专利名称：结合Aβ(1-42)球聚体的人源化抗体及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及可用于例如诊断、治疗和预防病症例如淀粉样变性(如阿尔茨海默 病)和有关病症的抗体。背景信息阿尔茨海默病(AD)是一种神经变性疾病，具有如下特点进行性丧失认知能力 和包含淀粉样蛋白沉积物的特有的神经病理学特征、神经纤维缠结以及在脑的某些区域 中神经元丢失(参见 Hardy 和 Selkoe (Science297, 353 (2002) ；Mattson Nature 431, 7004(2004)。淀粉样蛋白沉积物的主成分是淀粉样蛋白肽(Αβ)，具有42个氨基酸长 度类型(Α β 1-42)是最主要的。具体而言，淀粉样蛋白β (1-42)蛋白是一种具有42个氨基酸的多肽，其来源于淀 粉样蛋白前体蛋白(APP)的蛋白酶解加工。除人变体之外，其还包括存在于非人生物(具 体而言其他哺乳动物，特别是大鼠)中的淀粉样蛋白β (1-42)蛋白的同种型。该蛋白由于 在水相环境中倾向于聚合，因此可以非常不同的分子形式存在。已证明不溶蛋白的沉积与痴呆病症如阿尔茨海默病的发生或进展的简单相关是 不可信的(Terry 等，Ann. Neurol. 30. 572-580 (1991) ；Dickson 等，Neurobiol. Aging 16， 285-298(1995))。与此相反，突触和认知感觉的丧失似乎与A β (1_42)的可溶形式更相关 (Lue 等，Am. J. Pathol. 155，853-862 (1999) ；McLean 等，Ann. Neurol. 46，860-866 (1999))。尽管在过去已出现抗Αβ (1-42)的多克隆和单克隆抗体，但没有一种被证明产生 期望的疗效并且还没有在动物和/或人中引起严重的副作用。例如，由每周一次持续5个 月接受针对N-端的抗-Αβ (1-42)抗体的非常老的ΑΡΡ23小鼠的临床前研究引起的被动免 疫显示了治疗相关的副作用。具体而言，与盐水处理的小鼠相比，这些小鼠显示在微出血 (microhaemorrhages)量和严重程度上的增加(Pfeifer 等，Science 2002298:1379)。还 针对非常老(> 24个月)的Tg2576和PDAPP小鼠描述了相似的出血增加(Wilcock等，J Neuroscience 2003,23 3745-51 ；Racke 等，J Neuroscience 2005,25 629-636) 。 胃 种小鼠中，抗-Αβ (1-42)注射导致了明显增加的微出血。因此，对于开发预防或减缓疾病 进展而不诱导针对人体的消极效应和可能的致死效应的生物制剂而言，存在着巨大的、未 满足的治疗需求。鉴于一般人群渐增的寿命，并且随着寿命的增加，每年诊断有阿尔茨海默 病或相关病症的患者数量也连带增加，因此这样的需求格外明显。此外，这样的抗体可供在经历阿尔茨海默病症状的患者(目前仅可通过尸体解剖来确诊)中正确诊断阿尔茨海默病 之用。此外，这样的抗体可供阐明引起该使人虚弱的疾病的蛋白和其他生物因素的生物学 特性之用。 所有在本文中引用的专利和出版物以其全文在此并入作为参考。发明概述本发明涉及能结合存在于阿尔茨海默病患者脑中的可溶性寡聚体特别是 A β (1-42)球聚体的结合蛋白，尤其是抗体(如在本文中对于小鼠/鼠单克隆抗体称为术语 “8F5”以及对于人源化8F5称为“8F5hum8”的抗体)。为了本文的目的，这些结合蛋白以及 尤其是抗体将被称为“球聚体_表位特异性抗体”。这意味着这些抗体结合被认为是引起阿 尔茨海默病的球聚体或抗原的一个或更多个表位(如Αβ (1-42)肽的(1-42)氨基酸区)。 此外，本发明还提供了生产和使用这些结合蛋白或其部分的方法。本发明的一个方面涉及包含能结合Αβ (1-42)球聚体的抗原结合域的结合蛋白 (如抗体)。在一个实施方案中，该抗原结合域包含至少一个包含选自如下的氨基酸序列 CDR CDR-VH1. X1-X2-X3-X4-XjSEQ ID Ν0:5)，其中XjS;Χ2是Y;Χ3 是 G;Χ4 是 Μ;和Χ5 是 S，CDR-VH2. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17 (SEQ ID NO 6), 其中X1 是 S ；X2 是 I ；X3 是 N ；X4 是 S ；X5 是 N ；X6 是 G ；X7 是 G ；X8 是 S ；X9 是 Τ;X10 是 Y ；X11 是 Y ；X12 是 P ；X13 是 D ；X14 是 S ；X15 是 V ；X16 是 K ；和X17 是 G,
CDR-VH3. X「X2-X3_X4(SEQ ID NO :7)，其中X1 是 S ；X2 是 G ；X3 是 D ；和X4 是 Y，CDR-VL1. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16 (SEQ ID NO :8)，其 中X1 是 R ；X2 是 S ；X3 是 S ；X4 是 Q ；X5 是 S ；X6 ^ L ；X7 是 V ；X8 是 Y ；X9 是 S ；X10 是 N ；X11 是 G ；X12 是 D ；X13 是 T ；X14 是 Y ；X15 是 L ；和X16 是 H，CDR-VL2. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7 (SEQ ID Ν0:9)，其中X1 是 K ；X2 是 V ；X3 是 S ；X4 是 N ；X5 是 R ；X6 是 F;和X7 是 S，以及CDR-VL3. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9 (SEQ ID NO: 10)，其中X1 是 S ；X2 是 Q ；X3 是 S ；X4 是 T ；X5 是 H ；X6 是 V ；
X7 是 P ；父8是1;和X9 是 T， 优选地，该抗原结合域包含至少一个包含选自如下的氨基酸序列的⑶R =SEQ ID NO. :1 的残基 31-35 (艮口 SYGMS (SEQ ID NO 11) ；8F5VHCDR1) ； SEQ ID NO. 1 的残 基 50-66( BP SINSNGGSTYYPDSVKG(SEQID NO 12) ；8F5VH CDR2) ；SEQ ID NO. :1 的残 基 98-108 ( BP S⑶ Y(SEQID NO: 13) ； 8F5VH CDR3) ； SEQ ID NO. :2 的残基 24-39 (艮口 RSSQSLVYSNGDTYLH(SEQ ID NO 14) ；8F5VL CDR1) ；SEQ ID NO. :2 的残基 55-61 (艮口 KVSNRFS (SEQ ID N0:15) ；8F5VL CDR2)禾口 SEQ IDN0. :2 的残基 94-102 (即 SQSTHVPWT (SEQ ID N0 16) ；8F5VL⑶R3)。在一个优选的实施方案中，结合蛋白包含至少3个选自上述披露 的序列的⑶R。更优选地，该3个⑶R选自可变域⑶R组，所述可变域⑶R组选自
权利要求
1. 一种结合蛋白，包含a)结合淀粉样蛋白-β (1-42)球聚体的抗原结合域，所述抗原 结合域包含至少一个包含选自如下的氨基酸序列的CDR CDR-H1. X1-X2-X3-X4-X5 (SEQ ID Ν0:5)，其中X4 是 MjPX5 是 S，CDR-H2.)(1-X2-)(3-X4-)(5-X6-X7-X8-)(9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16-X17(SEQ ID NO :6),其中&是I X3是N X4是s&是6 X7是G X8是S )(9是丁 XlO 是 Y A1是Y X12 是 P X13 是 D Xl4 是 S A5是V X16^K X17 是 G，CDR-HS-X1-X2-X3-X4(SEQ ID Ν0:7)，其中 X1 是 S ； X2 是 G ； X3是D ；和 乂4 是 Y，CDR-L1. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9-X10-X11-X12-X13-X14-X15-X16(SEQ ID NO :8)，其中XjR X2是S X3是S X4是Q X5是SX7是 V;X9 是 S ； X10 是 N ； X11 是 G ； )(12 是 D ； 知是T ； ^14 是 Y ； X15是L ；和 Xl6 是 H，CDR-L2. X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7(SEQ ID N0:9)，其中 ；X5 是 R ； X6是F ；和 X7 是 R, 以及CDR-L3. A-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-X9 (SEQ ID NO: 10)，其中 ；X4 是 T ； X5 是 H ；X7 是 P ； 乂8是评;和 X9 是 T，以及2)包含至少一条选自如下的接纳体序列的人接纳体构架SEQID NO. :17,SEQ ID NO. 18、SEQ ID NO. 19、SEQ ID NO. 20, SEQ IDNO. :21、SEQ ID NO. 22, SEQ ID NO. :23 和 SEQ ID NO. :24ο
2.根据权利要求1的结合蛋白，其中所述至少一个CDR包含选自如下的氨基酸序列 SEQ ID NO. :11、SEQ ID NO. : 12、SEQ ID NO. : 13、SEQ ID NO. : 14、SEQ ID NO. :15 和SEQ ID NO. :16o
3.根据权利要求1的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少3个CDR。
4.根据权利要求3的结合蛋白，其中所述至少3个⑶R是选自由如下组成的可变域⑶R组
5.根据权利要求4的结合蛋白，两个可变域CDR组。
6.根据权利要求5的结合蛋白，其中所述两个可变域⑶R组是VH8F5⑶R组&VL8F5 CDR 组。
7.根据权利要求3的结合蛋白，进一步包含人接纳体构架。
8.根据权利要求4的结合蛋白，进一步包含人接纳体构架。
9.根据权利要求5的结合蛋白，进一步包含人接纳体构架。
10.根据权利要求6的结合蛋白，进一步包含人接纳体构架。
11.根据权利要求7的结合蛋白，其中所述人接纳体构架包含选自如下的氨基酸序列选SEQ ID NO. 17、SEQ ID NO. 18、SEQ ID NO. 19、SEQ IDN0. 20,SEQ ID NO. :21、SEQ ID NO. :22, SEQ ID NO. :23 和 SEQ IDNO. :24。
12.根据权利要求8的结合蛋白，其中所述人接纳体构架包含选自如下的氨基酸序列 SEQ ID NO. 17、SEQ ID NO. 18、SEQ ID NO. 19、SEQ IDN0. 20,SEQ ID NO. :21、SEQID NO. 22、SEQ ID NO. :23 和 SEQ IDN0. :24。
13.根据权利要求9的结合蛋白，其中所述人接纳体构架包含选自如下的氨基酸序列 SEQ ID NO. 17、SEQ ID NO. 18、SEQ ID NO. 19、SEQ IDN0. 20,SEQ ID NO. :21、SEQID NO. 22、SEQ ID NO. :23 和 SEQ IDN0. :24。
14.根据权利要求10的结合蛋白，其中所述人接纳体构架包含选自如下的氨基酸序列SEQ ID NO. 17、SEQ ID NO. 18、SEQ ID NO. 19、SEQ IDN0. 20,SEQ ID NO. :21、SEQ ID NO. 22、SEQ ID NO. :23 和 SEQ IDN0. :24。
15.根据权利要求1的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少一个具有选自SEQID NO. :1和SEQ ID NO. :2的氨基酸序列的可变域。
16.根据权利要求15的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含两个可变域，其中所述两个 可变域具有选自SEQ ID NO. :1和SEQ ID NO. :2的氨基酸序列。
17.根据权利要求7的结合蛋白，其中所述人接纳体构架在关键残基处包含至少一个 构架区氨基酸取代，所述关键残基选自邻接CDR的残基； 糖基化位点残基； 稀有残基；能与Αβ (1-42)球聚体相互作用的残基； 能与CDR相互作用的残基； 规范残基；在重链可变区和轻链可变区之间的接触残基； 游标区中的残基；和在Chothia-定义的可变重链⑶Rl与Kabat-定义的第一重链构架之间重叠区中的残基。
18.根据权利要求10的结合蛋白，其中所述人接纳体构架在关键残基处包含至少一个 构架区氨基酸取代，所述关键残基选自邻接CDR的残基； 糖基化位点残基； 稀有残基；能与Αβ (1-42)球聚体相互作用的残基； 能与CDR相互作用的残基； 规范残基；在重链可变区和轻链可变区之间的接触残基； 游标区中的残基；和在Chothia-定义的可变重链⑶Rl与Kabat-定义的第一重链构架之间重叠区中的残基。
19.根据权利要求16的结合蛋白，其中所述人接纳体构架在关键残基处包含至少一个 构架区氨基酸取代，所述关键残基选自邻接CDR的残基； 糖基化位点残基； 稀有残基；能与Αβ (1-42)球聚体相互作用的残基； 能与CDR相互作用的残基； 规范残基；在重链可变区和轻链可变区之间的接触残基； 游标区中的残基；和在Chothia-定义的可变重链⑶Rl与Kabat-定义的第一重链构架之间重叠区中的残基。
20.根据权利要求7的结合蛋白，其中所述人接纳体构架包含至少一个构架区氨基酸 取代，其中构架区的氨基酸序列至少65%同一于所述人接纳体构架的序列并包含至少52 个相同于所述人接纳体构架的氨基酸残基。
21.根据权利要求10的结合蛋白，其中所述人接纳体构架包含至少一个构架区氨基酸 取代，其中构架区的氨基酸序列至少65%同一于所述人接纳体构架的序列并包含至少52 个相同于所述人接纳体构架的氨基酸残基。
22.根据权利要求16的结合蛋白，其中所述人接纳体构架包含至少一个构架区氨基酸 取代，其中构架区的氨基酸序列至少65%同一于所述人接纳体构架的序列并包含至少52 个相同于所述人接纳体构架的氨基酸残基。
23.根据权利要求1的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少一个具有选自SEQID NO. :1和SEQ ID NO. :2的氨基酸序列的可变域，以及与原纤维形式相比所述结合蛋白优先 结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
24.根据权利要求23的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含两个可变域，其中所述两个 可变域具有氨基酸序列SEQ ID NO. :1和SEQ IDNO· :2。
25.根据权利要求20的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少一个具有选自SEQID NO. :1和SEQ ID NO. :2的氨基酸序列的可变域，以及与原纤维形式相比所述结合蛋白优先 结合A β (1-42)球聚体的可溶性形式。
26.根据权利要求21的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少一个具有选自选自SEQ ID NO. :1和SEQ ID NO. :2的氨基酸序列的可变域。
27.根据权利要求22的结合蛋白，其中所述结合蛋白包含至少一个具有选自选自SEQID NO. :1和SEQ ID NO. :2的氨基酸序列的可变域。
28.根据权利要求1的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
29.根据权利要求4的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
30.根据权利要求6的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
31.根据权利要求7的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
32.根据权利要求11的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合A β (1-42)球聚体的可溶性形式。
33.根据权利要求15的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
34.根据权利要求17的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
35.根据权利要求20的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
36.根据权利要求23的结合蛋白，其中结合蛋白结合Αβ(1-42)球聚体，以及与原纤维 形式相比所述结合蛋白优先结合Αβ (1-42)球聚体的可溶性形式。
37.根据权利要求观的结合蛋白，其中结合蛋白调节Αβ(1-42)球聚体的生物学功能。
38.根据权利要求33的结合蛋白，其中结合蛋白调节Αβ(1-42)球聚体的生物学功能。
39.根据权利要求36的结合蛋白，其中结合蛋白调节Αβ(1-42)球聚体的生物学功能。
40.根据权利要求观的结合蛋白，其中结合蛋白中和Αβ(1-42)球聚体。
41.根据权利要求33的结合蛋白，其中结合蛋白中和Αβ(1-42)球聚体。
42.根据权利要求36的结合蛋白，其中结合蛋白中和Αβ(1-42)球聚体。
43.根据权利要求观的结合蛋白，其中所述结合蛋白对所述靶标具有选自如下的解 离常数(Kd)至多约10_7Μ、至多约IOl、至多约101、至多约ΙΟ,Μ、至多约10_"M、至多约 10—M和至多约IO-13M0
44.根据权利要求33的结合蛋白，其中所述结合蛋白对所述靶标具有选自如下的解 离常数(Kd)至多约10_7M、至多约IOl、至多约101、至多约ΙΟ,Μ、至多约10_"M、至多约 10—M和至多约IO-13M0
45.根据权利要求35的结合蛋白，其中所述结合蛋白对所述靶标具有选自如下的解 离常数(Kd)至多约10_7M、至多约IOl、至多约101、至多约ΙΟ,Μ、至多约10_"M、至多约 10—M和至多约IO-13M0
46.根据权利要求36的结合蛋白，其中所述结合蛋白对所述靶标具有选自如下的解 离常数(Kd)至多约10_7M、至多约IOl、至多约101、至多约ΙΟ,Μ、至多约10_"M、至多约 10—M和至多约IO-13M0
47.一种包含权利要求1-46任一项的所述结合蛋白的抗体构建体，所述抗体构建体进 一步包含连接多肽或免疫球蛋白恒定域。
48.根据的权利要求47抗体构建体，其中所述结合蛋白选自 免疫球蛋白分子，单克隆抗体， 嵌合抗体， ⑶R-嫁接抗体， 人源化抗体， Fab, Fab', F(ab，)2, Fv,二硫键连接的Fv， scFv, 单区抗体， 双抗体， 多特异性抗体， 双重特异性抗体， 同种型抗体， 突变的抗体， 双可变区抗体 禾口双特异性抗体。
49.根据权利要求47的抗体构建体，其中所述结合蛋白包含选自如下的重链免疫球蛋 白恒定域人IgM恒定域， 人IgGl恒定域， 人IgG2恒定域， 人IgG3恒定域， 区，人IgG4恒定域， 人IgE恒定域， 禾口人IgA恒定域。
50.根据权利要求47的抗体构建体，包含具有选自如下的氨基酸序列的免疫球蛋白恒 定域SEQ ID NO. :25, SEQ ID NO. 26, SEQ IDNO. :27 禾口 SEQ ID NO. :28。
51.一种包含权利要求47-50任一项所述的抗体构建体的抗体缀合物，所述抗体缀合 物进一步包含选自如下的剂免疫粘附分子、显像剂、治疗剂和细胞毒性剂。
52.根据的权利要求51抗体缀合物，其中所述剂是显像剂，选自放射性标记、酶、荧光 标记、发光标记、生物发光标记、磁性标记和生物素。
53.根据权利要求52的抗体缀合物，其中所述放射性标记选自3H、14C、35S、9°Y、99Tc、ιηΙη, 1251 , 131 1 , 177Lu^166Ho 和 153Sm。
54.根据权利要求51的抗体缀合物，其中所述剂是治疗剂或细胞毒素剂，选自抗代谢 物、烷化剂、抗生素、生长因子、细胞因子、抗-血管发生剂、抗有丝分裂剂、蒽环类、毒素和 细胞凋亡剂。
55.根据权利要求49的抗体构建体，其中所述结合蛋白具有人糖基化模式。
56.根据权利要求51的抗体缀合物，其中所述结合蛋白具有人糖基化模式。
57.根据权利要求3的结合蛋白，其中所述结合蛋白以晶体形态存在。
58.根据权利要求47的抗体构建体，其中所述抗体构建体以晶体形态存在。
59.根据权利要求51的抗体缀合物，其中所述抗体构建体以晶体形态存在。
60.根据权利要求57的结合蛋白，其中所述晶体是无载体药物控制释放晶体。
61.根据权利要求58的抗体构建体，其中所述晶体是无载体药物控制释放晶体。
62.根据权利要求59的抗体缀合物，其中所述晶体是无载体药物控制释放晶体。
63.根据权利要求57的结合蛋白，其中与所述结合蛋白的可溶性对应物相比所述结合 蛋白具有更长的体内半衰期。
64.根据权利要求58的抗体构建体，其中与所述抗体构建体的可溶性对应物相比所述 抗体构建体具有更长的体内半衰期。
65.根据权利要求59的抗体缀合物，其中与所述抗体缀合物的可溶性对应物相比所述 抗体缀合物具有更长的体内半衰期。
66.根据权利要求57的结合蛋白，其中所述结合蛋白保留生物活性。
67.根据权利要求58的抗体构建体，其中所述抗体构建体保留生物活性。
68.根据权利要求59的抗体缀合物，其中所述抗体缀合物保留生物活性。
69.一种编码结合蛋白的分离的核酸分子，其中所述结合蛋白的所述可变重链的氨基 酸序列与SEQ ID NO 1具有至少70%同一性。
70.一种编码结合蛋白的分离的核酸分子，其中所述结合蛋白的所述可变轻链的氨基 酸序列与SEQ ID NO 2具有至少70%同一性。
71.—种编码权利要求1-46任一项的结合蛋白氨基酸序列的分离的核酸分子。
72.—种编码权利要求47-50任一项的抗体构建体氨基酸序列的分离的核酸分子。
73.—种编码权利要求51-53任一项的抗体缀合物氨基酸序列的分离的核酸分子。
74.—种包含权利要求71-73任一项的所述核酸分子的载体。
75.—种包含权利要求74的所述载体的宿主细胞。
76.权利要求75的宿主细胞，其中所述宿主细胞是原核细胞。
77.根据权利要求76的宿主细胞，其中所述宿主细胞是大肠杆菌。
78.根据权利要求75的宿主细胞，其中所述宿主细胞是真核细胞。
79.根据权利要求78的宿主细胞，其中所述真核细胞选自原生生物细胞、动物细胞、植 物细胞和真菌细胞.
80.根据权利要求79的宿主细胞，其中所述动物细胞选自哺乳动物细胞、禽类细胞和 昆虫细胞。
81.根据权利要求80的宿主细胞，其中所述哺乳动物细胞是CHO细胞。
82.根据权利要求80的宿主细胞，其中所述宿主细胞是COS。
83.根据权利要求80的宿主细胞，其中所述真菌细胞是酵母细胞。
84.根据权利要求83的宿主细胞，其中所述酵母细胞是酿酒酵母。
85.根据权利要求80的宿主细胞，其中所述昆虫细胞是Sf9。
86.—种产生能结合Αβ (1-42)球聚体的蛋白的方法，包括在足以产生能结合 Αβ (1-42)球聚体的结合蛋白的时间和条件下，培养权利要求75-85任一项的宿主细胞。
87.一种根据权利要求86的方法产生的分离的蛋白。
88.一种用于释放结合蛋白的组合物，所述组合物包含(a)一种制剂，其中所述制剂包含根据权利要求57-68任一项的结晶的结合蛋白和组 分；以及(b)至少一种聚合物载体。
89.根据权利要求88的组合物，其中所述聚合物载体是至少一种选自如下的聚合物 聚(丙烯酸)、聚(氰基丙烯酸酯)、聚(氨基酸)、聚(酐)、聚(酯肽)、聚(酯)、聚(乳 酸)、聚(乳酸乙醇酸共聚物)或PLGA、聚(b-羟基丁酸酯)、聚(已内酯)、聚(二氧杂环 己酮)；聚(乙二醇)、聚((羟丙基)甲基丙烯酰胺)、聚[(有机)膦腈]、聚(原酸酯)、 聚(乙烯醇)、聚(乙烯基吡咯烷酮)、马来酸酐-烷基乙烯醚共聚物、pluronic多元醇、白 蛋白、海藻酸盐、纤维素及纤维素衍生物、胶原蛋白、血纤蛋白、明胶、透明质酸、低聚糖、糖 胺聚糖、硫酸多糖、它们的混合物和共聚物。
90.根据权利要求87的组合物，其中所述组分选自白蛋白、蔗糖、海藻糖、乳糖醇、明 胶、羟丙基-环糊精、甲氧基聚乙二醇和聚乙二醇。
91.一种治疗怀疑患有淀粉样变性的哺乳动物的方法，包括以足以实现所述治疗的量 向哺乳动物施用权利要求88的所述组合物。
92.一种包含权利要求1的结合蛋白和药学上可接受的载体的药物组合物。
93.权利要求91的药物组合物，其中所述药学上可接受的载体起佐剂作用，用于增加 所述结合蛋白的吸收或分散。
94.权利要求92的药物组合物，其中所述佐剂是透明质酸酶。
95.权利要求91的药物组合物，进一步包含至少一种用于治疗其中Aβ (1-42)球聚体 的存在是有害的病症的附加治疗剂。
96.权利要求95的方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自胆固醇酶抑制剂、TNF拮 抗剂、细胞因子拮抗剂、部分NMDA受体阻断剂、糖胺聚糖模拟物、γ分泌酶抑制剂或别构调 节剂、黄体生成素阻断促性腺激素释放激素激动剂、5-羟色胺5-ΗΤ1Α受体拮抗剂、螯合剂、 神经元选择性L-型钙离子通道阻断剂、免疫调节剂、淀粉样蛋白原纤维形成抑制剂或淀粉 样蛋白沉积抑制剂、PDE4抑制剂、组胺激动剂、高级聚糖化终产物受体蛋白、PARP刺激物、 5-羟色胺6-受体拮抗剂、5-ΗΤ4受体激动剂、人类固醇、增强神经元代谢的葡萄糖摄取刺激 物、选择性CBl拮抗剂、苯并二吖庚因受体部分激动剂、淀粉样蛋白β产生拮抗剂或抑制 剂、淀粉样蛋白β沉积抑制剂、NNRa-7部分拮抗剂、治疗靶向PDE4、RNA翻译抑制剂、毒蕈 碱性激动剂、神经生长因子受体激动剂、NGF受体激动剂和基因治疗调节剂。
97.一种降低Αβ (1-42)球聚体活性的方法，包括将Αβ (1-42)球聚体与权利要求1的 结合蛋白接触，使得Αβ (1-42)球聚体活性降低。
98.一种降低患有其中Αβ (1-42)球聚体是有害的病症的人个体中人Αβ (1-42)球聚体活性的方法，包括向该人个体施用权利要求1的结合蛋白，使得该人个体中的人 Αβ (1-42)球聚体活性降低。
99.一种通过以足以实现所述治疗的量向个体施用权利要求1的结合蛋白，治疗个体 的其中Αβ (1-42)球聚体活性是有害的疾病或病症的方法。
100.权利要求99的方法，其中所述疾病或病症选自甲抗胰蛋白酶缺乏症、Cl-抑制剂 缺乏血管性水肿、抗凝血酶缺乏血栓栓塞性疾病、库鲁病、Creutzfeld-Jacob病/羊瘙痒 症、牛绵状脑病、Gerstmarm-Straussler-kheinker病、家族致命性失眠症、亨廷顿病、脊髓 小脑性共济失调、Machado-Joseph萎缩、齿状核红核苍白球丘脑下核萎缩、额颞痴呆、镰状 细胞贫血、不稳定性血红蛋白包含体溶血、药物性包含体溶血、帕金森氏病、全身性AL型淀 粉样变性、小结节性AL淀粉样变性、全身性AA淀粉样变性、前列腺淀粉样、血液透析淀粉样 变性、遗传性(冰岛人)大脑血管病、亨廷顿病、家族性内脏淀粉样、家族性内脏多神经病、 家族性内脏淀粉样变性、老年全身性淀粉样变性、家族性淀粉样神经病、家族性心脏淀粉 样、阿尔茨海默病、唐氏综合征、甲状腺髓样癌和2型糖尿病(T2DM)。
101.一种治疗患有其中Αβ (1-42)球聚体是有害的病症的患者的方法，包括在施用至 少一种第二药剂之前、同时或之后施用权利要求1的结合蛋白的步骤，其中所述至少一种 第二药剂选自胆固醇酶抑制剂、部分NMDA受体阻断剂、糖胺聚糖模拟物、TNF拮抗剂、细胞 因子拮抗剂、Y分泌酶抑制剂或别构调节剂、黄体生成素阻断促性腺激素释放激素激动剂、 5-羟色胺5-ΗΤ1Α受体拮抗剂、螯合剂、神经元选择性L-型钙离子通道阻断剂、免疫调节剂、 淀粉样蛋白原纤维形成抑制剂或淀粉样蛋白沉积抑制剂、PDE4抑制剂、组胺激动剂、高级聚 糖化终产物受体蛋白、PARP刺激物、5-羟色胺6-受体拮抗剂、5-ΗΤ4受体激动剂、人类固醇、 增强神经元代谢的葡萄糖摄取刺激物、选择性CBl拮抗剂、苯并二吖庚因受体部分激动剂、 淀粉样蛋白β产生拮抗剂或抑制剂、淀粉样蛋白β沉积抑制剂、NNRa-7部分拮抗剂、治 疗靶向PDE4、RNA翻译抑制剂、毒蕈碱性激动剂、神经生长因子受体激动剂、NGF受体激动剂 和基因治疗调节剂。
102.权利要求101的方法，其中所述胆固醇酶抑制剂选自他克林、多奈哌齐、利斯的明 和加兰他敏。
103.权利要求101的方法，其中所述部分NMDA受体阻断剂是美金刚。
104.根据权利要求98的方法，其中所述施用于个体是通过至少一种选自如下的方式 进行的肠胃外、皮下、肌内、静脉内、关节内、支气管内、腹内、囊内、软骨内、腔内、体腔内、 小脑内、脑室内、大肠内、子宫颈内、胃内、肝内、心肌内、骨内、骨盆内、心包内、腹膜内、胸膜 内、前列腺内、肺内、直肠内、肾内、视网膜内、脊柱内、滑膜内、胸内、子宫内、膀胱内、推注、 阴道、直肠、含服、舌下、鼻内和透皮。
105.一种在怀疑患有阿尔茨海默病的患者中诊断该疾病的方法，包括步骤a.从所述患者分离生物样品；b.在足以形成球聚体/结合蛋白复合物的时间和条件下，将所述生物样品与权利要求 1的所述结合蛋白接触；和c.检测所述样品中所述球聚体/结合蛋白复合物的存在，所述复合物的存在指示在所 述患者中诊断了阿尔茨海默病。
106.一种在怀疑患有阿尔茨海默病的患者中诊断该疾病的方法，包括步骤a.从所述患者分离生物样品；b.在足以形成球聚体/结合蛋白复合物的时间和条件下，将所述生物样品与权利要求 1的所述结合蛋白接触；c.在足以使得所述缀合物与已结合的结合蛋白结合的时间和条件下，添加缀合物至所 得到的球聚体/结合蛋白复合物，其中所述缀合物包含连接有能产生可检测的信号的信号 产生化合物的抗-结合蛋白抗体；和d.通过检测所述信号产生化合物产生的信号，检测其可存在于所述生物样品中的所述 结合蛋白的存在，所述信号指示在所述患者中诊断了阿尔茨海默病。
全文摘要
本发明涉及结合蛋白以及特别是可例如在阿尔茨海默病和相关病症的诊断、治疗和预防中使用的人源化抗体。
文档编号C07K16/18GK102076714SQ200880101482
公开日2011年5月25日 申请日期2008年5月30日 优先权日2007年5月30日
发明者A·R·斯特里宾格, B·拉科维斯基, H·希伦, P·R·欣顿, P·凯勒, S·巴格霍恩, U·埃伯特, V·M·胡安 申请人:艾博特股份有限两合公司, 雅培制药有限公司