一种对蓝木霉菌株及其应用的制作方法

文档序号:16972919发布日期:2019-02-26 18:43阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种对蓝木霉菌株,其特征在于,所述对蓝木霉菌株(Trichoderma cyanodichotomus)命名为TW21990-1,其生物菌种保藏编号为:CGMCC No.12161,保藏日期为:2016年2月23日,保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.如权利要求1所述对蓝木霉菌株的发酵工艺,具体步骤如下:

(1)斜面培养:采用0.4 mol/L NaCl的PDA培养基,将菌株TW21990-1接种在试管培养基上,28 ℃培养4~5 d;

(2)三角瓶培养:采用0.4 mol/L NaCl的PDB培养基,将试管菌种接种在液体三角瓶中,置于摇床上28 ℃振荡培养2 d;

(3)液体培养:采用液体发酵培养基,115 ℃灭菌30 min,将菌种接种到发酵罐,接种量0.2%(v/v),28 ℃培养,溶氧量40~50%,通气量1:0.6~0.8,搅拌速度为160 r/min,培养2 d;

(4)固体培养:采用固体发酵培养基,121 ℃灭菌30 min,在拌料罐中将液体菌种与固体培养基混合均匀,接种量为5~10%(v/v),接种完毕转移到固体培养室,培养基厚度为5 cm,料温控制在28±2 ℃,室温控制在25~30 ℃,培养室空气的相对含水量为95~100%,培养时间为4~5 d;

(5)孢子收集:培养后用生理盐水洗脱分生孢子,5000 r/min离心10 min,收集沉淀,得到两种浓缩分生孢子;

步骤(3)中,液体发酵培养基为,玉米粉2%,葡萄糖0.5%,豆饼粉4%,K2HPO4 0.2%,KH2PO4 0.3%,NaCl 2.3%,余量为水,pH 6.0~6.5;

步骤(4)中,固体发酵培养基为,葡萄糖0.5%,NaCl 2.3%,麸皮42.2%,稻壳5.0%,余量为水。

3.如权利要求2所述发酵工艺制备的两种分生孢子。

4.如权利要求3所述两种分生孢子制备的制剂。

5.如权利要求4所述两种分生孢子制备的制剂,按质量份数计由以下组分组成:

两种浓缩分生孢子 10~15 份

过300目筛的麦饭石 950 份

明胶 10 份

NaCl 23 份

SDS 1份。

6.如权利要求1所述对蓝木霉菌株在番茄猝倒病或黄瓜枯萎病方面的应用。

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