本发明涉及食用菌栽培技术领域，尤其是涉及一种金针菇液体培养基的制备方法。
背景技术：
金针菇学名毛柄金钱菌，又称毛柄小火菇、朴菇、冬菇、智力菇、毛柄金钱菇、金菇等，在植物分类学上，属真菌门，担子菌纲，伞菌目，口蘑科，金钱菌属。金针菇在自然界中分布广泛，中国、日本、俄罗斯、欧洲、北美洲、澳大利亚等地均有栽培。金针菇不含叶绿素，不具有光合作用，不能制造碳水化合物，完全可在黑暗环境中生长，必须从培养基中吸收现成的有机物质，如碳水化合物、蛋白质和脂肪等的降解物才能生长，为腐生营养型，是一种异养生物川。金针菇是一种木材腐生菌，易生长在柳、榆、白杨树等阔叶树的枯树干及树桩上，其在生长时先是由孢子萌发生成菌丝，菌丝通常呈白色绒毛状，有横隔和分枝，很多菌丝聚集在一起形成菌丝体，菌丝生长到一定阶段便会形成子实体，子实体的主要功能是产生抱子，用于繁殖后代。金针菇是秋冬与早春栽培的食用菌，以其菌盖滑嫩、柄脆、营养丰富、味美适口而著称于世。液体深层发酵培养是采用生物发酵培养设备，通过液体深层培养即发酵的方式生产食用菌菌球，作为食用菌栽培的种子或作为有效成分提取分离及深加工的原料。食用菌液体发酵可以获得大量的菌丝体，其营养和活性成分含量比固体发酵获得的子实体中更高`屯，且在液体发酵过程中分泌的胞外产物也有很多的活性成分，因此液体培养具有固体培养不可比拟的优势：生产周期短、营养利用率高、产品种性稳定和产物污染小等。近年来，随着液体发酵技术的日臻成熟，大量的食用菌采用了液体发酵培养技术，以获得更多的菌丝体和胞外发酵产物，用于提取功能蛋白质、多糖、生物碱、氨基酸等生理活性物质。
现有技术如授权公告号为cn104072299b的中国发明专利，公开了一种金针菇液体菌种培养基及其制备方法，采用的技术方案为：每250l培养基含有玉米面45kg，大豆淀粉2.5-3kg，食用油200ml，余量为水；制备按照如下步骤进行：（1）将以上配方原料溶于水进行混合并倒入生物发酵罐中，在容器中加水至250l；（2）保持温度122℃-126℃，压力2kg/cm2下灭菌60分钟；（3）将培养基料冷却至27℃以下，接入金针菇菌种，调节培养温度23℃-25℃，通入净化空气进行有氧培养，发酵培养70-100h即可制得优质金针菇液体菌种。该培养基工艺简便，但是该培养基培养金针菇的周期较长，成本较高。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种制备方法简单可行，原料成本低，营养丰富全面，利于菌种吸收利用，含氮量充足，碳氮配比合理，增强菌种的萌发能力，使菌种生长速度快，缩短菌种生长周期的金针菇液体培养基的制备方法。
本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：一种金针菇液体培养基的制备方法，包括马铃薯汁液制备、豆粕酶解液制备、味精废液浓缩液准备、混配，具体步骤为：
马铃薯汁液制备：将马铃薯去皮，切碎，再加入马铃薯重量0.01-0.03%的活性多肽，以料液比为1:4-5加水煮沸30-40min，纱布过滤得马铃薯汁液，备用，上述活性多肽的氨基酸序列hshcfccgaakcylcrvlhpgklncsk，该活性多肽能够破坏马铃薯细胞的细胞膜物质，使细胞膜产生孔洞，改变细胞膜的渗透压，使细胞内成分物质能够快速完全释放出来，提高马铃薯汁的浸提速率和有效成分，增加培养基的营养成分；
豆粕酶解液制备：将豆粕与等质量的水混合，调节ph值至8-9，随后添加6000-7000u/g的碱性蛋白酶，在50-60℃下酶解2-3h，灭酶，过滤，浓缩至50-60%，即得豆粕酶解液，该步骤可将大豆蛋白分解成大豆肽，大豆肽具有吸收速率快、能耗低、可避免氨基酸之间的吸收竞争和载体不易饱和的特点，以大豆肽的形式补充氨基酸，可改善金针菇菌种对氮的吸收，为金针菇菌种提供充足的氨基酸和氮源，加快金针菇菌种的吸收利用，提高菌种的生长速率和品质；
味精废液浓缩液准备：将味精废液浓缩为固含为30-40%的浓缩液，即得味精废液浓缩液，备用，金针菇可利用浓缩液中的葡萄糖、谷氨酸、尿素、乙酸铵和硫酸铵等作为菌丝发酵生长的碳源或氮源物质，呈现正常的生长状态，金针菇对味精废水的处理效果较佳，cod去除率最高可达82%，利用味精废水培养金针菇是减少污染、提高资源利用率有效途径；
混配：将配方量取马铃薯汁液、豆粕酶解液、味精废水、琼脂、磷酸二氢钾、维生素b1、硫酸镁，混合均匀，调节ph至6-7，放入高压灭菌器中，在压力0.1-0.15mpa下灭菌55-65min，即得金针菇液体培养基，该培养基是废物再生利用，不污染环境，大幅度降低了排污费用，增加资源利用率，具有配制方便、成本低的特点，营养丰富，能为金针菇菌种提供充足的营养物质，为菌中提供了更适宜的生长环境，大大缩短了培养时间，适合产业化推广。
作为优选，培养基的成分及其重量份为：马铃薯汁液20-30份、豆粕酶解液15-22份、味精废水11-15份、琼脂0.2-0.3份、磷酸二氢钾0.02-0.04份、维生素b10.001-0.002份、硫酸镁0.01-0.02份。上述培养基含有丰富的膳食纤维、蛋白质、大豆肽和维生素，为金针菇菌种提供充足的营养物质，能够加快金针菇菌种的吸收利用，增强菌种的萌发能力，使菌种生长速度快，长势强，菌丝粗壮、密集。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明培养基的制备方法简单可行，是废物再生利用，不污染环境，大幅度降低了排污费用，增加资源利用率，具有配制方便、成本低的特点；2）本发明制备方法将大豆蛋白分解成大豆肽，以大豆肽的形式补充氨基酸，可改善金针菇菌种对氮的吸收，加快金针菇菌种的吸收利用，提高菌种的生长速率和品质；3）本发明培养基采用的配方合理，营养丰富，能够满足菌种繁殖营养需要，能够加快金针菇菌种的吸收利用，增强菌种的萌发能力，使菌种生长速度快，长势强，菌丝粗壮、密集，具有菌种生产周期短、菌种质量容易控制、接入栽培瓶或袋装培养基上发菌速度快、出菇整齐、产量高等优点。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
一种金针菇液体培养基的制备方法，包括马铃薯汁液制备、豆粕酶解液制备、味精废液浓缩液准备、混配，具体步骤为：
1）马铃薯汁液制备：将马铃薯去皮，切碎，再加入马铃薯重量0.01%的活性多肽，以料液比为1:4加水煮沸40min，经6层纱布过滤得马铃薯汁液，备用，上述活性多肽的氨基酸序列hshcfccgaakcylcrvlhpgklncsk，该活性多肽能够破坏马铃薯细胞的细胞膜物质，使细胞膜产生孔洞，改变细胞膜的渗透压，使细胞内成分物质能够快速完全释放出来，提高马铃薯汁的浸提速率和有效成分，增加培养基的营养成分；
2）豆粕酶解液制备：将豆粕与等质量的水混合，调节ph值至8，随后添加7000u/g的碱性蛋白酶，在60℃下酶解2h，在100℃下灭酶12min，用8层纱布过滤，然后高温浓缩至50%，即得豆粕酶解液，该步骤可将大豆蛋白分解成大豆肽，大豆肽具有吸收速率快、能耗低、可避免氨基酸之间的吸收竞争和载体不易饱和的特点，以大豆肽的形式补充氨基酸，可改善金针菇菌种对氮的吸收，为金针菇菌种提供充足的氨基酸和氮源，加快金针菇菌种的吸收利用，提高菌种的生长速率和品质；
3）味精废液浓缩液准备：将味精废液浓缩为固含为40%的浓缩液，即得味精废液浓缩液，备用，金针菇可利用浓缩液中的葡萄糖、谷氨酸、尿素、乙酸铵和硫酸铵等作为菌丝发酵生长的碳源或氮源物质，呈现正常的生长状态，金针菇对味精废水的处理效果较佳，cod去除率最高可达82%，利用味精废水培养金针菇是减少污染、提高资源利用率有效途径；
4）混配：将配方量取马铃薯汁液、豆粕酶解液、味精废水、琼脂、磷酸二氢钾、维生素b1、硫酸镁，混合均匀，调节ph至6，放入高压灭菌器中，在压力0.15mpa下灭菌55min，即得金针菇液体培养基，该培养基是废物再生利用，不污染环境，大幅度降低了排污费用，增加资源利用率，具有配制方便、成本低的特点，营养丰富，能为金针菇菌种提供充足的营养物质，为菌中提供了更适宜的生长环境，大大缩短了培养时间，适合产业化推广。
上述培养基的成分及其重量份为：马铃薯汁液22份、豆粕酶解液22份、味精废水11份、琼脂0.3份、磷酸二氢钾0.02份、维生素b10.002份、硫酸镁0.01份。上述培养基含有丰富的膳食纤维、蛋白质、大豆肽和维生素，为金针菇菌种提供充足的营养物质，能够加快金针菇菌种的吸收利用，增强菌种的萌发能力，使菌种生长速度快，长势强，菌丝粗壮、密集。
实施例2：
一种金针菇液体培养基的制备方法，具体步骤为：
1）将马铃薯去皮，切碎，再加入马铃薯重量0.02%的活性多肽，以料液比为1:4.5加水煮沸35min，纱布过滤得马铃薯汁液，备用，上述活性多肽的氨基酸序列hshcfccgaakcylcrvlhpgklncsk，该活性多肽能够破坏马铃薯细胞的细胞膜物质，使细胞膜产生孔洞，改变细胞膜的渗透压，使细胞内成分物质能够快速完全释放出来，提高马铃薯汁的浸提速率和有效成分，增加培养基的营养成分；
2）将豆粕与等质量的水混合，调节ph值至8.5，随后添加6500u/g的碱性蛋白酶，在55℃下酶解2.5h，灭酶，过滤，浓缩至55%，即得豆粕酶解液，该步骤可将大豆蛋白分解成大豆肽，大豆肽具有吸收速率快、能耗低、可避免氨基酸之间的吸收竞争和载体不易饱和的特点，以大豆肽的形式补充氨基酸，可改善金针菇菌种对氮的吸收，为金针菇菌种提供充足的氨基酸和氮源，加快金针菇菌种的吸收利用，提高菌种的生长速率和品质；
3）将味精废液浓缩为固含为35%的浓缩液，即得味精废液浓缩液，备用，金针菇可利用浓缩液中的葡萄糖、谷氨酸、尿素、乙酸铵和硫酸铵等作为菌丝发酵生长的碳源或氮源物质，呈现正常的生长状态，金针菇对味精废水的处理效果较佳，cod去除率最高可达82%，利用味精废水培养金针菇是减少污染、提高资源利用率有效途径；
4）按重量份取马铃薯汁液25份、豆粕酶解液18份、味精废水13份、琼脂0.25份、磷酸二氢钾0.03份、维生素b10.0015份、硫酸镁0.015份，混合均匀，调节ph至6.5，放入高压灭菌器中，在压力0.12mpa下灭菌60min，即得金针菇液体培养基，该培养基是废物再生利用，不污染环境，大幅度降低了排污费用，增加资源利用率，具有配制方便、成本低的特点，营养丰富，能为金针菇菌种提供充足的营养物质，为菌中提供了更适宜的生长环境，大大缩短了培养时间，适合产业化推广。
实施例3：
一种金针菇液体培养基的制备方法：将马铃薯去皮，切碎，再加入马铃薯重量0.03%的活性多肽，以料液比为1:4.3加水煮沸30min，过滤得马铃薯汁液；将豆粕与等质量的水混合，调节ph值至9，随后添加7000u/g的碱性蛋白酶，在28℃下酶解2h，灭酶，过滤，浓缩至60%，即得豆粕酶解液；将味精废液浓缩为固含为32%的浓缩液，即得味精废液浓缩液；按重量份取马铃薯汁液28份、豆粕酶解液17份、味精废水14份、琼脂0.22份、磷酸二氢钾0.035份、维生素b10.0018份、硫酸镁0.014份，混合均匀，调节ph至7，放入高压灭菌器中，在压力0.11mpa下灭菌62min，即得金针菇液体培养基。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
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