从海藻中提取活性多糖的方法与流程

文档序号:12639675阅读:来源:国知局

技术特征:

1.从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于以下步骤:

1)脱脂、脱苷:将海藻洗净,粉碎,过筛得到海藻粉末,加入丙酮-石油醚混合液回流脱脂,抽滤,滤渣中加入乙醇回流,抽滤,滤渣烘干;

2)酶解:在步骤1最后得到的滤渣中加入蒸馏水和复合酶制剂酶解,超声波助溶,酶解结束后灭酶,过滤,取滤液;

3)去蛋白:在滤液中加入Sevage 试剂,搅拌,去除下层液体及絮状沉淀物,在上层液体中加入乙醇,搅拌,抽滤取滤渣,用无水乙醇和无水丙酮洗涤,旋蒸干燥得到粗制海藻活性多糖粉末;

4)超滤:粗制海藻活性多糖粉末中加入蒸馏水,超滤,取未滤过液,干燥得到粉末;

5)凝胶层析:粉末中加入蒸馏水,凝胶层析,苯酚 - 硫酸法检测,收集有显色反应的洗脱液;

6)去盐、干燥:将洗脱液置于透析袋中透析,取未滤过液,减压浓缩,冷冻干燥得到活性多糖粉末。

2.根据权利要求1所述的从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于:所述的步骤1中海藻粉末:丙酮-石油醚混合液体积比为1:10~15,丙酮:石油醚体积比为1:1.2~1:1.6,乙醇浓度为85~90%,滤渣:乙醇体积比为1:12~16。

3.根据权利要求1所述的从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于:所述的步骤2中滤渣:蒸馏水体积比:1:25~28,复合酶加入量为3~5%,酶解温度为52~56℃,pH为2.7~3.4,酶解时间为2.2~2.7h。

4.根据权利要求1所述的从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于:所述的步骤2中复合酶制剂成份及其重量份为:10~20份纤维素酶、10~15份果胶酶、1~3份NaCl、0.001~0.002份焦磷酸钾、0.5~1份硫酸镁、0.004~0.006份聚磷酸铵和0.2~0.8份磷酸二氢钙。

5.根据权利要求1所述的从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于:所述的步骤3中Sevage 试剂:滤液体积比为1:3~5,乙醇浓度为90~98%,上层液体:乙醇体积比为1:3.7~4.5。

6.根据权利要求1所述的从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于:所述的步骤3中先用滤渣体积35~40倍的无水乙醇洗涤,再用30~32倍的无水丙酮洗涤。

7.根据权利要求1所述的从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于:所述的步骤4与步骤6中滤膜规格均为3500~4000Da。

8.根据权利要求1所述的从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于:所述的步骤5中粉末:蒸馏水体积比为1:0.02~0.05,注入 DEAE- 琼脂糖凝胶柱中色谱分离,先用蒸馏水1.2~1.4mL/min冲洗4.2~4.6h,再用0.5MNaCl 以同样流速继续冲洗2.2~2.5h。

9.根据权利要求1所述的从海藻中提取活性多糖的方法,其特征在于:所述的步骤6中减压浓缩至未滤过液体积的1/100~1/200。

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