一种重组大肠杆菌全细胞转化合成D‑阿洛酮糖的方法与流程

文档序号:12346426阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.含有权利要求1所述基因的载体或细胞系。

3.权利要求1所述基因编码的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶。

4.一种重组大肠杆菌,其特征在于,以大肠杆菌Rosetta(DE3)为宿主,表达SEQ ID NO.1所示D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因。

5.权利要求4所述重组大肠杆菌的构建方法,其特征在于,将D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因dpe与pET28a连接,构建重组质粒pET28a-dpe,将重组质粒转入大肠杆菌Rosetta(DE3)。

6.一种全细胞转化合成D-阿洛酮糖的方法,其特征在于,以D-果糖为底物,加入权利要求4所述重组大肠杆菌的湿菌体,60~70℃反应0.5-6h。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,将所述重组大肠杆菌在LB培养基中37℃培养,至OD600为0.6~1.0时,加入终浓度为0.1-1.0mM IPTG,16-37℃诱导5~20h,收集湿菌体。

8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述含D-果糖的溶液pH为7~10,并添加0.3-0.7mM金属离子;所述金属离子包括Co2+,Mn2+

9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述湿菌体浓度为2.5~30mg/mL。

10.权利要求3所述D-阿洛酮糖-3-差向异构酶在食品、医药、保健品领域的应用。

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