专利名称：一种牙鲆用鱼蛋白寡肽的制作方法
技术领域：
本发明属于海水鱼类配合饲料添加剂，是促进牙鲆生长的一种促生长剂。
背景技术：
长期以来由于水产养殖和水产饲料中广泛使用抗生素、化学合成药物、激素等促生长保健剂，水产品中药物残留严重，不仅直接危害人体健康，而且水产品质下降，导致缺乏市场竞争力和信誉；细菌耐药性增强，耐药菌株增多，破坏生态环境等。随着鳗鱼、虾等水产品出口受阻事件的发生，消费者对食品的安全、卫生、健康等问题日益关注，对水产品品质的要求越来越高。加速开发，推广和应用新型安全高效的饲料原料，提高饲料和食品的安全与质量迫在眉睫。按照现代消化理论，寡肤可直接被消化道吸收，具有转运速度快，耗能低和不易饱和等特点，可消除与游离氨基酸的吸收竞争，大大地提高了蛋白的吸收利用率。由于鱼蛋白的氨基酸组成比例与人体肌肉组成极为接近，吸收利用率高，因而开发鱼蛋白寡肽引起人们广泛的兴趣。但是目前有关鱼蛋白寡肽的研究很少，将其应用到水产饲料中的报道很有限。王家林等(2006)以鱼蛋白寡肽替代饲料中12.6%的蛋白质配制成饲料喂养鲈鱼，发现其特定生长率和蛋白沉积率最高。刘峰等(2006)以鱼蛋白寡肽替代25%鱼粉蛋白，制成微颗粒饲料投喂大黄鱼的稚鱼，可明显地提高其成活率。 牙鲆属鲽形目，鲽亚目，鲆科，牙鲆属，是鲽形目中一种底栖肉食性鱼类，由于其肉质嫩、味道鲜美、营养丰富，深受人们喜爱，市场需求旺盛，经济价值较高。目前牙鲆的配合饲料主要使用硬颗粒饲料和膨化饲料，存在适口性差，生长速度慢等问题。以往有关牙鲆的绿色环保的促生长剂主要包括酶制剂、益生素、大豆低聚糖等，应用过程中会受到成本、工艺等方面的影响。利用鱼下脚料生产鱼蛋白寡肽作为牙鲆的促生长剂，既充分利用了资源，又减少了鱼粉的用量，能够明显促进牙鲆生长，提高了蛋白质的利用率。
发明内容
本发明的目的是通过在牙鲆饲料中添加 一 定比例、分子量范围《1000Da(>85%)的鱼蛋白寡肽，替代饲料中的蛋白质，以提高牙鲆的生长和成活率，提高蛋白质沉积率和饲料转化率。 为了解决背景技术中所存在的问题，本发明采用以下技术方案首先制备鱼蛋白寡肽。取新鲜冷冻的太平洋狭鳕下脚料，绞碎后升温至95t:保温l(rCmin灭菌，加入Alcalase蛋白酶和Flavourzyme蛋白酶，pH调至8. 5—9. 0，在55。C反应4小时。然后升温至95t:并保温10min进行蛋白酶灭活，粗滤分离骨剌，酶解液进一步三相离心分别获得可溶性蛋白寡肽水相、不溶性蛋白沉淀和鱼油，可溶性蛋白寡肽水相分别经lKDa和5Ka超滤膜超滤提纯，冷冻干燥后获得不同分子量范围的鱼蛋白寡肽粉。 将鱼蛋白寡肽加入饲料中，它是通过将鱼粉21 30% 、花生粕50% 、高筋粉10 12. 5% 、胆碱0. 5% 、卵磷脂0. 5% 、磷酸二氢钙1 % 、维生素预混料1 % 、矿物质预混料1 % 。各种原料按用量充分混匀后，加入鱼蛋白寡肽0 6.0%，再次混匀，变异系数《10%，再加入60g/kg的鱼油，充分混匀，以2%的褐藻酸钠做粘合剂，制粒后饲喂牙鲆。
本发明具有以下有益效果利用鱼类的下脚料生产鱼蛋白寡肽，改变其营养功效，
变动物下脚料为具有生物活性的肽蛋白，是一种资源丰富、价廉质优的肽蛋白制品，它不仅
为氮源沉积和利用提供氨基酸来源，而且所含的小肽能够迅速被吸收，缓解了肠壁细胞对
不同游离氨基酸摄入的竞争，提高蛋白质的合成效率；将研制的鱼蛋白寡肽添加到牙鲆配
合饲料中，不但可以促进其生长，而且改善了饲料的适口性，提高饲料转化率。
图1是本发明实验饲料配方的示意图； 图2是本发明实验期间牙鲆的生长及对饲料的利用的示意图； 图3是本发明牙鲆对四种饲料的消化率和蛋白净利用率及沉积率的示意图； 图4是本发明四种饲料对牙鲆鱼体化学组成的影响示意图。
具体实施例方式
本具体实施方式
采用以下技术方案 鱼蛋白寡肽的制作将新鲜冷冻的太平洋狭鳕鱼的下脚料经绞肉机绞碎后投入酶
反应器，升温至95"保温10°C min灭菌，再加水和蛋白酶混合，料水比1 : 1，采用Alcalase
酶E/S = 90AU+Flavourzyme酶E/S = 15000LAPU复合酶酶解方法，酶解温度55°C 、起始pH
=8.5、酶解3h，然后酶解液升温使蛋白酶灭活，粗滤分离骨剌，酶解液进一步三相离心分
别获得可溶性蛋白寡肽水相、不溶性蛋白沉淀和鱼油。 一部分可溶性蛋白寡肽水相经1K超
滤膜超滤提纯，喷雾干燥后获得蛋白寡肽粉，分子量《1000Da，另一部分可溶性蛋白寡肽水
相经5K超滤膜超滤提纯，喷雾干燥后获得蛋白寡肽粉，分子量1000-5000Da。 牙鲆用鱼蛋白寡肽的筛选先将满足牙鲆营养需求的主要原料混合均匀，然后
添加上述两种不同分子量组成的鱼蛋白寡肽粉，添加比例均为3%，再次混匀，变异系数
《10% ，再加入60g/kg的鱼油，充分混匀，以2%的褐藻酸钠做粘合剂，制粒后饲喂牙鲆。经
过两个月的生长实验，实验结束时通过比较生长率、成活率以及饲料效率的结果，进行综合
评定，发现分子量《1000Da的鱼蛋白寡肽的促生长效果优于另一种鱼蛋白寡肽。 鱼蛋白寡肽添加量的选择通过在牙鲆的配合饲料中添加不同含量的分子量
《1000Da的鱼蛋白寡肽，实验的饲料配方见图1，制成4组等氮饲料，进行了 3个月的喂养
试验，投喂试验结束时，测定牙鲆的生长情况、饲料利用状况以及蛋白质利用率。 参看图2中可看出牙鲆饲料中添加3.7%鱼蛋白寡肽的3号饲料增重效果最明显，
明显地高于其他三个组，但是成活率在各组之间差异不显著。添加3.7%鱼蛋白寡肽组的饲
料系数最低，明显的低于其他三组。肝体比在各组之间没有显著性差异。由此可见，鱼蛋白
寡肽的添加量为3. 7%，可以显著地提高鱼体增重率和饲料利用率。 参看图3为牙鲆对四种实验饲料的消化率和蛋白质净利用率及沉积率。从表中可 以看出，添加鱼蛋白寡肽使牙鲆对饲料的消化率提高，其中以添加量为3.7%，效果最明显。 同样添加鱼蛋白寡肽使牙鲆对饲料中的蛋白质净利用率明显高于未添加组，添加鱼蛋白寡 肽组中3. 7%和6%两组的蛋白质净利用率明显高于1. 2%组。牙鲆蛋白质沉积率以3. 7% 组最高，显著高于其他三组。
参看图4，试验结束时牙鲆的水分、脂肪和灰分含量各组之间差异不显著。使用添 加鱼蛋白寡肽的饲料喂养牙鲆，其蛋白质含量高于不添加组，但仅有3.7%组的体蛋白质含 量显著高于不添加组。 本具体实施方式
3号饲料喂养牙鲆的效果最好，它所添加鱼蛋白寡肽的组成为分 子量《1000Da( > 85% )，在牙鉀饲料中最佳添加量为3. 7%，可以明显地提高牙鉀的生长 率、饲料效率，增加蛋白质的净利用率和沉积率，同时鱼体蛋白质含量显著提高。
权利要求
一种牙鲆用鱼蛋白寡肽，其特征在于鱼蛋白寡肽是利用鳕鱼的下脚料生产的，在牙鲆饲料中添加一定比例、分子量范围≤1000Da(≥85％)的鱼蛋白寡肽，替代饲料中的蛋白质，以提高牙鲆的生长和成活率，提高蛋白质沉积率和饲料转化率，在牙鲆饲料中最佳添加量为3.7％，可以明显地提高牙鲆的生长率、饲料效率，增加蛋白质的净利用率和沉积率，同时鱼体蛋白质含量显著提高。
全文摘要
一种牙鲆用鱼蛋白寡肽，它涉及一种海水鱼类配合饲料添加剂。鱼蛋白寡肽是利用鳕鱼的下脚料生产的，在牙鲆饲料中添加一定比例、分子量范围≤1000Da(≥85％)的鱼蛋白寡肽，替代饲料中的蛋白质，以提高牙鲆的生长和成活率，提高蛋白质沉积率和饲料转化率，在牙鲆饲料中最佳添加量为3.7％，可以明显地提高牙鲆的生长率、饲料效率，增加蛋白质的净利用率和沉积率，同时鱼体蛋白质含量显著提高。
文档编号A23K1/10GK101715894SQ20091022344
公开日2010年6月2日 申请日期2009年11月16日 优先权日2009年11月16日
发明者姚洪波, 常青, 方伟, 梁萌青, 郑珂珂 申请人:中国水产科学研究院黄海水产研究所