一种快速鉴定牛肉的方法与流程

文档序号:11126289阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种快速鉴定牛肉的方法,其特征在于,包括以下步骤:

步骤1:设计特异性识别牛细胞色素b基因片段的1对引物;

步骤2:将牛肉总DNA的浓度调至20 ng/μL作为样品PCR检测的模板;

步骤3:使用步骤1的引物和步骤2的模板,借助PrimeSTAR MAX DNA聚合酶PCR扩增牛细胞色素b基因特定片段;

步骤4:通过1.2%琼脂糖凝胶电泳检测步骤3的PCR扩增产物;

步骤5:根据步骤4的电泳检测结果,判断样品是否是或者是否含有牛肉或牛的其他组织成份。

2.根据权利要求1所述的一种鉴定牛肉的方法,其特征在于:所述牛细胞色素b基因片段的1对引物,上游引物碱基序列:5′-aatacactacacatccgacac-3′,下游引物碱基序列:5′-gacccgtaatataagcctcg -3′,浓度均为2 pmol/μL。

3.根据权利要求1所述的一种快速鉴定羊肉的方法,其特征在于:所述PrimeSTAR MAX DNA聚合酶PCR扩增羊线粒体基因特定片段的PCR反应体系为10μL ,其中PrimeSTAR MAX Premix:5μL;上、下游引物各0.5μL;模板DNA:0.5μL;灭菌纯水3.5μL。

4.根据权利要求1所述的一种快速鉴定羊肉的方法,其特征在于:所述PrimeSTAR MAX DNA聚合酶PCR扩增羊线粒体基因特定片段的PCR程序为:98℃变性/10 s,62℃退火/5 s,72℃延伸反应/5 s,30次循环。

5.根据权利要求1所述的一种鉴定牛肉的方法,其特征在于:所述根据步骤4的电泳检测结果,判断样品是否是或含有牛肉或牛的其他组织成份,若出现162 bp PCR产物,表明检测样品是或含有牛肉或牛的其他组织成份;反之不是或不含有牛肉或牛的其他组织成份。

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