专利名称：一种生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法
技术领域：
本发明涉及一种鱼皮胶原寡肽的制备方法，尤其涉及一种生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法。
背景技术：
鱼皮胶原寡肽由于其具有的药用价值而被人们开始重视，现有的提取方法主要是利用酶水解、活性炭脱色获得，但所得的鱼皮胶原寡肽水解溶液呈黄色，有明显的鱼皮异味，因此，应用受到限制。为了满足市场和消费者的需求，获得无异味、几乎无色的鱼皮胶原寡肽就必须一种新的方法。
发明内容
为了解决现有技术中的问题，本发明的目的是提供一种生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法。为达到上述目的，本发明所采用的技术手段是
一种生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法，其步骤包括
一、预处理将鱼皮刮去皮下脂肪，用清水洗净，放入绞肉机中绞成碎块，称量后装入水解罐，向罐内加入6 7倍质量软水，密闭后向水解罐夹层通入间接蒸汽，升温至116 118°C，蒸汽压力为O. 2 O. 3MPa，处理30min后关闭蒸汽阀门，向水解罐夹层通人冷却水，降低水解液温度至60 65°C，放料，过60目不锈钢筛网，收集滤液泵入另一水解釜，备用；
二、酶水解向水解罐夹层通入间接蒸汽，在搅拌下将罐内液体升温至60°C 65°C，用质量浓度为15%的NaOH溶液调节 pH值=8.5，保持35min后加入鱼皮质量O. 8%的碱性蛋白酶，和鱼皮质量的O. 5%的菠萝蛋白酶，水解温度50°C 55°C，搅拌机转速为130 150r/min,水解时间3 3. 5h ; 三、脱异味水解完成后，向水解罐夹层通入间接蒸汽，在搅拌下将罐内液体升温至95°C 100°C，保持10 15min灭酶活，然后向水解罐夹层通入冷却水，降低水解液温度至30°C 35°C，泵入萃取罐进行萃取脱异味处理；将磷酸三丁酯与正己烷按照2 1的体积比例混合均匀，制备成磷酸三丁酯萃取剂备用；向萃取罐中泵入磷酸三丁酯萃取剂，该萃取剂与水解液的体积比为1:2，搅拌处理3 5min后泵入分离器中静置分层20 25min，然后放出下层脱异味水解液，泵入萃取罐再次进行脱异味处理，其条件与第一次脱异味相同；
四、萃取剂再生将萃取有异味物质的磷酸三丁酯萃取剂重新泵入萃取罐，加入等体积、温度为40°C 50°C软水，搅拌反萃取lOmin，然后保温30min，放出下层反萃取液后再次加入软水，同法反萃取2次，获得再生磷酸三丁酯萃取剂，可再次用于脱异味处理；放出下层第二次脱异味水解液，泵入脱色罐，向脱色罐夹层通入间接蒸汽，使脱异味液升温至80°C 85°C，加入鱼皮质量10%的糖用活性炭，进行搅拌脱色处理30min ； 五、脱色浓缩处理完成后放料，进行真空过滤，收集脱色滤液进行真空减压浓缩，浓缩条件同本节鱼皮水解胶原寡肽制备，直至浓缩液可溶性固形物浓度为10% 15%时，泵入调配罐进行调配；
六、配料干燥在搅拌下向浓缩液中加入麦芽糊精或阿拉伯树胶添加剂，使其溶解并混合均匀，添加剂加入质量等于浓缩液中可溶性固形物质量或为其质量的2倍，最后泵入喷雾干燥机进行喷雾干燥，干燥进风温度130°C 150°C，出风温度75°C 80°C，喷雾离心机转速为12000r/min，获得无异味水解胶原寡肽。进一步的，所述步骤六中所得鱼皮胶原寡肽为白色流动性粉末，蛋白质含量50% 53%，水分5% 5. 5%，短肽平均分子量为250 750道尔顿。本发明的有益效果在于通过本方法制备鱼皮胶原寡肽为白色流动性粉末，蛋白质含量50% 53%，水分5% 5. 5%，短肽平均分子量为250 750D(道尔顿)；而且无异味、无异色，且制备方法简便，利于规模生产。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，以助于理解本发明的内容。实施例1
一种生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法，其步骤包括
一、预处理将Ikg鱼皮刮去皮下脂肪，用清水洗净，放入绞肉机中绞成碎块，称量后装入水解罐，向罐内加入6倍质量软水，密闭后向水解罐夹层通入间接蒸汽，升温至116°C，蒸汽压力为O. 2MPa，处理30min后关闭蒸汽阀门，向水解罐夹层通人冷却水，降低水解液温度至60°C，放料，过60目不锈钢筛网，收集滤液泵入另一水解釜，备用； 二、酶水解向水解罐夹层通入间接蒸汽，在搅拌下将罐内液体升温至60°C°C，用质量浓度为15%的NaOH溶液调节PH值=8. 5，保持35min后加入鱼皮质量0.8%的碱性蛋白酶，和鱼皮质量的O. 5 %的菠萝蛋白酶，水 解温度50°C V，搅拌机转速为130r/min，水解时间3h ； 三、脱异味水解完成后，向水解te夹层通入间接蒸汽，在揽祥下将te内液体升温至95 C，保持IOmin灭酶活，然后向水解罐夹层通入冷却水，降低水解液温度至30°C，泵入萃取罐进行萃取脱异味处理；将磷酸三丁酯与正己烷按照2 1的体积比例混合均匀，制备成磷酸三丁酯萃取剂备用；向萃取罐中泵入磷酸三丁酯萃取剂，该萃取剂与水解液的体积比为1:2，搅拌处理3min后泵入分离器中静置分层20min，然后放出下层脱异味水解液，泵入萃取罐再次进行脱异味处理，其条件与第一次脱异味相同；
四、萃取剂再生将萃取有异味物质的磷酸三丁酯萃取剂重新泵入萃取罐，加入等体积、温度为40°C软水,搅拌反萃取IOmin,然后保温30min,放出下层反萃取液后再次加入软水，同法反萃取2次，获得再生磷酸三丁酯萃取剂，可再次用于脱异味处理；放出下层第二次脱异味水解液，泵入脱色罐，向脱色罐夹层通入间接蒸汽，使脱异味液升温至80°C°C，力口入鱼皮质量10%的糖用活性炭，进行搅拌脱色处理30min ； 五、脱色浓缩处理完成后放料，进行真空过滤，收集脱色滤液进行真空减压浓缩，浓缩条件同本节鱼皮水解胶原寡肽制备，直至浓缩液可溶性固形物浓度为10%时，泵入调配罐进行调配；
六、配料干燥在搅拌下向浓缩液中加入麦芽糊精或阿拉伯树胶添加剂，使其溶解并混合均匀，添加剂加入质量等于浓缩液中可溶性固形物质量或为其质量的2倍，最后泵入喷雾干燥机进行喷雾干燥，干燥进风温度130°C°C，出风温度75°C，喷雾离心机转速为12000r/min,获得无异味水解胶原寡肽。
所得鱼皮胶原寡肽为白色流动性粉末，蛋白质含量50%，水分5. 5%，短肽平均分子量为250 750道尔顿。实施例2
一种生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法，其步骤包括
一、预处理将鱼皮3kg刮去皮下脂肪，用清水洗净，放入绞肉机中绞成碎块，称量后装入水解罐，向罐内加入7倍质量软水，密闭后向水解罐夹层通入间接蒸汽，升温至118°C，蒸汽压力为O. 3MPa，处理30min后关闭蒸汽阀门，向水解罐夹层通人冷却水，降低水解液温度至65°C，放料，过60目不锈钢筛网，收集滤液泵入另一水解釜，备用； 二、酶水解向水解罐夹层通入间接蒸汽，在搅拌下将罐内液体升温至65°C，用质量浓度为15%的NaOH溶液调节PH值=8. 5，保持35min后加入鱼皮质量0.8%的碱性蛋白酶，和鱼皮质量的O. 5 %的菠萝蛋白酶，水解温度55°C，搅拌机转速为150r/min，水解时间3. 5h ； 三、脱异味水解完成后，向水解te夹层通入间接蒸汽，在揽祥下将te内液体升温至100 C，保持15min灭酶活，然后向水解罐夹层通入冷却水，降低水解液温度至35°C，泵入萃取罐进行萃取脱异味处理；将磷酸三丁酯与正己烷按照2 1的体积比例混合均匀，制备成磷酸三丁酯萃取剂备用；向萃取罐中泵入磷酸三丁酯萃取剂，该萃取剂与水解液的体积比为1:2，搅拌处理5min后泵入分离器中静置分层25min，然后放出下层脱异味水解液，泵入萃取罐再次进行脱异味处理，其条件与第一次脱异味相同；
四、萃取剂再生将萃取有异味物质的磷酸三丁酯萃取剂重新泵入萃取罐，加入等体积、温度为50°C软水,搅拌反萃取IOmin,然后保温30min,放出下层反萃取液后再次加入软水，同法反萃取2次，获得再生磷酸三丁酯萃取剂，可再次用于脱异味处理；放出下层第二次脱异味水解液，泵入脱色罐，向脱色罐夹层通入间接蒸汽，使脱异味液升温至85°C，加入鱼皮质量10%的糖用活性炭，进行搅拌脱色处理30min ； 五、脱色浓缩处理完成后放料，进行真空过滤，收集脱色滤液进行真空减压浓缩，浓缩条件同本节鱼皮水解胶原寡肽制备，直至浓缩液可溶性固形物浓`度为15%时，泵入调配罐进行调配；
六、配料干燥在搅拌下向浓缩液中加入麦芽糊精或阿拉伯树胶添加剂，使其溶解并混合均匀，添加剂加入质量等于浓缩液中可溶性固形物质量或为其质量的2倍，最后泵入喷雾干燥机进行喷雾干燥，干燥进风温度150°C ,出风温度80°C,喷雾离心机转速为12000r/min,获得无异味水解胶原寡肽。所得鱼皮胶原寡肽为白色流动性粉末，蛋白质含量53%，水分5%，短肽平均分子量为250 750道尔顿。本发明的实施例所表述的，并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法，其特征在于，步骤包括 一、预处理将鱼皮刮去皮下脂肪，用清水洗净，放入绞肉机中绞成碎块，称量后装入水解罐，向罐内加入6 7倍质量软水，密闭后向水解罐夹层通入间接蒸汽，升温至116 118°C，蒸汽压力为O. 2 O. 3MPa，处理30min后关闭蒸汽阀门，向水解罐夹层通人冷却水，降低水解液温度至60 65°C，放料，过60目不锈钢筛网，收集滤液泵入另一水解釜，备用；二、酶水解向水解罐夹层通入间接蒸汽，在搅拌下将罐内液体升温至60°C 65°C，用质量浓度为15%的NaOH溶液调节pH值=8.5，保持35min后加入鱼皮质量O. 8%的碱性蛋白酶，和鱼皮质量的O. 5%的菠萝蛋白酶，水解温度50°C 55°C，搅拌机转速为130 150r/min,水解时间3 3. 5h ; 三、脱异味水解完成后，向水解罐夹层通入间接蒸汽，在搅拌下将罐内液体升温至95°C 100°C，保持10 15min灭酶活，然后向水解罐夹层通入冷却水，降低水解液温度至30°C 35°C，泵入萃取罐进行萃取脱异味处理；将磷酸三丁酯与正己烷按照2 1的体积比例混合均匀，制备成磷酸三丁酯萃取剂备用；向萃取罐中泵入磷酸三丁酯萃取剂，该萃取剂与水解液的体积比为1:2，搅拌处理3 5min后泵入分离器中静置分层20 25min，然后放出下层脱异味水解液，泵入萃取罐再次进行脱异味处理，其条件与第一次脱异味相同； 四、萃取剂再生将萃取有异味物质的磷酸三丁酯萃取剂重新泵入萃取罐，加入等体积、温度为40°C 50°C软水，搅拌反萃取lOmin，然后保温30min，放出下层反萃取液后再次加入软水，同法反萃取2次，获得再生磷酸三丁酯萃取剂，可再次用于脱异味处理；放出下层第二次脱异味水解液，泵入脱色罐，向脱色罐夹层通入间接蒸汽，使脱异味液升温至80°C 85°C，加入鱼皮质量10%的糖用活性炭，进行搅拌脱色处理30min ； 五、脱色浓缩处理完成后放料，进行真空过滤，收集脱色滤液进行真空减压浓缩，浓缩条件同本节鱼皮水解胶原寡肽制备，直至浓缩液可溶性固形物浓度为10% 15%时，泵入调配罐进行调配； 六、配料干燥在搅拌下向浓缩液中加入麦芽糊精或阿拉伯树胶添加剂，使其溶解并混合均匀，添加剂加入质量等于浓缩液中可溶性固形物质量或为其质量的2倍，最后泵入喷雾干燥机进行喷雾干燥，干燥进风温度130°C 150°C，出风温度75°C 80°C，喷雾离心机转速为12000r/min，获得无异味水解胶原寡肽。
2.根据权力要求I所述的生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法，其特征在于所述步骤六中所得鱼皮胶原寡肽为白色流动性粉末，蛋白质含量50% 53%，水分5% 5. 5%，短肽平均分子量为250 750道尔顿。
全文摘要
本发明公开了一种生物酶法制备鱼皮胶原寡肽的方法，其步骤包括一、预处理；二、酶水解；三、脱异味；四、萃取剂再生；五、脱色浓缩；六、配料干燥。通过本方法制备鱼皮胶原寡肽为白色流动性粉末，蛋白质含量50％～53％，水分5％～5.5％，短肽平均分子量为250～750D(道尔顿)；而且无异味、无异色，且制备方法简便，利于规模生产。
文档编号C07K1/14GK103060414SQ20131001303
公开日2013年4月24日 申请日期2013年1月15日 优先权日2013年1月15日
发明者曹荣军, 任宪君, 杨庆利, 孙杰, 武鑫, 刘少芳, 张秋艳, 金海明, 姚秀芬, 台文静 申请人:青岛贝尔特生物科技有限公司