专利名称：用于免疫佐剂E6020之合成前体的β-酮酰胺合成的试剂和方法
技术领域：
本发明涉及通过β -酮酰胺中间体合成免疫佐剂Ε6020的前体的方法。本发明还 涉及所述合成方法中的中间体化合物及其晶形的两种化合物。
背景技术：
已经证明疫苗是用来预防传染病的成功方法。通常，其是有成本效益的，并且不会 诱导针对靶标病原体的抗生素抗性或影响存在于宿主中的正常菌群。在很多情况中，比如 当诱导抗病毒免疫时，疫苗可以预防没有可治愈性或改善性治疗方法的疾病。疫苗通过触发免疫系统以弓丨起对物质或抗原的应答而起作用，其通常是以非感染 性或非病原体形式引入到体内的感染性生物或其一部分。一旦免疫系统对所述生物已经是 “预处理过的” (primed)或敏化的，那么之后免疫系统暴露于作为感染性病原体的该生物后 产生快速强烈的免疫应答，所述免疫应答在病原体能够在宿主生物中繁殖和感染足够的细 胞以引起疾病症状之前破坏所述病原体。用来预处理免疫系统的物质或抗原可以是处于较 弱感染性状态的完整生物(称为减毒生物)，或者在某些情况下是生物的组分，比如代表生 物的不同结构组分的碳水化合物、蛋白质或肽。在许多情况下，为了以足够的程度刺激免疫系统使疫苗有效，即赋予免疫性，有必 要增强针对存在于疫苗中的抗原的免疫应答。许多蛋白质和大多数肽以及碳水化合物抗原 单独施用不会引起足以赋予免疫性的抗体应答。这样的抗原需要以其会被识别为是外来的 并会引起免疫应答的方式呈递给免疫系统。为此目的，已经设计了激发、增强和/或导向针 对所选抗原的免疫应答的添加剂(佐剂)。最著名的佐剂即弗氏完全佐剂由在油/水乳液中的分枝杆菌的混合物组成。弗氏 佐剂通过两种方式起作用第一种，通过增强细胞和体液介导的免疫，第二种，通过阻止抗 原激发的迅速分散(“储存效应”)。然而，由于对该物质的频繁的毒性生理和免疫反应，弗 氏佐剂不能用于人。另一种已经表现出具有免疫刺激活性或佐剂活性的分子是内毒素，又称为脂多糖 (LPS)。LPS通过触发“先天性的”免疫应答来刺激免疫系统，所述"先天性的"免疫应答是 已经演化为使得生物不需要预先与生物体接触而能够识别内毒素(和入侵细菌，其中内毒 素是入侵细菌的组分)的应答。虽然LPS的毒性太大而不能作为可利用的佐剂，但是在结 构上与内毒素相关的分子例如单磷酰脂质A (“MPL”)已经在临床试验中进行作为佐剂的测 试。已经证实LPS和MPL都是人toll-样受体-4 (TLR-4)的激动剂。然而，目前FDA批准 的用于人类的唯一佐剂是过硫酸铝盐(明矾)，其用于通过将抗原沉淀而“储存”抗原。明 矾还刺激针对抗原的免疫应答。
E6020是一种高效的TLR-4受体激动剂，因此当与抗原(比如疫苗)共同施用用于 细菌性和病毒性疾病时其用作免疫佐剂。例如，E6020可以与任何合适的抗原或疫苗成分 联合使用，所述抗原或疫苗成分例如选自来自病原性和非病原性生物、病毒和真菌的抗原 的抗原物质。作为进一步的实例，E6020可以与对于诸如以下的疾病状态和病症有药理学 活性的蛋白质、肽、抗原和疫苗联合使用天花、黄热病、癌症、瘟热(distemper)、霍乱、禽 痘、猩红热、白喉、破伤风、百日咳、流行性感冒、狂犬病、流行性腮腺炎、麻疹、口蹄疫和脊髓 灰质炎，以及病毒性疾病比如疱疹和疱疹相关疾病及肝炎和肝炎相关疾病。当作为疫苗使 用而向被预防接种的宿主动物、胚胎或卵施用时，E6020和抗原各自以能够有效引起免疫应 答的量存在。
权利要求
1.式(3)的化合物
2.根据权利要求1的化合物，其中 R1 为 C5- "C12焼基，R2为C7-C14烷基，和 R3 为 C7- "C14焼基。
3.根据权利要求2的化合物，其中 R1为C7烷基，R2为C11烷基，和R3为 C11焼基。
4.根据权利要求3的化合物，其中 R1为正庚基；R2为正十一烷基，和 R3 SEi烷基。
5.根据权利要求1的化合物，其中R1、! 2和R3中至少一个与其它不同。
6.根据权利要求1、2、3、4或5的化合物，其具有式(3a)的立体化学
7.根据权利要求6的化合物，其中所述化合物为化合物22
8.—种通过使式(1)化合物与式( 化合物反应制备式C3)化合物的方法，如下所示
9.根据权利要求8的方法，其中 R1 为 C5- "C12焼基，R2 为 C7- "C14焼基， R3为C7-C14烷基，和X为0H、Cl、F、咪唑烷基、三甲基乙酰氧基、碳酸乙酯基、碳酸甲酯基、碳酸异丁酯基或 式Z的基团
10.根据权利要求9的方法，其中 R1为C7烷基；R2为C11烷基；和R3为 C11焼基。
11.根据权利要求10的方法，其中 R1为正庚基；R2为正十一烷基；和 R3 SEi烷基。
12.根据权利要求8的方法，其中R1、R2和R3中至少一个与其它不同。
13.根据权利要求8的方法，还包括在异丙醇中氢化式Y化合物以形成式(1)化合物的 步骤
14.式的化合物
15.根据权利要求14的化合物，其中R4在每次出现时独立地为C3-C5烯基、2-氰基乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基或2，2， 2-三氯乙基；R5在每次出现时独立地为C3-C6烷基；和 R6在每次出现时独立地为C3-C6烷基。
16.根据权利要求15的式(4)化合物，其中 R4在每次出现时为烯丙基；R5在每次出现时为异丙基；和 R6在每次出现时为异丙基。
17.根据权利要求16的化合物，其中所述化合物为化合物25
18. 一种通过如下所示的缩合反应制备式(4)化合物的方法
19.权利要求18的方法，其中R4在每次出现时独立地为C3-C5烯基、2-氰基乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基或2，2， 2-三氯乙基；R5在每次出现时独立地为C3-C6烷基；和 R6在每次出现时独立地为C3-C6烷基。
20.权利要求18的方法，其中 R4在每次出现时为烯丙基； R5在每次出现时为异丙基；和 R6在每次出现时为异丙基。
21.一种用于制备式(6)化合物的方法，包括以下步骤i)如下所示使式( 化合物与式(4)化合物反应以形成式( 化合物
22.权利要求21的方法，其中 R1为C5-C12烷基；R2为C7-C14烧基； R3为C7-C14焼基；R4在每次出现时独立地为C3-C5烯基、2-氰基乙基、2-(三甲基甲硅烷基)乙基或2，2， 2-三氯乙基；R5在每次出现时独立地为C3-C6烷基；和 R6在每次出现时独立地为C3-C6烷基。
23.权利要求21的方法，其中 R1为C7烷基；R2为C11烷基； R3为C11烷基； R4为烯丙基；R5为异丙基；和 R6为异丙基。
24.权利要求23的方法，其中 R1为正庚基；R2为正十一烷基； R3为正十一烷基； R4为烯丙基； R5为异丙基；和 R6为异丙基。
25.权利要求21的方法，其中R1、! 2和R3中至少一个与其它不同。
26.权利要求21的方法，其中式( 化合物的形成包括以下步骤i)在庚烷和乙腈的共溶剂混合物中一起搅拌式( 化合物和式(4)化合物，直到所有 固体都溶解； )缓慢加入1. 0至2. 0当量的乙酸，同时保持温度为20至25°C ；和 iii)搅拌所得的混合物，直到反应完全。
27.权利要求沈的方法，其中所用庚烷的重量是所用式C3)化合物重量的4至6倍。
28.权利要求沈的方法，其中所用乙腈的重量是所用式C3)化合物重量的1至2倍。
29.权利要求21- 中任一项的方法，其中氧化所形成的化合物( 以形成式(6)化合 物包括以下步骤i)向包含所形成的式( 化合物的反应混合物中加入庚烷；ii)将所得混合物冷却至_5°C至10°C；iii)缓慢加入在水中的30%(wt/wt)的H2O2，加入速率使得反应混合物的温度保持 在-5°C至10°C之间；和iv)在_5°C至10°C的温度下搅拌所得混合物，直到反应完全。
30.权利要求四的方法，其中 使步骤ii)的混合物冷却至0至5°C ； 使步骤iii)的混合物保持在0至2V ；和 使步骤iv)的混合物保持在-1至2°C。
31.晶体化合物22
32.根据权利要求31的晶体化合物22，其进一步特征在于X射线粉末衍射图具 有以下峰值12. 3 士 0. 2 ° 2Θ、14. 5 士 0. 2° 2Θ、16. 2 士 0. 2° 2Θ、17. 8 士 0. 2° 2Θ、 22. 2 士 0.2° 2 θ 和23. 8 士 0.2° 2Θ。
33.根据权利要求32的晶体化合物22，其进一步特征在于熔点为约41°C。
34.晶体化合物25
35.根据权利要求34的晶体化合物25，其进一步特征在于X射线粉末衍射图具有以下 峰值6. 6 士 0.3° 2Θ、14. O 士 0. 3° 2Θ、17·3 士 0.3° 2 θ 和 19. 4 士 0. 3° 2Θ。
36.根据权利要求35的晶体化合物25，其进一步特征在于熔点为约65°C。
全文摘要
本发明涉及通过β-酮酰胺醇中间体化合物22合成E6020的前体化合物26的方法。该合成方法使化合物22与化合物25反应，并氧化所得中间体得到化合物26即E6020的前体。化合物22和25及其晶形代表本发明的独立实施方案。本发明还涉及式(3)和(4)的化合物及其制备方法。所述β-酮酰胺醇中间体化合物22是式(3)的化合物，化合物25是式(4)的化合物。
文档编号C07F9/24GK102149675SQ200880121706
公开日2011年8月10日 申请日期2008年12月18日 优先权日2007年12月18日
发明者吴阔明, 布鲁斯·德科斯塔, 弗朗西斯·G·方, 林恩·霍金斯, 查尔斯·莱梅林, 牛翔, 詹姆斯·E·福伊 申请人:卫材R&D管理有限公司