本发明属于抗生素提取技术领域，特别是涉及一种利用那西肽发酵液制备那西肽粗品的方法。
背景技术：
那西肽又称诺西肽，是一种含有多个噻唑环并富含硫多肽类抗生素，与硫链丝菌肽、盐屋霉素、微球菌素、硫肽霉素属于同一类化合物。目前那西肽已被列入欧洲药典以及日本饲料安全法，许多国家和地区都在使用那西肽。国内农业部将那西肽列为可在饲料中长期添加的饲料添加剂。
那西肽采用发酵模式生产，90-92%的那西肽存在于菌种细胞内，剩余8%左右的那西肽存在于发酵液中。国内相关文献、专利报道了采用浸提、树脂吸附和膜过滤的方法提取胞内产物那西肽，未能采取有效方法同时提取发酵液中剩余的部分产物那西肽，导致提取工艺总收率较低，生产成本较高。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服上述现有技术中的缺陷，提供一种有效提高那西肽提取收率，降低生产成本，且提取工艺简单的利用那西肽发酵液制备那西肽粗品的方法。
为实现上述目的所采取的技术方案为：
一种利用那西肽发酵液制备那西肽粗品的方法，其特征在于其工艺步骤为：首先将那西肽发酵液进行预处理，水洗，然后采用有机溶媒萃取，之后将萃取液加入钠盐，充分搅拌后静置分层，所得那西肽有机溶液减压蒸馏即可得到那西肽粗品；
所述预处理工艺为：在那西肽发酵液中加入尿素和聚乙二醇单辛基苯基醚（triton X-100），充分搅拌，然后静置，过滤即可；
所述有机溶媒是二氧六环或吡啶。
所述预处理过程中，控制那西肽发酵液温度30-35℃，搅拌转速90-110r/min，搅拌时间150-190min，静置时间40-60min。
在预处理过程中，所述尿素的用量为那西肽发酵液质量的1-3%。
在预处理过程中，所述聚乙二醇单辛基苯基醚（triton X-100）的用量为那西肽发酵液质量的4-6%。
所述水洗是指加入纯化水充分搅拌后再进行过滤处理，水洗两次，每次加水量按照每1千克预处理后的湿物质加水8-10L计量，每次搅拌时间20-40min。
所述有机溶媒萃取是指在水洗后的湿物质中加入有机溶媒，充分搅拌，过滤即可，搅拌转速20-40r/min，搅拌180-200min。
所述有机溶媒的用量为：每1千克的水洗后的湿物质加入4-6L有机溶媒。
所述钠盐为碳酸钠或氯化钠或羧甲基纤维素钠，其用量为水洗后的湿物质重量的0.6-0.8%。
所述减压蒸馏条件为：温度80-85℃，压力-0.1--0.05MPa。
本发明建立了一种利用那西肽发酵液制备纳西太粗品的方法，该方法在有效提取菌种细胞内的产物那西肽的同时，亦可提取出发酵液中部分产物那西肽，从而提高了提取收率，使其提取收率达到了90%以上，同时降低了生产成本，工艺简单，提高了产品市场竞争力。
具体实施方式
下面用实例予以说明本发明，应该理解的是，实例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。
下述实施例中的那西肽发酵液来源：
采用二级发酵模式生产那西肽，其生产菌种为活跃链霉菌，培养基中的碳源主要是淀粉和葡萄糖，氮源是豆饼粉、玉米浆、酵母膏，经240h的发酵培养，其效价一般在1500ug/ml左右。
实施例1
那西肽发酵液100m3，经检测，其效价为1630ug/ml。
1） 发酵液预处理
那西肽发酵液温度控制在30℃，搅拌转速控制在90r/min，发酵液中加入尿素10kg、triton X-100 40kg。继续搅拌150min，然后静置40min。发酵液过滤得到湿固体A 37吨。
2） 水洗
湿固体A中加入纯化水300吨，搅拌转速控制在40r/min，搅拌20min，过滤后得到湿固体B，再次加纯化水300吨，搅拌20min，过滤得到湿固体C 36.7吨。
3） 萃取
湿固体C中加入有机溶媒二氧六环147m3，搅拌转速控制在20r/min，搅拌180min，过滤后得到混合溶液D152.3m3。混合溶液D中加入碳酸钠221kg，搅拌30min，静置分层，得到有机溶液E146.8m3。
4） 减压蒸馏
有机溶液E升温至80℃，压力控制在-0.1MPa。减压蒸馏结束，得到那西肽粗品149kg。
提取收率：91.4%。
实施例2
那西肽发酵液100m3，经检测，其效价为1607ug/ml。
1） 发酵液预处理
那西肽发酵液温度控制在31℃，搅拌转速控制在95r/min，发酵液中加入尿素15kg、triton X-100 45kg。继续搅拌160min，然后静置45min。发酵液过滤得到湿固体A 36.7吨。
2） 水洗
湿固体A中加入纯化水312吨，搅拌转速控制在45r/min，搅拌25min，过滤后得到湿固体B，再次加纯化水312吨，搅拌25min，过滤得到湿固体C 36.5吨。
3） 萃取
湿固体C中加入有机溶媒吡啶165m3，搅拌转速控制在25r/min，搅拌185min，过滤后得到混合溶液D172m3。混合溶液D中加入氯化钠237kg，搅拌35min，静置分层，得到有机溶液E164.7m3。
4） 减压蒸馏
有机溶液E升温至81℃，压力控制在-0.09MPa。减压蒸馏结束，得到那西肽粗品147kg。
提取收率：91.7%。
实施例3
那西肽发酵液100m3，经检测，其效价为1547ug/ml。
1） 发酵液预处理
那西肽发酵液温度控制在33℃，搅拌转速控制在100r/min，发酵液中加入尿素20kg、triton X-100 50kg。继续搅拌170min，然后静置50min。发酵液过滤得到湿固体A 35.8吨。
2） 水洗
湿固体A中加入纯化水322吨，搅拌转速控制在50r/min，搅拌30min，过滤后得到湿固体B，再次加纯化水322吨，搅拌30min，过滤得到湿固体C35.7吨。
3） 萃取
湿固体C中加入有机溶媒二氧六环179m3，搅拌转速控制在30r/min，搅拌190min，过滤后得到混合溶液D186.4m3。混合溶液D中加入羧甲基纤维素钠250kg，搅拌40min，静置分层，得到有机溶液E178.6m3。
4） 减压蒸馏
有机溶液E升温至83℃，压力控制在-0.08MPa。减压蒸馏结束，得到那西肽粗品143kg。
提取收率：92.3%。
实施例4
那西肽发酵液100m3，经检测，其效价为1554ug/ml。
1） 发酵液预处理
那西肽发酵液温度控制在34℃，搅拌转速控制在105r/min，发酵液中加入尿素25kg、triton X-100 55kg。继续搅拌180min，然后静置55min。发酵液过滤得到湿固体A 36.1吨。
2） 水洗
湿固体A中加入纯化水343吨，搅拌转速控制在55r/min，搅拌35min，过滤后得到湿固体B，再次加纯化水343吨，搅拌35min，过滤得到湿固体C 36吨。
3） 萃取
湿固体C中加入有机溶媒吡啶198m3，搅拌转速控制在35r/min，搅拌195min，过滤后得到混合溶液D 204.6m3。混合溶液D中加入碳酸钠270kg，搅拌45min，静置分层，得到有机溶液E 197.4m3。
4） 减压蒸馏
有机溶液E升温至84℃，压力控制在-0.06MPa。减压蒸馏结束，得到那西肽粗品143kg。
提取收率：92%。
实施例5
那西肽发酵液100m3，经检测，其效价为1569ug/ml。
1） 发酵液预处理
那西肽发酵液温度控制在35℃，搅拌转速控制在110r/min，发酵液中加入尿素30kg、triton X-100 60kg。继续搅拌190min，然后静置60min。发酵液过滤得到湿固体A 36.4吨。
2） 水洗
湿固体A中加入纯化水364吨，搅拌转速控制在60r/min，搅拌40min，过滤后得到湿固体B，再次加纯化水364吨，搅拌40min，过滤得到湿固体C 36.2吨。
3） 萃取
湿固体C中加入有机溶媒二氧六环217m3，搅拌转速控制在40r/min，搅拌200min，过滤后得到混合溶液D 223m3。混合溶液D中加入羧甲基纤维素钠290kg，搅拌50min，静置分层，得到有机溶液E 222m3。
4） 减压蒸馏
有机溶液E升温至85℃，压力控制在-0.05MPa。减压蒸馏结束，得到那西肽粗品144kg。
提取收率：91.8%。
对比实施例
那西肽发酵液100m3，其效价为1528ug/ml。过滤得到湿菌渣，经闪蒸干燥，得到干菌渣23.4吨，加入二甲基亚砜有机溶媒120m3，连续浸提2次，得到含有那西肽的有机溶液238.2m3，经减压浓缩得到那西肽粗品125.7kg，提取收率为82.3%。。