用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及贝母总生物碱的提取，具体涉及用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法。
【背景技术】
[0002]贝母是百合科(Liliaceae)贝母属{Fri tillaria)植物，传统药用部位为其鳞茎，贝母主治伤寒烦热、咳嗽止气、安五脏、利骨髓、消痰润心肺，兼有消炎退肿、治疗痛疖肿毒等功效。1982年版《中药志》述:有“清热润肺、化痰止咳、散结功能等功效”，临床用于痰热咳嗽、脸色闷痰，治瘰疠和疮疡肿毒。贝母主要药用成份为贝母生物碱，包括贝母甲素(C27H45NO3X贝母乙素(C27H43NO3)等，贝母生物碱具有自由基清除活性。目前从贝母中提取总生物碱的方法为传统的有机溶剂萃取，如公告号为CN1146425的发明专利，就公开了先将贝母用95%乙醇回流，加2%盐水溶解后，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取多次，再用氯仿萃取，得到贝母总生物碱，然后再用硅胶柱层析贝母总生物碱，氯仿-甲醇洗脱，洗脱液浓缩后得到贝母甲素，同样方法也可以得到贝母乙素，只是收集时间不同。但传统方法萃取复杂，需反复萃取，萃取时间长，萃取效率低，且是以贝母鳞茎作为原料，而贝母花大多腐烂在田野中，得不到利用。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种提取简单、时间短、效率高的用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法。
[0004]本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法，其步骤如下:
a、将当日摘取的鲜贝母花风干后粉碎，过45?60目筛，得到贝母花粉末；
b、将上述贝母花粉末装入超声萃取釜中，加入质量百分浓度0.5?1%乙酸水溶液，在超声发生方式为:超声波功率为120?140W，超声频率为28?30kHz，它激式超声发声，径向振动柱状换能器，间隔3min超声一次，每次超声6min，于35?45°C气升式搅拌条件下，超声提取90?120min，过滤，得到贝母花提取液，所述浙贝母花粉末与所述乙酸水溶液的质量体积比为I Kg: 18?20 L ；
C、将贝母花提取液在压力为450?500Pa的条件下，减压浓缩90?120min，将浓缩液用质量百分浓度5%氢氧化钠调节pH至10，DlOl型大孔树脂层析柱层析，以每小时两个柱床体积的流速用蒸馏水洗层析柱，洗至流出液无色，再用2个柱床体积的质量百分浓度50%乙醇洗层析柱，然后用8个柱床体积的质量百分浓度95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱液，在450?500Pa的条件下减压浓缩30?45min，得到贝母浓缩液；
d、贝母浓缩液用100目硅胶柱层析，每小时以4?6柱床体积流速用体积比17:2的乙酸乙酯-甲醇混合液洗脱，收集273?310 min洗脱液，浓缩干燥，得到白色的贝母乙素。
[0005]与现有技术相比，本发明的优点在于用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法，贝母花粉末装在超声萃取釜中，用乙酸水溶液为溶剂，在超声发生方式为:超声波功率为120?140W，超声频率为28?30kHz，它激式超声发声，径向振动柱状换能器，间隔3min超声一次，每次超声6min，于35?45°C气升式搅拌条件下，超声提取，提取液用大孔树脂层析柱层析，乙醇洗脱，95%乙醇洗脱的洗脱液减压浓缩，再用100目硅胶柱层析，乙酸乙酯-甲醇混合液洗脱，收集273?310 min洗脱液，浓缩干燥，得到白色的贝母乙素。该方法步骤简单，提取时间缩短，提取效率较高，每公斤浙贝母花可以提取贝母乙素2.3克左右，且将贝母花充分利用，提高种植贝母的价值。
【具体实施方式】
[0006]以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
[0007]实施例1
将当日摘取的鲜贝母花(可以是浙贝母、川贝母等)风干后粉碎，过45?60目筛，得到贝母花粉末，IKg贝母花粉末装入超声萃取釜中，加入质量百分浓度0.5?1%乙酸水溶液18?20L，在超声发生方式为:超声波功率为128W，超声频率为30kHz，它激式超声发声，径向振动柱状换能器，间隔3min超声一次，每次超声6min，于42°C气升式搅拌条件下超声提取120min，过滤，得到贝母花提取液，提取液在压力为450?500Pa的条件下，减压浓缩120min，浓缩液用质量百分浓度5%氢氧化钠调节pH至10，在DlOl型大孔树脂层析柱层析，先以每小时两个柱床体积的流速用蒸馏水洗层析柱，洗至流出液无色，再用2个柱床体积的质量百分浓度50%乙醇洗层析柱，然后用8个柱床体积质量百分浓度95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱液，在450?500Pa的条件下减压浓缩30?45min，得到贝母浓缩液，贝母浓缩液用100目硅胶柱层析，每小时4?6柱床体积的流速用乙酸乙酯-甲醇(体积比17:2)洗脱，收集273?310 min洗脱液，浓缩干燥，得到白色化合物2.32克，该白色不定型化合物为贝母乙素，采用超高效液相色谱法-蒸发光散射法测定含量，纯度达到99.17%。
[0008]实施例2
与实施例1基本相同，所不同的只是超声波功率为120W，超声频率为28kHz，于45°C气升式搅拌条件下超声提取90min，贝母花提取液在压力为450?500Pa的条件下，减压浓缩90min，最后得到白色的贝母乙素2.28克。
[0009]实施例3
与实施例1基本相同，所不同的只是超声波功率为140W，超声频率为29kHz，于35°C气升式搅拌条件下超声提取lOOmin，贝母花提取液在压力为450?500Pa的条件下，减压浓缩lOOmin，最后得到白色的贝母乙素2.30克。
【主权项】
1.用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法，其特征在于步骤如下: a、将当日摘取的鲜贝母花风干后粉碎，过45?60目筛，得到贝母花粉末； b、将上述贝母花粉末装入超声萃取釜中，加入质量百分浓度0.5?1%乙酸水溶液，在超声发生方式为:超声波功率为120?140W，超声频率为28?30kHz，它激式超声发声，径向振动柱状换能器，间隔3min超声一次，每次超声6min，于35?45°C气升式搅拌条件下，超声提取90?120min，过滤，得到贝母花提取液，所述浙贝母花粉末与所述乙酸水溶液的质量体积比为I Kg: 18?20 L ； C、将贝母花提取液在压力为450?500Pa的条件下，减压浓缩90?120min，将浓缩液用质量百分浓度5%氢氧化钠调节pH至10，DlOl型大孔树脂层析柱层析，以每小时两个柱床体积的流速用蒸馏水洗层析柱，洗至流出液无色，再用2个柱床体积的质量百分浓度50%乙醇洗层析柱，然后用8个柱床体积的质量百分浓度95%乙醇洗脱，收集95%乙醇洗脱液，在450?500Pa的条件下减压浓缩30?45min，得到贝母浓缩液； d、贝母浓缩液用100目硅胶柱层析，每小时以4?6柱床体积流速用体积比17:2的乙酸乙酯-甲醇混合液洗脱，收集273?310 min洗脱液，浓缩干燥，得到白色的贝母乙素。2.如权利要求1所述的用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法，其特征在于步骤b中，超声波功率为128W，超声频率为30kHz，于42°C气升式搅拌条件下，超声提取120min，步骤c中，贝母花提取液在压力为450?500Pa的条件下，减压浓缩120min。3.如权利要求1所述的用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法，其特征在于步骤b中，超声波功率为140W，超声频率为29kHz，于35°C气升式搅拌条件下，超声提取lOOmin，步骤c中，贝母花提取液在压力为450?500Pa的条件下，减压浓缩lOOmin。
【专利摘要】本发明公开了用超声波从贝母花中提取贝母乙素的方法，贝母花粉末装在超声萃取釜中，用乙酸水溶液为溶剂，在超声发生方式为：超声波功率为120～140W，超声频率为28～30kHz，它激式超声发声，径向振动柱状换能器，间隔3min超声一次，每次超声6min，于35～45℃气升式搅拌条件下，超声提取，提取液用大孔树脂层析柱层析，乙醇洗脱，95%乙醇洗脱的洗脱液减压浓缩，再用100目硅胶柱层析，乙酸乙酯-甲醇混合液洗脱，收集273～310min洗脱液，浓缩干燥，得到白色的贝母乙素。该方法步骤简单，提取时间缩短，提取效率较高，每公斤浙贝母花可以提取贝母乙素2.3克左右，且将贝母花充分利用，提高种植贝母的价值。
【IPC分类】C07J71/00
【公开号】CN105218618
【申请号】CN201510676582
【发明人】阮晓, 王强
【申请人】浙江大学宁波理工学院
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月20日