一种莼菜多糖的提取与分离纯化工艺的制作方法

文档序号:11803502阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种莼菜多糖的提取与分离纯化工艺,其特征在于,包括如下步骤:

(1)莼菜多糖粗品的提取:

(1.1)将莼菜粉碎至100~200目,将粉碎后的莼菜放至超临界CO2萃取釜中,封釜,排除空气,通入携带剂进行萃取得提取液,萃取温度为44.0-45.5℃,萃取压力为20.5-21.5MPa,萃取二氧化碳流量为20-28L/h,携带剂为蒸馏水,用量为400-450ml/kg,萃取4-5h;

(1.2)向提取液中加入氯仿与正丁醇的混合液并摇匀,在3000~5000r/min离心5~10min,取上层清液I,所述混合液中氯仿与正丁醇的体积比为4:1,所述提取液与混合液的的体积比为4~5:1;

(1.3)用NaOH调节上层清液至pH为7.5-8.5,然后向清液中加入活性炭进行脱色并抽滤得滤液;将滤液进一步使用蒸馏水透析36-48h得透析液;

(1.4)将透析液3000-5000r/min离心5-10min得上层清液II,将上层清液II在75℃-80℃水浴条件下浓缩至原体积的1/3-1/4,再加入3-4倍体积的95wt%乙醇,搅拌均匀后,3000-5000r/min离心5-10min得沉淀I,将沉淀I分别用无水乙醇和丙酮洗涤,干燥得莼菜多糖粗品;

(2)莼菜多糖粗品的纯化

(2.1)以质量体积比1%-2%取莼菜多糖粗品及蒸馏水并混合均匀,3000-5000r/min离心5-10min除去不溶物,取上清液用1mol/L NaOH调pH至8.6-9.2,加入0.1wt%的碱性蛋白酶,46℃-50℃酶解4-5h除蛋白,8000-10000r/min离心8-10min得上层清液III;

(2.2)向上层清液III加十六烷基三甲基溴化铵至沉淀完全,静置5h,3000-5000r/min离心5-10min的沉淀II,将沉淀II用冰水洗涤三次,向沉淀II加NaCl溶液52-57℃解离3-4h,并在3000-5000r/min离心5-10min得上层清液IV;

(2.3)将上层清液IV通过处理好的312弱酸型阴离子交换树脂柱吸附,然后将树脂移入烧杯中,冰水洗至澄清止,再上柱,用0.5mol/L Na2HPO4-0.3mol/L Na2SO4洗脱液洗脱,流速1ml/min,得洗脱液;

(2.4)洗脱液使用蒸馏水透析12h,透析液80℃水浴浓缩,加三倍体积的95%乙醇,搅拌均匀后,3000r/min离心10min,沉淀再分别用无水乙醇和丙酮洗涤,真空干燥得莼菜多糖。

2.根据权利要求1所述一种莼菜多糖的提取与分离纯化工艺,其特征在于,所述步骤(1.1)萃取温度45.2℃,萃取压力21.3MPa,携带剂为蒸馏水,用量为420.0ml/kg,萃取4.0h。

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