高表达葡萄糖异构酶的重组链霉菌的制作方法

文档序号:12248558阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一株高表达葡萄糖异构酶的重组链霉菌株,该菌株分类命名为橄榄产色链霉菌(Streptomyces olivochromogenes),于2016年8月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号CGMCC NO.12831。

2.权利要求1所述的高表达葡萄糖异构酶的重组链霉菌株在生产葡萄糖异构酶中的应用。

3.一种构建高表达葡萄糖异构酶的重组链霉菌的方法,其特征在于在链霉菌基因组中插入一段AO基因得到重组链霉菌;优选的,所述的AO基因为一段经密码子优化的葡萄糖异构酶基因序列,其基因序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于所述的AO基因用kasop和SF14两个链霉菌强启动子构成双启动子kasop-SF14或SF14-kasop,启动AO基因的表达。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于所述的双启动子kasop-SF14的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

6.根据权利要求3~5中任一所述的方法,其特征在于将AO基因和双启动子kasopSF14插入pSET152载体中,构成重组整合载体pSET152-kasopSF14-AO;用接合转移的方法将pSET152-kasopSF14-AO载体经大肠杆菌ET12567(pUZ8002)转入橄榄产色链霉菌中得到重组链霉菌。

7.一种序列优化的葡萄糖异构酶基因AO,其具有如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。

8.一种重组载体,其特征在于是将权利要求7所述的基因和双启动子kasop-SF14插入pSET152载体中,构成的重组载体pSET152-kasopSF14-AO。

9.权利要求1所述的重组链霉菌株,权利要求3~6中任一所述方法、权利要求7所述的基因或权利要求8所述的重组载体在提高橄榄产色链霉菌葡萄糖异构酶酶活和生产葡萄糖异构酶中的应用。

10.一种生产葡萄糖异构酶的方法,其特征在于发酵权利要求1所述的重组链霉菌,得到葡萄糖异构酶。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1