专利名称：从五味子中提取五味子甲素和五味子乙素的方法
技术领域：
本发明涉及从五味子中提取活性成分的方法，具体涉及从五味子中提取五味子甲 素和五味子乙素的方法。
背景技术：
五味子为木兰科植物五味子(Schisandra chimesmsis (Turcz.) Baill.)的干燥成 熟果实，收载于《中国药典》2000版，俗称北五味子。北五味子是生长于中国东北，遍布小兴 安岭、伊春、桃山、延边等地的一种道地药材。现代研究证明，五味子生物活性成分主要是木 脂素和挥发油等，它对神经系统、消化系统等具有多种药理作用，其中木脂素类具有保肝、 降酶、抗艾滋病等多种活性。五味子中总木脂素的含量为2 8%，其成分大多具有联苯环 辛二烯母核，是一类低极性小分子化合物，如五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲等。现有的五味子总木脂素的提取纯化方法很多，如尹滟等发表的《用大孔树脂提取 和纯化五味子总木脂素》(沈阳药科大学学报，2007年2月，第M卷第2期，113 117页)， 以五味子甲素、五味子乙素和五味子醇甲为考察指标，提出了用大孔树脂纯化五味子粗提 液的工艺，最佳工艺为粗提液上AB-8大孔树脂吸附，5倍柱床体积蒸馏水洗柱后，再用体 积浓度为95%的乙醇洗脱，洗脱剂用量为8倍柱床体积；此后还将洗脱液用阴离子树脂进 行脱色处理，在经过以上两步纯化后，五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素3种有效成分 含量的质量分数由1. 197%提高到14. 92%，其总转移率为72. 3%。采用该方法进行提取纯 化，五味子有效成分损失较小，固形物得率较低，但该方法所得的五味子甲素和五味子乙素 混合在提取物中，并没有得到分离，这给后续生产上需单独使用其中的甲素或乙素的场合 带来不便。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种从五味子中提取五味子甲素和五味子乙素 的方法。该方法可先后洗脱出五味子甲素和五味子乙素，从而使五味子甲素和五味子乙素 得到分离。本发明所述从五味子中提取五味子甲素和五味子乙素的方法，包括以下步骤1)将五味子破碎，以体积浓度80 95%的乙醇煮沸保温提取1 2次，料液比为 1 7 10 (W/V)，每次提取1 2小时，合并提取液，浓缩，得浓缩液；2)向浓缩液中加入乙醇，使其中的乙醇浓度为60 65% (质量)，离心，收集上清 液；3)上清液过大孔树脂柱，用1. 5 2. 5倍树脂重量、体积浓度55 65%的乙醇洗 脱，收集洗脱液A，回收乙醇，干燥，即得五味子甲素提取物；4)再用2. 5 3. 5倍树脂重量、体积浓度85 95%的乙醇洗脱，收集洗脱液B，回 收乙醇，干燥，即得五味子乙素提取物。上述方法中，步骤1)中，可将合并得到的提取液浓缩至原料重量的2 3倍。
步骤幻中，最好将调节乙醇浓度后的浓缩液放冷后再离心。步骤3)中，大孔树脂的型号为 D101、DM130、DM132、DM312 或 HP-20。与现有技术相比，本发明对五味子用乙醇进行煮沸保温提取，使其中的五味子甲 素和五味子乙素更易溶出，提取率高；通过调节浓缩液中的乙醇浓度进而离心，可去除提取 液中的大部分杂质，所得上清液上树脂柱后先用体积浓度为阳 65%的乙醇水溶液对树 脂柱洗脱，可得到五味子甲素，再用体积浓度85 95%的乙醇洗脱，可得到五味子乙素， 从而使五味子甲素和五味子乙素得到分离；所得五味子甲素提取物中五味子甲素的含量为 0.8 1.2% (HPLC法测定)，五味子乙素提取物中五味子乙素的含量为3 4% (HPLC法 测定)；五味子甲素提取率为80 90%，五味子乙素提取率为80 90%。
具体实施例方式实施例11)取五味子破碎，加入相当于原料7倍重量的85% (ν/ν)的乙醇水溶液煮沸保温 提取2小时，滤出药液，再加入相当于原料10倍重量的85% (ν/ν)的乙醇水溶液煮沸保温 提取1小时，过滤，合并提取液，提取液浓缩至原料重量的2倍，得浓缩液；2)向浓缩液中加入无水乙醇，使其中的乙醇浓度为60% (质量)，离心，收集上清 液；3)上清液过DM132型大孔树脂柱，用1. 5倍树脂重量、55% (ν/ν)的乙醇水溶液洗 柱，收集洗脱液Α，回收乙醇，干燥，即得五味子甲素提取物；4)再用3. 5倍树脂重量、85% (ν/ν)的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液B，回收乙醇， 干燥，即得五味子乙素提取物。用HPLC法测得步骤幻所得提取物中五味子甲素的含量为1%，步骤4)所得提取 物中五味子乙素的含量为4%。其中五味子甲素的提取率为90%，五味子乙素的提取率为 88%。实施例21)取五味子破碎，加入相当于原料8倍重量的90% (ν/ν)的乙醇水溶液煮沸保温 提取1小时，滤出药液，再加入相当于原料8倍重量的80% (ν/ν)的乙醇水溶液煮沸保温提 取1小时，过滤，合并提取液，提取液浓缩至原料重量的3倍，得浓缩液；2)向浓缩液中加入95% (ν/ν)乙醇，使其中的乙醇浓度为65% (质量)，放冷后 离心，收集上清液；3)上清液过DlOl型大孔树脂柱，用2倍树脂重量、65% (ν/ν)的乙醇水溶液洗柱， 收集洗脱液Α，回收乙醇，干燥，即得五味子甲素提取物；4)再用2. 5倍树脂重量、90% (ν/ν)的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液B，回收乙醇， 然后加入相当于洗脱液B质量0.5倍的辅料(糊精、淀粉等)进行干燥，即得五味子乙素提 取物。用HPLC法测得步骤幻所得提取物中五味子甲素的含量为1.2%，步骤4)所得提 取物中五味子乙素的含量为3. 5%。其中五味子甲素的提取率为83%，五味子乙素的提取 率为86%。实施例3
1)取五味子破碎，加入相当于原料9倍重量的95% (ν/ν)的乙醇水溶液煮沸保温 提取2小时，滤出药液，再加入相当于原料7倍重量的85% (ν/ν)的乙醇水溶液煮沸保温提 取1. 5小时，过滤，合并提取液，提取液浓缩至原料重量的2. 5倍，得浓缩液；2)向浓缩液中加入90% (ν/ν)乙醇，使其中的乙醇浓度为65% (质量)，放冷后 离心，收集上清液；3)上清液过ΗΡ-20型大孔树脂柱，用2. 5倍树脂重量、60 % (ν/ν)的乙醇水溶液洗 柱，收集洗脱液Α，回收乙醇，然后加入相当于洗脱液A质量0. 5倍的辅料(糊精、淀粉等) 进行干燥，即得五味子甲素提取物；4)再用2. 5倍树脂重量、85% (ν/ν)的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液B，回收乙醇， 然后加入相当于洗脱液B质量0.5倍的辅料(糊精、淀粉等)进行干燥，即得五味子乙素提 取物。用HPLC法测得步骤幻所得提取物中五味子甲素的含量为1. 12%，步骤4)所得提 取物中五味子乙素的含量为3.8%。其中五味子甲素的提取率为89%，五味子乙素的提取 率为90%。实施例41)取五味子破碎，加入相当于原料10倍重量的95% (ν/ν)的乙醇水溶液煮沸保 温提取2小时，过滤，提取液浓缩至原料重量的2倍，得浓缩液；2)向浓缩液中加入95% (ν/ν)乙醇，使其中的乙醇浓度为62% (质量)，离心，收集上清液；3)上清液过DM130型大孔树脂柱，用2. 5倍树脂重量、55% (ν/ν)的乙醇水溶液洗 柱，收集洗脱液Α，回收乙醇，干燥，即得五味子甲素提取物；4)再用3. 5倍树脂重量、95% (ν/ν)的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，干 燥，即得五味子乙素提取物。用HPLC法测得步骤幻所得提取物中五味子甲素的含量为0.9%，步骤4)所得提 取物中五味子乙素的含量为3.4%。其中五味子甲素的提取率为86%，五味子乙素的提取 率为82%。权利要求
1.从五味子中提取五味子甲素和五味子乙素的方法，其特征在于包括以下步骤1)将五味子破碎，以体积浓度80 95%的乙醇煮沸保温提取1 2次，料液比为 1 7 10 (W/V)，每次提取1 2小时，合并提取液，浓缩，得浓缩液；2)向浓缩液中加入乙醇，使其中的乙醇浓度为60 65%(质量)，离心，收集上清液;3)上清液过大孔树脂柱，用1.5 2. 5倍树脂重量、体积浓度55 65%的乙醇洗脱， 收集洗脱液A，回收乙醇，干燥，即得五味子甲素提取物；4)再用2.5 3. 5倍树脂重量、体积浓度85 95%的乙醇洗脱，收集洗脱液B，回收乙 醇，干燥，即得五味子乙素提取物。
2.根据权利要求1所述的从五味子中提取五味子甲素和五味子乙素的方法，其特征在 于步骤1)中，提取液浓缩至原料重量的2 3倍。
3.根据权利要求1或2所述的从五味子中提取五味子甲素和五味子乙素的方法，其特 征在于步骤3)中，大孔树脂的型号为0101、011130、011132、01012、或朋-20。
全文摘要
本发明公开了从五味子中提取五味子甲素和五味子乙素的方法，包括以下步骤1)将五味子破碎，以体积浓度80～95％的乙醇提取，提取液浓缩，得浓缩液；2)向浓缩液中加入乙醇，使其中的乙醇浓度为60～65％(质量)，离心，收集上清液；3)上清液过大孔树脂柱，用1.5～2.5倍树脂重量、体积浓度55～65％的乙醇洗脱，收集洗脱液A，干燥，即得五味子甲素提取物；4)再用2.5～3.5倍树脂重量、体积浓度85～95％的乙醇洗脱，收集洗脱液B，干燥，即得五味子乙素提取物。本发明所述方法可先后洗脱出五味子甲素和五味子乙素，使它们得到分离；其中五味子甲素的含量为0.8～1.2％，五味子乙素的含量为3～4％。
文档编号C07D317/70GK102050707SQ20091011451
公开日2011年5月11日 申请日期2009年11月1日 优先权日2009年11月1日
发明者孙步祥, 宋云飞, 梁远盛, 汤凌志, 赵军 申请人:桂林莱茵生物科技股份有限公司