具有昆虫拒食活性和生长抑制活性的化合物及其制备方法
【专利摘要】本发明属于医药【技术领域】，公开了从植物肉桂中分离提取的多种瑞诺烷二萜类化合物的活性及结构，提供了新瑞诺烷二萜化合物的分离制备方法。本发明揭示了该类化合物具有免疫抑制活性、昆虫拒食活性和生长抑制活性，其中具有免疫抑制活性的化合物表现为对ConA诱导的T细胞增殖有显著抑制作用，昆虫拒食活性和生长抑制活性表现为对甜菜夜蛾幼虫有拒食活性、对棉铃虫幼虫有拒食活性和对棉铃虫幼虫有生长抑制作用。这些化合物可用于制备免疫抑制、对昆虫有拒食活性和生长抑制活性的药物。
【专利说明】具有昆虫拒食活性和生长抑制活性的化合物及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药【技术领域】，涉及瑞诺烷二萜化合物1-11的分离制备方法及用途。 具体涉及分离纯化过程，结构确证，免疫抑制、昆虫拒食和生长抑制作用等。
【背景技术】
[0002] 自身免疫性疾病是仅次于心血管疾病和癌症的第三大疾病，目前已开发了大量的 免疫抑制药物，主要用于防止器官移植中的排斥反应和抑制某些自身免疫性疾病的进展 等。其中不少药物虽具有免疫抑制作用，但毒副作用强，容易造成全身性免疫抑制。寻找并 开发出高效低毒的免疫抑制先导化合物是世界医药学界的一项重大课题。最新的研究发 现，自身免疫性疾病和T细胞关系尤其密切。ConA能在体外刺激T细胞表面的受体，选择性 激活T细胞过度增殖，因此，利用ConA建立的脾T细胞的增殖模型可快速、高效的筛选免疫 抑制的化合物。
[0003] 甜菜夜蛾和棉铃虫都是世界范围内广泛分布的杂食性农业害虫，主要危害棉花、 玉米、大豆和蔬菜等作物。目前防治甜菜夜蛾和棉铃虫仍然主要依赖于化学农药，但大量不 合理地使用化学农药造成了土地、水、空气的污染，植物抗药性产生以及危害人体牲畜健康 等灾害性弊端。因而植物性农药的开发成为近年来的研究热点，植物中的杀虫物质主要是 次生代谢物质，不会污染环境，对农作物和生态环境相对安全，且昆虫也不易产生抗药性， 因此植物性农药的开发应用在当前"绿色食品"生产中发挥着越来越重要的作用。
[0004] 肉桂皮是樟科植物肉桂树（Cinnamomum cassia Presl (Lauraceae))的干燥树皮， 肉桂叶即为肉桂的干燥树叶。肉桂能调节人体免疫力，肉桂及其异瑞诺烷二萜具有抗补体 的活性，肉桂具能驱虫、净化空气，肉桂中有能使昆虫拒食的活性成分。
【发明内容】
：
[0005] 本发明的任务是提供肉桂中具有生物活性的化合物及其分离制备方法和应用。
[0006] 实现本发明的技术方案是：
[0007] 从肉桂中分离得到瑞诺烷二萜类化合物的方法包括以下步骤：
[0008] 将干燥肉桂皮粉碎，用乙醇室温提取，合并乙醇提取液并减压回收浓缩成浸膏，得 到总膏，热水将总膏分散至混悬状，依次用极性递增的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃 取，回收萃取液减压浓缩得乙酸乙酯部位，正丁醇部位，石油醚及氯仿部位去除。
[0009] 将乙酸乙酯部位进行硅胶柱层析，氯仿至甲醇梯度洗脱（氯仿/甲醇10:1-3:1)， 氯仿/甲醇6:1时得一段Fr. l，Fr. 1经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇9:1)得一部位，此部 位再经凝胶、制备液相纯化得到化合物1 ;
[0010] 将正丁醇部位进行硅胶柱层析，氯仿至甲醇梯度洗脱（氯仿/甲醇1〇: 1-3:1)，氯 仿/甲醇8:1时得Fr. 2,氯仿/甲醇6:1时得Fr. 3,氯仿/甲醇5:1时得Fr. 4,氯仿/甲 醇4:1时得Fr.5 ;Fr.2经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇9:1)得一部位，此部位再经凝胶、 制备液相纯化得到化合物4、5 ;Fr. 3经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇9:1-7:3)得二部位分 别为Fr. 3. l、Fr. 3. 2。Fr. 3. 1经硅胶、凝胶、制备液相纯化得到化合物2、6、7 ;Fr. 3. 2经凝 胶、制备液相纯化得到化合物8、9 ;Fr. 4经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇9:1)，再经硅胶、凝 胶、制备液相纯化得到化合物3、11 ;Fr. 5经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇8:2)得一部位， 此部位再经硅胶、凝胶、制备液相纯化得到化合物10。本发明分离得到的瑞诺烷二萜类化合 物1-11的结构式及名称见表1，分离流程见附图1。
[0011] 表1.本发明从肉桂中分离得到的瑞诺烷二萜类化合物1-11结构式
[0012]
【权利要求】
1. 具有以下化合物1、化合物2、化合物3或化合物4所示结构的化合物：
2. 从肉桂中分离得到下列化合物1所示结构化合物的方法，包括以下步骤：
步骤一：将干燥肉桂皮粉碎，用乙醇室温提取，合并乙醇提取液并减压回收浓缩成浸 膏，得到总膏，热水将总膏分散至混悬状，依次用极性递增的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁 醇萃取，回收萃取液减压浓缩得乙酸乙酯部位，正丁醇部位，石油醚及氯仿部位去除； 步骤二：将乙酸乙酯部位进行硅胶柱层析，氯仿至甲醇梯度洗脱（氯仿/甲醇 10:1-3:1)，氯仿/甲醇6:1时得一段Fr. 1，Fr. 1经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇9:1)得 一部位，此部位再经凝胶、制备液相纯化得到化合物1。
3. 从肉桂中分离得到下列瑞诺烷二萜类化合物2至11中的一种或多种的方法，包括以 下步骤：
步骤A :将权利要求2之步骤一中得到的正丁醇部位进行硅胶柱层析，氯仿至甲醇梯度 洗脱（氯仿/甲醇10:1-3:1)，氯仿/甲醇8:1时得Fr. 2,氯仿/甲醇6:1时得Fr. 3,氯仿 /甲醇5:1时得Fr. 4,氯仿/甲醇4:1时得Fr. 5 ; 步骤B:将Fr.2经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇9:1)得一部位，此部位再经凝胶、制 备液相纯化得到化合物4、5 ;或 将Fr. 3经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇9:1-7:3)得二部位分别为Fr. 3. 1、Fr. 3. 2 ; Fr. 3. 1经硅胶、凝胶、制备液相纯化得到化合物2、6、7 ;或Fr. 3. 2经凝胶、制备液相纯化得 到化合物8、9 ;或 将Fr. 4经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇9:1)，再经硅胶、凝胶、制备液相纯化得到化合 物3、11 ;或 将Fr. 5经过反相硅胶柱色谱（水/甲醇8:2)得一部位，此部位再经硅胶、凝胶、制备 液相纯化得到化合物10。
4. 具有以下化合物2所示结构的化合物在制备免疫抑制中的应用，
5. 具有以下化合物11所示结构式的化合物在制备免疫抑制中的应用，
6. 下列化合物1至化合物7中的任一种化合物在制备对昆虫有拒食活性和/或生长抑 制活性药物中的应用：
R 丨=0H，R，=H，R-;=H，R4=OH·R;=OH，R(1=OH， R1=H, R2= O-p-D-Glc； - R7=OH,R8=H； 化合物3
仆人物I /i Ri=OH,R2=H,R;;=H, R4=OH. Κ!=Η,Κ2=ΟΗ,Κ3=Η, R5=OH,R(1=OH,R7=H,Rs=H； R4=H,R5=H,R(1=H,R7=H,Rs=OH； 化合物5 化合物6
Ri=H,R2=0H,R：=H.R4=H,R5=H,R6=H,R7=H,Rs=0-G1c; 化合物7。
7. 根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的昆虫是棉铃虫或甜菜夜蛾。
8. 根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的昆虫是棉铃虫幼虫或甜菜夜蛾幼 虫。
9. 下列化合物1 (肉桂廠 F)、化合物2 (肉桂廠 G)和化合物4 (18-hydroxyperseanol) 中的一种在制备对甜菜夜蛾幼虫有拒食活性药物中的应用，
化合物2
R|=0H,R2=H,R：,=H, r4=oh,r5=oh,r(1=oh, R7=OH,Rs=H； 化合物4。
10.下列化合物1(肉桂廠 F)和化合物4(18-hydroxyperseanol)中的一种在制备对棉 铃虫幼虫有拒食活性药物中的应用，
【文档编号】C07H17/04GK104151323SQ201410369539
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2014年7月30日 优先权日:2014年7月30日
【发明者】张勇慧, 姚广民, 曾俊芬, 张锦文 申请人:华中科技大学