专利名称：核糖核酸抽提液及生产方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种核糖核酸的提取。
现有技术中核糖核酸(RNA)，其提取过程复杂，提取效果不理想。
本发明的目的在于提供一种可方便抽提核糖核酸，且抽提效果好的核糖核酸抽提液及生产方法和用途。
本发明的技术解决方案是一种核糖核酸抽提液，由下列组份组成酚 100重量份甲粉20～40重量份乙液20～40重量份水 160～250重量份其中甲粉是由Guanidine Thiocyanate粉剂55～85％重量份和Ammonium Thiocyanate粉剂15～45％重量份组成；乙液是由2～3M的Sodium Acetate5～30％重量份和20％～70％的甘油70～95％重量份组成。
酚是苯酚。酚Phenol浓度99+％，分子式C6H6O，分子量Fw94.11。
一种核糖核酸抽提液的生产方法，包括下列步骤①将酚100重量份于60～80℃水浴中溶化；②将Guanidine Thiocyanate粉剂55～85％重量份和AmmoniumThiocyanate粉剂15～45％重量份混合，制得甲粉；将甲粉20～40重量份加入溶化的酚中，搅拌均匀；③将2～3M的Sodium Acetate5～30％重量份和20％～70％的甘油70～95％重量份混合，制得乙液；将乙液20～40重量份加入经步骤②得到的液体中；
④在经步骤③得到的液体中，加入水160～250重量份。
酚是苯酚。酚Phenol浓度99+％，分子式C6H6O，分子量Fw94.11。
上述核糖核酸抽提液作为抽提核糖核酸的应用。
本发明可有效用于抽提核糖核酸，抽提效果好，生产方法简单、方便。
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1①将固体苯酚Phenol浓度99％(分子式C6H6O，分子量Fw94.11)100重量份于60～80℃(例60℃、70℃、80℃)水浴中溶化；②将Guanidine Thiocyanate粉剂57％重量份和AmmoniumThiocyanate粉剂43％重量份混合，制得甲粉；将甲粉40重量份加入溶化的酚中，搅拌均匀；③将2～3M(例2M、2.5M、3M)的Sodium Acetate7％重量份和20％～70％(例20％、30％、40％、50％、60％、70％)的甘油93％重量份混合，制得乙液；将乙液20重量份加入经步骤②得到的液体中；④在经步骤③得到的液体中，加入水160重量份，即得产品核糖核酸(RNA)抽提液。
上述抽提液(Riso液)由下列成份组成苯酚100重量份甲粉40重量份乙液20重量份水 160重量份其中甲粉是由Guanidine Thiocyanate粉剂57％重量份和Ammonium Thiocyanate粉剂43％重量份组成；乙液是由2～3M的Sodium Acetate7％重量份和20％～70％的甘油93％重量份组成。
实施例2①将苯酚Phenol浓度99.5％(分子式C6H6O，分子量Fw94.11)100重量份于60～80℃(例60℃、70℃、80℃)水浴中溶化；②将Guanidine Thiocyanate粉剂75％重量份和AmmoniumThiocyanate粉剂25％重量份混合，制得甲粉；将甲粉30重量份加入溶化的酚中，搅拌均匀；③将2～3M(例2M、2.5M、3M)的Sodium Acetate18％重量份和20％～70％(例20％、30％、40％、50％、60％、70％)的甘油82％重量份混合，制得乙液；将乙液30重量份加入经步骤②得到的液体中；④在经步骤③得到的液体中，加入水210重量份，即得产品核糖核酸(RNA)抽提液。
上述抽提液(Riso液)由下列成份组成苯酚100重量份甲粉30重量份乙液30重量份水 210重量份其中甲粉是由Guanidine Thiocyanate粉剂75％重量份和Ammonium Thiocyanate粉剂25％重量份组成；乙液是由2～3M的Sodium Acetate18％重量份和20％～70％的甘油82％重量份组成。
实施例3①将苯酚Phenol浓度99.9％(分子式C6H6O，分子量Fw94.11)100重量份于60～80℃(例60℃、70℃、80℃)水浴中溶化；②将Guanidine Thiocyanate粉剂83％重量份和AmmoniumThiocyanate粉剂17％重量份混合，制得甲粉；将甲粉20重量份加入溶化的酚中，搅拌均匀；③将2～3M(例2M、2.5M、3M)的Sodium Acetate29％重量份和20％～70％(例20％、30％、40％、50％、60％、70％)的甘油71％重量份混合，制得乙液；将乙液40重量份加入经步骤②得到的液体中；④在经步骤③得到的液体中，加入水250重量份，即得产品核糖核酸(RNA)抽提液。上述抽提液(Riso液)由下列成份组成苯酚100重量份甲粉20重量份乙液40重量份水 250重量份其中甲粉是由Guanidine Thiocyanate粉剂83％重量份和Ammonium Thiocyanate粉剂17％重量份组成；乙液是由2～3M的Sodium Acetate29％重量份和20％～70％的甘油71％重量份组成。
实施例4将上述实施例1、2、3中苯酚替换成α-萘酚或β-萘酚、间苯二酚、邻甲苯酚，其余均相同，即形成新的实施例。
本发明可用于抽提核糖核酸(RNA)，具体抽提时，可将经上述步骤制得的抽提液(Riso液)加入碾成粉状的组织中，加入量为组织量的3～20倍(例3、6、9、12、16、20倍)，再经匀浆、离心处理，取上清，并加入上清液1/5左右的氯彷，再离心处理，取上清，加入1/2左右体积的异丙醇，离心得沉淀物，即得RNA，可进一步用70％乙醇清洗，并悬浮于DEPC处理水中。
权利要求
1.一种核糖核酸抽提液，其特征在于由下列组份组成酚 100重量份甲粉20～40重量份乙液20～40重量份水 160～250重量份其中甲粉是由Guanidine Thiocyanate粉剂55～85％重量份和Ammonium Thiocyanate粉剂15～45％重量份组成；乙液是由2～3M的Sodium Acetate5～30％重量份和20％～70％的甘油70～95％重量份组成。
2.根据权利要求1所述的核糖核酸抽提液，其特征在于酚是苯酚。
3.一种核糖核酸抽提液的生产方法，其特征在于包括下列步骤①将酚100重量份于60～80℃水浴中溶化；②将Guanidine Thiocyanate粉剂55～85％重量份和AmmoniumThiocyanate粉剂15～45％重量份混合，制得甲粉；将甲粉20～40重量份加入溶化的酚中，搅拌均匀；③将2～3M的Sodium Acetate5～30％重量粉和20％～70％的甘油70～95％重量份混合，制得乙液；将乙液20～40重量份加入经步骤②得到的液体中；④在经步骤③得到的液体中，加入水160～250重量份。
4.根据权利要求3所述的核糖核酸抽提液的生产方法，其特征在于酚是苯酚。
5.一种权利要求1所述的核糖核酸抽提液作为抽提核糖核酸的应用。
全文摘要
本发明公开了一种核糖核酸抽提液及生产方法和用途,由酚、Guanidine Thiocyanate粉剂、Ammonium Thiocyanate粉剂、SodiumAcetate液、甘油、水组成。本发明可有效用于抽提核糖核酸,抽提效果好,生产方法简单、方便。
文档编号C07H1/00GK1380301SQ0111352
公开日2002年11月20日 申请日期2001年4月10日 优先权日2001年4月10日
发明者朱远源 申请人:朱远源