一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染的方法与流程

技术特征：

1.一种基于磷酸钙-PEG的质粒转染方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

(1)配制PEG-DNA溶液

在1ml 2％-6％(w/v)的PEG溶液中加入5-15μg质粒DNA(待转染质粒)，混匀制得PEG-DNA溶液；

(2)PEG-DNA氯化钙溶液配制

1ml PEG-DNA溶液中加入40-80μl 2M CaCl₂溶液，配制成PEG-DNA氯化钙溶液。

(3)PEG‐磷酸钙转染复合物配制

在离心管中加入1ml 2×HBS溶液，逐滴加入所述PEG-DNA氯化钙溶液，配制成PEG-磷酸钙转染复合物；

(4)细胞转染

将转染复合物加入细胞培养物中，转染复合物与培养基体积为1:5-15，进行细胞转染。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，PEG溶液的浓度(w/v)为3％-4％。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，加入10μg质粒DNA。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，加入60μl 2M CaCl₂溶液。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，HBS溶液和PEG-DNA氯化钙溶液的体积比为1-3:3-1。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，转染复合物与培养基比率为1:10。