作为JAK抑制剂的联吡唑衍生物的制作方法与工艺

作为JAK抑制剂的联吡唑衍生物本申请要求2013年5月17日提交的美国临时申请号61/824,683的优先权，该临时申请以全文引用的方式并入本文。技术领域本发明提供联吡唑衍生物，以及其组合物和使用方法，其调节Janus激酶(JAK)的活性且可用于治疗与JAK活性有关的疾病，包括例如炎性病症、自体免疫病症、癌症以及其他疾病。背景蛋白激酶(Proteinkinase，PK)调节多种多样的生物过程，包括细胞生长、存活、分化、器官形成、形态发生、新血管生成、组织修复以及再生等。蛋白激酶还在许多人类疾病(包括癌症)中发挥专门作用。细胞因子(即低分子量多肽或糖蛋白)调节在对败血症的宿主发炎反应中所涉及的许多路径。细胞因子影响细胞分化、增殖以及活化，并且可以调节促炎反应与消炎反应两者，从而允许宿主适当地对病原体作出反应。多种细胞因子的信号传导涉及蛋白质酪氨酸激酶的Janus激酶家族(JAK)以及信号转导与转录活化蛋白(SignalTransducersandActivatorsofTranscription，STAT)。存在四种已知的哺乳动物JAK：JAKl(Janus激酶-1)、JAK2、JAK3(也称为白血球Janus激酶；JAKL；以及L-JAK)以及TYK2(蛋白质酪氨酸激酶2)。细胞因子刺激的免疫反应和发炎反应促成疾病的发病机制：诸如严重合并性免疫缺失病(severecombinedimmunodeficiency，SCID)的病理由免疫系统的抑制引起，而过度活化或不适当的免疫/发炎反应促成自体免疫疾病(例如，哮喘、全身性红斑狼疮、甲状腺炎、心肌炎)以及诸如硬皮病和骨关节炎的疾病的病理(Ortmann,R.A.,T.Cheng等人,(2000)ArthritisRes2(1):16-32)。JAK表达的缺乏与许多疾病状态有关联。举例来说，Jak1-/-小鼠出生时发育不全、无法进行护理且于围产期死亡(Rodig,S.J.,M.A.Meraz等人,(1998)Cell93(3):373-83)。Jak2-/-小鼠胚胎患贫血症且在交配后约12.5天因缺乏定向型红系造血(definitiveerythropoiesis)而死亡。据信JAK/STAT路径且特别是所有四种JAK在哮喘反应、慢性阻塞性肺病、支气管炎以及其他相关下呼吸道炎性疾病的发病机制中发挥作用。通过JAK进行信号传导的多种细胞因子已与上呼吸道炎性疾病/病状相关联，诸如累及鼻和窦的炎性疾病/病状(例如，鼻炎和窦炎)，不管是否是经典过敏反应。JAK/STAT路径亦已牵涉于眼部炎性疾病/病状和慢性过敏反应中。癌症中JAK/STAT的活化可因细胞因子刺激(例如IL-6或GM-CSF)或因JAK信号传导的诸如SOCS(抑制因子或细胞因子信号传导)或PIAS(活化STAT的蛋白质抑制剂)的内源性抑制因子减少而发生(Boudny,V.和Kovarik,J.,Neoplasm.49:349-355,2002)。STAT信号传导以及JAK下游的其他路径(例如，Akt)的活化已与许多癌症类型的不良预后相关(Bowman,T.等人,Oncogene19:2474-2488,2000)。升高水平的通过JAK/STAT进行信号传导的循环细胞因子在恶病质和/或慢性疲劳中发挥因果作用。因此，JAK抑制可能出于扩展超出潜在抗肿瘤活性的原因而有益于癌症患者。JAK2酪氨酸激酶可能有益于患有骨髓增生性病症(例如，真性红血球增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、髓样化生伴骨髓纤维变性(MMM))的患者(Levin等人,CancerCell,第7卷,2005:387-397)。JAK2V617F激酶的抑制减少造血细胞的增殖，表明JAK2作为针对患有PV、ET以及MMM的患者的药理学抑制的潜在标靶。JAK的抑制可能有益于罹患皮肤免疫病症(诸如牛皮癣)和皮肤致敏的患者。据信牛皮癣的维持除各种趋化因子和生长因子之外还取决于众多炎性细胞因子(JCI,113:1664-1675)，其中有许多通过JAK进行信号传导(AdvPharmacol.2000；47:113-74)。因此，持续需要用于开发旨在增强或抑制免疫和发炎路径的更有效的新型药物的抑制诸如JAK的激酶的新型或改进药剂(诸如用于器官移植的免疫抑制剂)，以及用于预防和治疗自体免疫疾病、涉及过度活跃的发炎反应的疾病(例如，湿疹)、过敏症、癌症(例如，前列腺癌、白血病、多发性骨髓瘤)以及一些由其他治疗剂引起的免疫反应(例如，皮疹或接触性皮炎或腹泻)的药剂。本发明化合物以及其组合物和本文所述的方法是针对于这些需要和其他目标。概述本发明尤其提供式I化合物：和其药学上可接受的盐；其中Y、Cy1、R1、R2、R7、R8、R9以及R10定义于下。本发明进一步提供组合物，其包含式I化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。本发明进一步提供调节JAK1的活性的方法，其包括使JAK1与式I化合物或其药学上可接受的盐接触。本发明进一步提供通过向患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐来治疗与患者的异常激酶表达或活性相关的疾病或病症的方法。本发明进一步提供治疗有需要的患者的自体免疫疾病、癌症、骨髓增生性病症、骨髓增生不良综合征(MDS)、炎性疾病、骨吸收疾病或器官移植排斥反应的方法，其包括向所述患者施用治疗有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。本发明还提供如本文所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗自体免疫疾病、癌症、骨髓增生性病症、骨髓增生不良综合征(MDS)、炎性疾病、骨吸收疾病或器官移植排斥反应。本发明进一步提供如本文所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其用于调节JAK1。本发明还提供如本文所述的式I化合物或其药学上可接受的盐用于制备用于调节JAK1的方法中的药物的用途。附图描述图1示出了实施例14的盐的XRPD图特性。图2示出了实施例15的盐的XRPD图特性。图3示出了实施例16的盐的XRPD图特性。图4A示出了实施例17的盐的DSC温谱图特性。图4B示出了实施例17的盐的TGA数据特性。图4C示出了实施例17的盐的XRPD图特性。图5A示出了实施例18的盐的DSC温谱图特性。图5B示出了实施例18的盐的TGA数据特性。图5C示出了实施例18的盐的XRPD图特性。图6示出了实施例19的盐的XRPD图特性。图7A示出了实施例20的盐的DSC温谱图特性。图7B示出了实施例20的盐的TGA数据特性。图7C示出了实施例20的盐的XRPD图特性。图8A示出了实施例21的盐的DSC温谱图特性。图8B示出了实施例21的盐的XRPD图特性。图9示出了实施例22的盐的XRPD图特性。详细描述本发明尤其提供式I化合物：或其药学上可接受的盐；其中：Cy1是苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基或哒嗪基，其各自任选由1、2、3或4个独立地选自以下的基团取代：R3、R4、R5以及R6；Y是N或CH；R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-7环烷基、C3-7环烷基-C1-3烷基、4-7元杂环烷基、4-7元杂环烷基-C1-3烷基、苯基、苯基-C1-3烷基、5-6元杂芳基或5-6元杂芳基-C1-3烷基，其各自任选由1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：氟代、氯代、C1-3烷基、-OH、-O(C1-3烷基)、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2、-NH(C1-3烷基)、-N(C1-3烷基)2、-C(＝O)N(C1-3烷基)2、-C(＝O)NH(C1-3烷基)、-C(＝O)NH2、-C(＝O)O(C1-3烷基)、-S(＝O)2(C1-3烷基)、-S(＝O)2(C3-6环烷基)、-C(＝O)(C3-6环烷基)以及-C(＝O)(C1-3烷基)；R2是H或C1-3烷基；其中所述C1-3烷基任选由1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：氟代、氯代、-OH、-O(C1-3烷基)、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、NH2、-NH(C1-3烷基)以及-N(C1-3烷基)2；或R1和R2与其所连接的氮原子一起形成4元、5元或6元杂环烷基环，其任选由1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：F、Cl、-OH、-O(C1-3烷基)、-CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、-NH2、-NH(C1-3烷基)、-N(C1-3烷基)2、-CH2CN以及-CH2OH；R3是H、F、Cl、-CN、C1-3烷基、C1-3氟代烷基、-O(C1-3烷基)或-O(C1-3氟代烷基)；R4是H、F、Cl、-CN、C1-3烷基、C1-3氟代烷基、-O(C1-3烷基)或-OC(C1-3氟代烷基)；R5是H、F、Cl、-CN、C1-3烷基、C1-3氟代烷基、-O(C1-3烷基)或-OC(C1-3氟代烷基)；R6是H、F、Cl、-CN、C1-3烷基、C1-3氟代烷基、-O(C1-3烷基)或-OC(C1-3氟代烷基)；R7是H、F、Cl、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、-NR17R17a、-NHC(＝O)R17b、-C(＝O)NR17aR17b、-NHS(＝O)2R17b或-S(＝O)2NR17aR17b，其中所述C1-3烷基任选由1、2或3个选自以下的取代基取代：F、Cl、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2、-NH(CH3)、-N(CH3)2、OH、-OCH3及-OCF3、-OCHF2以及-OCH2F；R8是H、F、Cl、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；R9是H、F、Cl、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、环丙基、-CN、-NH2、-NH(C1-3烷基)或-N(C1-3烷基)2，其中所述C1-3烷基任选由1、2或3个选自以下的取代基取代：F、氯代、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2以及OH；R10是H、F、Cl、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、环丙基、-CN、-NH2、-NH(C1-3烷基)或-N(C1-3烷基)2，其中所述C1-3烷基任选由1、2或3个选自以下的取代基取代：F、氯代、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2以及OH；R17是C1-6烷基、苯基或5-6元杂芳基，其各自任选由1、2、3或4个独立选择的R27取代基取代；R17a是H或C1-3烷基；R17b是任选由1、2或3个选自以下的取代基取代的C1-3烷基：F、氯代、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2、-NH(CH3)、-N(CH3)2、OH、-OCH3和-OCF3、-OCHF2以及-OCH2F；且各R27独立地选自卤代、-OH、NO2、-CN、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3卤代烷基、氰基-C1-3烷基、HO-C1-3烷基、CF3-C1-3羟基烷基、C1-3烷氧基-C1-3烷基、C3-7环烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、H2N-、(C1-3烷基)NH-、(C1-3烷基)2N-、HS-、C1-3烷基-S-、C1-3烷基-S(＝O)-、C1-3烷基-S(＝O)2-、氨甲酰基、C1-3烷基氨甲酰基、二(C1-3烷基)氨甲酰基、羧基、C1-3烷基-C(＝O)-、C1-4烷氧基-C(＝O)-、C1-3烷基-C(＝O)O-、C1-3烷基-C(＝O)NH-、C1-3烷基-S(＝O)2NH-、H2N-SO2-、C1-3烷基-NH-S(＝O)2-、(C1-3烷基)2N-S(＝O)2-、H2N-S(＝O)2NH-、C1-3烷基-NHS(＝O)2NH-、(C1-3烷基)2N-S(＝O)2NH-、H2N-C(＝O)NH-、C1-3烷基-NHC(＝O)NH-以及(C1-3烷基)2N-C(＝O)NH-。在一些实施方案中，所述化合物是式Ia化合物：或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物是式Ia化合物：或其药学上可接受的盐；其中：X是N或CR4；W是N或CR6；Y是N或CH；R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基、C3-6环烷基-C1-3烷基、4-6元杂环烷基或4-6元杂环烷基-C1-3烷基，其各自任选由1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：氟代、氯代、C1-3烷基、-OH、-O(C1-3烷基)、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2、-NH(C1-3烷基)、-N(C1-3烷基)2、-C(＝O)N(C1-3烷基)2、-C(＝O)NH(C1-3烷基)、-C(＝O)NH2、-C(＝O)O(C1-3烷基)、-S(＝O)2(C1-3烷基)、-S(＝O)2(C3-6环烷基)、-C(＝O)(C3-6环烷基)以及-C(＝O)(C1-3烷基)；R2是H或C1-3烷基；其中所述C1-3烷基任选由1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：氟代、氯代、-OH、-O(C1-3烷基)、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、NH2、-NH(C1-3烷基)以及-N(C1-3烷基)2；或R1和R2与其所连接的氮原子一起形成4元、5元或6元杂环烷基环，其任选由1、2或3个独立地选自以下的取代基取代：氯代、-OH、-O(C1-3烷基)、-CN、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、-NH2、-NH(C1-3烷基)、-N(C1-3烷基)2以及-CH2CN；R3是H、F、Cl、-CN、C1-3烷基、-OCF3、-CF3或-O(C1-3烷基)；R4是H、F、Cl、-CN、C1-3烷基或-O(C1-3烷基)；R5是H、F、Cl、-CN、C1-3烷基或-O(C1-3烷基)；R6是H、F、Cl、-CN或C1-3烷基；R7是H、F、Cl、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、-NR17R17a、-NHC(＝O)R17b、-C(＝O)NR17aR17b、-NHS(＝O)2R17b或-S(＝O)2NR17aR17b，其中所述C1-3烷基任选由1、2或3个选自以下的取代基取代：F、Cl、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2以及OH；R8是H、F、Cl、C1-3烷基或C1-3卤代烷基；R9是H、F、Cl、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、环丙基、-CN、-NH2、-NH(C1-3烷基)或-N(C1-3烷基)2，其中所述C1-3烷基任选由1、2或3个选自以下的取代基取代：F、氯代、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2以及OH；R10是H、F、Cl、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、环丙基、-CN、-NH2、-NH(C1-3烷基)或-N(C1-3烷基)2，其中所述C1-3烷基任选由1、2或3个选自以下的取代基取代：F、氯代、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2以及OH；R17是C1-6烷基、苯基或5-6元杂芳基，其各自任选由1、2、3或4个独立地选自R27的取代基取代；R17a是H或C1-3烷基；R17b是C1-3烷基，其任选由1、2或3个选自以下：的取代基取代F、氯代、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-NH2以及OH；且各R27独立地选自卤代、-OH、NO2、-CN、C1-3烷基、C2-3烯基、C2-3炔基、C1-3卤代烷基、氰基-C1-3烷基、HO-C1-3烷基、CF3-C1-3羟基烷基、C1-3烷氧基-C1-3烷基、C3-7环烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基、H2N-、(C1-3烷基)NH-、(C1-3烷基)2N-、HS-、C1-3烷基-S-、C1-3烷基-S(＝O)-、C1-3烷基-S(＝O)2-、氨甲酰基、C1-3烷基氨甲酰基、二(C1-3烷基)氨甲酰基、羧基、C1-3烷基-C(＝O)-、C1-4烷氧基-C(＝O)-、C1-3烷基-C(＝O)O-、C1-3烷基-C(＝O)NH-、C1-3烷基-S(＝O)2NH-、H2N-SO2-、C1-3烷基-NH-S(＝O)2-、(C1-3烷基)2N-S(＝O)2-、H2N-S(＝O)2NH-、C1-3烷基-NHS(＝O)2NH-、(C1-3烷基)2N-S(＝O)2NH-、H2N-C(＝O)NH-、C1-3烷基-NHC(＝O)NH-以及(C1-3烷基)2N-C(＝O)NH-。在一些实施方案中：R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代；R2是H或甲基；R3是H、F或Cl；R4是H或F；R5是H或F；R6是H或F；R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-；R8是H或甲基；R9是H、甲基或乙基；且R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，Y是N。在一些实施方案中，Y是CH。在一些实施方案中，X是N。在一些实施方案中，X是CR4。在一些实施方案中，R4是H或F。在一些实施方案中，R4是H。在一些实施方案中，R4是F。在一些实施方案中，W是N。在一些实施方案中，W是CR6。在一些实施方案中，R6是H、F或Cl。在一些实施方案中，R6是H或F。在一些实施方案中，R6是H。在一些实施方案中，R6是F。在一些实施方案中，R3是H或F。在一些实施方案中，R5是H或F。在一些实施方案中，R2是H或甲基。在一些实施方案中，R2是H。在一些实施方案中，R2是甲基。在一些实施方案中，R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代。在一些实施方案中，R1是异丙基、乙基、1-甲基丙基、2,2,2-三氟-1-甲基乙基、1-环丙基乙基、环丙基、1-三氟甲基环丙基、1-环丙基-2,2,2-三氟乙基、2,2,2-三氟乙基或2,2-二氟乙基。在一些实施方案中，R1是异丙基、乙基、1-甲基丙基或2,2,2-三氟-1-甲基乙基。在一些实施方案中，R1是异丙基在一些实施方案中，R1是乙基。在一些实施方案中，R1是1-甲基丙基。在一些实施方案中，R1是2,2,2-三氟-1-甲基乙基。在一些实施方案中，R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，R7是H。在一些实施方案中，R7是甲基。在一些实施方案中，R8是H或甲基。在一些实施方案中，R8是H。在一些实施方案中，R9是H、甲基或乙基。在一些实施方案中，R9是H。在一些实施方案中，R9是甲基。在一些实施方案中，R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，R10是H。在一些实施方案中，R10是甲基。在一些实施方案中，R10是乙基。在一些实施方案中，R10是HO-CH2-。在一些实施方案中，所述化合物是式II化合物：或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物是式III化合物：或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物是式IV化合物：或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物是式IIa化合物：或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物是式IIIa化合物：或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物是式IVa化合物：或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物是式Ia化合物或其药学上可接受的盐，其中：X是N或CR4；W是N或CR6；Y是N或CH；R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代；R2是H或甲基；R3是H、F或Cl；R4是H或F；R5是H或F；R6是H或F；R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-；R8是H或甲基；R9是H、甲基或乙基；且R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，所述化合物是式II化合物或其药学上可接受的盐，其中：R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代；R2是H或甲基；R3是H、F或Cl；R4是H或F；R5是H或F；R6是H或F；R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-；R8是H或甲基；R9是H、甲基或乙基；及R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，所述化合物是式III化合物或其药学上可接受的盐，其中：R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代；R2是H或甲基；R3是H、F或Cl；R4是H或F；R5是H或F；R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-；R8是H或甲基；R9是H、甲基或乙基；且R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，所述化合物是式IV化合物或其药学上可接受的盐，其中：R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代；R2是H或甲基；R3是H、F或Cl；R5是H或F；R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-；R8是H或甲基；R9是H、甲基或乙基；且R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，所述化合物是式IIa化合物或其药学上可接受的盐，其中：R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代；R2是H或甲基；R3是H、F或Cl；R4是H或F；R5是H或F；R6是H或F；R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-；R8是H或甲基；R9是H、甲基或乙基；及R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，所述化合物是式IIIa化合物或其药学上可接受的盐，其中：R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代；R2是H或甲基；R3是H、F或Cl；R4是H或F；R5是H或F；R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-；R8是H或甲基；R9是H、甲基或乙基；且R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，所述化合物是式IVa化合物，其中：R1是C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C3-6环烷基或C3-6环烷基-C1-3烷基，其中所述C1-6烷基、C3-6环烷基以及C3-6环烷基-C1-3烷基各自任选由1、2或3个独立地选自氟代、-CF3以及甲基的取代基取代；R2是H或甲基；R3是H、F或Cl；R5是H或F；R7是H、甲基、乙基或HO-CH2-；R8是H或甲基；R9是H、甲基或乙基；且R10是H、甲基、乙基或HO-CH2-。在一些实施方案中，本申请提供5-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供5-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供4-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基苯甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供4-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供4-[3-(1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)-3-(氰基甲基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供5-[3-(氰基甲基)-3-(3,3'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供5-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请5-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供5-[3-(氰基甲基)-3-(3-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供5-[3-(氰基甲基)-3-(3'-乙基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供4-{3-(氰基甲基)-3-[3'-(羟基甲基)-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供4-{3-(氰基甲基)-3-[3-(羟基甲基)-3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本申请提供选自以下的盐：4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐；4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺盐酸盐；4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺氢溴酸盐；以及4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺硫酸盐。在一些实施方案中，所述盐是4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐。在一些实施方案中，所述盐是1:1化学计量比的4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与磷酸。在一些实施方案中，所述盐是结晶的。在一些实施方案中，所述盐是大体上分离的。在一些实施方案中，所述盐是4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺盐酸盐。在一些实施方案中，所述盐是1:1化学计量比的4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与盐酸。在一些实施方案中，所述盐是结晶的。在一些实施方案中，所述盐是大体上分离的。在一些实施方案中，所述盐是4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺氢溴酸盐。在一些实施方案中，所述盐是1:1化学计量比的4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与氢溴酸。在一些实施方案中，所述盐是结晶的。在一些实施方案中，所述盐是大体上分离的。在一些实施方案中，所述盐是4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺硫酸盐。在一些实施方案中，所述盐是1:1化学计量比的4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与硫酸。在一些实施方案中，所述盐是结晶的。在一些实施方案中，所述盐是大体上分离的。在一些实施方案中，4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐由在约228℃下具有吸热峰的DSC温谱图表征。在一些实施方案中，所述磷酸盐具有大体上如图4A中所示的DSC温谱图。在一些实施方案中，所述磷酸盐具有选自约6.8°、约16.5°、约19.8°、约20.7°以及约23.6°的至少一个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述磷酸盐具有选自约6.8°、约16.5°、约19.8°、约20.7°以及约23.6°的至少两个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述磷酸盐具有选自约6.8°、约16.5°、约19.8°、约20.7°以及约23.6°的至少三个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述磷酸盐具有选自约6.8°、约16.5°、约19.8°、约20.7°以及约23.6°的至少四个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述磷酸盐具有大体上如图4C中所示的XRPD图。在一些实施方案中，4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺盐酸盐由在约213℃下具有吸热峰的DSC温谱图表征。在一些实施方案中，所述盐酸盐具有大体上如图5A中所示的DSC温谱图。在一些实施方案中，所述盐酸盐具有选自约7.0°、约12.1°、约13.7°、约14.8°、约15.5°、约16.6°、约17.1°、约19.7°、约20.4°、约20.8°、约23.9°、约24.7°、约25.1°、约25.7°、约27.4°以及约28.3°的至少一个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述盐酸盐具有选自约7.0°、约12.1°、约13.7°、约14.8°、约15.5°、约16.6°、约17.1°、约19.7°、约20.4°、约20.8°、约23.9°、约24.7°、约25.1°、约25.7°、约27.4°以及约28.3°的至少两个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述盐酸盐具有选自约7.0°、约12.1°、约13.7°、约14.8°、约15.5°、约16.6°、约17.1°、约19.7°、约20.4°、约20.8°、约23.9°、约24.7°、约25.1°、约25.7°、约27.4°以及约28.3°的至少三个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述盐酸盐具有选自约7.0°、约12.1°、约13.7°、约14.8°、约15.5°、约16.6°、约17.1°、约19.7°、约20.4°、约20.8°、约23.9°、约24.7°、约25.1°、约25.7°、约27.4°以及约28.3°的至少四个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述盐酸盐具有大体上如图5C中所示的XRPD图。在一些实施方案中，4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺氢溴酸盐由在约203℃下具有吸热峰的DSC温谱图表征。在一些实施方案中，所述氢溴酸盐具有大体上如图7A中所示的DSC温谱图。在一些实施方案中，所述氢溴酸盐具有选自约7.0°、约14.4°、约17.1°、约20.2°、约21.1°、约22.8°、约23.5°、约24.9°、约26.6°、约27.1°以及约28.2°的至少一个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述氢溴酸盐具有选自约7.0°、约14.4°、约17.1°、约20.2°、约21.1°、约22.8°、约23.5°、约24.9°、约26.6°、约27.1°以及约28.2°的至少两个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述氢溴酸盐具有选自约7.0°、约14.4°、约17.1°、约20.2°、约21.1°、约22.8°、约23.5°、约24.9°、约26.6°、约27.1°以及约28.2°的至少三个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述氢溴酸盐具有选自约7.0°、约14.4°、约17.1°、约20.2°、约21.1°、约22.8°、约23.5°、约24.9°、约26.6°、约27.1°以及约28.2°的至少四个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述氢溴酸盐具有大体上如图7C中所示的XRPD图。在一些实施方案中，4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺硫酸盐由在约259℃下具有吸热峰的DSC温谱图表征。在一些实施方案中，所述硫酸盐由在约136℃、约147℃及约259℃下具有三个吸热峰的DSC温谱图表征。在一些实施方案中，所述硫酸盐具有大体上如图8A中所示的DSC温谱图。在一些实施方案中，所述硫酸盐具有选自约7.3°、约14.7°、约9.9°、约19.0°、约19.6°、约21.3°以及约24.6°的至少一个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述硫酸盐具有选自约7.3°、约14.7°、约9.9°、约19.0°、约19.6°、约21.3°以及约24.6°的至少两个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述硫酸盐具有选自约7.3°、约14.7°、约9.9°、约19.0°、约19.6°、约21.3°以及约24.6°的至少三个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述硫酸盐具有选自约7.3°、约14.7°、约9.9°、约19.0°、约19.6°、约21.3°以及约24.6°的至少四个XRPD峰(以2θ计)。在一些实施方案中，所述硫酸盐具有大体上如图8B中所示的XRPD图。不同的晶形可具有不同的结晶晶格(例如，晶胞)并且因此通常具有不同的物理性质。可通过诸如X射线粉末衍射(XRPD)的固态表征方法来鉴别不同的盐形式。诸如示差扫描热分析(DSC)、热重分析(TGA)、动态气相吸附(DVS)等的其他表征方法进一步帮助鉴别形式以及帮助测定稳定性和溶剂/水含量。反射(峰)的XRPD图典型地视为特定晶形的指纹图。众所周知，XRPD峰的相对强度可尤其根据样品制备技术、晶体尺寸分布、所用的各种滤片、样品安装程序以及所用的特定仪器而广泛地改变。在一些情况下，视仪器类型或设置而定，可观测到新的峰或现有的峰可能消失。如本文所用，术语“峰”是指具有最大峰高度/强度的至少约4％的相对高度/强度的反射。此外，仪器变化和其他因素可能影响2θ值。因此，诸如本文所报导的峰赋值可在±约0.2°(2θ)范围内变化，且如在本文XRPD的上下文中所用的术语“大体上”和“约”意在涵盖上述变化。以相同的方式，视仪器、特定设置、样品制备等而定，结合DSC、TGA或其他热学实验的温度读数可在约±3℃范围内变化。因此，具有“大体上”如任何附图中所示的DSC温谱图的本文所报导的晶形或术语“约”应理解为适应此种变化。在一些实施方案中，本文所述的盐是大体上分离的。“大体上分离”意指化合物至少部分或大体上与形成或检测到所述化合物的环境分离开来。部分分离可包括例如富集本文所述的盐的组合物。大体上分离可包括含有至少约50重量％、至少约60重量％、至少约70重量％、至少约80重量％、至少约90重量％、至少约95重量％、至少约97重量％或至少约99重量％的本文所述的盐或其盐的组合物。用于分离化合物和其盐的方法是本领域中的常规方法。应了解，为清晰起见在独立实施方案的情形下描述的本发明的某些特征也可以组合形式提供于单个实施方案中(而所述实施方案意欲如同以多重相关形式书写一般组合)。相反地，为简洁起见在单个实施方案的情形下描述的本发明的各种特征也可单独提供或以任何合适的子组合形式提供。在本说明书中各处，本发明化合物的取代基以群组或范围形式公开。本发明尤其旨在包括此类群组和范围的成员的各个和每个单个子组合。举例来说，术语“C1-6烷基”尤其旨在单个地公开甲基、乙基、C3烷基、C4烷基、C5烷基以及C6烷基。在本说明书中各处，描述连接取代基。在结构清楚地需要连接基团的情况下，为所述基团所列出的马库什(Markush)变量应理解为连接基团。举例来说，若结构需要连接基团且所述变量的马库什基团定义列出“烷基”或“芳基”，则应理解为“烷基”或“芳基”分别表示连接亚烷基或亚芳基。在本说明书中各处，描述环(例如，“哌啶环”)。除非另外说明，否则这些环可在如由价态所允许的任何环成员处连接至分子的其余部分。举例来说，术语“2H-四氢吡喃环”可指2H-四氢吡喃-2-基、2H-四氢吡喃-3-基、2H-四氢吡喃-4-基环等。术语“n元”(其中n是整数)典型地描述成环原子数是n的部分中的成环原子数。举例来说，2H-四氢吡喃是6元杂环烷基环的实例，1H-1,2,4-三唑是5元杂芳基环的实例，吡啶是6元杂芳基环的实例，且1,2,3,4-四氢-萘是10元环烷基的实例。对于变量不止一次出现的本发明化合物来说，各变量可以是独立地选自定义所述变量的群组的不同部分。举例来说，在结构被描述为具有同时存在于同一化合物上的两个R基团的情况下，这两个R基团可表示独立地选自针对R所定义的群组的不同部分。在另一个实例中，当任选多个取代基被指定为以下形式时：则应了解，取代基R可在环上出现p次，且R在每次出现时可以是不同部分。应了解，各R基团可置换连接至环原子的任何氢原子，包括(CH2)n的一个或两个氢原子。此外，在上述实例中，若变量Q被定义为包括氢，诸如当Q是CH2、NH等时，任何变动的取代基(诸如，上述实例中的R)可置换Q变量的氢以及环的任何其他非变量组分中的氢。如本文所用，短语“任选取代的”意指未取代或取代。如本文所用，术语“取代的”意指氢原子被去除且由取代基置换。应了解，给定原子处的取代受价态限制。如本文所用，单独或与其他术语组合使用的术语“Cn-m烷基”是指具有n至m个碳原子的可以是直链或分支链的饱和烃基。在一些实施方案中，烷基含有1至6个、1至4个或1至3个碳原子。烷基部分的实例包括(但不限于)诸如以下化学基团：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基-1-丁基、3-戊基、正己基、1,2,2-三甲基丙基等。如本文所用，单独或与其他术语组合使用的术语“亚烷基”是指可以是分支链或直链的二价烷基连接基团，其中两个取代基可连接亚烷基连接基团的任何位置。亚烷基的实例包括(但不限于)乙-1,2-二基、丙-1,3-二基、丙-1,2-二基等。如本文所用，“Cn-m烯基”是指具有一个或多个碳碳双键且具有n至m个碳的烷基。在一些实施方案中，烯基部分含有2至3个碳原子。烯基的实例包括(但不限于)乙烯基、正丙烯基、异丙烯基、正丁烯基、仲丁烯基等。如本文所用，“Cn-m炔基”是指具有一个或多个碳碳参键且具有n至m个碳的烷基。炔基的实例包括(但不限于)乙炔基、丙炔-1-基、丙炔-2-基等。在一些实施方案中，炔基部分含有2至3个碳原子。如本文所用，单独或与其他术语组合使用的术语“C1-3烷氧基”是指式-O-烷基的基团，其中所述烷基具有1至3个碳。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基以及丙氧基(例如，正丙氧基和异丙氧基)。如本文所用，术语“CF3-C1-3羟基烷基”是指由一个CF3基团和一个OH基团取代的C1-3烷基。(C1-3烷基)2N-、(C1-3烷基)2N-S(＝O)2NH-和(C1-3烷基)2N-C(＝O)NH-中的C1-3基团可能相同或不同。如本文所用，术语“羧基”是指式-C(＝O)OH的基团。如本文所用，术语“氨甲酰基”是指式-C(＝O)-NH2的基团。如本文所用，术语“C1-3烷基氨甲酰基”是指式-C(＝O)-NH(烷基)的基团，其中所述烷基具有1至3个碳原子。如本文所用，术语“二(C1-3烷基)氨甲酰基”是指式-C(＝O)N(烷基)2的基团，其中所述两个烷基各独立地具有1至3个碳原子。如本文所用，术语“HO-Cn-m烷基”是指式-亚烷基-OH的基团，其中所述亚烷基具有n至m个碳原子。在一些实施方案中，亚烷基具有1至3个碳原子。如本文所用，术语“Co-p烷氧基-Cn-m烷基”是指式-亚烷基-O-烷基的基团，其中所述亚烷基具有n至m个碳原子且所述烷基具有o至p个碳原子。在一些实施方案中，烷基和亚烷基各独立地具有1至3个碳原子。如本文所用，单独或与其他术语组合使用的“卤代”或“卤素”包括氟代、氯代、溴代以及碘代。在一些实施方案中，卤代是氟代或氯代。如本文所用，单独或与其他术语组合使用的术语“Cn-m卤代烷基”是指具有至多{2(n至m)+1}个可能相同或不同的卤素原子的Cn-m烷基。在一些实施方案中，卤素原子是氟原子。在一些实施方案中，烷基具有1-6个或1-3个碳原子。卤代烷基的实例包括CF3、C2F5、CHF2、CCl3、CHCl2、C2Cl5等。在一些实施方案中，卤代烷基是氟代烷基。如本文所用，术语“C1-3氟代烷基”是指可能由氟原子部分或完全取代的C1-3烷基。如本文所用，“Cn-m卤代烷氧基”是指具有n至m个碳原子的式-O-卤代烷基的基团。卤代烷氧基的实例是OCF3。在一些实施方案中，卤代烷氧基仅是氟代的。在一些实施方案中，烷基具有1至6个或1至4个碳原子。如本文所用，术语“氰基-Cn-m烷基”是指由氰基取代的Cn-m烷基。在一些实施方案中，烷基具有1至3个碳原子。如本文所用，在部分的名称前出现术语“单环”指示所述部分具有单个环。如本文所用，术语“苯基烷基”是指式-亚烷基-苯基的基团。在一些实施方案中，苯基烷基是苯基-C1-3烷基。如本文所用，单独或与其他术语组合使用的术语“环烷基”是指非芳香族环烃部分，其可任选含有作为环结构的一部分的一个或多个亚烯基。环烷基可包括单环或多环(例如，具有2、3或4个稠环、螺环或桥环)环系统。环烷基定义中还包括具有一个或多个芳香族环与环烷基环稠合(即，与环烷基环共用一键)的部分，例如环戊烷、环戊烯、环己烷等的苯并衍生物。环烷基的一个或多个成环碳原子可氧化形成羰基键。在一些实施方案中，环烷基是3-7元环烷基，其为单环或双环。在一些实施方案中，环烷基是3-6或3-7元单环环烷基。示例性环烷基包括1,2,3,4-四氢-萘、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环戊烯基、环己烯基、环己二烯基、环庚三烯基、降冰片基、降蒎烷基、降蒈烷基、金刚烷基等。在一些实施方案中，环烷基是环丙基、环丁基、环戊基或环己基。如本文所用，术语“环烷基烷基”是指式-亚烷基-环烷基的基团。在一些实施方案中，环烷基烷基是C3-7环烷基-C1-3烷基，其中所述环烷基部分是单环。如本文所用，单独或与其他术语组合使用的术语“杂芳基”是指具有一个或多个选自氮、硫以及氧的杂原子环成员的单环或多环(例如，具有2、3或4个稠环)芳香族烃部分。在一些实施方案中，杂芳基是包含1至5个碳原子以及1、2、3或4个独立地选自氮、硫以及氧的杂原子环成员的单环或双环5-6元杂芳基。当杂芳基含有一个以上杂原子环成员时，所述杂原子可能相同或不同。杂芳基的实例包括(但不限于)吡啶、嘧啶、吡嗪、哒嗪、吡咯、吡唑、唑基、噁唑、噻唑、咪唑、呋喃、噻吩等。五元环杂芳基是具有含五个环原子的环的杂芳基，其中一个或多个(例如，1、2或3个)环原子独立地选自N、O以及S。示例性五元环杂芳基是噻吩基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡唑基、异噻唑基、异噁唑基、1,2,3-三唑基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-三唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,3,4-三唑基、1,3,4-噻二唑基以及1,3,4-噁二唑基。六元环杂芳基是具有含六个环原子的环的杂芳基，其中一个或多个(例如，1、2或3个)环原子独立地选自N、O以及S。示例性六元环杂芳基是吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、三嗪基以及哒嗪基。如本文所用，术语“杂芳基烷基”是指式-亚烷基-杂芳基的基团。在一些实施方案中，杂芳基烷基是5-6元杂芳基-C1-3烷基，其中所述杂芳基部分是单环的，包含1至5个碳原子以及1、2、3或4个独立地选自氮、硫及氧的杂原子环成员。如本文所用，单独或与其他术语组合使用的术语“杂环烷基”是指非芳香族环系统，其可任选含有作为环结构的一部分的一个或多个亚烯基或亚炔基，且其具有至少一个独立地选自氮、硫以及氧的杂原子环成员。当杂环烷基含有一个以上杂原子时，所述杂原子可能相同或不同。杂环烷基可包括单环或多环(例如，具有2、3或4个稠环、螺环或桥环)环系统。杂环烷基定义中还包括具有一个或多个芳香族环与非芳香族环稠合(即，与非芳香族环共用一键)的部分，例如，1,2,3,4-四氢-喹啉等。杂环烷基的一个或多个环中的碳原子或杂原子可氧化形成羰基或磺酰基(或其他氧化键)，或氮原子可为季铵化的。在一些实施方案中，杂环烷基是包含2-6个碳原子以及1、2、3或4个独立地选自氮、硫以及氧的杂原子环成员的单环4-7元杂环烷基。杂环烷基的实例包括氮杂环丁烷、氮杂环庚烷、吡咯烷、哌啶、哌嗪、吗啉、硫代吗啉、吡喃以及2-氧代-1,3-噁唑烷环。如本文所用，术语“杂环烷基烷基”是指式-亚烷基-杂环烷基的基团。在一些实施方案中，杂环烷基烷基是4-7元杂环烷基-C1-3烷基，其中所述杂环烷基部分是单环的，包含2-6个碳原子以及1、2、3或4个独立地选自氮、硫以及氧的杂原子环成员。本文所述的化合物可以是不对称的(例如，具有一个或多个立体异构中心)。除非另外说明，否则预期为所有立体异构物，诸如对映异构物和非对映异构物。含有不对称取代的碳原子的本发明化合物可以光学活性形式或外消旋形式分离。关于如何自无光学活性的起始物质制备光学活性形式的方法是本领域中已知的，诸如通过外消旋混合物的拆分或通过立体选择性合成。烯烃的许多几何异构物、C＝N双键等也可存在于本文所述的化合物中，且所有此类稳定异构物均涵盖于本发明中。描述了本发明化合物的顺式和反式几何异构物且其可以异构物混合物形式或以单独的异构形式分离。可通过本领域中已知的众多方法中的任何方法进行化合物的外消旋混合物的拆分。示例性方法包括使用手性拆分酸进行分步再结晶，所述手性拆分酸是光学活性的成盐有机酸。用于分步再结晶方法的合适的拆分剂是例如光学活性酸，诸如D和L形式的酒石酸、二乙酰基酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、扁桃酸、苹果酸、乳酸或各种光学活性樟脑磺酸(诸如，β-樟脑磺酸)。适用于分步结晶方法的其他拆分剂包括立体异构纯形式的α-甲基苄胺(例如，S和R形式，或非对映异构纯形式)、2-苯基甘氨醇、降麻黄碱、麻黄碱、N-甲基麻黄碱、环己基乙胺、1,2-二氨基环己烷等。还可通过在填充光学活性拆分剂(例如，二硝基苯甲酰基苯基甘氨酸)的柱子上洗脱来进行外消旋混合物的拆分。可由本领域技术人员确定合适的洗脱溶剂组成。本发明化合物还包括互变异构形式。互变异构形式源于单键与相邻双键的交换，同时伴随质子迁移。互变异构形式包括质子转移互变异构物，所述质子转移互变异构物是具有相同经验式和总电荷的异构质子化状态。示例性质子转移互变异构物包括酮-烯醇对、酰胺-酰亚胺酸对、内酰胺-内酰亚胺对、烯胺-亚胺对，以及质子可占据杂环系统中的两个或更多个位置的环状形式，例如，1H-咪唑和3H-咪唑；1H-1,2,4-三唑、2H-1,2,4-三唑和4H-1,2,4-三唑；1H-异吲哚和2H-异吲哚；以及1H-吡唑和2H-吡唑。互变异构形式可处于平衡状态或通过适当取代在空间上锁定为一种形式。举例来说，应认识到下列吡唑环可形成两种互变异构物：预期申请专利范围涵盖此两种互变异构物。本发明化合物还可包括出现于中间物或最终化合物中的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子数但质量数不同的那些原子。举例来说，氢的同位素包括氚和氘。在一些实施方案中，式I的氮杂环丁烷环中的1、2或3个CH2基团由CHD或CD2基团置换。在一些实施方案中，式I的哌啶环中的1、2或3个CH2或CH基团分别由CHD、CD2或CD基团置换。在一些实施方案中，式I的哌啶环中的1、2、3、4或5个CH2或CH基团分别由CHD、CD2或CD基团置换。如本文所用的术语“化合物”意欲包括所述结构的所有立体异构物、几何异构物、互变异构物以及同位素。此外，除非另外规定，否则本文中由名称或结构鉴别为一种特定互变异构形式的化合物意欲包括其他互变异构形式。可发现所有化合物和其药学上可接受的盐与诸如水和溶剂(例如，水合物和溶剂合物)的其他物质在一起或可分离出来。在一些实施方案中，本发明化合物或其盐是大体上分离的。“大体上分离的”意指化合物至少部分或大体上与形成或检测到所述化合物的环境分离开来。部分分离可包括例如富集本发明化合物的组合物。大体上分离可包括含有至少约50重量％、至少约60重量％、至少约70重量％、至少约80重量％、至少约90重量％、至少约95重量％、至少约97重量％或至少约99重量％的本发明化合物或其盐的组合物。用于分离化合物和其盐的方法是本领域中的常规方法。短语“药学上可接受”在本文中用于指在合理医学判断的范畴内、适于与人类和动物的组织接触使用而无过度毒性、刺激性、过敏反应或其他问题或并发症且与合理的效益/风险比相符的化合物、物质、组合物和/或剂型。如本文所用的表述“环境温度”和“室温”如本领域中所理解且一般是指大致为进行反应的室内温度的温度(例如反应温度)，例如，约20℃至约30℃的温度。本发明还包括本文所述化合物的药学上可接受的盐。如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中通过将现有的酸或碱部分转化为其盐形式而将母化合物改性。药学上可接受的盐的实例包括(但不限于)碱性残基(诸如胺)的无机酸盐或有机酸盐；酸性残基(诸如羧酸)的碱盐或有机盐；等。本发明的药学上可接受的盐包括例如由无毒无机酸或有机酸形成的母化合物的无毒盐。可通过常规化学方法从含有碱性或酸性部分的母化合物合成本发明的药学上可接受的盐。一般来说，可通过使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计算量的适当碱或酸于水或有机溶剂中或者二者的混合物中反应来制备此类盐；一般来说，非水性介质如醚、乙酸乙酯、醇(例如，甲醇、乙醇、异丙醇或丁醇)或乙腈(ACN)是优选的。合适的盐的列表见于Remington'sPharmaceuticalSciences,第17版,MackPublishingCompany,Easton,Pa.,1985,第1418页；和JournalofPharmaceuticalScience,66,2(1977)，其各自以全文引用的方式并入本文。在一些实施方案中，本文所述的化合物包括N-氧化物形式。合成本发明化合物(包括其盐)可使用已知有机合成技术进行制备且可根据众多可能的合成途径中的任一种(诸如下文流程中者)进行合成。可在合适的溶剂中进行用于制备本发明化合物的反应，所述合适溶剂可由有机合成领域技术人员容易地选择。合适的溶剂可以与起始物质(反应物)、中间物或产物在反应进行的温度下大体上不反应，所述温度可例如在溶剂的凝固温度至溶剂的沸腾温度的范围内。可于一种溶剂或一种以上溶剂的混合物中进行给定反应。视特定反应步骤而定，可由本领域技术人员选择用于特定反应步骤的合适溶剂。本发明化合物的制备可涉及各种化学基团的保护和去除保护。本领域技术人员可容易地确定对保护和去除保护的需求以及适当保护基的选择。保护基化学可见于例如Wuts和Greene,ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,第4版,JohnWiley&Sons:NewJersey,(2007)中，其以全文引用的方式并入本文。可根据本领域中已知的任何合适方法来监测反应。举例来说，可通过诸如核磁共振光谱法(例如，1H或13C)、红外光谱法、分光光度法(例如，UV-可见光)、质谱法的光谱手段，或通过诸如高效液相色谱法(HPLC)或薄层色谱法(TLC)的色谱法来监测产物形成。可通过与下文流程中类似的程序来合成式I化合物。可根据流程1中概述的方法来制备一系列联吡唑衍生物9。芳香族酸1宜通过使用诸如BOP、PyOP、HATU、HBTU、EDC或CDI的酰胺偶联试剂而转化为相应的酰胺2。可在诸如(但不限于)DMSO、二噁烷、DMF或NMP的合适溶剂中在诸如碳酸钾、碳酸铯或碳酸钠的碱存在下在加热条件下；或在铜催化的乌尔曼(Ullmann)型N-芳基化反应条件下，通过使用碘化铜(I)和碳酸钾；或在钯催化的C-N键形成反应条件下，使用xanthpos、BINAP或P(o-Tol)3作为配体且使用碳酸钾或碳酸铯作为碱，通过3-羟基氮杂环丁烷置换2中的离去基Hal(Hal可以是卤素、OTs或OTf)，产生化合物3。可通过3的斯文氧化(Swernoxidation)制备酮4，通过膦酸二(乙基)(氰基甲基)酯与酮4的维蒂希反应(Wittig'sreaction)可获得α,β-不饱和腈5。6与α,β-不饱和腈5的迈克尔加成(Michaeladdition)可得到硼酸酯7。硼酸酯7与合适的吡唑卤化物8的铃木偶联(Suzukicoupling)可得到相应的联吡唑衍生物9。流程1可根据流程2中概述的程序制备一系列硼酸酯衍生物7。6与α,β-不饱和腈10的迈克尔加成可得到硼酸酯11。可在酸条件下去除Boc基团，得到相应的胺12。在诸如(但不限于)乙腈、DMSO、二噁烷、DMF或NMP的合适溶剂中在诸如碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、许尼希碱(hunig'sbase)或DBU的碱的存在下在加热条件下通过12置换2中的离去基Hal可产生硼酸酯7。流程2可根据流程3中概述的方法制备一系列联吡唑衍生物21。可通过卤代-芳香族酯13与乙烯基硼酸酯的铃木偶联将所述卤代-芳香族酯13转化为相应的烯烃14。烯烃14可与适当取代的烯酮(诸如二氯烯酮)在2+2环加成下反应，得到二氯环丁酮15。在还原条件下(诸如锌于乙酸中，在加热条件下)，二氯环丁酮15可转化为环丁酮16。可通过使环丁酮16与霍纳尔-沃兹沃斯-埃蒙斯试剂(Horner-Wadsworth-Emmonsreagent)反应来形成α,β-不饱和腈17。在迈克尔加成条件中在偶联剂存在下硼酸酯6可与α,β-不饱和腈17反应，得到化合物18。硼酸酯18与合适的吡唑卤化物8的铃木偶联可得到相应的联吡唑19。酯19在碱性条件下水解，可得到酸20。可通过使用诸如BOP、PyBop、HATU、HBTU、EDC或CDI的酰胺偶联试剂使酸20与适当取代的胺偶联来合成酰胺21。流程3工艺本申请提供一种形成本文所述的盐的工艺，其包括使4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与选自磷酸、盐酸、氢溴酸以及硫酸的酸反应以形成其盐。在一些实施方案中，所述工艺利用以每当量的4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺计约0.55至1.5当量的酸。在一些实施方案中，所述工艺包括使4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与磷酸在溶剂组分中在高于室温的温度下反应以形成4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺的磷酸盐。在一些实施方案中，温度是约40℃至约70℃。在一些实施方案中，温度是约45℃至约55℃。在一些实施方案中，溶剂组分包含乙醇。在一些实施方案中，溶剂组分包含乙腈。在一些实施方案中，溶剂组分包含异丙醇。在一些实施方案中，溶剂组分包含甲醇。在一些实施方案中，溶剂组分包含甲醇和异丙醇。在一些实施方案中，溶剂组分包含甲醇、异丙醇以及正庚烷。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括将混合物冷却至室温且过滤以分离出盐。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括去除一部分溶剂以在所述过滤之前形成浓缩混合物。在一些实施方案中，通过蒸馏去除一部分溶剂。本申请进一步提供一种形成4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐的工艺，其包括使4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与磷酸在约40℃至约70℃的温度下在包含甲醇和异丙醇的溶剂组分中反应，形成包含4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐的磷酸盐的混合物。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括在约40℃至约70℃的温度下添加正庚烷至所述混合物中以形成第二混合物。在一些实施方案中，反应在约45℃至约55℃的温度下进行。在一些实施方案中，反应在约50℃的温度下进行。在一些实施方案中，本申请进一步提供一种制备4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐的工艺，其包括：(a)在约40℃至约70℃的温度下溶解4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐于甲醇中以形成第一混合物；(b)在约40℃至约70℃的温度下添加正庚烷至所述第一混合物中以形成第二混合物；以及(c)冷却所述第二混合物，得到4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐。在一些实施方案中，前述实施方案的工艺进一步包括在步骤(b)之前从第一混合物中蒸馏至少一部分甲醇。在一些实施方案中，前述实施方案的工艺进一步包括在步骤(c)之前从第二混合物中蒸馏至少一部分甲醇和/或正庚烷。在一些实施方案中，步骤(a)和(b)在约45℃至约55℃的温度下进行。在一些实施方案中，步骤(a)和(b)在约50℃的温度下进行。在一些实施方案中，所述工艺包括使4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与盐酸在溶剂组分中在高于室温的温度下反应以形成4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺的盐酸盐。在一些实施方案中，反应在大约室温的温度下进行。在一些实施方案中，溶剂组分包含2-丁醇。在一些实施方案中，溶剂组分包含异丙醇。在一些实施方案中，溶剂组分包含异丙醇和乙酸异丙酯。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括过滤以分离出盐。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括用甲基叔丁基醚洗涤所分离的盐。在一些实施方案中，所述工艺包括使4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与氢溴酸在溶剂组分中在高于室温的温度下反应以形成4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺的氢溴酸盐。在一些实施方案中，反应在大约室温的温度下进行。在一些实施方案中，溶剂组分包含异丙醇。在一些实施方案中，溶剂组分包含异丙醇和水。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括过滤以分离出盐。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括用甲基叔丁基醚洗涤所分离的盐。在一些实施方案中，所述工艺包括使4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺与硫酸在溶剂组分中反应以形成4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺的硫酸盐。在一些实施方案中，反应在大约室温的温度下进行。在一些实施方案中，溶剂组分包含异丙醇。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括过滤以分离出盐。在一些实施方案中，反应在约60℃的温度下进行。在一些实施方案中，溶剂组分包含异丙醇和水。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括冷却混合物至室温并过滤以分离出盐。在一些实施方案中，所述工艺进一步包括用甲基叔丁基醚洗涤所分离的盐。方法本发明化合物是JAK抑制剂，且本发明化合物中的大部分是JAK1选择性抑制剂。JAK1选择性抑制剂是相比于其他Janus激酶优先抑制JAK1活性的化合物。举例来说，相比于JAK2、JAK3以及TYK2中的一种或多种，本发明化合物优先抑制JAK1。在一些实施方案中，相比于JAK2，所述化合物优先抑制JAK1(例如，JAK1/JAK2IC50比率>1)。在一些实施方案中，所述化合物对JAK1的选择性相比于JAK2高约10倍。在一些实施方案中，所述化合物对JAK1的选择性相比于JAK2高约3倍、约5倍、约10倍、约15倍或约20倍，如通过在1mMATP下测量IC50所计算(例如，参见实施例A)。JAK1在许多细胞因子和生长因子信号传导路径中起到重要作用，当其失调时可引起或促成疾病状态。举例来说，IL-6水平在类风湿性关节炎中升高，在所述疾病中IL-6水平升高暗示具有不利作用(Fonesca,J.E.等人,AutoimmunityReviews,8:538-42,2009)。因为IL-6至少部分通过JAK1进行信号传导，所以预期直接或间接通过JAK1抑制来拮抗IL-6可提供临床效益(Guschin,D.,N.等人,EmboJ14:1421,1995；Smolen,J.S.等人,Lancet371:987,2008)。此外，在一些癌症中，JAK1突变，导致不合需要的构成性肿瘤细胞生长和存活(MullighanCG,ProcNatlAcadSciUSA.106:9414-8,2009；FlexE.等人,JExpMed.205:751-8,2008)。在其他自体免疫疾病和癌症中，启动JAK1的炎性细胞因子的全身水平升高也可促成疾病和/或相关症状。因此，患有此类疾病的患者可由JAK1抑制获益。JAK1的选择性抑制剂可能有效，同时避免抑制其他JAK激酶的不必要的潜在不良作用。相对于其他JAK激酶，JAK1的选择性抑制剂可具有优于选择性较小的抑制剂的多个治疗优势。关于针对JAK2的选择性，许多重要的细胞因子和生长因子通过JAK2进行信号传导，包括例如红血球生成素(Epo)和血小板生成素(Tpo)(ParganasE等人,Cell.93:385-95,1998)。Epo是红血球产生的关键生长因子；因此Epo依赖性信号传导的缺乏会导致红血球数量减少和贫血(KaushanskyK,NEJM354:2034-45,2006)。Tpo(JAK2依赖性生长因子的另一个实例)在控制巨核细胞(产生血小板的细胞)的增殖及和成熟中起到重要作用(KaushanskyK,NEJM354:2034-45,2006)。因此，Tpo信号传导减少将减小巨核细胞数目(巨核细胞减少症)且降低循环血小板计数(血小板减少症)。这会导致不希望和/或不可控制的出血。由于已经显示缺乏这些激酶的功能型式的人类罹患众多疾病，诸如严重合并性免疫缺失病或高免疫球蛋白E综合征，所以其他JAK(诸如，JAK3和Tyk2)抑制的减少也是所希望的(Minegishi,Y等人,Immunity25:745-55,2006；MacchiP等人,Nature.377:65-8,1995)。因此，就减少涉及免疫抑制、贫血以及血小板减少症的副作用来说，对其他JAK具有降低亲和力的JAK1抑制剂将具有显著优于选择性较小的抑制剂的优势。本发明的另一个方面是关于通过向需要此类治疗的个体施用治疗有效量或剂量的本发明化合物或其药物组合物来治疗所述个体(例如，患者)的JAK相关疾病或病症的方法。JAK相关疾病可包括直接或间接与JAK的表达或活性(包括过度表达和/或异常活性水平)有关联的任何疾病、病症或病状。JAK相关疾病还可包括可通过调节JAK活性来预防、改善或治愈的任何疾病、病症或病状。JAK相关疾病的实例包括涉及免疫系统的疾病，包括例如器官移植排斥反应(例如，同种异体移植排斥反应和移植物抗宿主疾病)。JAK相关疾病的其他实例包括自体免疫疾病，诸如多发性硬化症、类风湿性关节炎、幼年型关节炎、牛皮癣性关节炎、I型糖尿病、狼疮、牛皮癣、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病(Crohn'sdisease)、重症肌无力、免疫球蛋白肾病、心肌炎、自体免疫甲状腺病症、慢性阻塞性肺病(COPD)等。在一些实施方案中，自体免疫疾病是自体免疫大疱性皮肤病症，诸如寻常型天疱疮(PV)或大疱性类天疱疮(BP)。JAK相关疾病的其他实例包括过敏性病状，诸如哮喘、食物过敏、湿疹性皮炎、接触性皮炎、特应性皮炎(特应性湿疹)以及鼻炎。JAK相关疾病的其他实例包括病毒性疾病，诸如爱泼斯坦-巴尔病毒(EpsteinBarrVirus，EBV)、乙型肝炎、丙型肝炎、HIV、HTLV1、水痘-带状疱疹病毒(VZV)以及人类乳头状瘤病毒(HPV)。JAK相关疾病的其他实例包括与软骨转换相关的疾病，例如痛风性关节炎、败血性或感染性关节炎、反应性关节炎、反射交感性营养不良、痛性营养不良、泰齐综合征(Tietzesyndrome)、肋骨关节病、地方性变形性骨关节炎、姆塞莱尼氏病(Mselenidisease)、Handigodu病、由纤维肌痛引起的退化、全身性红斑狼疮、硬皮病或僵直性脊椎炎。JAK相关疾病的其他实例包括先天性软骨畸形，包括遗传性软骨溶解、软骨发育不全以及假软骨发育不全(例如，小耳畸形、大耳畸形以及干骺端软骨发育不全)。JAK相关疾病或病状的其他实例包括皮肤病症，诸如牛皮癣(例如，寻常型牛皮癣)、特应性皮炎、皮疹、皮肤刺激、皮肤致敏(例如，接触性皮炎或过敏性接触性皮炎)。举例来说，某些物质(包括一些药物)在局部施用时可能引起皮肤致敏。在一些实施方案中，共同施用或相继施用本发明的至少一种JAK抑制剂以及引起不需要的致敏的药剂可有助于治疗此类不需要的致敏或皮炎。在一些实施方案中，通过局部施用本发明的至少一种JAK抑制剂来治疗皮肤病症。在其他实施方案中，JAK相关疾病是癌症，包括以实体肿瘤为特征的癌症(例如，前列腺癌、肾癌、肝癌、胰脏癌、胃癌、乳癌、肺癌、头颈癌、甲状腺癌、成胶质细胞瘤、卡波西氏肉瘤(Kaposi'ssarcoma)、卡斯尔曼氏病(Castleman'sdisease)、子宫平滑肌肉瘤、黑色素瘤等)、血液科癌症(例如，淋巴瘤；白血病，诸如急性成淋巴细胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)；或多发性骨髓瘤)；以及皮肤癌(诸如皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)和皮肤B细胞淋巴瘤)。CTCL的实例包括塞扎里综合征(Sezarysyndrome)和蕈样真菌病。在一些实施方案中，本文所述的JAK抑制剂或与其他JAK抑制剂(诸如美国临时申请号11/637,545中所报导者，该临时申请以全文引用的方式并入本文)的组合可用于治疗炎症相关性癌症。在一些实施方案中，癌症与炎症性肠病有关。在一些实施方案中，炎症性肠病是溃疡性结肠炎。在一些实施方案中，炎症性肠病是克罗恩氏病。在一些实施方案中，炎症相关性癌症是结肠炎相关性癌症。在一些实施方案中，炎症相关性癌症是结肠癌或结肠直肠癌。在一些实施方案中，癌症是胃癌、胃肠癌样肿瘤、胃肠基质肿瘤(GIST)、腺癌、小肠癌或直肠癌。JAK相关疾病可进一步包括以下列各物的表达或CRLF2表达失调为特征的疾病：JAK2突变体，诸如在假性激酶结构域中具有至少一个突变的突变体(例如，JAK2V617F)；在假性激酶结构域外具有至少一个突变的JAK2突变体；JAK1突变体；JAK3突变体；红血球生成素受体(EPOR)突变体。JAK相关疾病可进一步包括骨髓增生性病症(MPD)，诸如真性红血球增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、髓样化生伴骨髓纤维变性(MMM)、原发性骨髓纤维变性(PMF)、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性骨髓单核细胞性白血病(CMML)、高嗜酸性粒细胞综合征(HES)、全身性肥大细胞疾病(SMCD)等。在一些实施方案中，骨髓增生性病症是骨髓纤维变性(例如，原发性骨髓纤维变性(PMF)或真性红血球增多症/原发性血小板增多症后骨髓纤维变性(Post-PV/ETMF))。在一些实施方案中，骨髓增生性病症是原发性血小板增多症后骨髓纤维变性(Post-ETMF)。在一些实施方案中，骨髓增生性病症是真性红血球增多症后骨髓纤维变性(Post-PVMF)。在一些实施方案中，本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗有需要的患者的骨髓增生不良综合征(MDS)。在一些实施方案中，所述患者依赖于红血球输注。如本文所用，骨髓增生不良综合征意欲涵盖以主要骨髓细胞谱系中的一种或多种的无效造血为特征的异质性和克隆性造血功能障碍。骨髓增生不良综合征与骨髓衰竭、外周血细胞减少症以及进展成急性骨髓性白血病(AML)的倾向有关。此外，可在约50％的MDS病例中检测到克隆细胞遗传学异常。世界卫生组织(WHO)联合血液病理学会(SH)和欧洲血液病理协会(EAHP)于1997年提出对于造血系肿瘤的新分类法(Harris等人,JClinOncol1999；17:3835-3849；Vardiman等人,Blood2002；100:2292-2302)。对于MDS，WHO不仅利用来自法-美-英(French-American-British，FAB)分类法的形态学准则，且还合并了可用的遗传、生物以及临床特征来定义MDS的子集(Bennett等人,BrJHaematol1982；51:189-199)。2008年，MDS的WHO分类法(表1)被进一步改进以通过合并新的临床和科学信息来实现单谱系发育不良的精确且预后相关的子分类(Vardiman等人,Blood2009；114:937-951；Swerdlow等人,WHOClassificationofTumoursofHaematopoieticandLymphoidTissues.第4版.LyonFrance:IARCPress；2008:88-103；Bunning和Germing,“Myelodysplasticsyndromes/neoplasms”,第5章,Swerdlow等人编,WHOClassificationofTumoursofHaematopoieticandLymphoidTissues.(版本：第4版):Lyon,France:IARCPress；2008:88-103)。表1.重新骨髓增生不良综合征的2008WHO分类在一些实施方案中，骨髓增生不良综合征是难治性血细胞减少伴单谱系发育不良(RCUD)。在一些实施方案中，骨髓增生不良综合征是难治性贫血伴环状铁粒幼细胞增多(RARS)。在一些实施方案中，骨髓增生不良综合征是难治性血细胞减少伴多谱系发育不良。在一些实施方案中，骨髓增生不良综合征是难治性贫血伴1型原始细胞增多(RAEB-1)。在一些实施方案中，骨髓增生不良综合征是难治性贫血伴2型原始细胞增多(RAEB-2)。在一些实施方案中，骨髓增生不良综合征是未分类骨髓增生不良综合征(MDS-U)。在一些实施方案中，骨髓增生不良综合征是与分离的del(5q)相关的骨髓增生不良综合征。在一些实施方案中，骨髓增生不良综合征是红细胞生成刺激剂难治的。本发明进一步提供通过施用含有本发明化合物的局部用配制品来治疗牛皮癣或其他皮肤病症的方法。在一些实施方案中，本文所述的JAK抑制剂可用于治疗肺动脉高血压。本发明进一步提供通过施用本发明化合物来治疗其他药物的皮肤病学副作用的方法。举例来说，众多医药剂产生不需要的过敏反应，所述过敏反应可表现为痤疮样皮疹或相关皮炎。具有此类不良副作用的示例性医药剂包括诸如吉非替尼(gefitinib)、西妥昔单抗(cetuximab)、埃罗替尼(erlotinib)等的抗癌药物。本发明化合物可与具有不良皮肤病学副作用的医药剂组合(例如，同时或相继)来全身或局部地(例如，局限于皮炎附近)施用。在一些实施方案中，本发明化合物可与一种或多种其他药物一起局部地施用，其中其他药物在不存在本发明化合物的情况下局部施用时可引起接触性皮炎、过敏性接触性致敏或类似皮肤病症。因此，本发明组合物包括局部用配制品，其含有本发明化合物和可引起皮炎、皮肤病症或相关副作用的另一种医药剂。其他JAK相关疾病包括炎症和炎性疾病。示例性炎性疾病包括肉状瘤病、眼部炎性疾病(例如，虹膜炎、葡萄膜炎、巩膜炎、结膜炎或相关疾病)、呼吸道炎性疾病(例如，包括鼻和窦的上呼吸道，诸如鼻炎或窦炎；或下呼吸道，包括支气管炎、慢性阻塞性肺病等)、炎性肌病(诸如心肌炎)以及其他炎性疾病。在一些实施方案中，眼部发炎疾病是睑炎。本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗缺血再灌注损伤、或与发炎缺血性事件有关的疾病或病状(诸如中风或心跳骤停)。本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗内毒素驱动的疾病状态(例如，绕道手术后的并发症或促进慢性心脏衰竭的慢性内毒素状态)。本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗厌食、恶病质或疲劳，诸如由癌症所致或与癌症有关者。本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗再狭窄、硬化性皮炎或纤维变性。本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗与低氧或星形胶质增生有关的病状，诸如糖尿病性视网膜病、癌症或神经退化。参见例如Dudley,A.C.等人Biochem.J.2005,390(第2部分):427-36；和Sriram,K.等人J.Biol.Chem.2004,279(19):19936-47.2004年3月2日电子版，两者皆以全文引用的方式并入本文。本文所述的JAK抑制剂可用于治疗阿尔茨海默氏病(Alzheimer'sdisease)。本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗其他炎性疾病，诸如全身性发炎反应综合征(SIRS)和败血性休克。本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗痛风和由例如良性前列腺肥大或良性前列腺增生引起的前列腺尺寸增大。其他JAK相关疾病包括骨吸收疾病，诸如骨质疏松症、骨关节炎。骨吸收还可与其他病状有关，诸如激素失衡和/或激素疗法、自体免疫疾病(例如骨结节病)、或癌症(例如骨髓瘤)。由JAK抑制剂引起的骨吸收的减少可以是约10％、约20％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％或约90％。在一些实施方案中，本文所述的JAK抑制剂可进一步用于治疗干眼症。如本文所用，“干眼症”意欲涵盖干眼病工作组(DryEyeWorkshop，DEWS)的最新官方报告中所概括的疾病状态，其中将干眼症定义为“引起不适症状、视觉障碍以及对眼表面具有潜在损害的泪膜不稳定性的眼泪和眼表面的多因子疾病。所述疾病伴有泪膜渗透浓度增大和眼表面炎症”。Lemp,“TheDefinitionandClassificationofDryEyeDisease:ReportoftheDefinitionandClassificationSubcommitteeoftheInternationalDryEyeWorkshop”,TheOcularSurface,5(2),75-92,2007年4月，其以全文引用的方式并入本文。在一些实施方案中，干眼症选自水性泪液不足性干眼症(ADDE)或蒸发性干眼症、或者其适当组合。在一些实施方案中，干眼症是休格连氏干眼综合征(Sjogrensyndromedryeye，SSDE)。在一些实施方案中，干眼症是非休格连氏干眼综合征(non-Sjogrensyndromedryeye，NSSDE)。在另一方面中，本发明提供一种在有需要的患者中治疗结膜炎、葡萄膜炎(包括慢性葡萄膜炎)、脉络膜炎、视网膜炎、睫状体炎、巩膜炎、巩膜表层炎或虹膜炎；治疗与角膜移植、激光辅助原位角膜磨镶术(laserassistedinsitukeratomileusis，LASIK)、屈光性角膜切除术或激光辅助上皮下角膜磨镶术(laserassistedsub-epithelialkeratomileusis，LASEK)有关的炎症或疼痛；抑制与角膜移植、LASIK、屈光性角膜切除术或LASEK有关的视觉敏锐度丧失；或抑制移植排斥反应的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的本发明化合物或其药学上可接受的盐。另外，本发明化合物或与其他JAK抑制剂(诸如美国临时申请号11/637,545中所报导者，该临时申请以全文引用的方式并入本文)的组合可用于治疗与病毒感染有关的呼吸道功能障碍或衰竭(诸如流行性感冒和SARS)。在一些实施方案中，本发明提供一种如本文任何实施方案中所述的式I化合物、其药学上可接受的盐，其用于治疗本文所述的任何疾病或病症的方法中。在一些实施方案中，本发明提供如本文任何实施方案中所述的式I化合物的用途，其用于制备用于治疗本文所述的任何疾病或病症的方法中的药物。在一些实施方案中，本发明提供一种如本文所述的式I化合物或其药学上可接受的盐，其用于调节JAK1的方法中。在一些实施方案中，本发明还提供如本文所述的式I化合物或其药学上可接受的盐的用途，其用于制备用于调节JAK1的方法中的药物。如本文所用，术语“接触”是指使指示部分在体外系统或体内系统中聚在一起。举例来说，使JAK与本发明化合物“接触”包括向具有JAK的个体或患者(诸如人类)施用本发明化合物，以及例如将本发明化合物引入含有包含JAK的细胞或纯化制剂的样品中。如本文所用，可互换使用的术语“个体”或“患者”是指任何动物，包括哺乳动物，优选是小鼠、大鼠、其他啮齿动物、兔、狗、猫、猪、牛、绵羊、马或灵长类动物，且最优选是人类。如本文所用，短语“治疗有效量”是指引起研究人员、兽医、医生或其他临床医师在组织、系统、动物、个体或人类中所寻求的生物学或医学反应的活性化合物或医药剂的量。在一些实施方案中，治疗有效量是约5mg至约1000mg，或约10mg至约500mg。如本文所用，术语“治疗”是指以下一种或多种：(1)预防疾病；例如，预防有患上疾病、病状或病症的倾向但尚未经历或显示疾病的病理或症状的个体的疾病、病状或病症；(2)抑制疾病；例如，抑制正经历或显示疾病、病状或病症的病理或症状的个体的疾病、病状或病症(即，阻止病理和/或症状的进一步发展)；以及(3)改善疾病；例如，改善正经历或显示疾病、病状或病症的病理或症状的个体的疾病、病状或病症(即，逆转病理和/或症状)，诸如降低疾病的严重程度。组合疗法本文所述的方法可进一步包括施用一种或多种额外治疗剂。所述一种或多种额外治疗剂可同时或依序向患者施用。在一些实施方案中，所述方法进一步包括施用选自以下的额外治疗剂：IMiD、抗IL-6剂、抗TNF-α剂、低甲基化剂以及生物反应改性剂(BRM)。一般来说，BRM是由活有机体制造用于治疗疾病的物质，其可天然存在于体内或可在实验室内制得。BRM的实例包括IL-2、干扰素、各种类型的集落刺激因子(CSF、GM-CSF、G-CSF)、单克隆抗体如阿昔单抗(abciximab)、依那西普(etanercept)、英利昔单抗(infliximab)、利妥昔单抗(rituximab)、曲妥珠单抗(trasturzumab)，以及高剂量抗坏血酸盐。在一些实施方案中，抗TNF-α剂是英利昔单抗和依那西普。在一些实施方案中，低甲基化剂是DNA甲基转移酶抑制剂。在一些实施方案中，DNA甲基转移酶抑制剂选自5-氮杂胞苷和地西他滨(decitabine)。一般来说，IMiD是免疫调节剂。在一些实施方案中，IMiD选自沙利度胺(thalidomide)、来那度胺(lenalidomide)、泊马度胺(pomalidomide)、CC-11006以及CC-10015。在一些实施方案中，所述方法进一步包括施用选自以下的额外治疗剂：抗胸腺细胞球蛋白、重组人类粒细胞集落刺激因子(GCSF)、粒细胞-单核细胞CSF(GM-CSF)、红细胞生成刺激剂(ESA)以及环孢素(cyclosporine)。在一些实施方案中，所述方法进一步包括向患者施用额外JAK抑制剂。在一些实施方案中，所述额外JAK抑制剂是托法替尼(tofacitinib)或卢梭替尼(ruxolitinib)。一种或多种额外医药剂，诸如化学治疗剂、消炎剂、类固醇、免疫抑制剂以及PI3Kδ、mTor、Bcr-Abl、Flt-3、RAF及FAK激酶抑制剂(诸如WO2006/056399中所述者，该文献以全文引用的方式并入本文)或其他药剂，可与本文所述的化合物组合使用以治疗JAK相关性疾病、病症或病状。可向患者同时或依序施用一种或多种额外医药剂。化学治疗剂的实例包括蛋白酶体抑制剂(例如，硼替佐米(bortezomib))、沙利度胺、雷利度胺(revlimid)，以及DNA破坏剂(诸如美法仑(melphalan)、多柔比星(doxorubicin)、环磷酰胺、长春新碱(vincristine)、依托泊苷(etoposide)、卡莫司汀(carmustine)等)。类固醇的实例包括皮质类固醇，诸如地塞米松(dexamethasone)或泼尼松(prednisone)。Bcr-Ab1抑制剂的实例包括美国专利号5,521,184、WO04/005281及美国临时申请号60/578,491(均以全文引用的方式并入本文)中所公开的属和种类的化合物和其药学上可接受的盐。合适的Flt-3抑制剂的实例包括如WO03/037347、WO03/099771以及WO04/046120(其均以全文引用的方式并入本文)中所公开的化合物和其药学上可接受的盐。合适的RAF抑制剂的实例包括如WO00/09495和WO05/028444(两者皆以全文引用的方式并入本文)中所公开的化合物和其药学上可接受的盐。合适的FAK抑制剂的实例包括如WO04/080980、WO04/056786、WO03/024967、WO01/064655、WO00/053595以及WO01/014402(其均以全文引用的方式并入本文)中所公开的化合物和其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，一种或多种本发明化合物可与一种或多种其他激酶抑制剂(包括伊马替尼(imatinib))组合使用，尤其用于治疗对伊马替尼或其他激酶抑制剂具有抗性的患者。在一些实施方案中，合适的化学治疗剂可选自抗代谢物剂、拓扑异构酶1抑制剂、铂类似物、紫杉烷、蒽环类药物以及EGFR抑制剂，以及其组合。在一些实施方案中，抗代谢物剂包括卡培他滨(capecitabine)、吉西他滨(gemcitabine)以及氟尿嘧啶(5-FU)。在一些实施方案中，紫杉烷包括太平洋紫杉醇(paclitaxel)、(用于可注射悬浮液的太平洋紫杉醇蛋白结合粒子)以及(多西紫杉醇(docetaxel))。在一些实施方案中，铂类似物包括奥沙利铂(oxaliplatin)、顺铂(cisplatin)以及卡铂(carboplatin)。在一些实施方案中，拓扑异构酶1抑制剂包括伊立替康(irinotecan)和拓扑替康(topotecan)。在一些实施方案中，蒽环类药物包括多柔比星或多柔比星脂质体配制品。在一些实施方案中，化学治疗剂是FOLFIRINOX(5-FU、甲酰四氢叶酸(lecovorin)、伊立替康以及奥沙利铂)。在一些实施方案中，化学治疗剂是吉西他滨和(用于可注射悬浮液的太平洋紫杉醇蛋白结合粒子)。在一些实施方案中，一种或多种本发明JAK抑制剂可与化学治疗剂组合用于治疗癌症(诸如多发性骨髓瘤)，且可使治疗反应相比于单独使用化学治疗剂的反应有所改进，同时不会加重其毒性作用。用于治疗多发性骨髓瘤的额外医药剂的实例可例如包括(但不限于)美法仑、美法仑加泼尼松[MP]、多柔比星、地塞米松以及Velcade(硼替佐米)。用于治疗多发性骨髓瘤的其他额外药剂包括Bcr-Abl、Flt-3、RAF以及FAK激酶抑制剂。加和或协同效应是组合本发明JAK抑制剂与额外药剂的理想结果。此外，在用本发明的JAK抑制剂治疗后，多发性骨髓瘤细胞对诸如地塞米松的药剂的抗性可以逆转。所述药剂可与本发明化合物组合于单一或连续剂型中，或所述药剂可作为独立剂型同时或依序施用。在一些实施方案中，向患者施用诸如地塞米松的皮质类固醇与至少一种JAK抑制剂的组合，其中地塞米松系间歇性而非连续性施用。在一些其他实施方案中，可在骨髓移植或干细胞移植之前、之时以及/或者之后，向患者施用一种或多种本发明JAK抑制剂与其他治疗剂的组合。在一些实施方案中，额外治疗剂是乙酸氟轻松(fluocinoloneacetonide)或利美索龙(rimexolone)(AL-2178、Vexol、Alcon)。在一些实施方案中，额外治疗剂是环孢素在一些实施方案中，额外治疗剂是皮质类固醇。在一些实施方案中，皮质类固醇是曲安西龙(triamcinolone)、地塞米松、氟轻松(fluocinolone)、可的松(cortisone)、泼尼松龙(prednisolone)或氟米松(flumetholone)。在一些实施方案中，额外治疗剂选自DehydrexTM(HollesLabs)、Civamide(Opko)、玻尿酸钠(Vismed，Lantibio/TRBChemedia)、环孢素(ST-603，SirionTherapeutics)、ARG101(T)(睾酮，Argentis)、AGR1012(P)(Argentis)、依卡倍特钠(ecabetsodium)(Senju-Ista)、吉法酯(gefarnate)(Santen)、15-(s)-羟基二十碳四烯酸(15(S)-HETE)、西维美林(cevilemine)、多西环素(doxycycline)(ALTY-0501，Alacrity)、米诺环素(minocycline)、iDestrinTM(NP50301，NascentPharmaceuticals)、环孢素A(Nova22007，Novagali)、土霉素(oxytetracycline)(耐久霉素(Duramycin)，MOLI1901，Lantibio)、CF101((2S,3S,4R,5R)-3,4-二羟基-5-[6-[(3-碘苯基)甲氨基]嘌呤-9-基]-N-甲基-氧杂环戊烷-2-氨甲酰基，Can-FiteBiophanna)、沃克普林(voclosporin)(LX212或LX214，LuxBiosciences)、ARG103(Agentis)、RX-10045(合成消退素(resolvin)类似物，Resolvyx)、DYN15(DyanmisTherapeutics)、来格列酮(rivoglitazone)(DE011，DaiichiSanko)、TB4(RegeneRx)、OPH-01(OphtalmisMonaco)、PCS101(PericorScience)、REV1-31(Evolutec)、Lacritin(Senju)、瑞巴派特(rebamipide)(Otsuka-Novartis)、OT-551(Othera)、PAI-2(宾夕法尼亚大学(UniversityofPennsylvania)和坦普尔大学(TempleUniversity))、毛果芸香碱(pilocarpine)、他克莫司(tacrolimus)、吡美莫司(pimecrolimus)(AMS981，Novartis)、依碳氯替泼诺(loteprednoletabonate)、利妥昔单抗、地夸索林四钠(diquafosoltetrasodium)(INS365，Inspire)、KLS-0611(KisseiPharmaceuticals)、去氢表雄固酮、阿那白滞素(anakinra)、依法珠单抗(efalizumab)、霉酚酸钠(mycophenolatesodium)、依那西普羟氯喹、NGX267(TorreyPinesTherapeutics)、actemra、吉西他滨、奥沙利铂、L-天冬酰胺酶或沙利度胺。在一些实施方案中，额外治疗剂是抗血管生成剂、胆碱激导性促效剂、TRP-1受体调节剂、钙离子通道阻断剂、粘蛋白促分泌物、MUC1剌激剂、钙调神经磷酸酶抑制剂、皮质类固醇、P2Y2受体促效剂、蕈毒碱受体促效剂、mTOR抑制剂、另一种JAK抑制剂、Bcr-Abl激酶抑制剂、Flt-3激酶抑制剂、RAF激酶抑制剂以及FAK激酶抑制剂，诸如WO2006/056399中所述者，该文献以全文引用的方式并入本文。在一些实施方案中，额外治疗剂是四环素衍生物(例如，米诺环素或强力霉素)。在一些实施方案中，额外治疗剂结合于FKBP12。在一些实施方案中，额外治疗剂是烷基化剂或DNA交联剂；抗代谢物/去甲基化剂(例如，5-氟尿嘧啶、卡培他滨或氮杂胞苷)；抗激素疗法(例如，激素受体拮抗剂、SERM或芳香酶抑制剂)；有丝分裂抑制剂(例如长春新碱或太平洋紫杉醇)；拓扑异构酶(I或II)抑制剂(例如米托蒽醌和伊立替康)；细胞凋亡诱导剂(例如ABT-737)；核酸疗法(例如反义或RNAi)；核受体配体(例如，促效剂和/或拮抗剂：全反式视黄酸或贝瑟罗汀(bexarotene))；表观遗传靶向剂，诸如组蛋白去乙酰基酶抑制剂(例如伏立诺他(vorinostat))、低甲基化剂(例如地西他滨)；蛋白质稳定性调节剂，诸如Hsp90抑制剂、泛素和/或泛素类结合或去结合分子；或EGFR抑制剂(埃罗替尼)。在一些实施方案中，一种或多种额外治疗剂是润湿性滴眼剂(也称为“人造泪液”)，其包括(但不限于)含有聚乙烯醇、羟丙基甲基纤维素、甘油、聚乙二醇(例如PEG400)或羧甲基纤维素的组合物。人造泪液可通过补偿泪膜润湿和润滑能力的降低来帮助治疗干眼症。在一些实施方案中，额外治疗剂是粘液溶解性药物(诸如N-乙酰基-半胱氨酸)，其可与粘蛋白相互作用且因此使泪膜的粘度减小。在一些实施方案中，额外治疗剂包括抗生素、抗病毒剂、抗真菌剂、麻醉剂、消炎剂(包括类固醇消炎剂和非类固醇消炎剂)以及抗过敏剂。合适的药物的实例包括氨基糖苷类，诸如阿米卡星(amikacin)、健大霉素(gentamycin)、妥布霉素(tobramycin)、链霉素(streptomycin)、奈替米星(netilmycin)以及卡那霉素(kanamycin)；氟喹啉酮类，诸如环丙沙星(ciprofloxacin)、诺氟沙星(norfloxacin)、氧氟沙星(ofloxacin)、曲伐沙星(trovafloxacin)、洛美沙星(lomefloxacin)、左氧氟沙星(levofloxacin)以及依诺沙星(enoxacin)；萘啶；磺酰胺；多粘菌素(polymyxin)；氯霉素(chloramphenicol)；新霉素(neomycin)；巴龙霉素(paramomycin)；甲磺酸粘菌素(colistimethate)；枯草菌素(bacitracin)；万古霉素(vancomycin)；四环素；利福平(rifampin)以及其衍生物(“利福平类”)；环丝氨酸；β-内酰胺；头孢菌素类(cephalosporins)；两性霉素类(amphotericins)；氟康唑(fluconazole)；氟胞嘧啶(flucytosine)；游霉素(natamycin)；咪康唑(miconazole)；酮康唑(ketoconazole)；皮质类固醇；双氯芬酸(diclofenac)；氟比洛芬(flurbiprofen)；酮咯酸(ketorolac)；舒洛芬(suprofen)；色甘酸(cromolyn)；洛度沙胺(lodoxamide)；左卡巴司汀(levocabastin)；萘甲唑啉(naphazoline)；安他唑啉(antazoline)；非尼拉明(pheniramine)；或氮杂内酯抗生素。药物配制品和剂型当作为药物使用时，本发明化合物可以药物组合物形式施用。视需要局部治疗抑或全身治疗以及待治疗的区域而定，这些组合物可以医药技术中熟知的方式制备，且可通过多种途径施用。施用可以是局部(包括经皮传递、表皮传递、经眼传递以及粘膜传递，粘膜包括鼻内粘膜、阴道粘膜以及直肠粘膜)、肺部(例如，通过吸入或吹入粉末或气雾剂，包括通过雾化器；气管内或鼻内)、口服或肠胃外施用。肠胃外施用包括静脉内、动脉内、皮下、腹膜内或肌肉内注射或输注；或颅内(例如，鞘内或脑室内)施用。肠胃外施用可呈单次剂量形式，或可例如通过连续灌注泵进行。用于局部施用的药物组合物和配制品可包括经皮贴片、软膏、洗剂、乳膏、凝胶、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体以及粉末。常规药物载体、水性、粉末或油性基剂、增稠剂等可以是必要的或合乎需要的。本发明还包括含有作为活性成分的本发明化合物或其药学上可接受的盐与一种或多种药学上可接受的载体(赋形剂)的组合的药物组合物。在一些实施方案中，组合物适于局部施用。在制备本发明的组合物时，典型地将活性成分与赋形剂混合，由赋形剂稀释或密闭于呈例如胶囊、药囊、纸或其他容器形式的此种载体内。当赋形剂用作稀释剂时，所述赋形剂可以是固体、半固体或液体物质，其充当活性成分的媒介物、载体或介质。因此，组合物可呈片剂、丸剂、粉末、口含锭、药囊、扁囊剂、酏剂、悬浮液、乳剂、溶液、糖浆、气雾剂(呈固体形式或处于液体介质中)、含有例如多达10重量％的活性化合物的软膏、软明胶胶囊和硬明胶胶囊、栓剂、无菌可注射溶液以及无菌包装粉末形式。在制备配制品时，可将活性化合物在与其他成分组合之前加以研磨以提供适当的细微性。若活性化合物是大体上不溶的，则其可研磨至小于200筛目的细微性。若活性化合物是大体上水溶性的，则可通过研磨调节细微性以提供于配制品中的大体上均一分布，例如约40筛目。可使用已知研磨程序(诸如湿磨)来研磨本发明化合物，以获得适于片剂形成且适于其他配制品类型的细微性。可通过本领域中已知的工艺来制备本发明化合物的细粉状(纳米粒子)制剂，例如参见国际申请号WO2002/000196。合适的赋形剂的一些实例包括乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、海藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆以及甲基纤维素。配制品可另外包括：润滑剂，诸如滑石、硬脂酸镁以及矿物油；湿润剂；乳化和悬浮剂；防腐剂，诸如苯甲酸甲酯和苯甲酸羟基丙酯；甜味剂；以及调味剂。可通过使用本领域中已知的程序调配本发明的组合物，以便在向患者施用后提供活性成分的快速、持续或延迟释放。在一些实施方案中，药物组合物包含硅化微晶纤维素(SMCC)和至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，硅化微晶纤维素包含约98％微晶纤维素和约2％二氧化硅(w/w)。在一些实施方案中，组合物是持续释放组合物，其包含至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种药学上可接受的载体。在一些实施方案中，组合物包含至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及至少一种选自以下的组分：微晶纤维素、单水合乳糖、羟丙基甲基纤维素以及聚氧化乙烯。在一些实施方案中，组合物包含至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及微晶纤维素、单水合乳糖以及羟丙基甲基纤维素。在一些实施方案中，组合物包含至少一种本文所述的化合物或其药学上可接受的盐，以及微晶纤维素、单水合乳糖以及聚氧化乙烯。在一些实施方案中，组合物进一步包含硬脂酸镁或二氧化硅。在一些实施方案中，微晶纤维素是AvicelPH102TM。在一些实施方案中，单水合乳糖是Fast-flo316TM。在一些实施方案中，羟丙基甲基纤维素是羟丙基甲基纤维素2208K4M(例如，MethocelK4MPremierTM)和/或羟丙基甲基纤维素2208K100LV(例如，MethocelK00LVTM)。在一些实施方案中，聚氧化乙烯是聚氧化乙烯WSR1105(例如，PolyoxWSR1105TM)。在一些实施方案中，使用湿式造粒工艺来制备组合物。在一些实施方案中，使用干式造粒工艺来制备组合物。组合物可调配成单位剂型，各剂量含有约1mg至约1,000mg、约1mg至约100mg、1mg至约50mg以及约1mg至10mg的活性成分。优选地，剂量是约1mg至约50mg或约1mg至约10mg的活性成分。在一些实施方案中，各剂量含有约10mg的活性成分。在一些实施方案中，各剂量含有约50mg的活性成分。在一些实施方案中，各剂量含有约25mg的活性成分。术语“单位剂型”是指适合作为单一剂量用于人类受试者和其他哺乳动物的物理离散单元，各单元含有经计算结合合适的药物赋形剂可产生所需治疗作用的预定量的活性物质。在一些实施方案中，组合物包含约1mg至约1,000mg、约1mg至约100mg、1mg至约50mg以及约1mg至10mg的活性成分。优选地，组合物包含约1mg至约50mg或约1mg至约10mg的活性成分。本领域技术人员应了解，此体现化合物或组合物含有约1mg至约10mg、约1mg至约20mg、约1mg至约25mg、约1mg至约50mg的活性成分。活性化合物可在宽剂量范围内有效，且一般以药学上有效量施用。然而，应了解，通常将由医师根据相关情况(包括待治疗的病状、所选择的施药途径、实际施用的化合物、单个患者的年龄、体重以及反应、患者症状的严重程度等)来确定实际施用的化合物的量。为制备诸如片剂的固体组合物，将主要活性成分与药物赋形剂混合以形成含有本发明化合物的均质混合物的固体预调配组合物。当将这些预调配组合物称为均质时，活性成分典型地均匀分散于整个组合物中，以便可以容易地将组合物细分成同等有效的单位剂型，诸如片剂、丸剂以及胶囊。随后，将此固体预配制品细分成含有例如约0.1mg至约1000mg本发明活性成分的上述类型的单位剂型。本发明的片剂或丸剂可包覆包衣或以其他方式混配，以提供可给予延长作用的优点的剂型。举例来说，片剂或丸剂可包含内剂量和外剂量组分，后者呈于前者之上的包膜的形式。两种组分可由肠衣层分离开来，所述肠衣层用于阻止胃中的崩解作用且允许内组分完整进入十二指肠中或延迟释放。多种材料可用于此类肠衣层或包衣，此类材料包括许多聚合酸和聚合酸与诸如虫胶、十六醇以及乙酸纤维素的材料的混合物。可并入本发明化合物和组合物以供经口施用或通过注射施用的液体形式包括水溶液、适当调味的糖浆、水性或油性悬浮液以及用食用油(诸如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油)调味的乳液，以及酏剂及类似药物媒介物。用于吸入或吹入的组合物包括于药学上可接受的水性或有机溶剂或者其混合物中的溶液和悬浮液，以及粉末。液体或固体组合物可含有如上所述的合适的药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，通过口或鼻呼吸途径施用组合物以达成局部或全身作用。可通过使用惰性气体来雾化组合物。可从雾化装置直接吸入雾化溶液，或雾化装置可附接至面罩帷幕或间歇性正压呼吸机。可从以适当方式传递配制品的装置经口或经鼻施用溶液、悬浮液或粉末组合物。局部用配制品可含有一种或多种常规载体。在一些实施方案中，软膏可含有水和一种或多种选自例如液体石蜡、聚氧乙烯烷基醚、丙二醇、白凡士林等的疏水性载体。乳膏的载体组合物可基于水与甘油和一种或多种其他组分(例如，单硬脂酸甘油酯、PEG-单硬脂酸甘油酯以及十六基硬脂醇)的组合。可使用异丙醇和水适当地与其他组分(诸如，甘油、羟乙基纤维素等)组合来调配凝胶。在一些实施方案中，局部用配制品含有至少约0.1重量％、至少约0.25重量％、至少约0.5重量％、至少约1重量％、至少约2重量％或至少约5重量％的本发明化合物。局部用配制品可适当地包装于例如100g管中，所述管任选附有关于治疗所选适应症(例如，牛皮癣或其他皮肤病状)的说明。向患者施用的化合物或组合物的量将视所施用物质、施用目的(诸如预防或治疗)、患者状况、施用方式等而改变。在治疗应用中，可向已罹患某种疾病的患者施用足以治愈或至少部分停滞疾病的症状和其并发症的量的组合物。有效剂量将取决于正经受治疗的疾病病状，并且由主治临床医师视诸如疾病严重程度、患者的年龄、体重以及一般状况等因素来判断。向患者施用的组合物可呈上述药物组合物形式。这些组合物可由常规灭菌技术进行灭菌，或可进行无菌过滤。水溶液可被包装成以原样使用，或被冻干，冻干制剂在施用之前与无菌水性载体合并。化合物制剂的pH值典型地在3与11之间，更优选是5至9且最优选是7至8。应了解，使用某些上述赋形剂、载体或稳定剂将导致药物盐的形成。可根据例如进行治疗的特定用途、化合物的施用方式、患者的健康和病状以及处方医师的判断来改变本发明化合物的治疗剂量。本发明化合物于药物组合物中的比例或浓度可视包括剂量、化学特性(例如，疏水性)以及施用途径的多个因素而改变。举例来说，本发明化合物可提供于含有约0.1％w/v至约10％w/v肠胃外施用的化合物的水性生理缓冲溶液中。一些典型剂量范围是每天每千克体重约1μg至约1g。在一些实施方案中，剂量范围是每天每千克体重约0.01mg至约100mg。剂量可能取决于诸如以下的变量：疾病或病症的类型和进程程度、特定患者的整体健康状态、所选化合物的相对生物功效、赋形剂的调配以及其施用途径。可从源自体外或动物模型测试系统的剂量-反应曲线外推有效剂量。本发明的组合物可进一步包括一种或多种额外医药剂，诸如化学治疗剂、类固醇、消炎化合物或免疫抑制剂，所述额外医药剂的实例如上文所列举。在一些实施方案中，化合物或其药学上可接受的盐是以眼用组合物形式施用。因此，在一些实施方案中，所述方法包括化合物或其药学上可接受的盐和眼科学上可接受的载体的施用。在一些实施方案中，眼用组合物是液体组合物、半固体组合物、插入物、膜、微粒或纳米粒子。在一些实施方案中，眼用组合物是液体组合物。在一些实施方案中，眼用组合物是半固体组合物。在一些实施方案中，眼用组合物是局部用组合物。局部用组合物包括(但不限于)液体组合物和半固体组合物。在一些实施方案中，眼用组合物是局部用组合物。在一些实施方案中，局部用组合物包含水溶液、水性悬浮液、软膏或凝胶。在一些实施方案中，眼用组合物是局部施用于眼睛的前面、上眼睑下面、下眼睑上以及穹窿之中。在一些实施方案中，眼用组合物是灭菌的。可通过如溶液的灭菌过滤的已知技术或通过在备用安瓿中加热溶液来实现灭菌。本发明的眼用组合物可进一步含有适用于制备眼用配制品的药物赋形剂。此类赋形剂的实例是防腐剂、缓冲剂、螯合剂、抗氧化剂以及用于调节渗透压的盐。如本文所用，术语“眼科学上可接受的载体”是指可含有并释放化合物或其药学上可接受的盐且与眼睛相容的任何物质。在一些实施方案中，眼科学上可接受的载体是水或水性溶液或悬浮液，且还包括油，诸如用以制得诸如用于眼插入物中的软膏和聚合物基质的油。在一些实施方案中，组合物可以是包含化合物或其药学上可接受的盐的水性悬浮液。液体眼用组合物(包括软膏和悬浮液)可具有适于所选施用途径的粘度。在一些实施方案中，眼用组合物具有约1,000厘泊至约30,000厘泊的范围的粘度。在一些实施方案中，眼用组合物可进一步包含以下一种或多种：表面活性剂、佐剂、缓冲剂、抗氧化剂、张力调节剂、防腐剂(例如，EDTA、氯化苯甲烃铵(benzalkoniumchloride，BAK)、亚氯酸钠、过硼酸钠、聚季铵盐-1)、增稠剂或粘度调节剂(例如，羧甲基纤维素、羟甲基纤维素、聚乙烯醇、聚乙二醇、乙二醇400、丙二醇羟甲基纤维素、羟丙基瓜尔胶、透明质酸以及羟丙基纤维素)等。配制品中的添加剂可包括(但不限于)氯化钠、碳酸氢钠、山梨酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、氯己定、蓖麻油以及过硼酸钠。水性眼用组合物(溶液或悬浮液)一般不含生理学或眼科学上有害的组分。在一些实施方案中，组合物中使用纯化水或去离子水。可通过添加任何生理学和眼科学上可接受的pH调节酸、碱或缓冲剂将pH调至约5.0至8.5的范围内。眼科学上可接受的酸的实例包括乙酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸、盐酸等，且眼科学上可接受的碱的实例包括氢氧化钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、乳酸钠、缓血酸胺、三羟甲基氨基甲烷等。盐和缓冲剂包括柠檬酸盐/右旋糖、碳酸氢钠、氯化铵以及上述酸和碱的混合物。在一些实施方案中，所述方法涉及形成或供应与眼睛外表面接触的治疗剂贮库。贮库是指无法通过泪液或其他眼睛清除机制快速除去的治疗剂源。这允许通过单次施用在眼睛外表面上的流体中提供连续、持续高浓度的治疗剂。不希望受任何理论约束，据信吸收和渗透可取决于溶解的药物浓度以及外部组织与含药物流体的接触持续时间。由于药物通过眼部流体清除作用和/或吸收至眼睛组织中而去除，故将有更多药物自贮库提供(例如溶解)至补充的眼部流体中。因此，贮库的使用可更易于促进眼组织装载更多不溶性治疗剂。在一些实施方案中，贮库可维持长达八小时或更长时间。在一些实施方案中，眼用贮库形式包括(但不限于)水性聚合悬浮液、软膏以及固体插入物。在一些实施方案中，眼用组合物是软膏或凝胶。在一些实施方案中，眼用组合物是油基传递媒介物。在一些实施方案中，组合物包含添加有通常0.1％至2％活性成分的石油或羊毛脂基剂，及赋形剂。常用基剂可包括(但不限于)矿物油、石蜡油以及其组合。在一些实施方案中，软膏是以条状物形式施用于下眼睑上。在一些实施方案中，眼用组合物是眼用插入物。在一些实施方案中，眼用插入物是生物学惰性、软质、生物可蚀性、粘弹性、在暴露于治疗剂后对灭菌作用稳定、对空气源性细菌感染具抗性、生物可蚀性、生物相容性以及/或者粘弹性的。在一些实施方案中，插入物包含眼科学上可接受的基质，例如聚合物基质。基质典型地是聚合物，且治疗剂一般分散于所述基质中或结合至所述聚合物基质。在一些实施方案中，治疗剂可通过共价键的溶解或水解从基质缓慢释放。在一些实施方案中，聚合物具有生物可蚀性(可溶性)且聚合物的溶解速率可控制分散于聚合物中的治疗剂的释放速率。在另一种形式中，聚合物基质是生物可降解聚合物，所述生物可降解聚合物诸如通过水解而分解，从而释放结合至所述聚合物基质或分散于所述聚合物基质中的治疗剂。在其他实施方案中，可用额外聚合包衣包围基质和治疗剂以进一步控制释放。在一些实施方案中，插入物包含生物可降解聚合物，诸如聚己内酯(PCL)、乙烯/乙酸乙烯酯共聚物(EVA)、聚氰基丙烯酸烷基酯、聚氨基甲酸酯、尼龙或聚(dl-丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)或任何这些物质的共聚物。在一些实施方案中，治疗剂分散于基质物质中或在用于制备基质物质的单体组合物聚合之前分散于所述单体组合物间。在一些实施方案中，治疗剂的量是约0.1％至约50％，或约2％至约20％。在其他实施方案中，使用生物可降解或生物可蚀性聚合物基质，由此用过的插入物无需去除。由于生物可降解或生物可蚀性聚合物降解或溶解，故治疗剂得以释放。在其他实施方案中，眼用插入物包含聚合物，所述聚合物包括(但不限于)Wagh等人,“Polymersusedinoculardosageformanddrugdeliverysystems”,AsianJ.Pharm.,第12-17页(2008年1月)(该文献以全文引用的方式并入本文)中所述的聚合物。在一些实施方案中，插入物包含选自以下的聚合物：聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、丙烯酸酯或甲基丙烯酸酯聚合物或共聚物(例如，来自Rohm或Degussa的家族聚合物)、羟甲基纤维素、聚丙烯酸、聚(酰胺基胺)树枝状聚合物、聚(二甲基硅氧烷)、聚氧化乙烯、聚(丙交酯-共-乙交酯)、聚(甲基丙烯酸2-羟基乙酯)、聚(乙烯醇)或聚(富马酸丙二醇酯)。在一些实施方案中，插入物包含R。在一些实施方案中，插入物是450kDa聚丙烯酸-半胱氨酸缀合物。在一些实施方案中，眼用组合物是眼用膜。适用于此类膜的聚合物包括(但不限于)Wagh等人(同上)中所述的膜。在一些实施方案中，膜是软性隐形眼镜，诸如由N,N-二乙基丙烯酰胺和与二甲基丙烯酸乙二醇酯交联的甲基丙烯酸的共聚物制成的软性隐形眼镜。在一些实施方案中，眼用组合物包含微球体或纳米粒子。在一些实施方案中，微球体包含明胶。在一些实施方案中，将微球体注射至眼睛的后段、脉络膜空间之中、巩膜之中、玻璃体腔内或视网膜下。在一些实施方案中，微球体或纳米粒子包含聚合物，所述聚合物包括(但不限于)Wagh等人(同上)中所述的聚合物，该文献以全文引用的方式并入本文。在一些实施方案中，聚合物是壳聚糖、聚羧酸(诸如聚丙烯酸)、白蛋白粒子、玻尿酸酯、聚衣康酸、聚(丁基)氰基丙烯酸酯、聚己内酯、聚(异丁基)己内酯、聚(乳酸-共-乙醇酸)或聚(乳酸)。在一些实施方案中，微球体或纳米粒子包含固体脂质粒子。在一些实施方案中，眼用组合物包含离子交换树脂。在一些实施方案中，离子交换树脂是无机沸石或合成有机树脂。在一些实施方案中，离子交换树脂包括(但不限于)Wagh等人(同上)中所述的离子交换树脂，该文献以全文引用的方式并入本文。在一些实施方案中，离子交换树脂是部分中和的聚丙烯酸。在一些实施方案中，眼用组合物是水性聚合悬浮液。在一些实施方案中，治疗剂或聚合悬浮剂悬浮于水性介质中。在一些实施方案中，可调配水性聚合悬浮液，以使其在眼睛中保持与其在施用于眼睛之前相同或大体上相同的粘度。在一些实施方案中，可调配水性聚合悬浮液，以便在与泪液接触时具有增强的胶凝作用。经标记化合物和分析方法本发明的另一方面涉及本发明的经标记化合物(放射性标记化合物、荧光标记化合物等)，其不仅将适用于成像技术而且亦将适用于体外和体内的分析中，用以定位和定量组织样品(包括人类)中的JAK，且用以通过抑制经标记化合物的结合来鉴别JAK配体。因此，本发明包括含有此类经标记化合物的JAK分析。本发明进一步包括本发明的同位素标记化合物。“同位素标记”或“放射性标记”的化合物是一个或多个原子由原子质量或质量数不同于在自然界中典型发现的(即，天然存在的)原子质量或质量数的原子置换或取代的本发明化合物。可并入本发明化合物中的合适的放射性核素包括(但不限于)3H(即氚，也写作T)、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、18F、35S、36Cl、82Br、75Br、76Br、77Br、123I、124I、125I以及131I。并入本发明放射性标记化合物中的放射性核素将视所述放射性标记化合物的特定应用而定。举例来说，对于体外JAK标记和竞争性分析来说，并有3H、14C、82Br、125I、131I、35S的化合物或将一般最有用。对于放射性成像应用来说，11C、18F、125I、123I、124I、131I、75Br、76Br或77Br一般将最有用。应了解，“放射性标记”或“标记化合物”是并有至少一种放射性核素的化合物。在一些实施方案中，放射性核素选自由3H、14C、125I、35S以及82Br组成的群组。在一些实施方案中，化合物并有1个、2个或3个氘原子。本发明可进一步包括用于将放射性同位素并入本发明化合物中的合成方法。用于将放射性同位素并入有机化合物中的合成方法是本领域中所熟知的，且本领域一般技术人员将容易认识到适用于本发明化合物的方法。本发明的经标记化合物可用于鉴别/评估化合物的筛选分析中。举例来说，可通过追踪标记来监测化合物在与JAK接触时的浓度变化，评估所标记的新合成或鉴别的化合物(即，测试化合物)结合JAK的能力。举例来说，可评估测试化合物(经标记)减少已知结合至JAK的另一化合物(即，标准化合物)的结合的能力。因此，测试化合物与标准化合物竞争结合至JAK的能力与其结合亲和力直接相关。相反地，在一些其他筛选分析中，标准化合物被标记，而测试化合物未标记。因此，监测所标记的标准化合物的浓度，以评估标准化合物与测试化合物之间的竞争，且由此确定测试化合物的相对结合亲和力。试剂盒本发明还包括可用于例如治疗或预防JAK相关性疾病或病症(诸如癌症)的药物试剂盒，所述药物试剂盒包括一个或多个含有药物组合物的容器，所述药物组合物包含治疗有效量的本发明化合物。如本领域技术人员易于了解，必要时，此类试剂盒可进一步包括各种常规药物试剂盒元件中的一种或多种，诸如具有一种或多种药学上可接受的载体的容器、额外容器等。指示待施用组分的量、施用准则和/或关于组分混合的准则的说明(呈插页或标签形式)也可包括于试剂盒中。将通过具体实施例更详细地描述本发明。下列实施例是出于说明目的提供，而不欲以任何方式限制本发明。本领域技术人员应容易认识到可更改或修改以得到基本上相同结果的多种非关键参数。已发现所述实施例的化合物是根据本文所述的至少一种分析的JAK抑制剂。实施例下文提供本发明化合物的实验程序。在Waters质量定向分级系统上对一些所制备化合物进行开放获取制备型LC-MS纯化。这些系统的关于操作的基本设备设置、方案以及控制软件已详细描述于文献中。参见例如“Two-PumpAtColumnDilutionConfigurationforPreparativeLC-MS”,K.Blom,J.Combi.Chem.,4,295(2002)；“OptimizingPreparativeLC-MSConfigurationsandMethodsforParallelSynthesisPurification”,K.Blom,R.Sparks,J.Doughty,G.Everlof,T.Haque,A.Combs,J.Combi.Chem.,5,670(2003)；以及“PreparativeLC-MSPurification:ImprovedCompoundSpecificMethodOptimization”,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Combi.Chem.,6,874-883(2004)。在下列条件下对分离化合物的纯度典型地进行分析型液相色谱-质谱分析(LCMS)：仪器；Agilent1100系列，LC/MSD，柱：WatersSunfireTMC185μm，2.1×5.0mm，缓冲液：流动相A：含0.025％TFA的水和流动相B：含0.025％TFA的乙腈；梯度2％至80％的B，3分钟内，流速1.5mL/min。还通过如实施例中所示的逆相高效液相色谱(RP-HPLC)与MS检测器或快速色谱(硅胶)在制备规模上分离一些所制备的化合物。典型的制备型逆相高效液相色谱(RP-HPLC)柱条件如下：pH＝2纯化：WatersSunfireTMC185um，19×100mm柱，用以下洗脱：流动相A：含0.1％TFA(三氟乙酸)的水和流动相B：乙腈；流速是30mL/min，使用如文献中所述的化合物特定方法最佳化方案对各化合物的分离梯度进行最佳化[参见“PreparativeLCMSPurification:ImprovedCompoundSpecificMethodOptimization”,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Comb.Chem.,6,874-883(2004)]。典型地，30×100mm柱的所用速率是60mL/min。pH＝10纯化：WatersXBridgeC185um，19×100mm柱，用以下洗脱：流动相A：含0.15％NH4OH的水和流动相B：乙腈；流速是30mL/min，使用如文献中所述的化合物特定方法最佳化方案对各化合物的分离梯度进行最佳化[参见“PreparativeLCMSPurification:ImprovedCompoundSpecificMethodOptimization”,K.Blom,B.Glass,R.Sparks,A.Combs,J.Comb.Chem.,6,874-883(2004)]。典型地，30×100mm柱的所用速率是60mL/min。还通过示差扫描热分析(DSC)对一些所制备的化合物进行分析。典型的DSC仪器条件如下：TA仪器示差扫描热分析，Q200型，具有自动取样器。一般条件：30-350℃，10℃/min；Tzero铝样品盘和盖；氮气流速是50mL/min。还通过热重分析(TGA)对一些所制备的化合物进行分析。典型的TGA仪器条件如下：TA仪器热重分析仪，Q500型。一般方法条件：以20℃/min从20℃快速上升至600℃；氮气吹扫，气体流速是40mL/min，接着吹扫流速平衡；样品吹扫流速是60mL/min；铂样品盘。还通过X射线粉末衍射(XRPD)对一些所制备的化合物进行分析。典型的XRPD仪器条件如下：RigakuMiniFlexX射线粉末衍射仪(XRPD)。一般实验程序：来自铜的X射线辐射，具有Kβ滤光器；X射线粉末是30KV，15mA；将样品粉末分散于零背景样品固持器上。一般测量条件：起始角-3度；终止角-45度；采样-0.02度；扫描速度-2度/分钟。实施例1.5-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐步骤1：3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯在0℃下向1.0M叔丁醇钾于四氢呋喃(30.7mL，30.7mmol)中的溶液中逐滴添加氰基甲基膦酸二乙酯(5.20mL，32.2mmol)于四氢呋喃(39mL)中的溶液。将反应物升温至室温且随后再次冷却至0℃。向反应混合物中添加3-氧代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(5.0g，0.029mol，来自Aldrich)于四氢呋喃(8mL)中的溶液。使反应物升温至室温且搅拌过夜。用水中止后，用乙酸乙酯(EtOAc)萃取混合物。将合并的有机层以盐水洗涤，经MgSO4干燥，且减压蒸发。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(0-70％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化粗混合物，得到所需产物(5.40g，95％)。C10H14N2O2Na的LCMS计算值(M+Na)+：m/z＝217.1；实验值：217.1步骤2：3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯将4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(0.990g，5.10mmol)、3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.00g，5.15mmol)以及1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.38mL，2.6mmol)于乙腈(20mL)中的混合物在60℃下加热2小时。冷却后，减压去除溶剂。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(0-60％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物(1.68g，84.8％)。C15H22BN4O4的LCMS计算值(M-55)+：m/z＝333.2；实验值：333.1。步骤3：{3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-3-基}乙腈盐酸盐将含4.0NHCl的1,4-二噁烷(2.0mL)添加至3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.68g，4.33mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中。在室温下搅拌反应混合物过夜，且随后减压浓缩，得到呈盐酸盐形式的所需产物，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤反应中。C14H22BN4O2的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝289.2；实验值：289.1。步骤4：5-氯-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺将N,N-二异丙基乙胺(1.3mL，7.5mmol)添加至六氟磷酸5-氯吡嗪-2-甲酸(0.40g，2.5mmol)、N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲鎓(1.0g，2.8mmol)以及(2S)-1,1,1-三氟丙-2-胺(0.28g，2.5mmol)于二氯甲烷(10mL)中的混合物中。在室温下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液处理且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层以盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩。通过于利用含乙酸乙酯的己烷溶液(0-15％)的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物(0.47g，73％)。C8H8ClF3N3O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝254.0；实验值：253.9。步骤5：5-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺5-氯-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺(254mg，1.00mmol)、{3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-3-基}乙腈盐酸盐(325mg，1.00mmol)以及N,N-二异丙基乙胺(401μL，2.30mmol)于1,4-二噁烷(5.0mL)中的混合物在100℃下加热2小时。冷却后，减压浓缩混合物。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(梯度：20-80％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物(0.49g，97％)。C22H28BF3N7O3的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝506.2；实验值：506.1。步骤6：4-溴-3-甲基-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯将4-溴-3-甲基-1H-吡唑(0.2g，1mmol)、二碳酸二叔丁酯(0.30g，1.4mmol)、4-二甲基氨基吡啶(0.02g，0.1mmol)以及三乙胺(0.26mL，1.9mmol)于乙腈(2mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩，且通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(0-15％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化，得到所需产物(0.32g)。C5H6BrN2O2的LCMS计算值(M-55)+：m/z＝205.0；实验值：204.9。步骤7：5-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐将5-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺(27.0mg，0.0533mmol)、4-溴-3-甲基-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(15mg，0.059mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(3.1mg，0.0027mmol)以及碳酸钠(17.0mg，0.160mmol)于1,4-二噁烷(1.6mL)和水(0.8mL)中的混合物在氮气下在100℃下搅拌过夜。过滤反应混合物，且通过RP-HPLC(pH＝2条件)纯化，得到呈三氟乙酸盐形式的所需产物。1HNMR(300MHz,CD3OD)δ8.73(d,J＝1.4Hz,1H),8.18(d,J＝0.6Hz,1H),7.98(d,J＝1.4Hz,1H),7.91-7.79(m,2H),4.84(m,1H),4.81(d,J＝10.2Hz,2H),4.60(d,J＝10.2Hz,2H),3.59(s,2H),2.44(s,3H),1.43(d,J＝7.1Hz,3H)ppm。C20H21F3N9O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝460.2；实验值：460.0。实施例2.5-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐步骤1：5-氯-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺将N,N-二异丙基乙胺(2.6mL，15mmol)添加至5-氯吡嗪-2-甲酸(0.80g，5.0mmol)、六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻(2.46g，5.56mmol)以及2-丙胺(0.47mL，5.6mmol)于二氯甲烷(20mL)中的混合物中。在室温下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物以饱和NaHCO3水溶液处理，且用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层以盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(0-15％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物。C8H11ClN3O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝200.1；实验值：200.1。步骤2：5-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺将5-氯-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺(200mg，1.00mmol)、{3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-3-基}乙腈盐酸盐(325mg，1.00mmol，来自实施例1步骤3)以及N,N-二异丙基乙胺(401μL，2.30mmol)于1,4-二噁烷(5.0mL)中的混合物在100℃下加热2小时。冷却后，减压浓缩混合物。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(梯度：20-80％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物(0.26g，58％)。C22H31BN7O3的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝452.3；实验值：452.2。步骤3：5-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐将反应小瓶中的4-溴-3-甲基-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(15.7mg，0.0600mmol)、5-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺(25.8mg，0.0571mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(1:1)(2.3mg，0.0028mmol)以及磷酸钾(0.036g，0.17mmol)于二噁烷(0.5mL)和水(0.2mL)中的混合物脱气且密封。将所述混合物在110℃下加热3小时。冷却后，将混合物以甲醇稀释，过滤且通过RP-HPLC(pH＝2条件)纯化，得到呈三氟乙酸盐形式的所需产物。C20H24N9O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝406.2；实验值：406.1。实施例3.4-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基苯甲酰胺三氟乙酸盐步骤1：4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)苯甲酸乙酯将4-氟苯甲酸乙酯(0.841g，5.00mmol，来自Aldrich)、氮杂环丁烷-3-醇盐酸盐(0.438g，4.00mmol，来自Aldrich)以及碳酸钾(1.38g，9.98mmol)于二甲亚砜(4mL)中的混合物在180℃下加热2小时。冷却后，将混合物以乙酸乙酯(50mL)稀释，且用水和盐水洗涤。将有机层经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩。通过于利用含乙酸乙酯的己烷溶液(0-50％)的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物(0.643，72.6％)。C12H16NO3的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝222.1；实验值：222.1。步骤2：4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)苯甲酸将1-[4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)苯基]-2-甲氧基乙酮(1.33g，6.00mmol)和单水合氢氧化锂(504mg，12.0mmol)于水(4mL)、甲醇(3mL)以及THF(6mL)中的混合物在40℃下搅拌过夜。将混合物以3NHCl水溶液(约4mL)中和至pH约7，用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物(1.10g，94.9，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤中。C10H12NO3的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝194.1；实验值：194.1。步骤3：4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-N-异丙基苯甲酰胺将六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻(4.64g，10.5mmol，来自Aldrich)添加至4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)苯甲酸(1.93g，10.0mmol)、2-丙胺(4.26mL，50.0mmol)以及N,N-二异丙基乙胺(3.88g，30.0mmol)于二氯甲烷(10mL)中的混合物中。将混合物在室温下搅拌2小时，且用二氯甲烷稀释。将混合物以NaHCO3水溶液和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且减压浓缩。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(梯度：0-50％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物(2.21g，94.3％)。C13H19N2O2的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝235.1；实验值：235.1。步骤4：N-异丙基-4-(3-氧代氮杂环丁烷-1-基)苯甲酰胺向乙二酰氯(1.05mL，12.4mmol)于二氯甲烷(20mL)中的冷却(-78℃)溶液中逐滴添加二甲亚砜(1.71mL，24.1mmol)。将混合物在-78℃下搅拌10分钟。随后添加4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-N-异丙基苯甲酰胺(1.72g，7.34mmol)于二氯甲烷(20mL)中的悬浮液。在-78℃下搅拌混合物1小时，且随后添加三乙胺(7.04mL，50.5mmol)。在-78℃下再搅拌混合物1.5小时。将混合物以NaHCO3水溶液和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤且减压浓缩。用乙醚洗涤沉淀物且通过过滤收集，得到所需产物(1.32g，77％)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤中。C13H17N2O2的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝233.1；实验值：233.1。步骤5：4-[3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基苯甲酰胺在-6至0℃下经10分钟时间向叔丁醇钾于四氢呋喃(7.10mL，7.10mmol)中的1.0M冷却(-6-0℃)溶液中逐滴添加氰基甲基膦酸二乙酯(1.20mL，7.43mmol，来自Aldrich)于四氢呋喃(10mL)中的溶液。使反应物升温且在室温下搅拌1小时。再次在-6℃下冷却反应混合物。随后经10分钟时间向反应混合物中添加N-异丙基-4-(3-氧代氮杂环丁烷-1-基)苯甲酰胺(1.30g，5.60mmol)于四氢呋喃(10mL)中的溶液。在此期间反应混合物的温度介于-5至0℃之间。使反应物升温至室温且搅拌3小时。将反应混合物通过硅胶垫过滤且用乙酸乙酯洗涤。浓缩滤液，且用乙醚处理残余物。通过过滤收集所形成的沉淀物，得到0.60g所需产物。减压浓缩母液。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(梯度：30-80％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物(0.21g)。总产物是0.81g(57％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91(d,J＝7.8Hz,1H),7.74(d,J＝8.7Hz,2H),6.53(d,J＝8.7Hz,2H),5.88(p,J＝2.3Hz,1H),4.77-4.67(m,2H),4.62(dt,J＝5.1,2.6Hz,2H),4.06(m,1H),1.12(d,J＝6.6Hz,6H)ppm。C15H18N3O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝256.1；实验值：256.1。步骤6：4-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-异丙基苯甲酰胺将4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(2.98g，15.3mmol)、4-[3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基苯甲酰胺(4.00g，15.7mmol)以及1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(1.17g，7.68mmol)于异丙醇(10mL)中的混合物在70℃下加热1小时。将混合物冷却至35℃。向悬浮液中添加30ml甲基叔丁基醚(MTBE)，且在室温下搅拌1小时。通过过滤收集所形成的沉淀物，用MTBE洗涤且减压干燥，得到所需产物(6.2g，89.8％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(s,1H),7.90(d,J＝7.8Hz,1H),7.75(s,1H),7.73(d,J＝8.7Hz,2H),6.52(d,J＝8.7Hz,2H),4.40(d,J＝8.6Hz,2H),4.20(d,J＝8.6Hz,2H),4.05(m,1H),3.65(s,2H),1.24(s,12H),1.12(d,J＝6.6Hz,6H)ppm。C24H33BN5O3的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝450.3；实验值：450.3。步骤7：4-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基苯甲酰胺三氟乙酸盐将反应小瓶中的4-溴-3-甲基-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(15.7mg，0.0600mmol)、4-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-异丙基苯甲酰胺(25.7mg，0.0571mmol)、磷酸钾(36.4mg，0.171mmol)以及[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(1:1)(2.33mg，0.00286mmol)于二噁烷(0.5mL)和水(0.2mL)中的混合物脱气且密封。将所述混合物在110℃下加热3小时。冷却后，将混合物以甲醇稀释，过滤且通过RP-HPLC(pH＝2条件)纯化，得到呈三氟乙酸盐形式的所需产物。C22H26N7O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝404.2；实验值：404.1。实施例4.4-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺三氟乙酸盐步骤1：2,4,5-三氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺向2,4,5-三氟苯甲酸(5.00g，28.4mmol)于乙腈(50mL)中的溶液中添加N,N-二甲基甲酰胺(40μL)，接着添加乙二酰氯(3.60mL，42.6mmol)。90分钟后，减压去除挥发物。将残余物与乙腈(50mL)一起共蒸发。随后将残余物溶解于二氯甲烷(50mL)中。将此溶液逐滴添加至(2S)-1,1,1-三氟丙-2-胺盐酸盐(5.52g，36.9mmol)(来自Synquest，98％ee)于甲苯(100mL)和0.5M氢氧化钠水溶液(142mL，71.0mmol)中的冷却(冰浴)混合物中。添加后，移去冰浴，且使反应物升温至室温。将反应物搅拌过夜。分离有机层。用二氯甲烷(50mL)萃取水层。将合并的有机层以20％盐水(75mL)和水(2×75mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩，得到所需产物(6.49g，84％)，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤中。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.01(d,J＝7.6Hz,1H),7.92-7.50(m,2H),4.76(m,1H),1.31(d,J＝7.0Hz,3H)ppm。C10H8F6NO的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝272.0；实验值：272.0。步骤2：2,5-二氟-4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺将2,4,5-三氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(6.39g，23.6mmol)、氮杂环丁烷-3-醇盐酸盐(3.19g，28.3mmol)以及1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(8.81mL，58.9mmol)于乙腈(25mL)中的混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物以EtOAc(75mL)稀释且用1NHCl(50mL)、1NNaHCO3(60mL)、20％盐水(50mL)以及水(75mL)洗涤。用EtOAc(100mL)萃取水层。将有机层合并，经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩，得到所需产物(7.59g，91.8％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.38(dd,J＝8.9,1.9Hz,1H),7.27(dd,J＝12.8,6.5Hz,1H),6.38(dd,J＝12.3,7.5Hz,1H),5.71(d,J＝6.4Hz,1H),4.74(dp,J＝15.3,7.6Hz,1H),4.62-4.46(m,1H),4.30-4.15(m,2H),3.71(m,2H),1.29(d,J＝7.1Hz,3H)ppm。C13H14F5N2O2的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝325.1；实验值：325.1。步骤3：2,5-二氟-4-(3-氧代氮杂环丁烷-1-基)-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺在室温下向2,5-二氟-4-(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(7.57g，23.3mmol)于二氯甲烷(93mL)中的溶液中添加二乙酸碘苯(9.40g，29.2mmol)和2,2,6,6-四甲基-1-哌啶基氧基自由基(1.82g，11.7mmol)(TEMPO)。在室温下搅拌反应混合物过夜。将混合物以EtOAc(100mL)稀释，用0.5NNaHCO3(2×80mL)、20％盐水(100mL)和水(100mL)洗涤。用乙酸乙酯(75mL)萃取水层。将有机萃取物合并，经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩。通过于以含0％至5％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到粗产物，其自MTBE(50mL)和庚烷(100mL)中再结晶，得到呈无色固体状的所需产物(5.44g，72％)。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.36(dd,J＝12.5,6.5Hz,1H),6.63(dd,J＝12.1,7.6Hz,1H),4.90(d,J＝2.1Hz,4H),4.86-4.68(m,1H),1.31(d,J＝7.1Hz,3H)ppm。C13H12F5N2O2的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝323.1；实验值：323.0。步骤4：4-[3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺将氰基甲基膦酸二乙酯(1.95mL，11.8mmol)逐滴添加至用四氢呋喃(12mL)稀释的叔丁醇钾于THF(11.8mL，11.8mmol)中的1.0M冷却(冰浴)溶液中。移去冰浴且使反应物升温至室温，且搅拌90分钟。再次用冰浴冷却反应溶液。随后经12分钟添加上述制备的溶液至2,5-二氟-4-(3-氧代氮杂环丁烷-1-基)-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(4.00g，12.4mmol)于四氢呋喃(50mL)中的冷却(冰浴)溶液中。搅拌反应混合物30分钟。移去冰浴，且在室温下搅拌反应物过夜，随后通过添加20％盐水(75mL)和乙酸乙酯(75mL)中止。分离有机层。用乙酸乙酯(50mL)萃取水层。将合并的有机层经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩。通过于利用含乙酸乙酯的己烷溶液(0％至30％)的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物(2.6g)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59-8.37(m,1H),7.33(dd,J＝12.5,6.4Hz,1H),6.59(dd,J＝12.0,7.4Hz,1H),5.88(m,1H),4.94-4.75(m,4H),4.76(m,1H),1.31(d,J＝7.1Hz,3H)ppm。C15H13F5N3O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝346.1；实验值：346.1。步骤5：4-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺将4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(1.00g，5.15mmol)、4-[3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(1.78g，5.15mmol)以及1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.31mL，2.1mmol)于乙腈(20.2mL)中的混合物在50℃下加热过夜。冷却后，减压去除溶剂。残余物不经进一步纯化即用于下一步骤中。C24H28BF5N5O3的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝540.2；实验值：540.1。步骤6：4-[3-(氰基甲基)-3-(3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺三氟乙酸盐将4-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(28.8mg，0.0533mmol)、4-溴-5-甲基-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(15mg，0.059mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(3.1mg，0.0027mmol)以及碳酸钠(17.0mg，0.160mmol)于1,4-二噁烷(1.6mL)和水(0.8mL)中的混合物在氮气下在100℃下搅拌过夜。用乙酸乙酯萃取反应混合物。将合并的有机层以盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩。通过RP-HPLC(pH＝2条件)来纯化残余物，得到呈三氟乙酸盐形式的所需产物。C22H21F5N7O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝494.2；实验值：494.0。实施例5.4-[3-(1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)-3-(氰基甲基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺三氟乙酸盐使用与关于实施例4步骤6的合成所述类似的程序，从4-溴-1H-吡唑和4-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺起始来制备此化合物。C21H19F5N7O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝480.2；实验值：480.0。实施例6.5-[3-(氰基甲基)-3-(3,3'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐步骤1：3-(氰基甲基)-3-[3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯将3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(1.06g，5.10mmol)、3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.00g，5.15mmol)以及1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.38mL，2.6mmol)于乙腈(20mL)中的混合物在60℃下加热2小时。冷却后，减压去除溶剂。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(0-60％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物。C16H24BN4O4的LCMS计算值(M-55)+：m/z＝347.2；实验值：347.1。步骤2：{3-[3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-3-基}乙腈盐酸盐将含4.0NHCl的二噁烷(3mL)添加至3-(氰基甲基)-3-[3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯于二氯甲烷(10mL)中的溶液中。在室温下搅拌反应混合物过夜。减压浓缩混合物，得到呈盐酸盐形式的粗产物。C15H24BN4O2的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝303.2；实验值：303.1。步骤3：5-{3-(氰基甲基)-3-[3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺将{3-[3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-3-基}乙腈盐酸盐(0.43g，1.3mmol)、5-氯-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺(0.24g，1.2mmol)以及N,N-二异丙基乙胺(0.63mL，3.6mmol)于叔丁醇(12mL，120mmol)中的混合物在100℃下加热4小时。冷却后，减压去除溶剂。通过于以含乙酸乙酯的己烷溶液(0-60％)洗脱的硅胶柱上进行快速色谱来纯化残余物，得到所需产物。C23H33BN7O3的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝466.3；实验值：466.2。步骤4：5-[3-(氰基甲基)-3-(3,3'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐使用与关于实施例4步骤6的合成所述类似的程序，从4-溴-3-甲基-1H-吡唑和5-{3-(氰基甲基)-3-[3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺起始来制备此化合物。C21H26N9O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝420.2；实验值：420.1。实施例7.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺将4-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(329mg，0.610mmol，来自实施例4步骤5)、4-溴-3,5-二甲基-1H-吡唑(206mg，1.18mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(110mg，0.098mmol)以及碳酸钠(320mg，3.0mmol)于1,4-二噁烷(10mL)/水(5mL)中的混合物用氮气吹扫且在110℃下搅拌1小时。将反应混合物以EtOAc稀释，用水和盐水洗涤，浓缩。首先利用硅胶(依次以0-100％EtOAc/己烷和10％甲醇/二氯甲烷洗脱)，且随后通过制备型LCMS(XBridgeC18柱，以含有0.1％氢氧化铵的乙腈/水的梯度洗脱，流速是60mL/min)来纯化残余物，得到所需产物(30mg，9.7％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.17(1H,s),8.45(1H,d,J＝8.0Hz),8.10(1H,s),7.70(1H,s),7.34(1H,m),6.61(1H,s),4.77(1H,m),4.62(2H,d,J＝9.0Hz),4.39(1H,d,J＝9.0Hz),3.64(2H,s),2.22(6H,s),1.31(6H,d,J＝7.0Hz)ppm。C23H23F5N7O的LCMS计算值(M+H)+：m/z＝508.2；实验值：508.0。实施例8.5-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺将5-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺(256mg，0.567mmol，来自实施例2步骤2)、4-溴-3,5-二甲基-1H-吡唑(119mg，0.681mmol)、二环己基(2',4',6'-三异丙基联苯-2-基)膦-(2'-氨基联苯-2-基)(氯)钯(1:1)(67mg，0.085mmol)以及碳酸铯(550mg，1.7mmol)于1,4-二噁烷(2mL)/水(1mL)中的混合物用氮气吹扫三次。将反应物加热至53℃持续2小时。将混合物以EtOAc稀释，用盐水洗涤，浓缩。首先利用硅胶(依次以0-100％EtOAc/己烷和10％甲醇/二氯甲烷洗脱)，且随后通过制备型LCMS(XBridgeC18柱，以含有0.1％氢氧化铵的乙腈/水的梯度洗脱，流速是60mL/min)来纯化所得残余物，得到所需产物(0.1g，40％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.64(1H,d,J＝1.5Hz),8.12(1H,s),8.06(1H,d,J＝8.0Hz),7.96(1H,d,J＝1.0Hz),7.71(1H,s),4.72(2H,d,J＝9.5Hz),4.49(1H,d,J＝9.5Hz),4.08(1H,m),3.68(2H,s),2.22(6H,s),1.16(6H,d,J＝6.5Hz)ppm。C21H26N9O的LCMS计算值(M+H)+：m/z＝420.2；实验值：420.0。实施例9.5-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐步骤1.[3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-3-基]乙腈盐酸盐用N2吹扫3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(381mg，0.981mmol，来自实施例1步骤2)、4-溴-3,5-二甲基-1H-吡唑(206mg，1.18mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(110mg，0.098mmol)以及碳酸钠(310mg，2.9mmol)于1,4-二噁烷(10mL)及水(5mL)中的混合物且在110℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，用EtOAc稀释，随后用水洗涤。将有机层浓缩且利用硅胶(依次用0-100％EtOAc/己烷和0-10％MeOH/二氯甲烷洗脱)纯化，得到3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(90mg，26％)。C18H25N6O2的LCMS计算值(M+H)+：m/z＝357.2；实验值：357.2。在室温下用含4.0M氯化氢的二噁烷(1.2mL，4.9mmol)溶液的二氯甲烷(1mL)处理此中间物2小时。将混合物汽提至干燥，得到所需产物。C13H17N6的LCMS计算值(M+H)+：m/z＝257.1；实验值：257.1。步骤2.5-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐将[3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-3-基]乙腈盐酸盐(13mg，0.039mmol)、5-氯-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺(11mg，0.043mmol，来自实施例1步骤4)以及N,N-二异丙基乙胺(28μL，0.16mmol)于叔丁醇(1mL)中的混合物在100℃下加热2小时。冷却后，用MeOH稀释混合物且利用制备型LCMS(pH＝2条件)纯化，得到呈三氟乙酸盐形式的所需产物(4.1mg，22％)。C21H23F3N9O的LCMS计算值(M+H)+：m/z＝474.2；实验值：474.0。实施例10.5-[3-(氰基甲基)-3-(3-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐步骤1：4-溴-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯通过使用关于实施例1步骤6的合成所述类似的程序，从4-溴-1H-吡唑起始来制备此化合物。C4H4BrN2O2的LCMS计算值(M-55)+：m/z＝191.0；实验值：190.9。步骤2：5-[3-(氰基甲基)-3-(3-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐通过使用关于实施例4步骤6的合成所述类似的程序，从4-溴-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯和5-{3-(氰基甲基)-3-[3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-异丙基吡嗪-2-甲酰胺起始来制备呈三氟乙酸盐形式的此化合物。C20H24N9O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝406.2；实验值：406.1。实施例11.5-[3-(氰基甲基)-3-(3'-乙基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺三氟乙酸盐通过使用关于实施例4步骤6的合成所述类似的程序，从5-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]吡嗪-2-甲酰胺(实施例1，步骤5)和4-溴-3-乙基-1H-吡唑起始来制备呈三氟乙酸盐形式的此化合物。C21H23F3N9O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝474.2；实验值：474.0。实施例12.4-{3-(氰基甲基)-3-[3'-(羟基甲基)-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺三氟乙酸盐步骤1：(4-溴-1H-吡唑-5-基)甲醇将四氢硼酸钠(0.13g，3.4mmol)添加至4-溴-1H-吡唑-5-甲醛(0.30g，1.7mmol，来自Maybridge)于四氢呋喃(5mL)中的溶液中。将反应混合物在50℃下搅拌1小时。将反应混合物以饱和NaHCO3水溶液中止，且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层以盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且减压浓缩，得到粗产物，其不经进一步纯化即直接用于下一步骤反应中。C4H6BrN2O的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝177.0；实验值：176.9。步骤2：4-{3-(氰基甲基)-3-[3'-(羟基甲基)-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺三氟乙酸盐通过使用关于实施例4步骤6的合成所述类似的程序，从4-{3-(氰基甲基)-3-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺和(4-溴-1H-吡唑-3-基)甲醇起始来制备呈三氟乙酸盐形式的此化合物。C22H21F5N7O2的LCMS计算值(M+1)+：m/z＝510.2；实验值：510.0。实施例13.4-{3-(氰基甲基)-3-[3-(羟基甲基)-3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺步骤1.4-溴-1-{3-(氰基甲基)-1-[2,5-二氟-4-({[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]氨基}羰基)苯基]氮杂环丁烷-3-基}-1H-吡唑-3-甲酸乙酯向微波小瓶中添加异丙醇(10mL)、4-溴-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(来自ChemBridge)(788mg，3.60mmol)、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(48.9μL，0.327mmol)以及4-[3-(氰基亚甲基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(来自实施例4步骤4，1.13g，3.27mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。冷却至室温后，在真空中去除溶剂。利用快速色谱(以含0-35％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)纯化残余物，得到呈白色泡沫状的所需产物。1HNMR(500MHz,DMSO)δ8.61(s,1H),8.47(d,J＝8.7Hz,1H),7.34(dd,J＝12.5和6.3Hz,1H),6.62(dd,J＝11.9和7.3Hz,1H),4.76(dt,J＝15.5和7.8Hz,1H),4.61(d,J＝9.2Hz,2H),4.39(d,J＝8.0Hz,2H),4.32(q,J＝7.1Hz,2H),3.68(s,2H),1.31(m,6H)ppm。C21H20BrF5N5O3的LCMS计算值(M+H)+：m/z＝564.1；实验值：563.8。步骤2.1-{3-(氰基甲基)-1-[2,5-二氟-4-({[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]氨基}羰基)苯基]氮杂环丁烷-3-基}-3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-3-甲酸乙酯向微波小瓶中装入叔丁醇(1.2mL)和水(1.2mL)、氟化铯(683mg，4.50mmol)、4-溴-1-{3-(氰基甲基)-1-[2,5-二氟-4-({[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]氨基}羰基)苯基]氮杂环丁烷-3-基}-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(725mg，1.28mmol)以及3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼戊环-2-基)-1H-吡唑(401mg，1.93mmol)，接着装入Pd-127(49mg，0.064mmol)(来自JohnsonMathew)。将反应混合物在85℃下加热48小时。将反应物冷却至室温，用水和乙酸乙酯稀释。用乙酸乙酯萃取水层。将有机层经Na2SO4干燥，浓缩。利用快速色谱(用含30-100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱)纯化所得残余物，得到呈油状的所需产物。C25H25F5N7O3的LCMS计算值(M+H)+：m/z＝566.2；实验值：566.0。步骤3.4-{3-(氰基甲基)-3-[3-(羟基甲基)-3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基}-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺向1-{3-(氰基甲基)-1-[2,5-二氟-4-({[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]氨基}羰基)苯基]氮杂环丁烷-3-基}-3'-甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-3-甲酸乙酯(35mg，0.062mmol)于THF(0.5mL)中的溶液中添加2.0M四氢硼酸锂的THF(0.12mL，0.25mmol)溶液。在室温下搅拌反应混合物过夜。用水缓慢地中止反应。用乙酸乙酯萃取水层。浓缩有机层。利用制备型LCMS(XBridgeC18柱，用含有0.1％氢氧化铵的乙腈/水的梯度洗脱，流速是60mL/min)纯化所得残余物，得到所需产物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.79-7.68(m,2H),7.61(s,1H),6.65(m,1H),6.20(m,1H),4.99-4.89(m,1H),4.68(s,2H),4.60(d,J＝8.5Hz,2H),4.45(dd,J＝8.9和2.0Hz,2H),3.38(s,2H),2.34(s,3H),1.41(d,J＝7.0Hz,3H)。C23H23F5N7O2的LCMS计算值(M+H)+：m/z＝524.2；实验值：524.0。实施例14.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐(程序1)向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(24.8mg，0.0489mmol)中添加乙醇(0.3mL)且搅拌混合物以形成澄清溶液。添加含磷酸的异丙醇(0.064mL，1M，0.064mmol，1.3当量)且搅拌混合物2分钟以形成浆液。随后连续搅拌此浆液过夜。过滤此混合物，且用甲基叔丁基醚(MTBE)洗涤滤饼。将所述滤饼风干，得到标题盐(26.3mg，88.9％)。测定磷酸盐的X射线粉末衍射(XRPD)图且在图1中示出。2θ峰的列表提供于下表2中。表2实施例15.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐(程序2)向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(24.6mg，0.0485mmol)中添加乙腈(0.3mL)且搅拌混合物以形成澄清溶液。添加含磷酸的异丙醇(0.063mL，1M，0.063mmol，1.3当量)且搅拌混合物2小时以形成浆液，随后连续搅拌过夜。过滤此混合物，且用MTBE洗涤滤饼。将所述滤饼风干，得到标题盐(26.27mg，89.5％)。测定磷酸盐的XRPD图且在图2中示出。2θ峰的列表提供于下表3中。表3实施例16.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐(程序3)向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(98.93mg，0.195mmol)中添加异丙醇(1.23mL)且搅拌混合物以形成澄清溶液。添加含磷酸的异丙醇(0.273mL，1M，0.273mmol，1.4当量)且在70℃下搅拌混合物1小时以形成浆液。随后将此浆液冷却至室温且搅拌过夜。过滤此混合物，且用MTBE洗涤滤饼。将所述滤饼风干，得到标题盐(109.1mg，92.4％)。测定磷酸盐的XRPD图且在图3中示出。2θ峰的列表提供于下表4中。表4实施例17.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐(程序4)步骤1.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐(粗)在50℃下经18分钟向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(405.0g，798.1mmol)于甲醇(520.0mL)和异丙醇(2550.0mL)中的澄清溶液中添加85％磷酸(119.65g，1037.8mmol)于异丙醇(120.0mL)中的水溶液，形成浆液。将所得浆液在50℃下搅拌1小时。随后经40分钟添加正庚烷(4050.0mL)至浆液中，同时保持浆液的内部温度介于46℃至53℃之间。添加正庚烷后，将浆液逐渐冷却至室温且在室温下搅拌19小时。随后通过过滤收集固体，依次用异丙醇与正庚烷的混合物(以体积计是3:10，2×700mL)和正庚烷(3×550mL)洗涤，且在室温下在真空下干燥，得到粗制4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐(434.6g，89.9％产率)。步骤2.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐(纯化的)在室温下向配备有顶置式搅拌机构和Teflon涂布型热电偶的22L圆底烧瓶中添加步骤1的4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺磷酸盐(958.3g，1583mmol)和甲醇(MeOH，9583.0mL)。将所得浆液加热至50℃，得到澄清的浅橙色溶液。将所述溶液精密过滤，再转移至22L烧瓶中且加热至回流以经70分钟蒸馏出甲醇(4793g，6090mL)。随后经30分钟添加异丙醇(7700mL)至烧瓶，同时保持溶液温度介于50℃至65℃之间。在异丙醇完全添加后，逐份添加正庚烷(14400mL)，同时保持溶剂混合物(MeOH、IPA以及正庚烷)平缓蒸馏历时2.5小时。蒸馏出总共10818g(15000mL)溶剂混合物。将所得浆液逐渐冷却至室温，且在室温下搅拌17小时。通过过滤收集固体，依次用异丙醇与正庚烷的混合物(以体积计1:5，3000mL)和正庚烷(3×4000mL)洗涤，且在室温下在真空下干燥，得到呈灰白色结晶粉末形式的标题化合物(925.7g，96.6％产率)。通过1HNMR显示磷酸盐是1:1盐且通过XRPD确定结晶度。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.35(br.s,4H),8.50(d,J＝8.9Hz,1H),8.11(s,1H),7.70(s,1H),7.34(dd,J＝12.5,6.4Hz,1H),6.61(dd,J＝12.0,7.4Hz,1H),4.86-4.69(m,1H),4.61(d,J＝8.9Hz,2H),4.38(d,J＝8.9Hz,2H),3.64(s,2H),2.21(s,6H),1.30(d,J＝7.1Hz,3H)；13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ162.8,156.7(d,JCF＝246.5Hz),146.9(d,JCF＝236.1Hz),141.6(dd,JCF＝13.0,11.7Hz),140.3,138.3,125.8(q,JCF＝281.8Hz),125.6,117.2,116.4(dd,JCF＝22.3,4.6Hz),115.1,111.3(dd,JCF＝15.7,5.8Hz),107.7,102.0(dd,JCF＝29.5,4.5Hz),62.3,57.7,57.7,45.8(q,JCF＝30.5Hz),27.0,13.3(d,JCF＝1.7Hz),11.7。C23H22F5N7O(MW计算值507.46)；LCMS：(EI)m/e508.1(M++H)。如图4A中所示，DSC显示在约227.62℃(开始于224.45℃)出现尖锐熔融峰。如图4B中所示，标题化合物达200℃时显示0.129％的重量损失。测定磷酸盐的XRPD图且在图4C中示出。2θ峰的列表提供于下表5中。表5实施例18.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺盐酸盐(程序1)向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(97.64mg，0.192mmol)中添加2-丁醇(1.2mL)且搅拌混合物2分钟，得到澄清溶液。添加含盐酸的异丙醇/乙酸异丙酯(0.29mL，1M于IPA/IPAc中，来自3.7MHCl的IPAc溶液，0.29mmol，1.5当量)，得到澄清溶液。搅拌此溶液6分钟，形成浆液。随后在室温下搅拌此浆液5小时。随后过滤浆液且用MTBE洗涤滤饼。将所述滤饼在45-50℃下在真空下干燥12小时，得到标题盐(97.8mg，93.4％)。如图5A中所示，DSC显示在约213.07℃(开始于209.22℃)出现尖锐熔融峰。如图5B中所示，标题化合物达约210℃时显示4.635％的重量损失。测定磷酸盐的XRPD图且在图5C中示出。2θ峰的列表提供于下表6中。表62θ高度H％7.0672083812.2342895313.71630856.414.4813324.414.7842955415.45928952.916.25918133.116.60935965.717.12134763.519.48612923.520.4391472721.2599517.422.86522340.823.85733561.324.77154610025.70420437.426.49628451.927.42933461.128.35419435.628.7110619.331.4727012.831.8411721.434.0911721.540.5515810.641.487513.844.075539.7实施例19.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺盐酸盐(程序2)向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(52.12mg，0.103mmol)中添加异丙醇(0.5mL)且搅拌混合物3分钟以形成澄清溶液。随后添加含盐酸的异丙醇/乙酸异丙酯(0.144mL，1M于IPA/IPAc中，来自3.7MHCl的IPAc溶液，0.144mmol，1.4当量)，得到澄清溶液。搅拌此溶液6-8分钟，形成浆液。随后在室温下搅拌此浆液5小时。随后过滤浆液且用MTBE洗涤滤饼。将所述滤饼风干，得到标题盐(51.2mg，91.6％)。测定盐酸盐的XRPD图且在图6中示出。2θ峰列表提供于下表7中。表7实施例20.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺氢溴酸盐向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(54.74mg，0.108mmol)中添加异丙醇(0.6mL)且搅拌混合物3分钟，得到澄清溶液。添加含氢溴酸的异丙醇/水(0.151mL，1MIPA/水，来自48％HBr的水溶液，0.144mmol，1.4当量)，得到澄清溶液，随后搅拌约8分钟，形成浆液。在室温下搅拌此浆液5小时。随后过滤浆液且用MTBE洗涤滤饼。将所述滤饼风干，得到标题盐(53.12mg，83.7％)。如图7A中所示，DSC显示在约203.19℃(开始于199.26℃)出现尖锐熔融峰。如图7B中所示，标题化合物达约100℃时仅显示轻微重量损失。测定氢溴酸盐的XRPD图且在图7C中示出。2θ峰的列表提供于下表8中。表8实施例21.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺硫酸盐(程序1)向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(47mg，0.103mmol)中添加异丙醇(0.5mL)且搅拌混合物3分钟，得到澄清溶液。添加含硫酸的异丙醇(0.5M，于IPA中，来自98％硫酸，0.051mmol，0.55当量)，得到澄清溶液，随后搅拌6-8分钟以形成浆液。随后在室温下搅拌此浆液5小时。随后过滤浆液且用MTBE洗涤滤饼。将所述滤饼风干，得到标题盐(18.84mg，33.6％)。如图8A中所示，DSC显示在136.16℃和146.97℃(开始于122.15℃)出现两个吸热峰且在259.16℃(开始于255.09℃)出现尖锐吸热峰。测定硫酸盐的XRPD图且在图8B中示出。2θ峰的列表提供于下表9中。表9实施例22.4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺硫酸盐(程序2)向4-[3-(氰基甲基)-3-(3',5'-二甲基-1H,1'H-4,4'-联吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]-2,5-二氟-N-[(1S)-2,2,2-三氟-1-甲基乙基]苯甲酰胺(27.91mg，0.055mmol)中添加异丙醇(0.5mL)以形成澄清溶液。添加硫酸水溶液(1.0M，0.06mmol，1.09当量)且搅拌所得混合物以形成浆液。将此浆液加热至60℃且搅拌，得到澄清溶液。将所述溶液冷却至室温且连续搅拌过夜。过滤所得混合物且用MTBE洗涤滤饼。随后将所述滤饼干燥，得到标题盐。测定硫酸盐的XRPD图且在图9中示出。2θ峰的列表提供于下表10中。表102θ高度H％4.84319122.57.31321825.89.85611613.712.5569511.213.61576.814.70336142.615.261647.516.30914717.318.94114917.619.61184710020.95211313.321.24224128.421.70810011.824.60962073.226.51313015.327.02612614.828.1916719.730.6598610.132.34660734.71110812.738.597829.741.082556.442.435435.1实施例A：体外JAK激酶分析根据以下体外分析(描述于Park等人，AnalyticalBiochemistry1999，269，94-104中)，测试本文中的化合物对JAK标靶的抑制活性。使用杆状病毒在昆虫细胞中表达具有N端His标签的人类JAK1(a.a.837-1142)、JAK2(a.a.828-1132)以及JAK3(a.a.781-1124)的催化功能域，且将其纯化。通过测量生物素标记肽的磷酸化来分析JAK1、JAK2或JAK3的催化活性。通过均相时间分辨荧光(homogenoustimeresolvedfluorescence，HTRF)来检测磷酸化肽。在40微升含有于50mMTris(pH7.8)缓冲液中的酶、ATP以及500nM肽的反应物中测量化合物针对各激酶的IC50，所述50mMTris(pH7.8)缓冲液含有100mMNaCl、5mMDTT以及0.1mg/mL(0.01％)BSA。对于1mMIC50测量，反应物中的ATP浓度是1mM。在室温下使反应进行1小时，随后用含20μL45mMEDTA、300nMSA-APC、6nMEu-Py20的分析缓冲液(PerkinElmer,Boston,MA)停止所述反应。结合至铕标记的抗体进行40分钟，且利用Fusion读板仪(PerkinElmer,Boston,MA)测量HTRF信号。关于与实施例的化合物有关的数据，参见表11。表11.JAK酶分析的IC50数据(1mMATP)*300nM或300nM以下(+)；>300nM至1000nM(++)；>1000nM(+++)；>700nM(++++)实施例B：细胞分析可将依赖于细胞因子且因此依赖于JAK/STAT信号转导进行生长的癌细胞系以每孔6000个细胞的密度(96孔板格式)接种于RPMI1640、10％FBS以及1nG/mL适当细胞因子中。可将化合物添加至DMSO/培养基中的细胞(最终浓度0.2％DMSO)中且在37℃、5％CO2下培育72小时。依次使用CellTiter-Glo发光细胞活力分析(Promega)和TopCount(PerkinElmer,Boston,MA)定量来评估化合物对细胞活性的影响。使用具有相同分析读出的非JAK驱动细胞系，平行测量化合物的潜在脱靶作用。所有实验典型地一式两份进行。还可使用以上细胞系来研究化合物对JAK激酶或潜在下游底物(诸如，STAT蛋白质、Akt、Shp2或Erk)的磷酸化的影响。可在细胞因子挨饿过夜后进行这些实验，接着用化合物进行短暂的预培育(2小时或少于2小时)且用细胞因子刺激约1小时或少于1小时。随后从细胞中提取蛋白质且通过本领域技术人员所熟知的技术(包括西方墨点法(Westernblotting)或ELISA)使用可区分磷酸化蛋白质与总蛋白质的抗体来分析。这些实验可利用正常细胞或癌细胞来研究化合物对肿瘤细胞存活生物学或炎性疾病介体的活性。举例来说，关于后者，可使用诸如IL-6、IL-12、IL-23或IFN的细胞因子来刺激JAK活化，从而引起STAT蛋白的磷酸化且潜在地引起转录型态(由阵列或qPCR技术评估)或者蛋白质(诸如IL-17)的产生和/或分泌。可使用本领域技术人员常用的技术测量化合物抑制这些细胞因子介导的作用的能力。还可以在细胞模型中测试本文中的化合物，所述细胞模型被设计成评估化合物针对突变型JAK(例如，于骨髓增生性病症中所见的JAK2V617F突变)的功效和活性。这些实验通常利用异位表达野生型或突变型JAK激酶的血液系细胞因子依赖性细胞(例如BaF/3)(James,C.等人,Nature434:1144-1148；Staerk,J.等人,JBC280:41893-41899)。终点包括化合物对细胞存活、增殖以及磷酸化的JAK、STAT,Akt或Erk蛋白质的作用。可评估本文中某些化合物抑制T细胞增殖的活性。此种分析可视为第二细胞因子(即JAK)驱动的增殖分析，且还可以视为对免疫抑制或免疫活化抑制的简化分析。以下是可如何进行此类实验的简要概述。使用FicollHypaque分离方法从人类全血样品制备周边血液单核细胞(Peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)，且可通过淘析法从PBMC获得T细胞(部分2000)。可在37℃下将新鲜分离的人类T细胞以2×106个细胞/毫升的密度保持于培养基(补充有10％胎牛血清、100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素的RPMI1640)中长达2天。对于IL-2刺激的细胞增殖分析，首先用最终浓度是10μg/mL的植物血球凝集素(PHA)处理T细胞72小时。在用PBS洗涤一次后，将6000个细胞/孔接种于96孔板中且在培养基中在存在100U/mL人类IL-2(ProSpec-TanyTechnoGene；Rehovot,Israel)的情况下以不同浓度的化合物处理。在37℃下将板培育72小时，且遵循制造商建议的方案(Promega；Madison,WI)使用CellTiter-Glo发光试剂评估增殖指数。实施例C：体内抗肿瘤功效可在免疫受损小鼠的人类肿瘤异种移植模型中评估本文中的化合物。举例来说，可使用INA-6浆细胞瘤细胞系的致肿瘤变体对SCID小鼠进行皮下接种(Burger,R.等人,HematolJ.2:42-53,2001)。随后，可将带有肿瘤的动物随机分成药物或媒介物处理组，且可通过多种常见途径(包括经口、腹膜内施用或使用可植入泵进行连续输注)施用不同剂量的化合物。使用卡尺随时间追踪肿瘤生长。此外，可在开始治疗后的任何时间采集肿瘤样品以如上文所述进行分析(实施例B)，以评价化合物对JAK活性和下游信号传导路径的作用。另外，可使用由其他已知激酶(例如Bcr-Abl)驱动的异种移植肿瘤模型(诸如K562肿瘤模型)评估一种或多种化合物的选择性。实施例D：鼠类皮肤接触延迟超敏反应测试还可以在T细胞驱动的鼠类延迟超敏测试模型中测试本文中化合物的功效(抑制JAK标靶)。鼠类皮肤接触延迟型超敏(DTH)反应被视为临床接触性皮炎和其他T淋巴细胞介导的皮肤免疫病症(诸如牛皮癣)的有效模型(ImmunolToday.1998年1月；19(1):37-44)。鼠类DTH与牛皮癣共有多种特性，包括免疫浸润、炎性细胞因子的伴随增加以及角质细胞过度增殖。此外，在临床上可有效治疗牛皮癣的许多种类的药剂也是小鼠DTH反应的有效抑制剂(AgentsActions.1993年1月；38(1-2):116-21)。在第0天和第1天，通过对Balb/c小鼠剃去毛发的腹部局部施用抗原2,4-二硝基氟苯(DNFB)来使所述小鼠致敏。在第5天，使用工程师用的测微计来测量耳朵的厚度。记录此测量值且用作基线。随后通过局部施用0.2％浓度的DNFB总共20μL(内耳廓上10μL且外耳廓上10μL)来激发动物的双耳。在激发后二十四小时至七十二小时，再次测量耳朵。在整个致敏和激发阶段(第-1天至第7天)或在激发阶段之前以及整个激发阶段(通常是第4天下午至第7天)，用测试化合物进行治疗。全身或局部(对耳朵进行局部施用治疗)施用测试化合物(不同浓度)的治疗。与未治疗的情况相比耳朵肿胀减小将指示测试化合物的功效。引起20％或20％以上减小的化合物被视为有效的。在一些实验中，小鼠被激发但未致敏(阴性对照组)。可通过免疫组织化学分析证实测试化合物的抑制作用(抑制JAK-STAT路径的活化)。JAK-STAT路径的活化导致功能性转录因子的形成和易位。此外，免疫细胞的流入和角质细胞的增殖增加也将提供可研究且定量的耳朵的独特表达型态变化。使用与磷酸化STAT3特异性相互作用的抗体(无性系58E12，CellSignalingTechnologies)，对福尔马林(Formalin)固定且石蜡包埋的耳朵切片(在DTH模型中于激发阶段后采集)进行免疫组织化学分析。在DTH模型中，用测试化合物、媒介物或地塞米松(临床上有效的牛皮癣治疗方法)处理小鼠耳朵或不进行任何处理，以供比较。测试化合物和地塞米松可定性且定量地产生类似的转录变化，且测试化合物与地塞米松两者皆可减少浸润细胞的数目。测试化合物的全身和局部施用皆可产生抑制作用，即减少浸润细胞的数目且抑制转录变化。实施例E：体内消炎活性可在被设计成复制单一或复杂发炎反应的啮齿动物或非啮齿动物模型中评估本文中的化合物。举例来说，可使用关节炎啮齿动物模型来评估预防性或治疗性施用化合物的治疗潜力。这些模型包括(但不限于)小鼠或大鼠胶原蛋白诱发的关节炎、大鼠佐剂诱发的关节炎以及胶原蛋白抗体诱发的关节炎。还可以使用自体免疫疾病来评估本文中化合物的治疗潜力，所述自体免疫疾病包括(但不限于)多发性硬化症、I型糖尿病、葡萄膜视网膜炎、甲状腺炎、重症肌无力、免疫球蛋白肾病、心肌炎、气道致敏(哮喘)、狼疮或结肠炎。这些模型在研究团体中充分确立且是本领域技术人员所熟悉(CurrentProtocolsinImmunology,第3卷,Coligan,J.E.等人,WileyPress.；MethodsinMolecularBiology:第225卷,InflammationProtocols.,Winyard,P.G.以及Willoughby,D.A.,HumanaPress,2003)。实施例F：用于治疗干眼症、葡萄膜炎以及结膜炎的动物模型可在本领域技术人员已知的一个或多个临床前干眼症模型中评估药剂，所述临床前模型包括(但不限于)兔刀豆球蛋白A(ConA)泪腺模型、茛菪碱小鼠模型(皮下或经皮)、肉毒素小鼠泪腺模型或任何导致眼部腺体功能障碍的众多自发啮齿动物自体免疫模型(例如NOD-SCID、MRL/lpr或NZB/NZW)(Barabino等人,ExperimentalEyeResearch2004,79,613-621；以及Schrader等人,DevelopmentalOpthalmology,Karger2008,41,298-312，其各自以全文引用的方式并入本文中)。这些模型中的终点可包括眼部腺体和眼睛(角膜等)的组织病理学以及测量泪液产生的可能的经典Schirmer测试或其修改版本(Barabino等人)。可通过经由多个施用途径(例如全身或局部)给药来评估活性，给药可在可测量疾病存在之前或之后开始。可在本领域技术人员已知的一个或多个临床前葡萄膜炎模型中评估药剂。这些临床前模型包括(但不限于)实验性自体免疫葡萄膜炎(EAU)模型和内毒素诱发的葡萄膜炎(EIU)模型。可在兔、大鼠或小鼠中进行EAU实验，且所述EAU实验可涉及被动免疫或主动免疫。举例来说，可使用多种视网膜抗原中的任一种来使动物对相关免疫原致敏，此后可用相同抗原经眼部激发动物。EIU模型更剧烈且涉及以亚致死剂量局部或全身施用脂多糖。EIU模型和EAU模型的终点可包括眼底检查、组织病理学等。这些模型由Smith等人评述(ImmunologyandCellBiology1998,76,497-512，该文献以全文引用的方式并入本文)。可通过经由多个施用途径(例如全身或局部)给药来评估活性，给药可在可测量疾病存在之前或之后开始。以上列举的一些模型还可发生巩膜炎/巩膜表层炎、脉络膜炎、睫状体炎或虹膜炎，且因此所述模型可用于研究化合物用于这些疾病的治疗性治疗的潜在活性。还可以在本领域技术人员已知的一个或多个临床前结膜炎模型中评估药剂。这些临床前模型包括(但不限于)利用天竺鼠、大鼠或小鼠的啮齿动物模型。天竺鼠模型包括利用主动免疫或被动免疫的模型和/或使用抗原(诸如卵白蛋白或猪草)的免疫激发方案(评述于Groneberg,D.A.等人,Allergy2003,58,1101-1113中，该文献以全文引用的方式并入本文)。大鼠模型和小鼠模型的设计与天竺鼠模型大致类似(亦由Groneberg评述)。可通过经由多个施用途径(例如全身或局部)给药来评估活性，给药可在可测量疾病存在之前或之后开始。此类研究的终点可包括例如眼组织(诸如结膜)的组织分析、免疫分析、生物化学分析或分子分析。实施例G：体内骨胳保护可在本领域技术人员已知的各种骨质减少、骨质疏松症或骨吸收的临床前模型中评估化合物。举例来说，可使用卵巢切除的啮齿动物来评估化合物影响骨胳重塑和/或密度的征象和标记物的能力(W.S.S.Jee和W.Yao,JMusculoskel.Nueron.Interact.,2001,1(3),193-207，该文献以全文引用的方式并入本文)。或者，可在疗法(例如糖皮质激素)诱发的骨质减少的模型中以对照啮齿动物或化合物处理的啮齿动物评估骨胳密度和架构(Yao等人,ArthritisandRheumatism,2008,58(6),3485-3497；以及同上.58(11),1674-1686，二者皆以全文引用的方式并入本文)。另外，可在上述(实施例E)啮齿动物关节炎模型中评估化合物对骨吸收和密度的影响。所有此等模型的终点均可改变，但通常包括组织学评估和放射评估，以及免疫组织学和骨胳重塑的适当生物化学标记物。实施例H：S100A9转基因小鼠模型先前显示，S100A9转基因小鼠显示MDSC的骨髓积聚，其伴随着与MDS类似的进行性多谱系血细胞减少和细胞发育不良的发展。此外，通过全反式视黄酸处理或带有基于活性免疫受体酪氨酸的活化基序(带有ITAM)接头蛋白(DAP12)对CD33信号传导进行中断使MDSC早期强迫成熟可拯救血液学表型且缓解疾病。此系统可用于测试JAK1抑制对于临床前模型中MDS样疾病的作用。J.Clin.Invest.,123(11):4595-4611(2013)。因此，通过经口管饲给予JAK1选择性抑制剂。监测在S100A9转基因小鼠中观测到的所述化合物降低血细胞减少和细胞发育不良的能力。除本文所述内容之外，本领域技术人员还将根据前述说明显而易知本发明的各种修改。此类修改也意欲在随附权利要求书的范围内。本申请中所引用的各参考文献(包括所有专利、专利申请以及出版物)均以全文引用的方式并入本文。