1.一种抗感冒病毒及肺链菌、葡萄球菌复合IgY抗体制备方法,其特征在于:它包括以下步骤:
(1)免疫原制备:
取流感病毒甲1型病毒10~20份、流感病毒甲3型病毒20~30份和流感病毒乙型病毒5~10份,鼻病毒10~20份,冠状病毒10~20份,呼吸道合胞病毒5~10份,腺病毒5~10份,肺炎链球菌10~20份,金黄色葡萄球菌20~30份混合成病毒+细菌液;
将等量体积的病毒+细菌液与等量体积的福氏完全佐剂混合,搅拌乳化,制成油包水福氏完全佐剂流感病毒及肺链菌、葡萄球菌免疫原;
将等量体积的病毒+细菌液与等量体积的福氏不完全佐剂混合,搅拌乳化,制成油包水福氏不完全佐剂流感病毒及肺链菌、葡萄球菌免疫原;
每毫升福氏完全佐剂免疫原和福氏不完全佐剂免疫原中,均含有病毒50~200μg+细菌10亿~50亿;
(2)免疫:
将福氏完全佐剂免疫原皮下和肌肉10~100点注射给产蛋母鸡,每只产蛋母鸡注射1ml~1.5ml免疫原,然后每隔一周使用福氏不完全佐剂免疫原1ml皮下和肌肉20~60点注射给产蛋母鸡共计五次,此后每隔一个月再使用福氏不完全佐剂免疫原1ml皮下和肌肉10~40点注射给产蛋母鸡加强免疫五次;
(3)抗感冒病毒及肺链菌、葡萄球菌复合IgY抗体水提取物的制备:
收集免疫20天后的免疫母鸡的鸡蛋,鸡蛋表面用水洗净、70%酒精浸泡,去蛋壳取蛋黄,去除蛋黄膜取蛋黄液,将蛋黄液与蒸馏水按体积比1:3~11的比例加蒸馏水搅拌,并用1N HCl调节酸碱度至pH4.8~5.5,在温度4℃下静置过夜;
将蛋黄稀释液在4℃高速离心15分钟取上清,然后经截留分子量为10~50kDa的中空纤维超滤器中超滤浓缩10~20倍,再加入0.02%~5.0%的氯已定,并使用1N NaOH调节酸碱度至pH7.0~7.5,且在4℃静置过夜;之后高速离心10分钟取上清,将上清经0.22μ的消毒微孔滤膜过滤除菌,即得抗感冒病毒及肺链菌、葡萄球菌复合IgY抗体水提取物。
2.根据权利要求1所述的抗感冒病毒及肺链菌、葡萄球菌复合IgY抗体制备方法,其特征在于:所述免疫中的产蛋母鸡包括普通环境下饲养、清洁环境下饲养、以及SPF环境下饲养的莱杭鸡、海兰褐鸡、罗曼鸡、明星鸡、以及家养的土鸡。
3.如权利要求1所述的制备方法制取的特异性抗感冒病毒及肺链菌、葡萄球菌复合IgY抗体在感冒、鼻炎、鼻窦炎、扁桃体炎、咽喉炎、支气管炎上的应用。
4.一种抗感冒病毒及肺链菌、葡萄球菌复合IgY抗体纯品的制备方法,其特征在于:它包括如下步骤:将如权利要求(1)方法制备的抗感冒病毒及肺链菌、葡萄球菌复合IgY抗体水提取物加硫酸胺至45%~60%的饱和度充分搅拌,室温静置2~12小时,然后高速离心10分钟,取沉淀物,将沉淀物使用蒸馏水稀释到原体积量,再加硫酸胺至28%~35%的饱和度充分搅拌,室温静置2~12小时,然后高速离心10分钟,取沉淀物,用蒸馏水溶解后采用中空纤维超滤膜超滤除盐,即得抗感冒病毒及肺链菌、葡萄球菌复合IgY抗体纯品。