一种山楂叶多糖的提取方法
【专利摘要】本发明公开一种山楂叶多糖的提取方法。本发明采用超声波辅助提取山楂叶多糖的方法，以提取过黄酮的山楂叶粉为原料，加入水，超声波处理，离心，留取上清液，减压浓缩，用乙醇沉淀，静置、离心，沉淀物用水溶解，加入氯仿-正丁醇混合液，离心，留取上清液，减压浓缩，加入乙醇，静置、离心，取沉淀物，干燥得山楂叶多糖。本发明方法操作简单，提取时间短，能耗小，尤其适合制备山楂叶黄酮的厂家进行工业化生产，投入少，利润高；该方法可以有效地提取到具有较强抗氧化能力的山楂叶多糖。
【专利说明】一种山楂叶多糖的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种采用超声波辅助提取山楂叶多糖的方法，属于农副产品深加工领域。
【背景技术】
[0002]山楂叶是蔷薇科植物山里红(Crataeguspinnatifida Bunge Var.major N.E.Br)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.)的干燥叶。其味酸、性平，归肝经，具有活血化瘀、理气通脉的功效，已被《中国药典》(2005版)收载。目前，关于山楂叶黄酮的提取及活性研究较多，而且已广泛用于临床，例如以山楂叶黄酮为主要成分的益心片、胶囊、滴丸等制剂已被《中华人民共和国药典》收载。
[0003]多糖具有调节机体免疫力、抗肿瘤、抗氧化、降血糖、降血脂等作用，是保健食品的一种重要功能性添加剂。目前，有关山楂叶多糖的研究很少，且提取过黄酮的山楂叶粉含有丰富的多糖，都被当作废物处理。为了变废为宝，提高资源利用率，以提取过黄酮的山楂叶粉为原料，开发山楂叶多糖的提取技术具有重要的意义。目前，未见从提取过黄酮的山楂叶粉中提取多糖的报道。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种从提取过黄酮的山楂叶粉中用超声波辅助法提取山楂叶多糖的制备方法。该方法工艺简单，可操作性强，有效缩短提取时间，降低成本，提高了山楂叶资源利用率及其附加值。
[0005]本发明的目的是通过下述技术方案予以实现:
[0006]一种山楂叶多糖的提取方法，该方法包括以下步骤:
[0007]a、以提取过黄酮的山楂叶粉为原料，按照山楂叶粉与水质量之比为1: 10-40投料，超声波处理0.2-2小时，离心分离，上清液为山楂叶多糖提取液，沉淀物为山楂叶残渣，留取上清液，得第一次提取多糖液，沉淀物加水，加水量与第一次提取时加水量相同，超声波处理0.2-2小时，离心，留取上清液，得第二次提取多糖液，合并第一次和第二次提取多糖液；
[0008]b、将多糖液减压浓缩到多糖液体积的1/3-1/4，得浓缩液，于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4-5倍的乙醇，降温至0-4°C，静置10-15小时，离心，沉淀物为山楂叶多糖粗品；
[0009]C、取山楂 叶多糖粗品，加水完全溶解，依次加入氯仿和正丁醇，多糖溶液:氯仿:正丁醇的体积比为15: 4: 1，保持100-300转/小时振荡0.2-0.5小时后离心，取上清液，重复操作数次，直至无沉淀物出现为止，收集上清液，浓缩到上清液体积的1/3-1/4，得浓缩液；
[0010]d、于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4-5倍的乙醇，降温至0_4°C，静置10-15小时后离心，收集沉淀物，于50°C干燥，得山楂叶多糖。[0011]所述提取过黄酮的山楂叶粉的目数为12-8目。
[0012]所述提取过黄酮的山楂叶粉是山楂叶粉碎、过筛后，先用石油醚于50°C处理1-2小时，过滤，滤渣中加入60-80%乙醇，超声波处理，过滤，滤渣在50°C干燥即得提取过黄酮的山楂叶粉。
[0013]所述步骤b中减压浓缩条件是50-60°C、真空度< 0.1MPa。
[0014]本发明上述制备方法制得的山楂叶多糖具有一定的抗氧化活性。山楂叶多糖浓度为2mg/ml时，对1，1- 二苯基-2-三硝基苯肼的清除率可达59.67-63.55%。
[0015]本发明的优点和积极效果是:
[0016]1、本发明制备方法以提取过黄酮的山楂叶粉为原料，采用超声波辅助法制备山楂叶多糖，该方法操作简单，有效缩短提取时间，能耗小，成本低，尤其适合制备山楂叶黄酮的厂家进行工业化生产，不仅投入少，而且利润高。
[0017]3、本发明制备方法所制备的山楂叶多糖抗氧化活性较强。
【具体实施方式】
[0018]下面结合实施例，对本发明作进一步说明。
[0019]实施例1:
[0020]a、称取5g提取过黄酮的山楂叶粉，加水，水与山楂叶粉的质量之比为30: 1，超声波处理0.4小时，离心分离，上清液为山楂叶多糖提取液，沉淀物为山楂叶残渣，留取上清液，得第一次提取多糖液，沉淀物加水，加水量与第一次提取时加水量相同，超声波处理0.4小时，离心，留取上清液，得第二次提取多糖液，合并第一次和第二次提取多糖液；
`[0021]b、将多糖液减压浓缩到多糖液体积的1/4，得浓缩液，于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的乙醇，降温至0-4°C，静置10小时后离心，沉淀物为山楂叶多糖粗品;
[0022]C、取山楂叶多糖粗品，加水完全溶解，依次加入氯仿和正丁醇，多糖溶液:氯仿:正丁醇的体积比为15: 4: 1，保持100转/小时振荡0.25小时后离心，取上清液，重复操作数次，直至无沉淀物出现为止，收集上清液，浓缩到上清液体积的1/4，得浓缩液；
[0023]d、于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的乙醇，降温至0_4°C，静置10小时后离心，收集沉淀物，于50°C干燥，得山楂叶多糖。
[0024]山楂叶多糖的提取率为1.26% ;当以上述方法获得的山楂叶多糖浓度为2mg/mL时，对I，1-二苯基-2-三硝基苯肼的清除率为63.55%。
[0025]实施例2:
[0026]a、称取5g提取过黄酮的山楂叶粉，加水，水与山楂叶粉的质量之比为25: 1，超声波处理0.4小时，离心分离，上清液为山楂叶多糖提取液，沉淀物为山楂叶残渣，留取上清液，得第一次提取多糖液，沉淀物加水，加水量与第一次提取时加水量相同，超声波处理0.4小时，离心，留取上清液，得第二次提取多糖液，合并第一次和第二次提取多糖液；
[0027]b、将多糖液减压浓缩到多糖液体积的1/4，得浓缩液，于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的乙醇，降温至0-4°C，静置12小时后离心，沉淀物为山楂叶多糖粗品;
[0028]C、取山楂叶多糖粗品，加水完全溶解，依次加入氯仿和正丁醇，多糖溶液:氯仿:正丁醇的体积比为15: 4: 1，保持300转/小时振荡0.33小时后离心，取上清液，重复操作数次，直至无沉淀物出现为止，收集上清液，浓缩到上清液体积的1/3，得浓缩液；
[0029]d、于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积5倍的乙醇，降温至0_4°C，静置12小时后离心，收集沉淀物，于50°C干燥，得山楂叶多糖。
[0030]山楂叶多糖的提取率为2.16% ;当以上述方法获得的山楂叶多糖浓度为2mg/mL时，对I，1-二苯基-2-三硝基苯肼的清除率为62.12%。
[0031]实施例3:
[0032]a、称取5g提取过黄酮的山楂叶粉，加水，水与山楂叶粉的质量之比为35: 1，超声波处理0.3小时，离心分离，上清液为山楂叶多糖提取液，沉淀物为山楂叶残渣，留取上清液，得第一次提取多糖液，沉淀物加水，加水量与第一次提取时加水量相同，超声波处理0.3小时，离心，留取上清液，得第二次提取多糖液，合并第一次和第二次提取多糖液；
[0033]b、将多糖液减压浓缩到多糖液体积的1/4，得浓缩液，于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的乙醇，降温至0-4°C，静置11小时后离心，沉淀物为山楂叶多糖粗品;
[0034]C、取山楂叶 多糖粗品，加水完全溶解，依次加入氯仿和正丁醇，多糖溶液:氯仿:正丁醇的体积比为15: 4: 1，保持200转/小时振荡0.25小时后离心，取上清液，重复操作数次，直至无沉淀物出现为止，收集上清液，浓缩到上清液体积的1/4，得浓缩液；
[0035]d、于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4倍的乙醇，降温至0_4°C，静置11小时后离心，收集沉淀物，于50°C干燥，得山楂叶多糖。
[0036]山楂叶多糖的提取率为1.73% ;当以上述方法获得的山楂叶多糖浓度为2mg/mL时，对I，1-二苯基-2-三硝基苯肼的清除率为62.25%。
【权利要求】
1.一种山楂叶多糖的提取方法，其特征在于包括如下步骤: a、以提取过黄酮的山楂叶粉为原料，按照山楂叶粉与水质量之比为1: 10-40投料，超声波处理0.2-2小时，离心分离，上清液为山楂叶多糖提取液，沉淀物为山楂叶残渣，留取上清液，得第一次提取多糖液，沉淀物加水，加水量与第一次提取时加水量相同，超声波处理0.2-2小时，离心，留取上清液，得第二次提取多糖液，合并第一次和第二次提取多糖液； b、将多糖液减压浓缩到多糖液体积的1/3-1/4，得浓缩液，于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4-5倍的乙醇，降温至0-4°C，静置10-15小时后离心，沉淀物为山楂叶多糖粗品； C、取山楂叶多糖粗品，加水完全溶解，依次加入氯仿和正丁醇，多糖溶液:氯仿:正丁醇的体积比为15: 4: 1，保持100-300转/小时振荡0.2-0.5小时后离心，取上清液，重复操作数次，直至无沉淀物出现为止，收集上清液，浓缩到上清液体积的1/3-1/4，得浓缩液； d、于搅拌条件下，向浓缩液中加入浓缩液体积4-5倍的乙醇，降温至0-4°C，静置10-15小时后离心，收集沉淀物，于50°C干燥，得山楂叶多糖。
2.根据权利要求1所述的山楂叶多糖的提取方法，其特征在于步骤a中所述提取过黄酮的山楂叶粉的目数为12-8目。
3.根据权利要求1所述的山楂叶多糖的提取方法，其特征在于步骤a中所述提取过黄酮的山楂叶粉是山楂叶粉碎、过筛后,先用石油醚于50°C处理1-2小时，过滤，滤渣中加入60-80%乙醇，超声波处理，过滤，滤渣在50°C干燥即得提取过黄酮的山楂叶粉。
4.根据权利要求1所述的山楂叶多糖的提取方法，其特征在于所述步骤b中减压浓缩条件是50-60°C、真空度< 0.1MPa0
【文档编号】C08B37/00GK103641926SQ201310642028
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年12月5日 优先权日:2013年12月5日
【发明者】许瑞波, 马卫兴, 胡喜兰, 高颖颖, 万蓓蓓 申请人:淮海工学院