专利名称：一种香叶木素的分离纯化方法
技术领域：
本发明属于中药提取技术领域，涉及一种香叶木素的分离纯化方法。
背景技术：
香叶木素(Diosmetin)，分子式为C16H12O6 ；分子量为300. 26，CAS登录号为 520-；34-3，熔点253-255°C ；主要存在于唇形科植物薄荷ife/ iAa haplocalyχ Briq.等多种植物中，结构式为
现代研究表明香叶木素有抗氧化、抗感染、抗休克、抗诱变和抗变应性特性等功效。现有技术中，尚没有香叶木素的工业化生产工艺报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的香叶木素的分离纯化方法。为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案
一种香叶木素的分离纯化方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成
(1)超临界萃取将提取过挥发油的薄荷全草投入超临界CO2萃取釜中，萃取压力为 20-30MPa，温度;M-45°C，0)2流量为l_3ml/g生药·π η，萃取时间60_180min，得到萃取物；
(2)大孔树脂吸附将萃取物用水溶解，通过大孔吸附树脂吸附，50-65%乙醇洗脱，收集3-6倍柱体积的洗脱液，减压回收乙醇，得到浓缩液；
(3)逆流萃取将浓缩液加酸调节pH至4-6，然后用混合溶剂进行多级逆流萃取，混合溶剂包括第一组分和第二组分，第一组分为乙酸乙酯，第二组分为甲醇、乙醇、丙酮或水中的任何一种；
(4)结晶干燥将分段收集到的萃取液合并，减压回收溶剂，冷藏析晶，加入甲醇重结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。步骤(2)中大孔吸附树脂选自D130、NKA-2、NKA-9、XAD-7HP、ADS-17、HPD600 型大孔吸附树脂中的一种。步骤(3)中调节pH所采用的酸为盐酸、磷酸、草酸、硫酸中的任何一种，多级逆流萃取级数为5-15级，第一组分和第二组分的混合比为10: (1-5)。
采用本发明方法制备香叶木素，能耗小、污染小、产品纯度高，有利于大生产操作。下面将结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不仅限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1
取提取过挥发油的薄荷全草20kg，投入超临界(X)2萃取釜中，萃取压力24MPa，温度 350C，CO2流量2mg/g生药·π η，萃取时间lOOmin，得到萃取物，加水溶解，通过HPD600大孔吸附树脂柱吸附，用65%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积的洗脱液，减压回收，得到浓缩液，加草酸调PH至4. 5，用比例为10:3的乙酸乙酯-甲醇混合溶剂进行10级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，冷藏析晶，加入甲醇重结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶4. 52g， 经IKMSjHNMR^CMffi分析为香叶木素，HPLC法检测，其纯度为95. 7%。实施例2:
取提取过挥发油的薄荷全草20kg，投入超临界(X)2萃取釜中，萃取压力21MPa，温度 400C，CO2流量3mg/g生药· min，萃取时间150min，得到萃取物，加水溶解，通过D130大孔吸附树脂柱吸附，用阳％乙醇洗脱，收集6倍量柱体积的洗脱液，减压回收，得到浓缩液，加稀盐酸调PH至5. 5，用比例为10:1的乙酸乙酯-水混合溶剂进行8级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，冷藏析晶，加入甲醇重结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶4. 26g, 经IR、MSjHNMR^CMffi分析为香叶木素，HPLC法检测，其纯度为96. 3%。实施例3:
取提取过挥发油的薄荷全草20kg，投入超临界(X)2萃取釜中，萃取压力^MPa,温度 380C，CO2流量lmg/g生药·π η，萃取时间90min，得到萃取物，加水溶解，通过NKA-2大孔吸附树脂柱吸附，用60%乙醇洗脱，收集3倍量柱体积的洗脱液，减压回收，得到浓缩液，加稀磷酸调PH至5. 0，用比例为10:5的乙酸乙酯-乙醇混合溶剂进行5级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，冷藏析晶，加入甲醇重结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶4. 33g， 经IR、MS、2HNMR、13CNMR分析为香叶木素，HPLC法检测，其纯度为92. 4%。实施例4:
取提取过挥发油的薄荷全草20kg，投入超临界(X)2萃取釜中，萃取压力23MPa，温度 420C，CO2流量3mg/g生药· min,萃取时间180min，得到萃取物，加水溶解，通过NKA-9大孔吸附树脂柱吸附，用50%乙醇洗脱，收集4倍量柱体积的洗脱液，减压回收，得到浓缩液，加稀硫酸调pH至4. 5，用比例为10 2的乙酸乙酯-丙酮混合溶剂进行6级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，冷藏析晶，加入甲醇重结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶4. 21g， 经IR、MSjHNMR^CMffi分析为香叶木素，HPLC法检测，其纯度为94. 5%。实施例5:
取提取过挥发油的薄荷全草20kg，投入超临界(X)2萃取釜中，萃取压力30MPa，温度 36 0C，CO2流量2mg/g生药·π η，萃取时间120min，得到萃取物，加水溶解，通过XAD-7HP大孔吸附树脂柱吸附，用60%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积的洗脱液，减压回收，得到浓缩液，加草酸调PH至4. 0，用比例为10:1的乙酸乙酯-甲醇混合溶剂进行15级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，冷藏析晶，加入甲醇重结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶4. 47g，经IR、MSjHNMR^CMffi分析为香叶木素，HPLC法检测，其纯度为93. 6%。
实施例6:
取提取过挥发油的薄荷全草20kg，投入超临界(X)2萃取釜中，萃取压力27MPa，温度 450C，CO2流量lmg/g生药· min,萃取时间60min，得到萃取物，加水溶解，通过ADS-17大孔吸附树脂柱吸附，用65%乙醇洗脱，收集6倍量柱体积的洗脱液，减压回收，得到浓缩液，加稀磷酸调PH至4. 5，用比例为10:2的乙酸乙酯-水混合溶剂进行12级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，冷藏析晶，加入甲醇重结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得黄色结晶4. 39g， 经IKMSjHNMR^CMffi分析为香叶木素，HPLC法检测，其纯度为95. H
权利要求
1.一种香叶木素的分离纯化方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成(1)超临界萃取将提取过挥发油的薄荷全草投入超临界CO2萃取釜中，萃取压力为 20-30MPa，温度;M-45°C，0)2流量为l_3ml/g生药·π η，萃取时间60_180min，得到萃取物；(2)大孔树脂吸附将萃取物用水溶解，通过大孔吸附树脂吸附，50-65%乙醇洗脱，收集3-6倍柱体积的洗脱液，减压回收乙醇，得到浓缩液；(3)逆流萃取将浓缩液加酸调节pH至4-6，然后用混合溶剂进行多级逆流萃取，混合溶剂包括第一组分和第二组分，第一组分为乙酸乙酯，第二组分为甲醇、乙醇、丙酮或水中的任何一种；(4)结晶干燥将分段收集到的萃取液合并，减压回收溶剂，冷藏析晶，加入甲醇重结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。
2.根据权利要求1所述的香叶木素的分离纯化方法，其特征在于步骤(2)中大孔吸附树脂选自D130、NKA-2、NKA-9、XAD-7HP、ADS-17, HPD600型大孔吸附树脂中的一种。
3.根据权利要求1所述的香叶木素的分离纯化方法，其特征在于步骤(3)中调节pH 所采用的酸为盐酸、磷酸、草酸、硫酸中的任何一种，多级逆流萃取级数为5-15级，第一组分和第二组分的混合比为10: (1-5)。
全文摘要
本发明公开了一种香叶木素的分离纯化方法，包括以下步骤以提取过挥发油的薄荷全草为原料，加入到CO2超临界萃取罐中萃取，得到萃取物，将萃取物用水溶液，通过大孔吸附树脂吸附，醇水溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，浓缩液用比例为的混合溶剂进行级逆流萃取，合并萃取液，减压回收溶剂，加入结晶，干燥即得。采用本方法分离纯化香叶木素，易于产业规模化、产品含量高。
文档编号C07D311/30GK102304113SQ201110187720
公开日2012年1月4日 申请日期2011年7月6日 优先权日2011年7月6日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司