界萃取器中，加入无水1500ml乙醇，萃取压力20MPa、萃取温度35°C下进行超临界萃取，萃取时间为1.5h，C02流量为21 L/h，萃取完成后，收集提取物，得到银杏叶粗提物溶液；
(3)银杏叶粗提物预处理:将银杏叶粗提物溶液抽滤，浓缩至稠膏状(浓缩至无醇味，近干)，20vol%乙醇溶液稀释(20vol%乙醇溶液与浓缩至稠膏状的银杏叶粗提物体积比为10:1)，4°C下冷却12小时，再次抽滤后制成上柱液；
(4)大孔树脂纯化:上柱液过AB-8树脂柱，先用纯水洗脱3次，再用70vol%的乙醇溶液洗脱解析树脂柱，收集洗脱液；
(5)银杏叶提取物干燥成粉:洗脱液经旋蒸浓缩、55°C真空干燥，得到总黄酮含量35.9%、总内酯含量21.2%的银杏叶提取物粉末产品。
[0014]实施例2
一种银杏叶提取物的制备方法，包括以下步骤:
(1)银杏叶粉的制备:将银杏叶除去杂质后在600C下烘干，将烘干后的银杏叶粉碎，过20目筛，得到银杏叶粉；
(2)超临界CO2萃取:取SOg过筛后的银杏叶粉加入到CO2超临界萃取器中，加入无水2000ml乙醇，萃取压力30MPa、萃取温度50 °C下进行超临界萃取，萃取时间为Ih，⑶2流量为20 L/h，萃取完成后，收集提取物，得到银杏叶粗提物溶液；
(3)银杏叶粗提物预处理:将银杏叶粗提物溶液抽滤，浓缩至稠膏状(浓缩至无醇味，近干)，15vol%乙醇溶液稀释(15vol%乙醇溶液与浓缩至稠膏状的银杏叶粗提物体积比为15:1)，3°C下冷却10小时，再次抽滤后制成上柱液；
(4)大孔树脂纯化:上柱液过AB-8树脂柱，先用纯水洗脱3次，再用80vol%的乙醇溶液洗脱解析树脂柱，收集洗脱液；
(5)银杏叶提取物干燥成粉:洗脱液经旋蒸浓缩、50°C真空干燥，得到总黄酮含量36.9%、总内酯含量22.3%的银杏叶提取物粉末产品。
[0015]实施例3
一种银杏叶提取物的制备方法，包括以下步骤:
(1)银杏叶粉的制备:将银杏叶除去杂质后在600C下烘干，将烘干后的银杏叶粉碎，过50目筛，得到银杏叶粉；
(2)超临界CO2萃取:取120g过筛后的银杏叶粉加入到CO2超临界萃取器中，加入无水600ml乙醇，萃取压力1MPa、萃取温度30 °C下进行超临界萃取，萃取时间为3h，CO2流量为22L/h，萃取完成后，收集提取物，得到银杏叶粗提物溶液；
(3)银杏叶粗提物预处理:将银杏叶粗提物溶液抽滤，浓缩至稠膏状(浓缩至无醇味，近干)，18vol%乙醇溶液稀释(18vol%乙醇溶液与浓缩至稠膏状的银杏叶粗提物体积比为12:1)，5°C下冷却14小时，再次抽滤后制成上柱液；
(4)大孔树脂纯化:上柱液过AB-8树脂柱，先用纯水洗脱3次，再用20vol%的乙醇溶液洗脱解析树脂柱，收集洗脱液；
(5)银杏叶提取物干燥成粉:洗脱液经旋蒸浓缩、60°C真空干燥，得到总黄酮含量35.3%、总内酯含量20.5%的银杏叶提取物粉末产品。
[0016]动物长期毒性试验
将本发明的实施例1中的银杏叶提取物粉末产品喂食大鼠，三个实验组分别用140mg/kg(高剂量)、65mg/kg(中剂量)和30mg/kg(低剂量)三个剂量喂食大鼠，与空白对照组(不喂食药物)进行观察比较60天，得到如下结果:体重、血常规、肝功能、肾功能等指标中，三个实验组和空白对照组均无显著差异，三个实施验组中均未发现明显的病理形态学损害。可知本发明的银杏叶提取物毒副作用小，适合于心脑血管疾病需要长期治疗的特点。
【主权项】
1.一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)银杏叶粉的制备:将银杏叶除去杂质后烘干，将烘干后的银杏叶粉碎，过20-50目筛，得到银杏叶粉； (2)超临界CO2萃取:将步骤(I)得到的银杏叶粉加入到CO2超临界萃取器中，加入夹带剂无水乙醇，萃取压力10-30MPa、萃取温度30-50°C下进行超临界萃取，萃取时间为l_3h，萃取完成后，收集提取物，得到银杏叶粗提物溶液； (3)银杏叶粗提物预处理:将银杏叶粗提物溶液抽滤，浓缩，15?20vol%乙醇溶液稀释，3?5 °C下冷却10-14小时，再次抽滤后制成上柱液； (4)大孔树脂纯化:上柱液过AB-8树脂柱，先用纯水洗脱，再用20-80vol%的乙醇溶液洗脱解析树脂柱，收集洗脱液； (5)银杏叶提取物干燥成粉:洗脱液经旋蒸浓缩，真空干燥，得到银杏叶提取物粉末产品O2.如权利要求1所述银杏叶提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)加入的无水乙醇的体积与银杏叶粉的质量比为5 ml: Ig -25ml:lg。3.如权利要求1所述银杏叶提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中真空干燥的温度为50-60 °C。4.如权利要求1一3任一制备方法所制备的银杏叶提取物。
【文档编号】A61P9/00GK106038619SQ201610400134
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月8日
【发明人】汤广斌, 李桂娟, 赵当歌
【申请人】河南骏化发展股份有限公司