一种盐酸左氧氟沙星复合脂质体及制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种抗菌药物盐酸左氧氟沙星复合脂质体及制备方法，利用盐酸左氧氟沙星与乌梅两者的协同作用，通过复合脂质体使盐酸左氧氟沙星与乌梅作用效果显著增强，由于大肠杆菌是革兰氏阴性菌，外膜外叶层主要有LPS组成，内部流动性极低，能够有效的排斥部分抗生素，将盐酸左氧法沙星与乌梅做成复合脂质体制剂后，脂质体能够有效的粘附在大肠杆菌细胞壁上，破坏细胞壁的生成，侵入到细胞外膜上，进而通过与外膜结合进入细菌内部，达到较好的抑菌效果。
【专利说明】一种盐酸左氧氟沙星复合脂质体及制备方法
【技术领域】
[0001]本发明提供一种盐酸左氧氟沙星复合脂质体，同时还公开了其制备方法，属于医药【技术领域】。
【背景技术】
[0002]在我国医药市场中，抗感染药物的销售额始终居于首位，年销售额约为300多亿元，约占全国药品市场的30%左右，目前在抗感染药物市场中，喹诺酮类药物在临床上的用量已超过青霉素类，成为第二大抗菌药物。据估计，进入市场的新型抗菌药物产品中，有I / 3为氟喹诺酮类。目前世界氟喹诺酮类药物主要以左氧氟沙星和环丙沙星为主导，两者总和约占氟喹诺酮类药物全球销售额的65%左右，其中左氧氟沙星在国内2003年的销售金额为18.83亿元，名列喹诺酮类抗生素药品之首。目前左氧氟沙星的市场销售额仍然保持快速增长的势头，因此开发更加优良的左氧氟沙星制剂有着巨大的市场前景。
[0003]微生物感染是危害人类生命健康的重要疾病，左氧氟沙星是日本第一制药株式会社于1986年开发，1994年推向日本市场的氟喹诺酮类抗菌药。其特别对难治性、复杂性的较深部位的感染显示出优异的效果，临床上主要用于敏感菌引起的呼吸、泌尿、生殖、皮肤软组织等轻、重度感染。但同时也存在许多不良反应，如胃肠道反应，腹部不适或疼痛、腹泻、恶心或呕吐；中枢神经系统反应可有头昏、头痛、嗜睡或失眠；过敏反应有皮疹、皮肤瘙痒，偶可发生渗出性多形性红斑及血管神经性水肿。目前盐酸左氧氟沙星在国内上市的剂型主要有片剂、胶囊剂、注射剂和滴眼剂等普通制剂，暂无具有缓释、促渗作用的新型制剂出现。
[0004]而脂质体是近年来发展起来来的一种新型载药系统，由磷脂和胆固醇组成，可包封水溶性药物，又可包封脂溶性药物。以硫酸铵梯度为基础的远程载药技术制备的脂质体，具有不易渗漏，较传统方法制备的脂质体稳定。脂质体还具有亲和性、缓释性、减低药物毒性、增加药物稳定性等优点。因此，作为药物传递系统具有很大的优势。
[0005]中草药所含有的抗菌物质具有不易产生耐药性，毒副作用小，安全性高等特点，其中，乌梅可以收敛生津，安蛔驱虫.治久咳，虚热烦渴，久疟，久泻，痢疾，便血，尿血，血崩，蛔厥腹痛，呕吐，钩虫病，牛皮癣，胬肉等。其所含的有机酸对侵入胃肠道中的霉菌等病原菌有很强的杀灭作用。
[0006]
【发明内容】
:
本发明公开了一种盐酸左氧氟沙星复合脂质体，其特征在于是由以下原料按重量份数比制成的:
盐酸左氧氟沙星2、磷脂:10-20、胆固醇:10、表面活性剂:广2、乌梅提取物0.0f 2。
[0007]其中，乌梅提取物是通过以下制备工艺获得的:
在乌梅中加入5倍量的水浸泡2~3h，强火加热至沸再以文火煎煮4(T60min，过滤，收集滤液，置于4°C保存，残渣加3倍量水，浸泡2~3h，再煎3(T60min，过滤，合并2次滤液，喷雾干燥。[0008]本发明提供的盐酸左氧氟沙星复合脂质体是通过以下制备工艺获得的:
将上述混合物加入17倍量(g/ml)乙醇，并进行超声处理使其充分溶解至澄清；将该溶有药物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸铵的水溶液中，同时转速为500rpm，搅拌3min，溶液呈淡蓝色乳光，将装有该溶液的透析袋置于PH7.4，温度为37°C的PBS缓冲溶液中，透析24h，除去硫酸铵，既得脂质体混悬液。
[0009]本发明还公开了该复合脂质体混悬液在制备抗菌药物中的应用，制成片剂、胶囊剂、散剂、颗粒剂、口服液等口服制剂，用于治疗敏感菌引起的呼吸、泌尿、生殖、皮肤软组织等轻、重度感染。
[0010]本发明的积极效果在于:
利用盐酸左氧氟沙星与乌梅两者的协同作用，通过复合脂质体使盐酸左氧氟沙星与乌梅作用效果显著增强，由于大肠杆菌是革兰氏阴性菌，外膜外叶层主要有LPS组成，内部流动性极低，能够有效的排斥部分抗生素，将盐酸左氧法沙星与乌梅做成复合脂质体制剂后，脂质体能够有效的粘附在大肠杆菌细胞壁上，破坏细胞壁的生成，侵入到细胞外膜上，进而通过与外膜结合进入细菌内部，达到较好的抑菌效果。
【具体实施方式】
[0011]下面结合实施例对本发明作进一步的解释。应当理解的是，以下实施例仅用于解释本发明，而不是限制本发明的保护范围。
[0012]实施例1
本实施例为乌梅提取物的制备。
[0013]取乌梅50g，加入250ml的水浸泡2h，强火加热至沸再以文火煎煮40min，过滤，收集滤液，置于4°C保存，残渣加3倍量水，浸泡2h，再煎30min，过滤，合并2次滤液，喷雾干燥。
[0014]实施例2
本实施例制备的脂质体混悬液，其组成为盐酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，胆固醇，司盘80，乌梅提取物。
[0015]取乌梅100g加入500ml的水浸泡2.5h，强火加热至沸再以文火煎煮40min，过滤，收集滤液，置于4°C保存，残渣加3倍量水，浸泡2h，再煎30min，过滤，合并2次滤液，喷雾干燥。
[0016]将盐酸左氧氟沙星2g，磷脂(大豆卵磷脂)20g，胆固醇IOg,司盘80:2g，乌梅提取物2g加入650ml乙醇，并进行超声处理使其充分溶解至澄清；将该溶有药物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸铵的水溶液中，同时转速为500rpm，搅拌3min，溶液呈淡蓝色乳光，将装有该溶液的透析袋置于PH7.4，温度为37°C的PBS缓冲溶液中，透析24h，除去硫酸铵，既得脂质体混悬液。
[0017]实施例3
本实施例制备的脂质体混悬液，其组成为盐酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，胆固醇，吐温80，乌梅提取物。
[0018]取乌梅200g加入1000ml的水浸泡2h，强火加热至沸再以文火煎煮60min，过滤，
收集滤液，置于4°C保存，残渣加3倍量水，浸泡2h，再煎30min，过滤，合并2次滤液，喷雾干燥。
[0019]将盐酸左氧氟沙星2g，磷脂(大豆卵磷脂)20g，胆固醇，吐温80:2g,乌梅提取物2g加入650ml乙醇，并进行超声处理使其充分溶解至澄清；将溶有药物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸铵的水溶液中，同时转速为500rpm，搅拌3min，溶液呈淡蓝色乳光，将装有该溶液的透析袋置于PH7.4，温度为37°C的PBS缓冲溶液中，透析24h，除去硫酸铵，既得脂质体混悬液。
[0020]实施例4
本实施例制备的脂质体混悬液，其组成为盐酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，胆固醇，司盘80，乌梅提取物。
[0021]取乌梅100g加入500ml的水浸泡3h，强火加热至沸再以文火煎煮60min，过滤，收
集滤液，置于4°C保存，残渣加3倍量水，浸泡2h，再煎30min，过滤，合并2次滤液，喷雾干燥。
[0022]将盐酸左氧氟沙星2g，磷脂(大豆卵磷脂)10g，胆固醇IOg,司盘802g，乌梅提取物2g加入450ml乙醇，并进行超声处理使其充分溶解至澄清；将溶有药物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸铵的水溶液中，同时转速为500rpm，搅拌3min，溶液呈淡蓝色乳光，将装有该溶液的透析袋置 于PH7.4，温度为37°C的PBS缓冲溶液中，透析24h，除去硫酸铵，既得脂质体混悬液。
[0023]实施例5
本实施例制备的脂质体混悬液，其组成为盐酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，胆固醇，司盘80，乌梅提取物。
[0024]取乌梅100g加入500ml的水浸泡2h，强火加热至沸再以文火煎煮50min，过滤，收
集滤液，置于4°C保存，残渣加3倍量水，浸泡3h，再煎40min，过滤，合并2次滤液，喷雾干燥。
[0025]将盐酸左氧氟沙星lg，磷脂(大豆卵磷脂)20g，胆固醇IOg,司盘80:2g，乌梅提取物1.5g加入600ml乙醇，并进行超声处理使其充分溶解至澄清；将溶有药物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸铵的水溶液中，同时转速为500rpm，搅拌3min，溶液呈淡蓝色乳光，将装有该溶液的透析袋置于PH7.4，温度为37°C的PBS缓冲溶液中，透析24h，除去硫酸铵，既得脂质体混悬液。
[0026]实施例6
本实施例制备的脂质体混悬液，其组成为盐酸左氧氟沙星，磷脂(大豆卵磷脂)，胆固醇，司盘80，乌梅提取物。
[0027]取乌梅100g加入500ml的水浸泡3h，强火加热至沸再以文火煎煮60min，过滤，收
集滤液，置于4°C保存，残渣加3倍量水，浸泡3h，再煎40min，过滤，合并2次滤液，喷雾干燥。
[0028]将盐酸左氧氟沙星2g，磷脂(大豆卵磷脂)10g，胆固醇IOg,司盘80:2g，乌梅提取物0.5g加入450ml乙醇，并进行超声处理使其充分溶解至澄清；将溶有药物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸铵的水溶液中，同时转速为500rpm，搅拌3min，溶液呈淡蓝色乳光，将装有该溶液的透析袋置于PH7.4，温度为37°C的PBS缓冲溶液中，透析24h，除去硫酸铵，既得脂质体混悬液。[0029]下列实验表明了本发明复方脂质体的有益效果 1.实验材料与方法
1.1实验材料
大肠杆菌(中检所140732)，蛋白胨(北京奥博星生物技术有限责任公司)，酵母提取物(北京奥博星生物技术有限责任公司)，氯化钠(北京化工厂)，琼脂粉(中国惠世生化试剂有限公司)，盐酸左氧氟沙星(武汉东康源科技有限公司)，乌梅提取物(上述实验所得)，盐酸左氧氟沙星复合脂质体(本发明所得)。本实验所使用的试剂，用具均经过高压蒸汽灭菌，所有操作均在无菌室的超净试验台上进行。
[0030]1.2实验方法:
1.2.1 LB培养基的制备:
LB液体培养基:取蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠IOg溶于IL去离子水中，于121°C灭菌20min。LB固体培养基:取蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂粉15g，溶于IL去离子水中，于121°C灭菌20min。LB半固体培养基:取蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂粉7.5g，溶于IL去离子水中，于121°C灭菌20min。
[0031]1.2.2抑菌实验:
将培养6小时后的大肠杆菌菌液(处于对数生长期)与上层琼脂培养基混合均匀(含菌量为1%)后，倒平板盖上平皿盖，室温静置片刻。
[0032]取固体培养基20ml做为底层培养基，取半固体培养基(含菌量为1%) 5.5ml作为上层培养基，待凝固后，将盐酸左氧氟沙星化药溶液(A)，乌梅提取液(B)，盐酸左氧氟沙星与乌梅提取物(重量比1:1)混合液(C)，盐酸左氧氟沙星复合脂质体混悬液(分别为实施例2，实施例3，实施例4，实施例5)，各液体取相同体积分别各自注入到对应平板的牛津杯中(50mg/ml),盖上平皿盖，置恒温培养箱中，培养24小时后，观察结果，用菌落计数仪测量抑菌环直径，记录下数据，单位是mm。实验重复3次。
[0033]2.实验结果
表1不同抗菌剂的抑菌圈直径大小
【权利要求】
1.一种盐酸左氧氟沙星复合脂质体，其特征在于是由以下药物按重量份数比制成的: 盐酸左氧氟沙星:广2、磷脂:10-20、胆固醇:10、表面活性剂:广2、乌梅提取物0.0f 2。
2.根据权利要求1所述的盐酸左氧氟沙星复合脂质体制备方法，其特征在于: 将上述混合物加入17倍量(g/ml)乙醇，并进行超声处理使其充分溶解至澄清；将该溶有药物的乙醇溶液快速注入到35°C含有3%的硫酸铵的水溶液中，同时转速为500rpm，搅拌3min，溶液呈淡蓝色乳光，将装有该溶液的透析袋置于PH7.4，温度为37°C的PBS缓冲溶液中，透析24h，除去硫酸铵，既得脂质体混悬液； 所述的乌梅提取物制备方法如下: 在乌梅中加入5倍量的水浸泡2~3h，强火加热至沸再以文火煎煮4(T60min，过滤，收集滤液，置于4°C保存，残渣加3倍量水，浸泡2~3h，再煎3(T60min，过滤，合并2次滤液，喷雾干燥。
【文档编号】A61P31/04GK103585318SQ201310592827
【公开日】2014年2月19日 申请日期:2013年11月22日 优先权日:2013年11月22日
【发明者】滕乐生, 曲娜, 逯家辉, 李玉婧, 彭小君, 孟庆繁, 刘艳, 王贞佐, 程瑛琨, 沈畏 申请人:吉林大学