专利名称：咪唑衍生物及其作为多巴胺－β－羟化酶的周围选择性抑制剂的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及多巴胺-β-羟化酶的周围选择性抑制剂及它们的制备方法。
近几年中，对开发多巴胺-β-羟化酶(DβH)抑制剂的兴趣集中于这样的假设，即这种酶的抑制可显著临床改善患有心血管疾病如高血压或慢性心力衰竭的患者。使用DβH抑制剂的基本原理是基于它们能够抑制经多巴胺的酶促羟化实现的去甲肾上腺素的生物合成。神经体液系统，主要是交感神经系统的激活是充血性心力衰竭的主要临床表现(Parmley W.W.，Clinical Cardiology，18440-445，1995)。充血性心力衰竭患者血浆去甲肾上腺素浓度升高(Levine，T.B.等人，Am.J.Cardiol.，491659-1666，1982)，中枢交感流出增加(Leimbach，W.N.等人，Circulation，73913-919，1986)和心肾去甲肾上腺素溢出增加(Hasking，G.J.等人，Circulation，73615-621，1966)。心肌长时间过度地接触去甲肾上腺素可导致心脏β1-肾上腺素受体减量调节、左心室改变、心律失常和坏死，所有这些均可削弱心脏的功能完整性。血浆去甲肾上腺素浓度高的充血性心力衰竭患者还有最不利的长期预后(Cohn，J.N.等人，N.Engl.J.Med.，311819-823，1984)。在没有明显心力衰竭的无症状患者中已存在血浆去甲肾上腺素浓度升高这一发现具有更重要的意义，它可以预测继发的死亡和发病(Benedict，C.R.等人，Circulation，94690-697，1996)。这表明激活的交感内驱力不仅仅是充血性心力衰竭的临床标志，也可引起疾病的逐渐恶化。
用肾上腺素受体拮抗剂抑制交感神经功能似乎是一种有希望的方法，然而很大比例的患者不能忍受β-阻滞剂治疗所伴随的快速血液动力衰退(Pfeffer，M.A.等人，N.Engl.J.Med.，3341396-7，1996)。直接调节交感神经功能的另一方法是通过抑制交感神经中将多巴胺转化成去甲肾上腺素的酶DβH来减少去甲肾上腺素的生物合成。这种方法有几个优点，包括与交感神经系统的突然抑制相反，该方法为逐渐调节，并且引起多巴胺释放增加，这可改善肾功能，如肾血管舒张、利尿和尿钠增多。因此，DβH抑制剂可以提供优于常规β-阻断剂的显著优点。
因此几种DβH抑制剂已在文献中得到报道。发现早期的第一和第二代实例如戒酒硫(Goldstein，M.等人，Life Sci.，3763，1964)和二乙基二硫代氨基甲酸盐(Lippmann，W.等人，Biochem.Pharmacol.，182507，1969)或镰孢菌酸(Hidaka，H.Nature，231，1971)和芳香或烷基硫脲(Johnson，G.A.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.，17180，1970)效力低，对DβH选择性差，并且引起毒副作用。但是，发现第三代DβH抑制剂具有高得多的效力，例如nepicastat(RS-25560-197，IC509nM)(Stanley，W.C.等人，Br.J.Pharmacol.，1211803-1809，1997)，它被开发至早期临床试验。虽然没有了与第一和第二代DβH抑制剂有关的一些问题，但是一个重要的发现是，发现nepicastat穿透血脑屏障(BBB)，因此能够引起中枢及周围效应，这种情况可能引起不希望的并且可能严重的药物中枢神经系统副作用。因此，仍有对有效、无毒的周围选择性DβH抑制剂的未实现的临床需求，其可用于治疗某些心血管疾病。具有与nepicastat相似或者更强效力，但没有中枢神经系统效应(不能穿透BBB)的DβH抑制剂将提供优于现有技术中迄今描述的所有DβH抑制剂化合物的显著改进。
我们已经惊奇地发现，将某些杂原子引入nepicastat核心结构的碳环和/或延长nepicastat核心结构的氨基烷基侧链导致一系列化合物，它们对于DβH抑制具有非常显著的潜在有用性。这些化合物中有许多具有更好的效力和显著降低的脑进入，导致有效的周围选择性DβH抑制剂。因此，本发明涉及通式I的化合物，其单独的(R)和(S)-对映异构体或对映异构体的混合物，及其药学可接受的盐 其中R1、R2和R3相同或不同，且表示氢、卤素、烷基、烷基芳基、烷氧基、羟基、硝基、氨基、烷基羰基氨基、烷基氨基或二烷基氨基；R4表示氢、烷基或烷基芳基；X表示CH2、氧原子或硫原子；n为1、2或3，附带条件是当n为1时，X不为CH2。
除非另外声明，本说明书中术语烷基(不论是单独使用，还是与其它基团一起使用)意为烃链，其为直链或支链的，含有1-6个碳原子，任选被芳基、烷氧基、卤素、烷氧羰基或羟基羰基取代；术语芳基(不论是单独使用，还是与其它基团一起使用)意为苯基或萘基，其任选被烷氧基、卤素或硝基取代；而术语卤素意为氟、氯、溴或碘。
本发明的另一方面是式I的化合物的制备方法。其中X表示亚甲基(CH2)、氧或硫的式II的一些化合物在文献中是已知的(Martinez，G.R.等人，美国专利5,538,988，1996年7月23日；Eriksson，M.，PCT国际申请WO 9959988A1，1999年11月25日；Napoletano，M.，PCT国际申请WO 9608489A1，1996年3月21日；Sarda，N.等人，Tetrahedron Lett.，17271-272，1976；Neirabeyeh，M.Al等人，Eur.J.Med.Chem.，26497-504，1991)，而其它可通过本领域技术人员制备。式II的化合物是手性的，因此式II代表两个旋光纯的单独的(R)-和(S)-对映异构体或它们的混合物；式I的化合物如下制备在有机酸的存在下，使式II的化合物与式III的化合物及水溶性硫氰酸盐于惰性有机溶剂中反应，其中水溶性的硫氰酸盐是碱金属硫氰酸盐或四烷基铵硫氰酸盐， 其中X为CH2、氧或硫；R1、R2和R3相同或不同，且表示氢、卤素、烷基、烷基芳基、烷氧基、羟基、硝基、烷基羰基氨基、烷基氨基或二烷基氨基， 其中n表示1、2或3；当n为1或2时，R4表示氢、烷基或烷基芳基；R5表示羟基保护基，而R6表示氨基保护基；当n为3时，R5同以上定义，但R4和R6一起代表苯二甲酰亚氨基。
合适的碱金属硫氰酸盐包括钠、锂和铯硫氰酸盐，但是优选硫氰酸钾。
其中n为1的式III的化合物是已知的(Wolf，E.等人，Can.J.Chem.，75942-948，1997)，而其中n为2或3的式III的化合物是本领域技术人员能够制备的新化合物(参见实施例)。优选的羟基保护基(R5)包括有机甲硅烷基化合物如三烷基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基、苯基二烷基甲硅烷基或烷基二苯基甲硅烷基。特别优选叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)。优选的氨基保护基(R6)包括氨基甲酸酯，如烷基氨基甲酸酯，特别是叔丁基氨基甲酸酯(Boc)基团和烷基芳基氨基甲酸酯。可以用稍微过量的式III的化合物与硫氰酸钾(优选1.1-1.3当量)进行反应。
本发明还提供式II的化合物，其中R1、R2和R3中至少一个为氟。
反应可以在基本上惰性的溶剂(优选乙酸乙酯)中和在不同温度(优选溶剂回流温度)下进行。优选的有机酸包括醋酸。当使用其中n表示1的式III的化合物时，接着在合适的溶剂中用无机酸处理式IV的中间体以除去Boc氨基保护基，并提供式I的化合物(路线1)。优选的无机酸包括盐酸，而优选的溶剂包括乙酸乙酯。
当使用其中n表示2而R4表示氢的式III的化合物时，使式V和VI的中间体产物的混合物与盐酸在乙酸乙酯中反应，以获得相应的式I的单一化合物(路线2)；当R4表示烷基(包括被芳基取代的烷基)时，使式V的单一中间体产物与盐酸在乙酸乙酯中反应，以获得式I的化合物。
当使用其中n为3的式III的化合物时，接着用硼氢化钠在合适的溶剂系统中处理式VII的中间体，接着如文献(Osby等人，Tetrahedron Lett.，1984，25(20)，2093-2096)中描述加入醋酸除去苯二甲酰亚氨氨基保护基，获得式I的化合物(路线3)。获得的式I的化合物纯度很高，但是如果优选的话，它可从合适的溶剂中重结晶。
路线1
路线2 路线3 为制备式I的化合物的药物组合物，将惰性药学可接受的载体和活性化合物混合。药学可接受的载体可以是固体或液体。固体形式制剂包括散剂、片剂、可分散颗粒剂和胶囊剂。固体载体可以是一种或多种物质，其也可用作稀释剂、调味剂、增溶剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂或片剂崩解剂；其也可以是包封材料。
优选地，该药物制剂是单位剂型，如包装的制剂，该包装含有分离量的制剂，如包装的片剂、胶囊剂和小瓶或安瓿中的散剂。
剂量可根据患者的需要、疾病的严重性和采用的特定化合物而变化。为了方便起见，每天的总剂量可在一整天中分成几次给药。预期每天一次或两次给药最合适。医学领域技术人员能够根据具体情况决定合适的剂量。
材料和方法体外研究如以前所描述(Kojima，K.，Parvez，S.和Nagatsu T.1993.Analysisof enzymes in catecholamine biosynthesis.In Methods inNeurotransmitter and Neuropeptide Research，pp.349-380ElsieverScience Publishers)，通过将多巴胺β-羟化成去甲肾上腺素的能力评价DβH活性。使用SK-N-SH细胞(ATCC HTB-11)，人神经母细胞瘤衍生的细胞系作为人DβH源。于24孔板中培养的SK-N-SH细胞在含有200mM醋酸钠、30mM N-乙基马来酰亚胺、5μM硫酸铜、0.5mg/mL过氧化氢酶水溶液、1mM优降宁、10mM延胡索酸钠和20mM抗坏血酸的反应介质中预培养20分钟。此后，在多巴胺浓度增加(0.5-100mM)的反应介质中进一步将细胞培养45分钟。在预培养和培养期间，持续振荡细胞并将温度维持在37℃。通过加入0.2M过氯酸终止反应。酸化的样品在注入高压液相色谱中进行去甲肾上腺素测定前贮存在4℃。在研究新DβH抑制剂对酶活性的影响的实验中，将目标测试化合物(0.3-10000nM)加入到预培养和培养溶液中；在一定浓度(50mM)多巴胺存在下进行培养，该浓度是饱和实验中测定的相应Km值的2.5倍。
体内研究雄性NMRI小鼠或Wistar鼠得自Harlan-Interfauna(西班牙)，它们分别以10和5只/笼的密度，在控制环境条件(12h光照/黑暗周期，室温22±1℃)下饲养。允许随意获取食物和自来水，并且实验在白天进行。
在时间＝0h时，通过管饲法口服给予动物给定剂量的测试化合物或赋形剂(水)。在给药后2、6、9、12、18和24小时后通过断头术处死动物，并分离心脏(左心房和左心室)和脑(额皮层和壁皮层)，称重并在0.2M过氯酸中于4℃黑暗下贮存12小时。培养后，通过将培养物离心过滤(0.2μM/10min/～5000rpm，4℃)收集所得上清液。将上清液冷冻贮存于-80℃直到进行分析。上清液中的多巴胺和去甲肾上腺素通过高压液相色谱用电化学检测进行定量。
结果体外研究在浓度增加的多巴胺存在下培养SK-N-SH细胞导致去甲肾上腺素的浓度依赖性形成，所得Km(μM)和Vmax(nmol mg蛋白-1h-1)值分别为20.6±1.6和153.8±4.4。由这些动力学参数，选择接近饱和的多巴胺浓度(50mM)用于抑制研究。如表1所示，发现化合物2、3、4、5、6、7、8、10、12、16、19、24、26、28和29显著抑制DβH活性。化合物2、3、4和nepicastat 1(参比物)产生多巴胺的β-羟化的浓度依赖性降低，其对人DβH活性的IC50值在低的nM范围内(见表2)。为了确证作为本发明的一部分，对分子进行结构修饰是观察到的生物学性质显著改善的原因，选择最接近nepicastat 1的化合物4进行进一步的体内研究。
表1.选定化合物(5μM)对SK-N-SH细胞中的DβH活性的影响。值以对照的百分比表示。
表2.SK-N-SH细胞中DβH抑制的IC50值(nM)
体内研究小鼠在心脏中100mg/kg的化合物4和nepicastat(1)随时间变化的实验表明两种化合物均为长效。4和1降低组织去甲肾上腺素的最大作用时间(Tmax)似乎是给药后9小时(
图1)。此后，去甲肾上腺素组织水平恢复，在24小时达到初始组织水平的50％。
在Tmax(给药后9小时)，4和1均以剂量依赖性方式降低左心室中的去甲肾上腺素水平。4和1均在100mg/kg的剂量下获得最大抑制作用。与心脏中的发现相反，4不影响脑壁皮层中的去甲肾上腺素组织水平，而1以剂量依赖性方式降低脑部此区域的去甲肾上腺素水平(图2)。
大鼠如在小鼠中所示，4和1对去甲肾上腺素的影响均依赖于给药剂量，并且在9小时达到其最大作用(数据没有显示)。然而，如图3所示，4(100mg/kg)对左心房和左心室中的去甲肾上腺素水平的抑制作用均比1(100mg/kg)的更显著。如在小鼠中所观察到的，4不影响脑壁皮层和脑额皮层中去甲肾上腺素组织水平，而1显著降低脑的这些区域的去甲肾上腺素水平。
可以得出结论，与nepicastat 1完全相反，4只在周围表现其对DβH的抑制作用，而在脑中没有抑制作用。
现在参考附图，其中图1显示用100mg/kg 4或nepicastat 1口服治疗的小鼠左心室中去甲肾上腺素水平的时间依赖性降低。符号为每组5次测定的平均值，垂直线表示S.E.M.。
图2是显示口服给予4或nepicastat 1后9小时，小鼠左心室和脑壁皮层中的去甲肾上腺素水平的两幅图。符号为每组5次测定的平均值，垂直线表示S.E.M.。
图3是显示口服给予4或nepicastat 1后9小时，大鼠心脏(左心房和左心室)和脑(额和壁皮层)中的去甲肾上腺素水平的四幅图。柱为每组5次测定的平均值，垂直线表示S.E.M.。
结论通式I的一些化合物为非常强力的多巴胺-β-羟化酶抑制剂，并且在治疗其中多巴胺酶促羟化成去甲肾上腺素的下降可能具有治疗益处的一些心血管疾病，如高血压和慢性心力衰竭中具有潜在有价值的药学性质。使用很少进入脑(CNS)的DβH抑制剂，如化合物4的可能性通过改善周围DβH抑制的潜能和选择性为治疗高血压和慢性心力衰竭开辟了新的前景。
本文公开的发明通过以下制备实施例进行例示，它们不应被解释为限制本文公开的内容的范围。本领域技术人员清楚其它途径和类似结构。
实施例实施例1(R)-5-氨基甲基-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐，化合物3，表1)将在乙酸乙酯(3mL)中的(R)-6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基胺盐酸盐(0.22g，1.0mmol)、[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-2-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(0.33g，1.1mmol)、硫氰酸钾(0.11g，1.1mmol)和醋酸(0.3mL，5.0mmol)的搅拌混合物回流2小时，冷却至室温，接着用碳酸氢钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，并真空蒸发。用硅胶柱色谱法纯化残余物，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液。将所得油状物(0.23g)溶解在乙酸乙酯(2mL)中，在其上加入于乙酸乙酯中的2MHCl溶液(2mL，4mmol)，将混合物在室温下搅拌2小时。通过过滤转移沉淀，用乙酸乙酯洗涤，获得熔点为192℃(分解)的晶体。
实施例2-3通过应用上述技术和本领域技术人员已知的相关方法，使用合适的苯并二氢吡喃-3-基胺盐酸盐制备以下化合物(R)-5-氨基甲基-1-苯并二氢吡喃-3-基-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物24，表1)(R)-5-氨基甲基-1-(6-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物22，表1)实施例4(R，S)-5-氨基甲基-1-(6-羟基二氢苯并噻喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐将在乙酸乙酯(3mL)中的6-羟基二氢苯并噻喃-3-基胺盐酸盐(0.22g，1.0mmol)、[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-2-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(0.33g，1.1mmol)、硫氰酸钾(0.11g，1.1mmol)和醋酸(0.3mL，5.0mmol)的搅拌混合物回流2小时，接着冷却至室温，用碳酸氢钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，并真空蒸发。用硅胶柱色谱法纯化残余物，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液。将所得油状物(0.25g)溶解在乙酸乙酯(2mL)中，在其上加入于乙酸乙酯中的2MHCl溶液(2mL，4mmol)，将混合物在室温下搅拌2小时。通过过滤转移沉淀，用乙酸乙酯洗涤，获得不熔解而分解的晶体。
实施例5(3，4-二羟基丁基)氨基甲酸叔丁酯在室温下，向4-氨基-1，2-丙二醇(2.1g，20mmol)在乙醇(50mL)中的搅拌溶液中一次加入二-叔丁基二碳酸酯(4.80g，22mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时，接着真空蒸发，并通过硅胶柱色谱法，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液进行纯化，获得无色油状物。
实施例6-7通过应用上述技术和本领域技术人员已知的相关方法，使用合适的N-取代的4-氨基-1，2-丙二醇制备以下化合物(3，4-二羟基丁基)甲基氨基甲酸叔丁酯(3，4-二羟基丁基)苄基氨基甲酸叔丁酯实施例8[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-羟基丁基]氨基甲酸叔丁酯在室温下，向(3，4-二羟基丁基)氨基甲酸叔丁酯(2.60g，12.7mmol)、三乙胺(2.03mL，14.50mmol)和4-(二甲基氨基)吡啶(0.05g，0.4mmol)在无水二氯甲烷(40mL)中的搅拌溶液中一次加入叔丁基二甲基氯硅烷(2.0g，13.17mmol)。将所得混合物在室温下搅拌18小时，用水、盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥。过滤并真空浓缩，获得油状物，通过硅胶柱色谱法，使用乙酸乙酯-石油醚作为洗脱液进行纯化，获得无色油状物。
实施例9-10通过应用上述技术和本领域技术人员已知的相关方法，使用实施例6和7的化合物制备以下化合物[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-羟基丁基]甲基氨基甲酸叔丁酯[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-羟基丁基]苄基氨基甲酸叔丁酯实施例11[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-氧代丁基]氨基甲酸叔丁酯在室温下，向Dess-Martin periodinane(5.0g，11.8mmol)在无水二氯甲烷(35mL)中的溶液中加入[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-羟基丁基]氨基甲酸叔丁酯(3.77g，11.8mmol)在无水二氯甲烷中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌1小时，真空蒸发到初始体积的1/3，并施加到硅胶填充柱上。用乙酸乙酯-石油醚溶剂混合物洗脱，获得无色油状物。
实施例12-13通过应用上述技术和本领域技术人员已知的相关方法，使用实施例9和10的化合物制备以下化合物[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-氧代丁基]甲基氨基甲酸叔丁酯[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-氧代丁基]苄基氨基甲酸叔丁酯实施例14(S)-5-(2-氨基乙基)-1-(5，7-二氟-1，2，3，4-四氢萘-2-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物2，表1)将在乙酸乙酯(2mL)中的(S)-5，7-二氟-1，2，3，4-四氢萘-2-基胺盐酸盐(0.17g，0.79mmol)、[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-氧代丁基]氨基甲酸叔丁酯(0.28g，0.87mmol)、硫氰酸钾(0.085g，0.85mmol)、水(0.014mL，0.80mmol)和醋酸(0.2mL，3.3mmol)的搅拌混合物回流7小时，冷却至室温，用碳酸氢钠溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥，真空蒸发。用硅胶柱色谱法纯化残余物，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液。将所得油状物(0.24g)溶解在乙酸乙酯(2mL)中，加入于乙酸乙酯中的2M HCl溶液(2mL，4mmol)，将混合物在室温下搅拌2小时。通过过滤转移沉淀，用乙酸乙酯洗涤，获得晶体，该晶体不熔解而分解。
实施例15通过应用上述技术和本领域技术人员已知的相关方法，使用合适的1，2，3，4-四氢萘-2-基胺盐酸盐制备以下化合物
(S)-5-(2-氨基乙基)-1-(1，2，3，4-四氢萘-2-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物20，表1)实施例16(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物4，表1)将在乙酸乙酯(30mL)中的(R)-6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基胺盐酸盐(1.68g，7.58mmol)、[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-氧代丁基]氨基甲酸叔丁酯(3.13g，9.85mmol)、硫氰酸钾(0.96g，9.85mmol)、水(0.18mL，10mmol)和醋酸(3.0mL，50mmol)的搅拌混合物回流7小时，冷却至室温，用碳酸氢钠溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥，真空蒸发。用硅胶柱色谱法纯化残余物，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液。将所得油状物(2.15g)溶解在乙酸乙酯(20mL)中，加入于乙酸乙酯中的2M HCl溶液(20mL，40mmol)，将混合物在室温下搅拌2小时。通过过滤转移沉淀，用乙酸乙酯洗涤，获得晶体，该晶体不熔解而分解。
实施例17-37通过应用上述技术和本领域技术人员已知的相关方法，使用合适的苯并二氢吡喃-3-基胺盐酸盐和[4-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-氧代丁基]氨基甲酸叔丁酯制备以下化合物(R)-5-(2-氨基乙基)-1-苯并二氢吡喃-3-基-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物12，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物16，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(8-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物21，表1)
(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-甲氧基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物23，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(8-甲氧基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物19，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物7，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(8-氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物6，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6，7-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物8，表1)(S)-5-(2-氨基乙基)-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物9，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6，7，8-三氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物10，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-氯-8-甲氧基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物11，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-甲氧基-8-氯苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物13，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-硝基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物18，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(8-硝基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物17，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-[6-(乙酰氨基)苯并二氢吡喃-3-基]-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物14，表1)(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-羟基-7-苄基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物15，表1)(R)-5-(2-苄氨基乙基)-1-(6-甲氧基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物25，表1)(R)-5-(2-苄氨基乙基)-1-(6-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物26，表1)(R)-1-(6-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-5-(2-甲氨基乙基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物27，表1)(R)-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-5-(2-甲氨基乙基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物28，表1)(R)-1-苯并二氢吡喃-3-基-5-(2-甲氨基乙基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物29，表1)实施例38(R，S)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-甲氧基二氢苯并噻喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物30，表1)将在乙酸乙酯(2mL)中的6-甲氧基二氢苯并噻喃-3-基胺盐酸盐(0.12g，0.50mmol)、[3-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-2-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(0.17g，0.55mmol)、硫氰酸钾(0.055g，0.55mmol)、水(0.009g，0.50mmol)和醋酸(0.2mL，3.3mmol)的搅拌混合物回流7小时，冷却至室温，用碳酸氢钠溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥，真空蒸发。用硅胶柱色谱法纯化残余物，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液。将所得油状物(0.12g)溶解在乙酸乙酯(1mL)中，加入于乙酸乙酯中的2M HCl溶液(1mL，2mmol)，将混合物在室温下搅拌2小时。通过过滤转移沉淀，用乙酸乙酯洗涤，获得晶体，该晶体不熔解而分解。
实施例39通过应用上述技术和本领域技术人员已知的相关方法，使用合适的苯并二氢吡喃-3-基胺盐酸盐制备以下化合物
(R，S)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-羟基二氢苯并噻喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物31，表1)实施例402-[3-(2，2-二甲基[1，3]二氧戊环-4-基)丙基]异吲哚-1，3-二酮向在乙腈(10mL)中的3-(2，2-二甲基-[1，3]二氧戊环-4-基)丙胺(1.05g，6.60mmol)和乙氧羰基邻苯二甲酰亚胺(1.45g，6.60mmol)的搅拌溶液中一次加入三乙胺(0.92mL，6.60mmol)，将所得混合物在室温下搅拌18小时，真空蒸发，并将残余物溶解在乙酸乙酯(50mL)中。用盐水、10％柠檬酸溶液和盐水洗涤溶液，接着用无水硫酸镁干燥。过滤并真空浓缩，获得油状物，通过硅胶柱色谱法，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液进行纯化，获得无色油状物。
实施例412-(4，5-二羟基戊基)异吲哚-1，3-二酮在室温下，向在四氢呋喃(20mL)中的2-[3-(2，2-二甲基[1，3]二氧戊环-4-基)丙基]异吲哚-1，3-二酮(1.65g，5.70mmol)的搅拌溶液中一次加入2N HCl溶液(15mL，30mmol)，将所得混合物在室温下搅拌2小时，接着真空蒸发到初始体积的一半。用氯化钠饱和残余物，并用乙酸乙酯萃取。用无水硫酸镁干燥有机相。过滤并真空浓缩，获得无色油状物。
实施例42应用实施例8中描述的技术，使用2-(4，5-二羟基戊基)异吲哚-1，3-二酮制备以下化合物2-[5-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-4-羟基戊基]异吲哚-1，3-二酮实施例43应用实施例11中描述的技术，使用2-[5-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-4-羟基戊基]异吲哚-1，3-二酮制备以下化合物2-[5-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-4-氧代戊基]异吲哚-1，3-二酮实施例44(S)-5-(3-氨基丙基)-1-(5，7-二氟-1，2，3，4-四氢萘-2-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐(化合物5，表1)将在乙酸乙酯(3mL)中的(S)-5，7-二氟-1，2，3，4-四氢萘-2-基胺盐酸盐(0.22g，1.0mmol)、2-[5-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-4-氧代戊基]异吲哚-1，3-二酮(0.38g，1.05mmol)、硫氢酸钾(0.11g，1.10mmol)、水(0.18g，1.0mmol)和醋酸(0.3mL，5.0mmol)的搅拌混合物回流7小时，冷却至室温，用碳酸氢钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，并真空蒸发。用硅胶柱色谱法纯化残余物，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液。将所得油状物(0.18g)溶解在异丙醇(5mL)和四氢呋喃(2mL)的混合物中。在室温下加入水(0.8mL)和硼氢化钠(0.066g，1.74mmol)，将混合物搅拌1.5小时。加入醋酸(0.6mL，10mmol)，将溶液回流2小时，接着真空蒸发至干。将残余物放入丙酮中，滤去固体，用于乙酸乙酯中的2N HCl溶液酸化滤液。收集沉淀，用丙酮洗涤，获得晶体，该晶体不熔解而分解。
实施例45(R)-5-(3-氨基丙基)-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐将在乙酸乙酯(1.5mL)中的(R)-6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基胺盐酸盐(0.11g，0.50mmol)、2-[5-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-4-氧代戊基]异吲哚-1，3-二酮(0.19g，0.55mmol)、硫氢酸钾(0.055g，0.55mmol)、水(0.009g，0.50mmol)和醋酸(0.15mL，2.5mmol)的搅拌混合物回流7小时，冷却至室温，用碳酸氢钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，并真空蒸发。用硅胶柱色谱法纯化残余物，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液。将所得油状物(0.10g)溶解在异丙醇(2.5mL)和四氢呋喃(1mL)的混合物中。在室温下加入水(0.4mL)和硼氢化钠(0.038g，1.0mmol)，将混合物搅拌1.5小时。加入醋酸(0.3mL，5mmol)，将溶液回流2小时，接着真空蒸发至干。将残余物放入丙酮中，滤去固体，用于乙酸乙酯中的2N HCl溶液酸化滤液。收集沉淀，用丙酮洗涤，获得晶体，该晶体不熔解而分解。
实施例46(R，S)-5-(3-氨基丙基)-1-(6-羟基二氢苯并噻喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐将在乙酸乙酯(3mL)中的6-羟基二氢苯并噻喃-3-基胺盐酸盐(0.22g，1.0mmol)、2-[5-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-4-氧代戊基]异吲哚-1，3-二酮(0.38g，1.05mmol)、硫氢酸钾(0.11g，1.10mmol)、水(0.18g，1.0mmol)和醋酸(0.3mL，5.0mmol)的搅拌溶液回流7小时，冷却至室温，用碳酸氢钠溶液洗涤，用无水硫酸镁干燥，并真空蒸发。用硅胶柱色谱法纯化残余物，使用乙酸乙酯-石油醚混合物作为洗脱液。将所得油状物(0.17g)溶解在异丙醇(5mL)和四氢呋喃(2mL)的混合物中，在室温下加入硼氢化钠(0.066g，1.74mmol)，将混合物搅拌1.5小时。加入醋酸(0.6mL，10mmol)，将溶液回流2小时，并真空蒸发至干。将残余物放入丙酮中，滤去固体，用于乙酸乙酯中的2NHCl溶液酸化滤液。收集沉淀，用丙酮洗涤，获得晶体，该晶体不熔解而分解。
权利要求
1.式I的化合物及其单独的(R)和(S)-对映异构体或对映异构体的混合物以及药学可接受的盐 其中R1、R2和R3相同或不同，且表示氢、卤素、烷基、烷氧基、羟基、硝基、氨基、烷基羰基氨基、烷基氨基或二烷基氨基；R4表示氢、烷基或烷基芳基；X表示CH2、氧原子或硫原子；n为1、2或3，附带条件是当n为1时，X不为CH2；其中术语烷基意为直链或支链烃链，其含有1-6个碳原子，任选被芳基、烷氧基、卤素、烷氧羰基或羟基羰基取代；术语芳基意为苯基或萘基，其任选被烷氧基、卤素或硝基取代；术语卤素意为氟、氯、溴或碘。
2.根据权利要求1的化合物，其包括(S)-5-(2-氨基乙基)-1-(1，2，3，4-四氢化萘-2-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(S)-5-(2-氨基乙基)-1-(5，7-二氟-1，2，3，4-四氢化萘-2-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-苯并二氢吡喃-3-基-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(8-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-甲氧基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(8-甲氧基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(8-氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6，7-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(S)-5-(2-氨基乙基)-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6，7，8-三氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-氯-8-甲氧基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-甲氧基-8-氯苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-硝基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(8-硝基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-[6-(乙酰氨基)并二氢吡喃-3-基]-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-氨基甲基-1-苯并二氢吡喃-3-基-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-氨基甲基-1-(6-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-羟基-7-苄基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-氨基甲基-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(3-氨基丙基)-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(S)-5-(3-氨基丙基)-1-(5，7-二氟-1，2，3，4-四氢化萘-2-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R，S)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-羟基二氢苯并噻喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R，S)-5-(2-氨基乙基)-1-(6-甲氧基二氢苯并噻喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-苄氨基乙基)-1-(6-甲氧基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-5-(2-苄氨基乙基)-1-(6-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-1-(6-羟基苯并二氢吡喃-3-基)-5-(2-甲氨基乙基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐；(R)-1-(6，8-二氟苯并二氢吡喃-3-基)-5-(2-甲氨基乙基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐或(R)-1-苯并二氢吡喃-3-基-5-(2-甲氨基乙基)-1，3-二氢咪唑-2-硫酮盐酸盐。
3.权利要求1的式I的化合物的单独的(R)-和(S)-对映异构体或对映异构体的混合物和药学可接受的盐的制备方法，其包括在有机酸的存在下，使式II的化合物的单独的(R)-或(S)-对映异构体或对映异构体的混合物与式III的化合物及水溶性硫氰酸盐于基本上惰性的溶剂中反应，接着进行中间产物IV-VII的脱保护， 其中X为CH2、氧或硫；R1、R2和R3相同或不同，且表示氢、卤素、烷基、烷氧基、羟基、硝基、烷基羰基氨基、烷基氨基或二烷基氨基； 其中n表示1、2或3；当n为1或2时，R4表示氢、烷基；R5表示羟基保护基，而R6表示氨基保护基；当n表示3时，R5同以上定义，但R4和R6一起代表苯二甲酰亚氨基； 其中该水溶性硫氰酸盐是碱金属硫氰酸盐或四烷基铵硫氰酸盐，并且其中术语烷基意为直链或支链烃链，其含有1-6个碳原子，任选被芳基、烷氧基、卤素、烷氧羰基或羟基羰基取代；术语芳基意为苯基或萘基，其任选被烷氧基、卤素或硝基取代；术语卤素意为氟、氯、溴或碘。
4.一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1或2的化合物和药学有效的载体。
5.根据权利要求1或2的化合物，其用作药物。
6.权利要求1或2的化合物在生产药物中的用途，所述药物用于治疗其中在多巴胺羟基化为去甲肾上腺素中的还原具有治疗益处的疾病。
7.权利要求1或2的化合物在生产药物中的用途，所述药物用于治疗患有心血管疾病的患者。
8.权利要求1或2的化合物在生产药物中的用途，所述药物用于治疗高血压或慢性心力衰竭。
9.权利要求1或2的化合物在生产药物中的用途，所述药物用于抑制多巴胺-β-羟化酶。
10.式III的化合物 其中n表示2，R4表示氢或烷基；R5表示羟基保护基，而R6表示氨基保护基，其中该羟基保护基为三烷基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基、苯基二烷基甲硅烷基或烷基二苯基甲硅烷基；而氨基保护基为氨基甲酸烷基酯或氨基甲酸烷基芳基酯，并且其中术语烷基意为直链或支链烃链，其含有1-6个碳原子，任选被芳基、烷氧基、卤素、烷氧羰基或羟基羰基取代；术语芳基意为苯基或萘基，其任选被烷氧基、卤素或硝基取代；术语卤素意为氟、氯、溴或碘。
11.式III的化合物 其中n表示3，R5表示羟基保护基；而R4和R6一起表示苯二甲酰亚氨基，其中该羟基保护基为三烷基甲硅烷基、三苯基甲硅烷基、苯基二烷基甲硅烷基或烷基二苯基甲硅烷基。
12.式II的化合物 其中R1、R2和R3相同或不同，且表示氟或氢，附带条件是R1、R2和R3至少之一表示氟，其中X与权利要求1中定义相同。
13.(R)-6，8-二氟-3，4-二氢-2H-1-苯并吡喃-3-胺。
全文摘要
本发明描述了式(I)的化合物以及它们的制备方法，其中X是CH
文档编号C07D233/84GK1726211SQ200380105942
公开日2006年1月25日 申请日期2003年10月10日 优先权日2002年10月11日
发明者戴维·亚历山大·利尔蒙斯, 帕特里西奥·曼努埃尔·维埃拉·阿劳若·苏亚雷斯达席尔瓦, 亚历山大·别里亚夫 申请人:坡特拉有限公司