一种牙鲆鱼块的保鲜方法
【专利摘要】一种牙鲆鱼块的保鲜方法，鲜活牙鲆用碎冰猝死，去头尾和内脏后，切成鱼块，鱼块用蒸馏水洗净，沥干表面水分；将凌枣黄酮和山楂黄酮溶解于水中，加入凌枣多糖溶液，超声波辅助溶解，配制成牙鲆保鲜剂；在室温下，将沥干水分后的鱼块浸泡在牙鲆保鲜剂中，并沥干表面水分，保鲜袋包装，置于4 ℃冷藏箱中贮藏。优点是：操作方法简单，保鲜效果好，对保鲜设备要求低，可有效延长冷藏牙鲆鱼块的货架期。
【专利说明】
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种牙鲆的保鲜方法，特别涉及一种牙鲆保鲜剂及冷藏牙鲆鱼块的保 鲜方法。
【背景技术】
[0002] 牙鲆（Para/icA级751 属鲽形目、牙鲆属，是我国主要的海水增养殖 鱼类之一，养殖品种主要有褐牙鲆、漠斑牙鲆和大西洋牙鲆。2012年，我国鲆鱼产量达到 11. 36万吨，在我国海水养殖鱼类中居第二位。牙鲆肉质细嫩，味道鲜美，鱼肉利用率高，是 低脂肪、高蛋白、富含维生素的比目鱼类，适宜做鱼片、鱼块等初步加工产品。鱼体死亡初 始阶段，组织蛋白酶被激活，内源性蛋白酶分解肌肉蛋白质，产生肽和游离氨基酸等物质， 在微生物的生长和代谢作用下，蛋白质、氨基酸及其它含氮物质进一步分解产生胺类、硫化 物、醛类和氨等小分子物质，从而使鱼体产生不良味道，引起鱼体新鲜度下降。牙鲆组织蛋 白酶活性较高，因此牙鲆鱼块等产品很容易腐败变质。
[0003] 目前，牙鲆保鲜方式多为冷冻等低温条件与保鲜剂结合进行保藏，对于保鲜设备 的要求条件较高，保鲜的应用容易受到局限。在进入销售阶段后，条件所限，常将冻鱼片或 整条鱼放置于碎冰上在超市等处售卖，在这种保鲜条件下，鱼经解冻后，容易发生蛋白变性 和汁液流失的现象，鱼体靠近空气的一侧也容易失水风干甚至脂肪氧化变黄，不利于保持 品质。
[0004] 凌枣又称铃枣，其果树耐寒、抗贫瘠，适应性强，是辽西地区的特色栽培品种，主要 分布在辽宁省凌源市。凌枣枣果富含多糖、氨基酸和多种维生素及矿物质。有研究表明，凌 枣中总黄酮含量为枣果之首，主要包括芦丁、槲皮素、金丝桃苷和黄酮-C-葡萄糖苷等黄酮 类化合物等。凌枣中多糖含量也较高，这些多糖和黄酮等生物活性物质具有很高的营养保 健价值，可起到消炎止咳、降血压、降血脂、增进冠状动脉血流量和防治冠心病、心绞痛等作 用，经常食用有增进人体健康的功效。
[0005] 山楂（CrateegttsBge.)通常是指蔷薇科山楂属植物的果实，分为山 里红和野山楂，其中，山里红也叫北山楂，在我国北方地区广泛栽培，是重要的药食同源植 物。山楂中富含有机酸、维生素、微量元素，原花青素和黄酮类化合物等营养和功能性组分。 目前，从山楂中分离得到60余种黄酮类化合物，主要包括以芹菜素和木犀草素为苷元的苷 类以及以芦丁、金丝桃苷和槲皮素为主的黄酮醇及氧苷类物质。山楂醇溶性提取物中富含 槲皮素和金丝桃苷等黄酮醇类物质。山楂黄酮类化合物具有降血脂、降血糖、预防肝损伤、 抗氧化及提高机体免疫力等生理活性，是山楂果实中主要的生物活性成分。
【发明内容】
[0006] 本发明要解决的技术问题是一种牙鲆鱼块的保鲜方法，操作方法简单，保鲜效果 好，对保鲜设备要求低，可有效延长冷藏牙鲆鱼块的货架期。
[0007] 本发明的技术解决方案是： 一种牙鲆鱼块的保鲜方法，其具体步骤如下： (1) 切块并清洗 鲜活牙鲆用碎冰粹死，去头尾和内脏后，切成重量为80g?120g的鱼块,鱼块用蒸馈 水洗净，浙干表面水分； (2) 牙鲆保鲜剂的配制 将凌枣黄酮和山楂黄酮溶解于40 °C?50 °C水中，加入凌枣多糖溶液，超声波辅助溶 解，配制成凌枣黄酮浓度为Ig/L?7g/L、山楂黄酮浓度为Ig/L?7g/L、凌枣多糖浓度 为2g/L?12g/L的牙鲆保鲜剂； (3) 保鲜剂浸泡 在室温下，将浙干水分后的鱼块浸泡在牙鲆保鲜剂中20min?60min,并浙干表面水 分，保鲜袋包装，置于4 °C冷藏箱中贮藏。
[0008] 所述的保鲜剂中凌枣黄酮浓度为Ig/L，山楂黄酮浓度为Ig/L，凌枣多糖浓度为 2g/L。
[0009] 所述的保鲜剂中凌枣黄酮浓度为4g/L，山楂黄酮浓度为4g/L，凌枣多糖浓度为 7g/L〇
[0010] 所述的保鲜剂中凌枣黄酮浓度为7g/L，山楂黄酮浓度为7g/L，凌枣多糖浓度为 12g/L。
[0011] 所述山楂黄酮是利用山楂粉进行提取，称取山楂果粉20g于烧瓶中，加入400mL 体积分数为80%的乙醇溶液，烧瓶置于超声波清洗器水槽中，连接冷凝管，在超声波功率为 400W和清洗槽中水温为70 °C条件下回流提取50min，减压抽滤提取液，滤液用旋转蒸发 仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干燥，得到山楂黄酮粗提物，将山楂黄酮粗提物经50mL 无水乙醇溶解后，过DlOl大孔树脂柱（40cmX2.6cm)，用体积分数为75%乙醇溶液洗 脱，收集洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥24h。采用液相色谱检测方法测得山楂黄酮 中芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为65. 5%，其中芦丁含量为44. 8%，金丝桃苷含量为19. 2%， 槲皮素含量为1. 5%。
[0012] 所述山楂粉是将山楂去核后60 °C烘干，然后用植物粉粹机粉碎。
[0013] 所述凌枣黄酮是利用凌枣粉进行提取，称取凌枣粉20g于烧瓶中，加入400mL去 离子水，将烧瓶置于超声波清洗器水槽中，连接冷凝管，在超声波功率为400W和水温为85 °〇条件下回流浸提40min，浸提液减压抽滤，得到滤液I和滤渣，滤渣中加入400mL体积 分数为70%乙醇溶液，在超声波清洗器中，在超声波功率为400W和水温75°C条件下回流 提取30min，减压抽滤提取液，得到滤液II，滤液II用旋转蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真 空冷冻干燥，得到凌枣黄酮粗提物，将凌枣黄酮粗提物经50mL无水乙醇溶解后，过AB8大 孔树脂柱（40cmX2.6cm)，用体积分数为60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，在旋转蒸发仪 中浓缩后冷冻干燥24h。液相色谱法检测凌枣黄酮中山楂芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为 68. 8%，其中芦丁含量为55. 1%，金丝桃苷含量为13. 2%，槲皮素含量为0. 5%。
[0014] 所述凌枣多糖是利用凌枣粉进行提取，称取凌枣粉20g于烧瓶中，加入400mL去 离子水，将烧瓶置于超声波清洗器水槽中，连接冷凝管，在超声波功率为400W和水温为85 °〇条件下回流浸提40min，浸提液减压抽滤，得到滤液I和滤渣，将浓缩后，用经浓缩滤液 I4倍体积的体积分数为95%乙醇溶液沉淀4h后，4000r/min离心15min，取沉淀，用 300mL去离子水复溶，得到的是粗多糖提取液；向粗多糖提取液中加入0.2g中性蛋白酶， 50 °C条件下酶解4h，然后100 °C灭酶5min, 4000r/min离心15min,取上清液，上清液 边搅拌边加入1200mL体积分数为95%乙醇溶液进行醇沉4h，4000r/min离心15min，取 沉淀，置于冷冻干燥机中干燥24h。用硫酸-苯酚法测定凌枣多糖中多糖含量为75. 2%。
[0015] 所述凌枣粉是将凌枣去核后60 °C烘干，然后用植物粉粹机粉碎。
[0016] 本发明的有益效果： 保鲜剂中以凌枣黄酮、山楂黄酮和凌枣多糖为主要保鲜成分，均为水果来源，提取溶剂 为乙醇和水，无毒，食用安全；山楂黄酮和凌枣黄酮组成中以芦丁和金丝桃苷等黄酮醇类化 合物为主，其结构中含有活性酚羟基，芦丁和槲皮素等黄酮类化合物对胰蛋白酶等蛋白酶 的催化活性有明显的抑制作用，将鱼块经凌枣黄酮、山楂黄酮和凌枣多糖浸泡后，部分黄酮 类物质可渗入到鱼块内部，部分附着在鱼块表面，可同时起到抑菌和抑制蛋白酶活性的作 用，延长了鱼块的货架期。而凌枣多糖粘度较高，加入了浓度为2g/L?12g/L凌枣多糖 的保鲜剂能很好的附着在鱼块表面，在鱼块表面形成一层保护膜，防止鱼块脱水和氧化，采 用保鲜剂浸泡后有效的避免了鱼块汁液损失。本发明中采用的保鲜剂原料来源广泛、纯天 然产物、成本低、使用方法简单，可有效延长冷藏牙鲆鱼块的货架期，货架期比冷藏方法和 单独使用凌枣多糖作保鲜剂并冷藏方法延长了 6d?8d，比单独使用凌枣黄酮和山楂黄酮 作保鲜剂或单独使用壳聚糖作保鲜剂后冷藏的货架期延长了 2d?4d。保鲜处理后的牙 鲆鱼块可直接放在冷藏箱中或置于碎冰上售卖，适合在超市菜场等地短期保鲜使用，对保 鲜设备要求低，操作方法简单，便于推广和应用。
【具体实施方式】
[0017] 下面通过具体实施例详细描述一下本发明的具体内容。
[0018] 本发明提供一种牙鲆鱼块的保鲜方法： 鲜活牙鲆碎冰粹死，去头尾和内脏后，切成均匀的鱼块，每份鱼块80g?120g,加蒸馈 水洗净，浙干表面水分；将切块并浙干水分后的鱼块浸泡在保鲜剂中20min?60min，并 浙干表面水分；将浸泡保鲜剂并浙水的鱼块用保鲜袋包装；将包装后的鱼块置于4 °C冷藏 箱中贮藏。
[0019] 所述保鲜剂包括山楂黄酮、凌枣黄酮、凌枣多糖和去离子水，保鲜剂中各成分体积 分数为凌枣黄酮浓度为Ig/L?7g/L、山楂黄酮浓度为Ig/L?7g/L和凌枣多糖浓度为 2g/L?12g/L。
[0020] 所述山楂黄酮按照如下步骤进行提取：首先将山楂去核后60 °C烘干，植物粉粹 机粉碎后，称取山楂果粉20g于烧瓶中，加入400mL体积分数为80%乙醇溶液，烧瓶置于超 声波清洗器中，上面连接冷凝管，在超声波功率为400W和清洗槽中水温为70 °C条件下回 流提取50min，减压抽滤提取液，滤液用旋转蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干燥， 得到山楂黄酮粗提物，将粗提物经50mL无水乙醇溶解后，过DlOl大孔树脂柱（40cmX 2. 6cm)，用体积分数为75%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥24h 即可，得到山楂黄酮。采用液相色谱检测方法测得山楂黄酮中芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量 为65. 5%，其中芦丁含量为44. 8%，金丝桃苷含量为19. 2%，槲皮素含量为1. 5%。
[0021] 所述凌枣黄酮和凌枣多糖按照如下步骤进行提取：凌枣去核后60 °C烘干，植物 粉粹机粉碎，得到凌枣粉，称取凌枣粉20g于烧瓶中，加入400mL去离子水，将烧瓶置于超 声波清洗器水槽中，连好冷凝管，在超声波功率为400W和水温为85 °C条件下回流浸提40 min，浸提液减压抽滤，得到滤液I和滤渣，滤渣中加入400mL70%乙醇溶液，在超声波清洗 器中，在超声波功率为400W和水温75 °C回流提取30min，减压抽滤提取液，得到滤液II， 滤液II用旋转蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干燥，得到凌枣黄酮粗提物，将粗提物 经50mL无水乙醇溶解后，过AB8大孔树脂柱（40cmX2.6cm)，60%乙醇溶液洗脱，收集 洗脱液，在旋转蒸发仪中浓缩后冷冻干燥24h即可的得到凌枣黄酮。液相色谱法检测凌枣 黄酮中山楂芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为68. 8%，其中芦丁含量为55. 1%，金丝桃苷含量 为13. 2%，槲皮素含量为0. 5%。
[0022] 取所述滤液I浓缩后，用体积分数为95%乙醇溶液沉淀4h，所述浓缩后滤液I与 乙醇溶液的体积比为1:4,然后在4000r/min离心15min，取沉淀，用300mL去离子水复 溶，得到的是粗多糖提取液。向粗多糖提取液中加入0.2g中性蛋白酶，50 °C条件下酶解 4h，然后100 °C灭酶5min，4000r/min离心15min，取上清液，上清液边搅拌边加入1200 mL体积分数为95%乙醇进行醇沉4h，4000r/min离心15min，取沉淀，置于冷冻干燥机中 干燥24h，得到纯化后凌枣多糖。用硫酸-苯酚法测定凌枣多糖中多糖含量为75. 2%。
[0023] 所述保鲜剂的制备：先将凌枣黄酮和山楂黄酮溶解于40 °C?50 °C热水中，再与 准备好的凌枣多糖溶液按照比例混合在一起，超声波辅助溶解，配制成凌枣黄酮浓度为1 g/L?7g/L、山楂黄酮浓度为Ig/L?7g/L、凌枣多糖浓度为2g/L?12g/L的保鲜剂。
[0024] 通过挥发性盐基氮（TVB-N值）和细菌总数来评价保鲜效果。挥发性盐基氮参 照SC/T2032-2007方法测定，细菌总数参照GB/T4789. 2-2008平板计数法测定。按照 GB18406. 4-2001(农产品安全质量-无公害水产品安全要求)规定：无公害水产品中TVB-N 值（mg/100 g)彡30,细菌总数彡IO6个/g。
[0025] 实施例1 (1)山楂黄酮提取 首先将山楂去核后60 °C烘干，植物粉粹机粉碎后，称取山楂果粉20g于烧瓶中，加入 400mL体积分数为80%乙醇溶液，烧瓶置于超声波清洗器中，上面连接冷凝管，在超声波功 率为400W和清洗槽中水温为70 °C条件下回流提取50min，减压抽滤提取液，滤液用旋转 蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干燥，得到山楂黄酮粗提物，将粗提物经50mL无水 乙醇溶解后，过DlOl大孔树脂柱（40cmX2. 6cm)，用体积分数为75%乙醇溶液洗脱，收 集洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥24h即可，得到山楂黄酮。采用液相色谱检测方 法测得山楂黄酮中芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为65. 5%，其中芦丁含量为44. 8%，金丝桃 苷含量为19. 2%，槲皮素含量为1. 5%。
[0026] (2)凌枣黄酮和凌枣多糖提取 凌枣去核后60 °C烘干，植物粉粹机粉碎，得到凌枣粉，称取凌枣粉20g于烧瓶中，力口 入400mL去离子水，将烧瓶置于超声波清洗器水槽中，连好冷凝管，在超声波功率为400W 和水温为85 °C条件下回流浸提40min，浸提液减压抽滤，得到滤液I和滤渣，滤渣中加入 400mL70%乙醇溶液，在超声波清洗器中，在超声波功率为400W和水温75 °C回流提取30 min，减压抽滤提取液，得到滤液II，滤液II用旋转蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干 燥，得到凌枣黄酮粗提物，将粗提物经50mL无水乙醇溶解后，过AB8大孔树脂柱（40cmX 2.6 cm)，60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，在旋转蒸发仪中浓缩后冷冻干燥24h即可得到凌 枣黄酮。液相色谱法检测凌枣黄酮中山楂芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为68. 8%，其中芦丁 含量为55. 1%，金丝桃苷含量为13. 2%，槲皮素含量为0. 5%。
[0027] 取所述滤液I浓缩后，用体积分数为95%乙醇溶液沉淀4h，所述浓缩后滤液I与 乙醇溶液的体积比为1:4,然后在4000r/min离心15min，取沉淀，用300mL去离子水复 溶，得到的是粗多糖提取液。向粗多糖提取液中加入0.2g中性蛋白酶，50 °C条件下酶解 4h，然后100 °C灭酶5min，4000r/min离心15min，取上清液，上清液边搅拌边加入1200 mL体积分数为95%乙醇进行醇沉4h，4000r/min离心15min，取沉淀，置于冷冻干燥机中 干燥24h，得到纯化后凌枣多糖。用硫酸-苯酚法测定凌枣多糖中多糖含量为75. 2%。
[0028] (3)牙鲆保鲜剂的配制 将凌枣黄酮和山楂黄酮溶解于40 °C?50 °C水中，加入凌枣多糖溶液，超声波辅助溶 解，配制凌枣黄酮浓度为Ig/L、山楂黄酮浓度为Ig/L、凌枣多糖浓度为2g/L的保鲜剂。
[0029] (4)牙鲆保鲜 将鲜活牙鲆采用碎冰粹死，去掉头尾和内脏后，切成均匀的鱼块，每份鱼块80g~120g，加蒸馏水洗净，浙干水分；将切块并浙干水分后的鱼块浸泡保鲜剂20min，并浙干表面水 分；将浸泡保鲜剂并浙水的鱼块用保鲜袋包装；将包装后的鱼块置于4 °C冷藏箱中贮藏。 通过挥发性盐基氮（TVB-N值）和细菌总数来评价保鲜效果。TVB-N值和细菌总数的测定结 果见表1和表2。
[0030] 实施例2 (1)山楂黄酮提取 首先将山楂去核后60 °C烘干，植物粉粹机粉碎后，称取山楂果粉20g于烧瓶中，加入 400mL体积分数为80%乙醇溶液，烧瓶置于超声波清洗器中，上面连接冷凝管，在超声波功 率为400W和清洗槽中水温为70 °C条件下回流提取50min，减压抽滤提取液，滤液用旋转 蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干燥，得到山楂黄酮粗提物，将粗提物经50mL无水 乙醇溶解后，过DlOl大孔树脂柱（40cmX2. 6cm)，用体积分数为75%乙醇溶液洗脱，收 集洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥24h即可，得到山楂黄酮。采用液相色谱检测方 法测得山楂黄酮中芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为65. 5%，其中芦丁含量为44. 8%，金丝桃 苷含量为19. 2%，槲皮素含量为1. 5%。
[0031] (2)凌枣黄酮和凌枣多糖提取 凌枣去核后60 °C烘干，植物粉粹机粉碎，得到凌枣粉，称取凌枣粉20g于烧瓶中，力口 入400mL去离子水，将烧瓶置于超声波清洗器水槽中，连好冷凝管，在超声波功率为400W 和水温为85 °C条件下回流浸提40min，浸提液减压抽滤，得到滤液I和滤渣，滤渣中加入 400mL70%乙醇溶液，在超声波清洗器中，在超声波功率为400W和水温75 °C回流提取30 min，减压抽滤提取液，得到滤液II，滤液II用旋转蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干 燥，得到凌枣黄酮粗提物，将粗提物经50mL无水乙醇溶解后，过AB8大孔树脂柱（40cmX 2.6 cm)，60%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，在旋转蒸发仪中浓缩后冷冻干燥24h即可得到凌 枣黄酮。液相色谱法检测凌枣黄酮中山楂芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为68. 8%，其中芦丁 含量为55. 1%，金丝桃苷含量为13. 2%，槲皮素含量为0. 5%。
[0032] 取所述滤液I浓缩后，用体积分数为95%乙醇溶液沉淀4h，所述浓缩后滤液I与 乙醇溶液的体积比为1:4,然后在4000r/min离心15min，取沉淀，用300mL去离子水复 溶，得到的是粗多糖提取液。向粗多糖提取液中加入0.2g中性蛋白酶，50 °C条件下酶解 4h，然后100°C灭酶5min，4000r/min离心15min，取上清液，上清液边搅拌边加入1200 mL体积分数为95%乙醇进行醇沉4h，4000r/min离心15min，取沉淀，置于冷冻干燥机中 干燥24h，得到纯化后凌枣多糖。用硫酸-苯酚法测定凌枣多糖中多糖含量为75. 2%。
[0033] (3)牙鲆保鲜剂的配制 将凌枣黄酮和山楂黄酮溶解于40 °C?50 °C水中，加入凌枣多糖溶液，超声波辅助溶 解，配制凌枣黄酮浓度为4g/L、山楂黄酮浓度为4g/L、凌枣多糖浓度为7g/L的保鲜剂。
[0034] (4)牙鲆保鲜 将鲜活牙鲆采用碎冰粹死，去掉头尾和内脏后，切成均匀的鱼块，每份鱼块80g~120g，加蒸馏水洗净，浙干水分；将切块并浙干水分后的鱼块浸泡保鲜剂40min，并浙干表面水 分；将浸泡保鲜剂并浙水的鱼块用保鲜袋包装；将包装后的鱼块置于4 °C冷藏箱中贮藏。 通过挥发性盐基氮（TVB-N值）和细菌总数来评价保鲜效果。TVB-N值和细菌总数的测定结 果见表1和表2。
[0035] 实施例3 (1)山楂黄酮提取 首先将山楂去核后60 °C烘干，植物粉粹机粉碎后，称取山楂果粉20g于烧瓶中，加入 400mL体积分数为80%乙醇溶液，烧瓶置于超声波清洗器中，上面连接冷凝管，在超声波功 率为400W和清洗槽中水温为70 °C条件下回流提取50min，减压抽滤提取液，滤液用旋转 蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干燥，得到山楂黄酮粗提物，将粗提物经50mL无水 乙醇溶解后，过DlOl大孔树脂柱（40cmX2. 6cm)，用体积分数为75%乙醇溶液洗脱，收 集洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥24h即可，得到山楂黄酮。采用液相色谱检测方 法测得山楂黄酮中芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为65. 5%，其中芦丁含量为44. 8%，金丝桃 苷含量为19. 2%，槲皮素含量为1. 5%。
[0036] (2)凌枣黄酮和凌枣多糖提取 凌枣去核后60 °C烘干，植物粉粹机粉碎，得到凌枣粉，称取凌枣粉20g于烧瓶中，力口 入400mL去离子水，将烧瓶置于超声波清洗器水槽中，连好冷凝管，在超声波功率为400W 和水温为85 °C条件下回流浸提40min，浸提液减压抽滤，得到滤液I和滤渣，滤渣中加入 400mL70%乙醇溶液，在超声波清洗器中，在超声波功率为400W和水温75 °C回流提取30 min，减压抽滤提取液，得到滤液II，滤液II用旋转蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干 燥，得到凌枣黄酮粗提物，将粗提物经50mL无水乙醇溶解后，过AB8大孔树脂柱（40cmX 2.6cm)，60%乙醇去离子水溶液洗脱，收集洗脱液，在旋转蒸发仪中浓缩后冷冻干燥24h即 可得到凌枣黄酮。液相色谱法检测凌枣黄酮中山楂芦丁、金丝桃苷和槲皮素总量为68. 8%， 其中芦丁含量为55. 1%，金丝桃苷含量为13. 2%，槲皮素含量为0. 5%。
[0037] 取所述滤液I浓缩后，用体积分数为95%乙醇溶液沉淀4h，所述浓缩后滤液I与 乙醇溶液的体积比为1:4,然后在4000r/min离心15min，取沉淀，用300mL去离子水复 溶，得到的是粗多糖提取液。向粗多糖提取液中加入0.2g中性蛋白酶，50 °C条件下酶解 4h，然后100 °C灭酶5min，4000r/min离心15min，取上清液，上清液边搅拌边加入1200 mL体积分数为95%乙醇进行醇沉4h，4000r/min离心15min，取沉淀，置于冷冻干燥机中 干燥24h，得到纯化后凌枣多糖。用硫酸-苯酚法测定凌枣多糖中多糖含量为75. 2%。
[0038] (3)牙鲆保鲜剂的配制 将凌枣黄酮和山楂黄酮溶解于40 °C?50 °C水中，加入凌枣多糖溶液，超声波辅助溶 解，配制凌枣黄酮浓度为7g/L、山楂黄酮浓度为7g/L、凌枣多糖浓度为12g/L保鲜剂。
[0039] (4)牙鲆保鲜 将鲜活牙鲆采用碎冰粹死，去掉头尾和内脏后，切成均匀的鱼块，每份鱼块80g~120g，加蒸馏水洗净，浙干水分；将切块并浙干水分后的鱼块浸泡保鲜剂60min，并浙干表面水 分；将浸泡保鲜剂并浙水的鱼块用保鲜袋包装；将包装后的鱼块置于4 °C冷藏箱中贮藏。 通过挥发性盐基氮（TVB-N值）和细菌总数来评价保鲜效果。TVB-N值和细菌总数的测定结 果见表1和表2。
[0040] 对照组1 将鲜活牙鲆采用碎冰粹死，去掉头尾和内脏后，切成均匀的鱼块，每份鱼块80g~120g，加蒸馏水洗净，浙干水分，将浙水的鱼块用保鲜袋包装；将包装后的鱼块置于4 °C冷藏 箱中贮藏。通过挥发性盐基氮（TVB-N值）和细菌总数来评价保鲜效果。TVB-N值和细菌总 数的测定结果见表1和表2。
[0041] 10.对照组 2: 将鲜活牙鲆采用碎冰粹死，去掉头尾和内脏后，切成均匀的鱼块，每份鱼块80g~120g，加蒸馏水洗净，浙干水分；配制保鲜剂，保鲜剂中凌枣黄酮浓度为7g/L、山楂黄酮浓度 为7g/L;将切块并浙干水分后的鱼块浸泡保鲜剂40min，并浙干表面水分；将浸泡保鲜剂 并浙水的鱼块用保鲜袋包装；将包装后的鱼块置于4 °C冷藏箱中贮藏。通过挥发性盐基氮 (TVB-N值）和细菌总数来评价保鲜效果。TVB-N值和细菌总数的测定结果见表1和表2。
[0042] 对照组3 将鲜活牙鲆采用碎冰粹死，去掉头尾和内脏后，切成均匀的鱼块，每份鱼块80g~120g，加蒸馏水洗净，浙干水分；配制保鲜剂，保鲜剂中凌枣多糖浓度为12g/L，将切块并浙干 水分后的鱼块浸泡保鲜剂40min，并浙干表面水分；将浸泡保鲜剂并浙水的鱼块用保鲜袋 包装；将包装后的鱼块置于4 °C冷藏箱中贮藏。通过挥发性盐基氮（TVB-N值)和细菌总数 来评价保鲜效果。TVB-N值和细菌总数的测定结果见表1和表2。
[0043] 对照组4 将鲜活牙鲆采用碎冰粹死，去掉头尾和内脏后，切成均匀的鱼块，每份鱼块80g~120g，加蒸馏水洗净，浙干水分；配制保鲜剂，保鲜剂中壳聚糖(脱乙酰度大于85%)浓度为10 g/L，乙酸浓度为2g/L，将切块并浙干水分后的鱼块涂膜保鲜剂，并浙干表面水分；将涂膜 保鲜剂并浙水的鱼块用保鲜袋包装；将包装后的鱼块置于4 °C冷藏箱中贮藏。通过挥发性 盐基氮（TVB-N值）和细菌总数来评价保鲜效果。TVB-N值和细菌总数的测定结果见表1和 表2。
【权利要求】
1. 一种牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：具体步骤如下： (1) 切块并清洗 鲜活牙鲆用碎冰粹死，去头尾和内脏后，切成重量为80g?120g的鱼块,鱼块用蒸馈水 洗净，浙干表面水分； (2) 牙鲆保鲜剂的配制 将凌枣黄酮和山楂黄酮溶解于40 °C?50 °C水中，加入凌枣多糖溶液，超声波辅助溶 解，配制成凌枣黄酮浓度为lg/L?7 g/L、山楂黄酮浓度为lg/L?7g/L、凌枣多糖浓度为 2g/L?12 g/L的牙鲆保鲜剂； (3) 保鲜剂浸泡 在室温下，将浙干水分后的鱼块浸泡在牙鲆保鲜剂中20 min?60 min,并浙干表面水 分，保鲜袋包装，置于4 °C冷藏箱中贮藏。
2. 根据权利要求1所述的牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：所述的保鲜剂中凌枣黄酮 浓度为1 g/L，山楂黄酮浓度为1 g/L，凌枣多糖浓度为2 g/L。
3. 根据权利要求1所述的牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：所述的保鲜剂中凌枣黄酮 浓度为4 g/L，山楂黄酮浓度为4 g/L，凌枣多糖浓度为7 g/L。
4. 根据权利要求1所述的牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：所述的保鲜剂中凌枣黄酮 浓度为7 g/L，山楂黄酮浓度为7 g/L，凌枣多糖浓度为12 g/L。
5. 根据权利要求1所述的牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：所述山楂黄酮是利用山楂 粉进行提取，称取山楂果粉20 g于烧瓶中，加入400 mL体积分数为80%的乙醇溶液，烧瓶 置于超声波清洗器水槽中，连接冷凝管，在超声波功率为400 W和清洗槽中水温为70 °C条 件下回流提取50 min，减压抽滤提取液，滤液用旋转蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻 干燥，得到山楂黄酮粗提物，将山楂黄酮粗提物经50 mL无水乙醇溶解后，过D101大孔树脂 柱，用体积分数为75%乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥24 h。
6. 根据权利要求1所述的牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：所述山楂粉是将山楂去核 后60 °C烘干，然后用植物粉粹机粉碎。
7. 根据权利要求1所述的牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：所述凌枣黄酮是利用凌枣 粉进行提取，称取凌枣粉20 g于烧瓶中，加入400 mL去离子水，将烧瓶置于超声波清洗器 水槽中，连接冷凝管，在超声波功率为400 W和水温为85 °C条件下回流浸提40 min，浸提 液减压抽滤，得到滤液I和滤渣，滤渣中加入400 mL体积分数为70%乙醇溶液，在超声波清 洗器中，在超声波功率为400 W和水温75°C条件下回流提取30 min，减压抽滤提取液，得到 滤液II，滤液II用旋转蒸发仪浓缩，取出浓缩液进行真空冷冻干燥，得到凌枣黄酮粗提物， 将凌枣黄酮粗提物经50 mL无水乙醇溶解后，过AB8大孔树脂柱，用体积分数为60%乙醇溶 液洗脱，收集洗脱液，用旋转蒸发仪浓缩后冷冻干燥24 h。
8. 根据权利要求1所述的牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：所述凌枣多糖是利用凌枣 粉进行提取，称取凌枣粉20 g于烧瓶中，加入400 mL去离子水，将烧瓶置于超声波清洗器 水槽中，连接冷凝管，在超声波功率为400 W和水温为85 °C条件下回流浸提40 min，浸提 液减压抽滤，得到滤液I和滤渣，将滤液I浓缩后，用体积分数为95%乙醇溶液沉淀4 h，所 述浓缩后滤液I与乙醇溶液的体积比为1:4,然后在4000 r/min离心15 min，取沉淀，用 300 mL去离子水复溶，得到的是粗多糖提取液；向粗多糖提取液中加入0.2 g中性蛋白酶， 50 °C条件下酶解4 h，然后100 °C灭酶5 min, 4000 r/min离心15 min,取上清液，上清液 边搅拌边加入1200 mL体积分数为95%乙醇溶液进行醇沉4 h，4000 r/min离心15 min，取 沉淀，置于冷冻干燥机中干燥24 h。
9.根据权利要求1所述的牙鲆鱼块的保鲜方法，其特征是：所述凌枣粉是将凌枣去核 后60 °C烘干，然后用植物粉粹机粉碎。
【文档编号】A23B4/06GK104472656SQ201410846001
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月31日 优先权日:2014年12月31日
【发明者】李秀霞, 励建荣, 孙协军, 蔡路昀, 李学鹏, 密更, 田鑫 申请人:渤海大学