1.一种几丁质脱乙酰基酶,其特征在于,所述几丁质脱乙酰基酶的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示,或者在SEQ ID NO.2中限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或者添加一个或几个氨基酸且具有几丁质脱乙酰基酶活性的由SEQ ID NO.2衍生的蛋白质。
2.根据权利要求1所述的几丁质脱乙酰基酶,其特征在于,所述几丁质脱乙酰基酶编码的基因核苷酸序列为SEQ ID NO.1。
3.权利要求1或2所述的几丁质脱乙酰基酶的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1):构建几丁质脱乙酰酶重组表达载体质粒;
(2):将步骤(1)所得的重组表达载体质粒导入大肠杆菌宿主细胞,诱导表达,获得表达产物;
(3):分离纯化步骤(2)所得到的重组蛋白,即SEQ ID NO.2中氨基酸所示的几丁质脱乙酰酶;或者在SEQ ID NO.2中限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或者几个氨基酸且具有几丁质脱乙酰基酶活性的由SEQ ID NO.2衍生的蛋白质。
4.权利要求1或2所述的几丁质脱乙酰基酶在制备纳米几丁质领域中的应用。
5.一种纳米几丁质的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)在酸的作用下,水解含有几丁质的原料,然后去除酸,加入溶剂后得到预制备的纳米几丁质悬浮液;
(2)向纳米几丁质悬浮液中加入几丁质脱乙酰基酶,脱乙酰得到纳米几丁质;
优选地,步骤(1)中,水解温度为70-90℃,优选为70-85℃,水解时间为2-4h,优选为2-3h;
更进一步优选,步骤(1)中所述酸选自盐酸、硫酸、硝酸中的一种,优选为盐酸,所述盐酸的浓度优选为3M-5M。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)加入溶剂后还包括超声破碎的步骤,得到预制备的纳米几丁质悬浮液,所述溶剂优选为去离子水。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,脱乙酰温度为50-60℃,反应时间为30-60min;
优选地,步骤(2)中几丁质脱乙酰酶与步骤(1)中的纳米几丁质悬浮液的比例为(1-10):(3000-5000)(wt/wt)。
8.根据权利要求5-7中任一项所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中加入催化剂进行脱乙酰反应,所述催化剂优选为氯化钴。
9.一种纳米几丁质,其采用权利要求5-8中任一项所述的制备方法制备得到。
10.权利要求9所述的纳米几丁质在废水处理、食品和饲料、制药和农药制剂、肥料及植物生长调节剂领域中的应用。